铁皮石斛菌根真菌对铁皮石斛组培苗的接种效应

[目的]对铁皮石斛（Dendrobium officinale）菌根真菌对铁皮石斛组培苗的接种效应进行研究。[方法]以从野生铁皮石斛根系中分离得到的Tj1、Tj2、Tj3真菌为材料,将其接种到铁皮石斛组培苗的根系上进行接种试验。[结果]在组培条件下,Tj1菌在前期没有表现出促生作用,Tj2菌表现出较强的促生作用,Tj3菌则对根具有促生作用,而在后期,Tj1菌则表现出了较强的促生作用,Tj2菌的接种效果最好,促生作用最强,Tj3菌则出现烂根烂苗现象;在室外条件下,Tj2菌接种使组培苗叶数增加,侧芽数增加,侧根生长明显,株高增加显著,叶片大而深绿,根部有明显的膨大现象。[结论]2种接种方式均说明Tj2菌对铁皮石斛的地上植株和地下根系生长,株数增多,株高增加,新芽和新根萌发均具有较强的促进作用,证明Tj2菌与铁皮石斛有效地建立了共生关系。因此Tj2菌对石斛组培苗的成功栽培具有实际应用价值。     

不同氮源对铁皮石斛菌根真菌生长的影响

为了研究铁皮石斛菌根真菌对不同氮源的适应性,以碳酸铵、硫酸铵、硝酸铵、硝酸钾、尿素、牛肉膏、牛肉蛋白胨、鱼肉蛋白胨作为PDA培养基中的氮源,探讨其对3种铁皮石斛菌根真菌菌丝生长速度和干重的影响.结果表明,以牛肉膏、鱼肉蛋白胨、硝酸铵3种物质作为氮源时,各种菌根真菌的生长速度较快、干重较高.因此认为,牛肉膏、鱼肉蛋白胨、硝酸铵为适用于铁皮石斛菌根真菌的外源氮源.研究以期为优化铁皮石斛菌根真菌的培养条件以及生物菌肥的制备提供参考.     

铁皮石斛组培苗移栽试验

以铁皮石斛组培苗为材料进行移栽试验,研究了其生长条件,包括基质选择、炼苗移栽技术、移栽后管理等方面。结果表明:恰当的生长条件加上合理的栽培管理就可以实现人工栽培铁皮石斛的目的,不仅可以保存濒危的铁皮石斛资源,还能创造巨大的经济效益。     

菌根共生对铁皮石斛生长发育的影响

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)为试材,采用菌根真菌(S1和S3)与铁皮石斛幼苗共培养的方法,研究了菌根共生对铁皮石斛幼苗阶段生长发育的影响。结果表明:共培养前期,菌根真菌(S1和S3)与寄主保持着共生关系;后期,这种共生关系逐渐消失,真菌菌丝大量聚集在根外。菌根真菌在铁皮石斛生长前期促生作用强于生长后期,表明菌根真菌在兰科幼苗生长阶段仍保持着一定的促生作用,但随着共生关系的消解,促生作用也逐渐减弱。     

铁皮石斛组培苗快速繁殖的研究

[目的]研究铁皮石斛组织培养与快速繁殖方法.[方法]以铁皮石斛蒴果为材料,分别探究不同培养基及培养基添加物对铁皮石斛原球茎诱导、增殖及生根的影响.[结果]最适宜的铁皮石斛萌发的培养基为1/2 MS,加入0.2 mg/L NAA的培养基中原球茎增殖率达120％,在培养基中加入1.0mg/L 6-BA和20％香蕉提取液均对其茅的增殖有良好的促进作用,添加0.25mg/L NAA、2.0mg/L6-BA和20％马铃薯提取液的培养基中其再生率可高达220％,0.2 mg/L NAA和20％马铃薯提取液均可显著提高铁皮石斛苗生根生长.[结论]该研究为铁皮石斛快速繁殖技术的应用奠定了理论基础.     

