表达β-1，3-1，4-葡聚糖酶的基因工程酵母菌株

本专利利用基因工程手段，通过毕赤酵母生产葡聚糖酶。将重组酵母进行诱导发酵，对重组酶进行初步酶学性质分析表明，最适反应pH约为5．5，最适反应温度约为55℃。从芽孢杆菌菌株Bacillus licheniformis EGW039中克隆出β-（1，3）-（1，4）葡聚糖酶基因，将不带有DNA原基因信号肽编码序列的β-（1，3）-（1，4）葡聚糖酶基因插入到毕赤酵母表达载体pMETaA上.     

丝瓜蜂蜜治疗百日咳

如果患百日咳，用丝瓜绞取汁液，3-6岁儿童每次用丝瓜汁60g加少量蜂蜜服用，6～10岁儿童每次用丝瓜汁120g加少量蜂蜜服用，10岁以上每次用丝瓜汁180-240g加少量蜂蜜服用。病轻者每天服2次，病重者每天服用3～4次。     

三氯苯唑合成工艺研究

以2，3-二氯苯酚及1，2，4-三氯苯为原料，经硝化、氨化、相转移催化缩合、还原、环合和甲硫基化等6步反应合成三氯苯唑,总收率达34％。     

犬血虫净中毒病例

1病例情况 某犬场有4只犬因肘部及腹部皮肤红疹到-动物医院检查，诊断为附红细胞体病，用血虫净进行注射，按3．5mg／kg体重注射，1g血虫净20ml生理盐水溶解，每日1次，连用3天，第4天4只犬全发病，其中3只(一雌性黑背，一雄性黑背，一雌性巴哥)情况危重，主要症状为：突然发病，最初双     

蜂针治愈体表血管瘤、皮肤纤维瘤85例

1998年-2003年间我处共收治体表血管瘤患者46例，皮肤纤维瘤患者39例。蜂针过敏试验阴性后，在瘤体上面活蜂螫刺。留针20分钟。经1-15次蜂针均获治愈。因蜂针液有软坚、活血、化瘀、消炎之功效，经随访除其中纤维瘤1例瘤直径1cm,治疗4次用蜂4只，1年以后复发，其余治愈后随访1-3年无复发。蜂针治疗体表面血管瘤及皮肤纤维瘤效果良好。     

黑白花奶牛氯丙嗪过敏1例

2000年7月10日，北海市某奶牛专业户1头6岁第4胎黑白花奶牛因产后第6天仅泌乳O．5kg，请兽医注射催乳激素。每天肌注1次，第2天注后有轻度反应，少食，第3天后反应严重(上一胎注射同样的药物未见反应)。牛开口喘气、不吃、体温41．5℃。7月13日停止注射催乳激素，7月13日、14日，肌注肾上腺素、地塞米松、安乃近并静脉滴注5％葡萄糖生理盐水、10％的葡萄糖酸钙、维生素C。经上述治疗，病     

高效液相色谱法测定蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶酶活

建立了一种检测蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶酶活的方法，即样液中加棉籽糖作为反应底物，在pH为5．4的缓冲液中，45aC摇床200r／min条件下反应2h，测定样液中的密二糖含量。色谱条件为：Phenomenex NH2 Luan 5U 250×4．60mm；流动相：乙腈：水=80：20；进样量：10μL；流速：1．2mL／min；柱温：40℃；示差折光检测器，温度40cc。实验结果表明：β-呋喃果糖苷酶酶活在0．3—1．7U／mL范围内线性良好，相关系数R为0．998 10。相对标准偏差为1．72％（n=5），平均回收率为94．5％。该分析方法简便、准确、灵敏，重现性好，适用于蜂蜜中β-呋喃果糖苷酶酶活的检测。     

椰心叶甲对椰树叶片挥发物的EAG和行为反应

测定了椰心叶甲Brontispa longissima (Gestro)雌、雄成虫对其寄主椰树叶片中的十三醇、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、苯乙醛等10种挥发性气味物质的触角电位（EAG）反应。结果表明,与对照相比,这10种挥发物组分除了庚醛对雄虫EAG反应不显著外,其他均能引起椰心叶甲雌、雄成虫明显的EAG反应,其中十三醇对雌、雄成虫的EAG反应值最大。根据雌、雄成虫对这10种挥发物EAG反应的强弱,进一步测定雌、雄成虫对1×10-6 ~1×10-1μL/mL等6个浓度梯度的十三醇、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、苯乙醛和2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚的EAG反应和行为反应,结果表明,这4种挥发物对椰心叶甲雌、雄成虫的EAG反应随浓度的变化而变化,在1×10-4μL/mL时达到最大值,除了苯乙醛的引诱率在1×10-5μL/mL时达最大值（65.00%）外,其他3种对雌、雄成虫的引诱率均在1×10-4μL/mL时达最大（均在60%以上）。     

