鸡输卵管生物反应器的研究进展

目前鸡输卵管生物反应器的研究集中在以卵清蛋白调控区来调控外源基因的表达。鸡输卵管生物反应器的研究以输卵管细胞的培养为起点 ,再研究外源基因在输卵管内定位表达的可能性 ,最后制作转外源基因能稳定遗传的转基因鸡。本文对鸡输卵管生物反应器研究作一综述 ,提出了存在的问题并作以展望。     

CRISPR/Cas9 knock-in介导的输卵管特异性表达转基因鸡研究进展

利用动物生物反应器生产重组蛋白是一种具有应用前景的生物技术。鸡输卵管生物反应器是理想的动物生物反应器之一,其优点在于表达的外源蛋白能够分泌到蛋清中,可避免蛋白提取过程中对鸡本身造成伤害,同时蛋清成分简单,便于后期的纯化。目前利用慢病毒结合原始生殖细胞(PGCs)制备转基因鸡被认为是最可行的方法,但因外源基因随机整合且生殖系传递效率较低,使转基因鸡研究受到技术上的限制。而2013年问世的CRISPR/Cas9基因敲入(CRISPR/Cas9 knock-in)技术能够使外源基因精准定向插入基因组特异性位点,这对生产输卵管特异性转基因鸡具有重大意义。文章综述了鸡输卵管反应器的研究进展、CRISPR/Cas9 knock-in技术在输卵管特异性表达转基因鸡研究和鸡育种领域的应用现状,并指出了目前存在的问题和相应的解决办法。     

用逆转录病毒法制作鸡输卵管生物反应器的研究

自80年代以来,人们对转基因鸡的方法进行了探索。已经运用的制作转基因鸡的方法有显微注射法、精子载体法、原生殖细胞法、逆转录病毒法。从目前世界各研究室的研究结果来看,逆转录病毒法是制作转基因鸡最有效、最成功的方法。所以在鸡的胚胎干细胞的筛选还未成功、基因打靶尚不可能的情况下,此法是制作鸡的输卵管生物反应器首选的方法。下面就鸡的生物反应器和逆转录病毒法分别作以综述。 1 鸡生物反应器的研究 从80年代以来随着转基因动物个体表达系统的研究,哺乳动物的乳腺生物反应器如鼠、牛、羊等已有成功的报道。作为禽类的生物反应器也已经起步,鸡是禽类中最常见、数量最多的。鸡蛋成分简单,由白蛋白、卵黄、卵壳组成,白蛋白又包括卵清蛋白、卵转铁蛋白、卵粘蛋白、溶菌酶,其中卵清蛋白最多可达重量比的65%,在产蛋母鸡输卵管管状腺体细胞总合成蛋白中占55%～60%,在成熟母鸡输卵管的管状腺体细胞中主要白蛋白的合成超过了总翻译能力的70%,卵清蛋白的高效合成过程促使研究者想到它的启动子,高效启动合成外源蛋白。     

乳腺生物反应器表达载体和转基因方法的研究概况

动物乳腺生物反应器，属转基因动物研究的范畴，是指通过各种转基因技术，将某种或几种具有重要生物活性的蛋白外源基因在动物乳腺中高效表达，从而在乳腺中生产目的基因产品。与细胞发酵系统相比，乳腺生物反应器的pH、温度、离子强度等由动物自身控制和平衡，其发酵特性可以遗传，生产效率非常高，而且生产的外源蛋白具有翻译后加工     

动物乳腺生物反应器在现代生物制药中的应用

目的基因在乳腺中表达的转基因动物称为动物乳腺生物反应器(mammary gland bioreaetor),又称为动物个体乳腺表达系统.动物乳腺生物反应器出现于20世纪90年代初,它是一项利用转基因动物的乳房代替生物发酵,大规模生产供人类疾病治疗和保健用的生物活性物质或药用珍稀蛋白的现代生物技术,其核心内容是利用乳蛋白基因的乳腺特异性调控成分驱动外源基因在动物乳腺中高效表达,以期通过源源不断地回收乳汁来提取大量有重要药用价值的生物活性外源蛋白.因此,动物乳腺生物反应器在现代生物制药领域中具有广阔的开发前景.     

输卵管生物反应器的研究和应用前景

基因工程是生命科学的重要一环,输卵管生物反应器是转基因鸡的理想反应器,为将来鸡育种、药用蛋和免疫球蛋白(IgY)生产开辟了广阔的前景。由于禽的繁殖方式特殊,它也为转基因技术研究提供了又一途径。     

动物乳腺生物反应器与未来畜牧业发展

动物乳腺生物反应器是应用重组DNA技术和转基因技术,获得的在乳腺中特异表达外源基因、高效生产活性功能蛋白的转基因动物个体。动物乳腺生物反应器主要用于生产重大疾病防治的蛋白等创新型药物品种,是国家战略性新兴产业的重点发展内容。转基因动物作为乳腺反应器生产药用蛋白,将拓宽畜牧生产领域,使畜牧业成为现代生物医药的上游产业,国家战略性新兴产业的基础产业,是未来畜牧科技创新的亮点和特点。     

转基因家畜生物反应器浅谈

本文简介利用动物基因工程技术建立转基因动物生物反应器的基本原理和一般方法。讨论并回顾了利用转基因家畜作为生物反应器生产外源蛋白的优点和有关进展。     

转基因鸡的制作及研究展望

鉴于转基因鸡在输卵管生物反应器、抗病育种及发育生物学等多种领域的广阔前景,鸡的转基因技术正受到广泛的关注.本文主要就转基因鸡的研究进展、制作方法和存在的问题进行了介绍,并对转基因鸡的前景进行了分析.     