菌根真菌对铁皮石斛生长和矿质元素的影响

铁皮石斛组培苗接种6个真菌菌株,培养60 d后,接菌苗的平均鲜重增长率均高于对照,其中接种GS222、GDB162、GDB254、MLX102菌株的苗平均鲜重增长率均达到极显著差异(α=0.01),接种CLN103、CLX104的苗达到显著差异(α=0.05);接菌苗的各矿质元素(除Zn外)含量也均高于对照。接菌苗的营养根重分离获得原接种菌株。显微观察到在皮层和中柱组织形成菌丝结等典型的共生结构,表明接种菌株已与铁皮石斛根共生形成了菌根,对铁皮石斛的生长和矿质元素的吸收有较明显促进作用。由此可认为GS222、GDB162、GDB254、MLX102、CLN103、CLX104是铁皮石斛优良的菌根菌株。     

培养环境对铁皮石斛组培苗生长的影响

对影响铁皮石斛组培苗生长的环境因子进行了研究,结果表明,光照时间是影响铁皮石斛组培苗增殖及品质的最大影响因子,12 h·d-1为最佳的光照时间。而不同培养基、培养温度及光照强度对铁皮石斛组培苗生长的影响差异不显著。从组培苗质量和生产成本考虑,适宜的铁皮石斛组培苗规模化生产的环境条件为光照时间12 h·d-1,光照强度30 μmol·m-2·s-1,培养温度25 ℃左右。     

施肥对铁皮石斛组培苗的效应研究

为探究不同施肥浓度对铁皮石斛组培苗产量的影响,以及施肥对其根系生长等方面的影响,采用田间随机区组设计喷肥的方法,对铁皮石斛组培苗进行喷肥试验。结果表明:按1∶1的比例喷磷酸二氢钾和尿素对单株产量有明显的增产效果,能显著提高产量,其中以喷施浓度为0.20%增产效果最好。另外,喷施尿素和磷酸二氢钾对铁皮石斛幼苗根系的生长有明显的促进作用。     

瘤菌根菌对铁皮石斛生长和营养成分的影响

[目的] 了解瘤菌根菌与铁皮石斛建立共生关系后对植株地上部生长和营养物质积累的影响.[方法] 通过液体培养瘤菌根菌属菌株,浇灌无菌盆栽铁皮石斛苗的根部共培养,观察铁皮石斛植株的农艺性状的变化,并比较不同年限铁皮石斛鲜条的营养物质含量的变化.[结果] 接菌处理的铁皮石斛盆栽苗比未接菌的对照生长旺盛,叶色浓绿,植株健壮,1...     

铁皮石斛的组织培养与快速繁殖

以铁皮石斛(Dendrobium candidum Wallich ex Lindley)无菌苗分成的茎段、带顶芽的茎段和根蔸3类外植体在MS 6-BA 0.5 mg/L NAg 0.2 mg/L上均能诱导出丛芽,只有根蔸能诱导原球茎,且诱导丛芽倍数高于其它两类;在此培养基上原球茎的增殖系数高于其它组合的培养基;温度对原球茎继代增殖有明显影响,(25±1)℃最适合原球茎的生长繁殖;温度对生根的影响较为明显,较低的温度(23℃)有利于减少分生苗的数量,形成健壮高大的试管苗,适量的香蕉能促进形成粗壮的根和苗.     

铁皮石斛多倍体诱导研究

[目的]研究铁皮石斛的多倍体诱导。[方法]以铁皮石斛蒴果为材料,诱导萌发出铁皮石斛圆球茎,研究不同浓度的NAA、6-BA对铁皮石斛圆球茎增殖的影响;以秋水仙素作为诱导剂,研究不同浓度秋水仙素、处理时间对多倍体铁皮石斛诱导的影响。[结果]NAA浓度为1.5 mg/L、6-BA浓度为2.0 mg/L时,铁皮石斛圆球茎增殖效果最好;秋水仙素浓度越低、处理时间越短时,成活率越高、诱导率相对较低;随着秋水仙素浓度增大,处理时间延长,诱导率升高,但死亡率增大。[结论]秋水仙素浓度在0.15%、处理时间为48 h时,成活率达40%,诱导率为30%,效果最好。     