蜂螫治疗膝盖痛

人老腿先老。随着年龄增加，容易出现膝盖痛，可能是患了骨刺、风湿或类风湿。应用蜜蜂螫刺有一定疗效，具体方法是，一年四季，左右膝盖用蜂螫刺，开始用活蜂2只，出现肿胀是正常现象，待消肿后再螫刺。如果反应正常可以每次增加1—2只蜂针，连续4-5次后基本可治愈。这种不花钱，不打针，不吃药，用几只蜜蜂就能治病，有兴趣的蜂友不妨试一试。     

两种不同药物治疗副猪嗜血杆菌病效果观察

1材料和方法 1．1供试药品 “紫罗兰”注射液主要成分为磺胺间甲氧嘧啶钠等，化学名称为4-对氨基苯磺酰胺基-6-甲氧基嘧啶。规格为每支10毫升，含磺胺间甲氧嘧啶钠1000毫克。由株洲市神农动物药业有限公司生产。     

猫杯状病毒RAA-CRISPR/Cas12a-LFS检测方法的建立及初步应用

为建立猫杯状病毒(FCV)基于重组酶介导的等温核酸扩增(RAA)结合CRISPR-Cas12a系统及侧向流层析试纸条(LFS)(RAA-CRISPR/Cas12a-LFS)的快速检测的方法，本研究基于FCV衣壳蛋白(VP1)基因序列保守区设计RAA引物、4对针对VP1靶标的扩增引物、4对VP1-cr RNA扩增引物和1条报告探针。利用4对VP1-crRNA扩增引物经退火和T7 RNA聚合酶转录合成4条靶标crRNA:VP1-1/2/3/4-crRNA，利用4对VP1靶标扩增引物经退火合成4条靶标双链DNA:VP1-1/2/3/4，经EnGen^?Lba Cas12a (Cpf1)核酸酶试剂的切割反应和Cas12a试纸条检测，根据出现条带的强弱筛选最佳VP1-crRNA。结果显示，VP1-2-crRNA对应的T线条带最强且C线不完全切割的条带最弱。因此选择VP1-2-crRNA进行后续试验。分别以FCV VR-782株及6株分离的FCV RNA为模板，利用RAA引物扩增其VP1基因，并通过琼脂糖凝胶电泳检测并评估RAA引物的扩增效果；利用Cas12a (Cpf1)核酸...     

(3S,4S)-4-([R)-1-羰基乙基]-3-([R)-1-(t-丁基二甲基硅烷氧基)乙基]氮杂环丁烷-2-酮的合成

以4-乙酰氧基氮杂环丁酮(2)为母核,与手性合成辅助剂溴丙酰基-螺环[2H-1,3-苯并噁嗪-2,1’-环己基]-3(4H)-酮(3)进行取代反应,水解得培南类关键中间体(3S,4S)-4-([R)-1-羰基乙基]-3-([R)-1-(t-丁基二甲基硅烷氧基)乙基]-2-丙内酰胺(1),总收率约为81%~87.6%[以4-乙酰氧基氮杂环丁酮(2)计]。     

血清4型禽腺病毒广西分离株单克隆抗体的制备及鉴定

为制备血清4型禽腺病毒(FAdV-4)广西分离株(FAdV-4-GX2018-005)的特异性单克隆抗体，将FAdV-4-GX2018-005作为免疫原免疫BALB/c小鼠后，取小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合，利用间接ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞株。利用阳性杂交瘤细胞株制备腹水并纯化得到单克隆抗体，利用ELISA和IFA鉴定单克隆抗体的特异性。结果表明，成功获得3株单克隆细胞株3A3、13A11和4D5。3株杂交瘤细胞株分泌的抗体，能与FAdV-4产生特异性反应，与其他血清型禽腺病毒(FAdV-1、FAdV-2、FAdV-3、FAdV-5、FAdV-6、FAdV-7、FAdV-8a、FAdV-8b、FAdV-9、FAdV-10和FAdV-11)不发生反应。本研究成功制备FAdV-4广西分离株单克隆抗体，为FAdV-4检测方法的建立奠定了良好基础。     