1.1kb、2.7kb、3.0kb鸡输卵管组织特异性启动子的克隆及细胞评价

鸡卵清蛋白基因启动子是指导外源基因高效特异性表达的理想调控区,利用卵清蛋白启动子驱动外源蛋白大量表达,需要包含组织特异性相关序列。本研究以海兰白鸡的基因组为模板,采用PCR扩增了1.1 kb、2.7 kb和3.0 kb的卵清蛋白启动子区,置换pcDNA6.2-GFP中CMV启动子序列,构建了真核表达载体pOV1.1 kb-GFP、pOV2.7 kb-GFP、pOV3.0 kb-GFP;转染原代输卵管上皮细胞和中国仓鼠卵巢细胞(CHO),PCR、RT-PCR证明重组载体能够整合到细胞基因组内,并进行转录;倒置荧光显微镜下观测到绿色荧光蛋白表达;启动子表达效率由高到低依次是CMV启动子、1.1 kb、2.7 kb、3.0 kb卵清蛋白启动子。研究结果为瞬时表达模型的建立和输卵管生物反应器的研究奠定基础。     

我国转基因鸡初露端倪

由上海复旦大学和上海新杨种畜场共同投资 2 0 0万元创建的上海复旦新杨生物科技有限公司 ,在全国率先开发通过鸡蛋蛋清表达外源基因的技术。他们构建了能在鸡蛋蛋清中表达外源基因的表达载体 ;建立了有效的转基因技术 ,转基因效率在 3 0 %至 70 %之间 ;2 0 %以上的转基因鸡所产的鸡蛋蛋清中检测到实验用的外源基因“人瘦素蛋白” ,其中最高的表达量为每升蛋清中含 1 0毫克至 3 0毫克。鸡转基因技术开发前景深远 :①改良鸡的种质品质 ,可培育出生长速度快、抗病毒、低胆固醇蛋的转基因品系。②利用鸡蛋蛋清作为生物反应器 ,在蛋清中生产有药…     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达,并从转基因动物奶中获 取重组蛋白。利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景。本文就转基因动物 乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述。     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子IX

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达,并从转基因动物奶中获取重组蛋白.利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景.本文就转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述.     

利用动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达，并从转基因动物奶中获取重组蛋白。利用转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ是一种新型的生物制药方法且具有广阔的应用前景。本文就转基因动物乳腺生物反应器生产人凝血因子Ⅸ的载体构建、研究现状以及存在的问题等作一综述。     

动物乳腺生物反应器的研究、发展及产业化

动物乳腺生物反应器(mammary gland bioreactor),又称动物个体乳腺表达系统,它属于转基因动物的范畴,其核心内容是通过各种转基因技术,将乳腺组织特异性启动子驱动的外源基因,在动物乳腺组织高效表达,在乳汁中生产目的产品。它是20世纪90年代初才出现的生物技术,通过回收奶就可以提取有重要价值的生物活性蛋白。在一般情况下,这种特异性表达方式更安全、可靠。本文主要简单介绍动物乳腺生物反应器的一些基本情况,以及我国的研究和产业化发展情况。1动物乳腺生物反应器的基本情况1.1定义乳腺生物反应器一般指用重组DNA技术和转基因技术,将…     

转基因动物乳腺生物反应器研究进展

转基因动物乳腺生物反应器是利用动物乳腺特异性启动子调控元件指导外源基因在乳腺中特异性表达 ,并从转基因动物乳汁中获取重组蛋白。近年来 ,生物学和分子生物学研究领域的成就促进了该技术的蓬勃发展 ,并在生产药用蛋白领域展现出广阔前景。本文简要概述了转基因动物乳腺生物反应器的基本概念、原理、特点及应用 ,并重点阐述其研究现状及前景 ,从而探讨其存在的问题     

鸡卵清蛋白基因5’端调控区的克隆及其序列分析

应用PCR技术从鸡输卵管组织基因组中扩增出了1．00kb的鸡卵清蛋白基因5‘端调控区序列。序列分析表明，该区域含有TATA框及激素识别位点，具备输卵管定位表达的调控能力。为外源基因在鸡输卵管中的定位表达奠定了基础。     

动物生物反应器研究进展

动物生物反应器是指将外源目的基因导入整合到动物基因组中，该外源基因可以遗传给后代，并能够表达相应目标蛋白，所获得的个体表达系统就是动物生物反应器。这样的一个具有动物生物反应器功能的转基因动物，其体内可以合成所需的蛋白，并通过乳汁、尿液、血液、精液、蛋清或蚕丝等分泌产生。     

动物乳腺生物反应器的原理及研究进展

1　基本概念1 .1　转基因动物 (ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃａｎｉｍａｌ)　转基因动物是指通过实验室的某些方法 ,将人为构建的外源目的基因导入动物的生殖细胞或早期胚胎 (原核或受精卵 ) ,使其稳定地整合到动物基因组中 ,并能遗传给后代的动物。最早的转基因动物是鸡 (Ｍｕｎｒｏ,1 968) ,其后是利用注射法和病毒感染法转基因鼠 (Ｊａｅｎｉｓｈ ,1 976)。1 .2　动物生物反应器 (ａｎｉｍａｌｂｉｏｒｅａｃｔｅｒ)　一般把目的基因在血液循环系统或乳腺中表达的转基因动物叫动物生物反应器。利用它来生产人类所需的生物活性物质或药用珍稀蛋白…     

转基因植物生产疫苗的研究进展

20世纪70年代以来,人们通过对植物生理及植物基因表达调控的研究,获得了操纵植物基因的能力,使植物成为生产外源蛋白的天然生物反应器之一,这样就使利用转基因植物生产疫苗成为可能.1992年,Mason首先提出了用转基因植物生产疫苗.该技术是利用分子生物技术把重组的疫苗基因转入植物,