铁皮石斛组培苗移栽基质理化性质及栽培效果研究

[目的]研究铁皮石斛组培苗移栽基质的理化性质对栽培效果的影响。[方法]通过试验比较不同原料、不同配比的移栽基质的理化性质、营养成分对铁皮石斛移栽成活率、病害发病率、多糖含量的影响。[结果]以48%废弃食用菌糠、5%中草药废渣、11%桑秆+玉米芯、11%食物废弃壳、8.5%黏土+草皮土、6%木屑混和而成的栽培基质具有较适宜的理化性质和合理的营养成分,能有效减少铁皮石斛病害的发生,对植株的成活率、植株生长、多糖含量及产量均有明显影响。[结论]移栽基质的理化性质是影响铁皮石斛组培苗移栽时生根成活的关键因素。     

不同内生真菌对铁皮石斛幼苗生长的效应

为弄清齿瓣石斛促生真菌对铁皮石斛幼苗生长的促生效应,利用2种从齿瓣石斛根中分离筛选获得的促生菌根真菌,采用注射器注射接种法分别将单一菌剂及混合菌剂接种到松树皮基质上与铁皮石斛幼苗进行共生培养,分析2种真菌及其不同接菌方式对铁皮石斛株高及生物量等生长指标的影响。结果表明:共生培养130d后,与对照组相比,FDdS-5接种组对铁皮石斛幼苗叶长、株高及干重具有显著促进作用,FDdS-9接种组对叶数、根数、分蘖数、根长、株高、茎粗、鲜重及干重具有显著促进作用,混合菌剂(V_(FDdS-5)∶V_(FDdS-9)=1∶1)接种组对根数、叶长、根长、株高、茎粗、鲜重及干重具有显著促进作用,且与单菌株接菌组相比,混合菌株接种对株高的促生作用为协同效应,在茎粗、鲜重及干重指标上表现为累加效应。齿瓣石斛促生真菌同样能促进铁皮石斛幼苗的生长,混合接种有可能更大地发挥微生物的效能。     

不同添加物及浓度对铁皮石斛组织培养的影响 x

以无菌播种取得的铁皮石斛无菌苗作为试验材料,研究1/2 MS 培养基中添加不同浓度的添加物对铁皮 石斛的增殖、生根的影响。结果表明;马铃薯汁和木瓜乳有利于诱导芽的增殖,其中又以1/2 MS+NAA 0.2 mg/L +蔗糖 30 g/L+马铃薯200 g/L 培养基最有利于诱导芽的增殖;香蕉乳有利于诱导生根,其中又以1/2 MS +NAA 0.5 mg/L+蔗 糖30 g/L +香蕉100 g/L 培养基最有利于诱导芽生根。     

铁皮石斛试管苗生长的适宜光照时间

为给铁皮石斛组培规模化生产中光照时间的控制提供理论依据,在人工密闭式植物工厂的可控环境条件下,研究不同光照时间对铁皮石斛增殖及生根阶段试管苗生长的影响。结果表明:铁皮石斛试管苗增殖阶段增殖系数、株高光照时间在10h/d到最大值,为适宜光照时间;在生根阶段苗高、叶片数、根长均在光照时间为12h/d培养条件下到最高,为铁皮石斛生根阶段适宜光照时间。     

铁皮石斛内生真菌的分离鉴定及其促宿主生长作用

利用微生物学传统分离培养方法从野生铁皮石斛根部分离内生真菌,依据形态学和真菌18SrDNA ITS序列分析对菌株进行分类,并采用正交设计法优化菌丝体液体培养基,考察发酵液对铁皮石斛组培苗生长的影响,以期为人工种植铁皮石斛提供优良菌肥。结果显示,共分离到4株内生真菌,其中TPSH1、TPSH2、TPSH3为镰刀菌属(Fusarium),TPSH4为柱霉属(Scytalidi-um)。优化后确定培养液的组分为:麦麸25g/L,土豆20g/L,蔗糖10g/L,1/2MS。菌株发酵液分别喷施铁皮石斛组培苗8周后,与对照(1/2MS)相比,以TPSH4菌株液体发酵8d,对铁皮石斛生长促进作用明显,成活率提高30.43%,植株高度增加了31.21%,鲜质量增加40.61%。TPSH4为具有促宿主生长作用的新菌株,其发酵液可作为菌肥,用以促进人工栽培铁皮石斛的生长。     