抗犬瘟热病毒单克隆抗体的制备及初步应用

采用 B淋巴细胞杂交瘤技术 ,通过免疫荧光法筛选 ,获得 4株能稳定分泌抗犬瘟热病毒的单克隆抗体杂交瘤细胞株。 4株单克隆抗体均属 Ig G1亚类 ,其腹水效价在 1∶ 10 - 4 ～ 1∶ 10 - 5,细胞培养上清液效价为 1∶ 10 - 2 ～ 1∶ 10 - 3 。用微量细胞培养中和试验筛选到 2株具有中和活性的特异性单克隆抗体 ,其中和效价为 1∶ 32和 1∶ 12 8,并初步应用于治疗中早期犬瘟热病毒感染犬 ,取得了较好的结果。     

哺乳仔猪渗出性皮炎的诊治

仔猪渗出性皮炎是由葡萄球菌引起的一种接触传染性皮肤疾病，常发于1-4周龄的仔猪，其中以1-2周龄以内的哺乳仔猪居多。近年来个别猪场偶有发生，猪场往往误诊为疥螨病，延误了正确治疗时间，造成较严重的损失。     

益生菌脱基因毒性作用的研究进展

益生菌具有脱基因毒性的作用。在益生菌脱基因毒性研究中常见的基因毒性物质主要有4-硝基喹啉-1-氧化物、甲基硝基亚硝基胍、黄曲霉毒素。主要研究方法有Ames实验，SOS显色反应和高效液相检测法。益生菌脱基因毒性的作用机理主要通过吸附致癌物质或将致癌物代谢为无毒物质。     

无溶剂室温研磨固相反应合成4-吗啉基香豆素

以2-羟基苯乙酮和碳酸二乙酯为起始原料合成4-羟基香豆素,再与三氯氧磷反应得到4-氯香豆素,最后用4-氯香豆素和吗啉通过室温研磨固相反应,合成了含有吗啉基和香豆素环两种生物活性基团的4-吗啉基香豆素;对中间体和目标产物的结构进行了表征。该反应操作简单,产率高。     

抗伊氏锥虫表膜单克隆抗体的研究Ⅰ.杂交瘤细胞株的建立与鉴定

利用淋巴细胞杂交瘤技术,建立了3株抗伊氏锥虫表膜抗原的McAb杂交癌细胞株1C_2、2A_3、5B_7,对其鉴定的结果;①杂交瘤细胞所诱生的腹水效价,1C_2为2×10~(-4)、2A_3 4×10~(-4)、5B_7 64×10~(-4);培养上清效价,1C_2为1/512、2A_3 1/512、5B_7 1/1024。②3株细胞所产生的McAb均为IgM。③杂交瘤细胞的染色体数,1C_2 82条、2A_3 96条、5B_7 106条。④用McAb作抗原定位,均结合于伊氏锥虫虫体表面。⑤McAb与伊氏锥虫表膜以外的其它抗原成分反应较弱,与锥虫属以外的病原体不发生反应,与泰氏锥虫、路氏锥虫有部分交叉反应。⑥3株McAb对虫体均无抑制作用。     

奶牛临床型乳腺炎治疗药物筛选及疗效

以2个不同地点奶牛场临床分离鉴定出奶牛临床型乳腺炎的病原菌，其中链球菌、葡萄球菌为主要病原菌。以试验二倍稀释法测定14种抗菌药物对临床分离病原菌的最小抑菌浓度（MIC），以恩诺沙星（≤0.06-1mg/L)、环丙沙星（≤0.06-2mg/L)及阿莫西林的MIC较低。以青霉素＋链霉素为对照，选择恩诺沙星、阿莫西林、克拉维酸合剂（4：1）、阿莫西林作临床疗效试验。结果证明：0．5％阿莫西林（200mg) 克拉维酸（50mg)合剂（4：1）溶液50mL乳房灌注，每天2次，平均疗程3．6d，对临床型乳腺炎有较好疗效。     

H5亚型禽流感单克隆抗体的研制及应用

以禽流感H5亚型病毒分别免疫BABL／C小鼠，取其脾细胞与SP2／0骨髓瘤细胞融合，用血凝抑制试验(HI)和间接ELISA检测细胞上清液，结果获得了3株抗禽流感H5亚型病毒特异性单克隆抗体，分别命名为186，1D4，7D1；其中1D4株为抗禽流感H5亚型病毒血凝素特异性单克隆抗体细胞株．186株和7D1株为针对禽流感病毒NP蛋白的单克隆抗体细胞株。经3次亚克隆后，100％杂交瘤细胞保持了分泌抗禽流感病毒抗体的能力。这些单克隆抗体小鼠腹水ELISA效价为10^5，HI效价为2^11-12。研究结果表明，所有这些单克隆抗体仅与相应的禽流感病毒株发生特异性反应，而不与鸡新城疫病毒、产蛋下降综合征病毒、鹅副粘病毒等反应。所有这些单抗在禽流感诊断中将发挥重要作用。