铁皮石斛试管苗快繁体系

铁皮石斛Dendrobium officinale是一种名贵药用植物,野生资源亟待保护,必须通过试管苗快繁技术研究,才能满足人们对它的需要。通过不同基本培养基对铁皮石斛进行种子发芽试验,不同消毒方法对茎尖进行存活率试验,不同植物生长调节物质组合对不定芽、原球茎和壮苗及根系的诱导试验的结果表明:铁皮石斛胚培养最佳培养基为1/2 MS(Murashigeand Skoog) 添加物A 25 g.L-1蔗糖;4种消毒方法中最佳消毒方法为B,外植物茎尖存活率可达76.2%。不定芽诱导最佳培养基为1/2 MS 1.5 mg.L-16-苄基腺嘌呤(BA) 0.25 mg.L-1萘乙酸(NAA),诱导倍数4.7。原球茎诱导最佳培养基为1/2 MS 1.0 mg.L-1BA 0.5mg.L-1NAA,诱导率为58%。不定芽最佳生根培养基为1/2 MS 0.5 mg.L-1NAA,生根率为100%,平均生根数为7.1条。建立了铁皮石斛试管苗快繁体系,为其广泛应用提供了依据。图1表5参11     

铁皮石斛组织快繁及移栽培养1）

为了筛选出铁皮石斛的最佳组织培养培养基、最佳移栽基质、最适菌剂种类和施用方式,选取具有1～2片叶片的铁皮石斛分化苗在3种常用组培培养基上培养,11周后,统计平均株高、茎粗、根长、鲜质量的增长量、平均产生新根数、新孽数;选取相同长势的铁皮石斛组培苗,在2种常用兰科植物培养基质上移栽,将3株优良兰科菌根真菌制成4 g· L－1的单一液体菌剂,对铁皮石斛移栽苗分别进行蘸根、灌根,90 d后,统计成活率、平均鲜质量、株高、茎粗增长量、平均新根数。结果显示：MS＋0．34 g· L－1KNO3＋100 g· L－1土豆提取液＋2．4 g· L－1植物凝胶＋30 g· L－1蔗糖培养基上生长的铁皮石斛苗平均株高增长量、平均鲜质量增长量、平均新根数、平均分蘖数极显著大于其他两组处理;移栽于V（珍珠岩）∶V（仙土）∶V（松树皮）∶V（活苔藓）＝1∶1∶1∶2基质上的铁皮石斛幼苗除平均新芽数略低于移栽于V（花生壳）∶V（石灰岩）∶V（蛭石）∶V（活苔藓）＝1∶1∶1∶2基质上的铁皮石斛幼苗外,其他生长指标均高于后者,其中新根数显著高于后者;施用Dh57菌剂的铁皮石斛幼苗在成活率、平均新根数、生长量方面显著高于施用Do60、 Ph03菌剂的铁皮石斛幼苗,在株高、茎粗增长量方面极显著高于另外4组处理;施用 Ph03菌剂的铁皮石斛幼苗平均新芽数极显著高于施用Dh57、D6o0菌剂的处理组;同一菌剂蘸根处理的幼苗生长指标均高于灌根处理。     

铁皮石斛的组织快繁研究

研究了不同培养基和不同浓度激素对铁皮石斛组织快繁愈伤组织诱导的影响。结果表明：诱导愈伤组织时,培养基以N6培养基对愈伤组织的诱导效果最好;添加6-BA,浓度以1.0 mg/L诱导愈伤组织效果最好。