黄秋葵果胶与半乳糖凝集素-3相互作用的研究

采用DEAE-纤维素柱层析对黄秋葵果胶进行分离纯化,得到不同结构特征的果胶组分,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化HPLC法和HPGPC对分离纯化的果胶组分进行单糖组成分析和分子量分布进行分析,采用半乳糖凝集素-3诱导的红细胞凝集实验和竞争性荧光酶联免疫法研究不同结构特征的黄秋葵果胶组分抑制半乳糖凝集素-3活性的情况。结果表明,黄秋葵果胶经DEAE-纤维素柱层析分级后得到AEP-1和AEP-2 2个产物,均主要由鼠李糖、半乳糖醛酸和半乳糖构成,分子量分别约为380和130 k Da;半乳糖凝集素-3诱导的红细胞凝集实验和竞争性荧光酶联免疫法的实验结果均表明,AEP-2具有较强的抑制半乳糖凝集素-3的活性,初步阐释了黄秋葵抗肿瘤活性的机理,将促进黄秋葵深度开发利用。     

重组捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素免疫山羊皱胃细胞因子表达定位

【目的】检测重组雌、雄捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素(rHco-GAL-f/m)免疫山羊皱胃转录细胞因子。【方法】用rHco-GAL-f/m免疫山羊,通过原位杂交法对阴性对照组(A)、攻虫对照组(B)、免疫攻虫组(C)和免疫不攻虫组(D)山羊皱胃中白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA转录进行定位,并对上述细胞因子阳性反应细胞数量进行分析。【结果】A组山羊皱胃组织中没有检测到细胞因子,其它3组仅在皱胃黏膜下层中检测到了上述细胞因子。B、C和D组间IL-4和IL-6阳性反应细胞数差异显著(P0.05),其中C组明显高于其它两组;B、C和D组间IL-1?、IL-2和TNF-α阳性反应细胞数差异显著(P0.05),其中D组明显高于其它两组;IFN-γ阳性反应细胞数在B组和C组之间差异不显著(P0.05),D组与B组和C组之间差异显著(P0.05),且明显高于其它两组。【结论】重组捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素能够诱导山羊皱胃局部免疫应答。     

慢性心力衰竭患者血浆半乳糖凝集素-3与动脉僵硬度的相关性

目的 分析慢性心力衰竭(CHF)患者血浆半乳糖凝集素-3(Gal-3)与动脉僵硬度的相关性.方法 收集336例CHF患者及112例非CHF患者(对照组)临床资料、实验室检查和B超结果,ELISA检测血浆Gal-3水平,动脉硬化检测仪测定颈动脉和股动脉脉搏波传导速度(cf-PWⅤ)、肱动脉和踝动脉脉搏波传导速度(ba-P...     

重组捻转血矛线虫半乳糖凝集素对山羊外周血单核细胞细胞因子mRNA转录的抑制作用

 【目的】以体外试验观察雌雄捻转血矛线虫半乳糖凝集素重组蛋白（rHco-gal-m/f）对山羊外周血单核细胞多种细胞因子mRNA转录水平的影响及其量效关系。【方法】选用2岁健康山羊5只，分别从颈静脉无菌采血，分离外周血单核细胞(PBMCs)，以ConA或LPS刺激的同时分别加入0 μg•ml-1，10 μg•ml-1、20 μg•ml-1和40μg•ml-1的rHco-gal-m/f，进行体外培养。用RT-PCR方法，以肌动蛋白基因（β-actin）作内标，定量分析单核淋巴细胞白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA丰度。【结果】重组雄性捻转血矛线虫半乳糖凝集素(rHco-gal-m)可以抑制上述细胞因子mRNA的转录，并呈现出明显的剂量依赖性；重组雌性捻转血矛线虫半乳糖凝集素(rHco-gal-f)可抑制IL-1β、IL-4、IFN-γ and TNF-α的转录，也呈现出明显的剂量依赖性。【结论】重组捻转血矛线虫半乳糖凝集素能降低多种细胞因子在体外的转录。     

人胎盘碱性磷酸酯酶基因在鸡蛋蛋清中的表达

利用PCR方法从pSEAP2-control质粒中扩增获得人胎盘碱性磷酸酯酶基因plap的cDNA,将其克隆到鸡输卵管特异性表达载体(pAB-Sig-SV40)的卵清蛋白基因调控区下游。通过脂质体精子载体法人工授精母鸡,收集鸡蛋、孵化。雏鸡出壳后,抽提鸡冠基因组DNA,采用PCR方法检测两组孵化后代中的嵌合体鸡,第1组母鸡(95羽)中plap的PCR阳性检出率为75%,第2组母鸡(128羽)的阳性检出性率为81%。经Western blotting检测,仅1只嵌合体母鸡所产鸡蛋蛋清中检测到plap产物的存在。     

妊娠早期营养不良对牛胎盘血管生成因子表达和血管分布的影响

试验选用用于繁殖相同公牛的经产肉母牛,旨在检测妊娠早期母体营养不良以及随后营养补偿对胎盘血管生长和血管生成因子表达的影响。在妊娠的第30～125天,对照组选择怀有雌性胎儿的30头母牛按照NRC营养需要量饲喂;营养限饲组（NR）饲喂量低于NRC需要量,以降低试验牛的体重。妊娠第125天时,分别从对照组和NR组选择10头牛屠宰,用于检测：在妊娠第125～220天时,NR组剩余的5头牛补偿饲喂,使其在妊娠第220天达到一定的体况分值（BodyConditionScore,BCS）,并与对照组（5头牛）同期体况分值相同。从妊娠第220～250天,所有牛都被饲喂对照组日粮,在妊娠第250天,对照组和NR组剩余牛被屠宰并剖检：剖检时,经肉阜和子叶动脉灌注使胎盘固定,用于检测毛细血管密度;将子叶（胎儿胎盘）和肉阜（母体胎盘）放于液氮中迅速冻结。     

正常孕妇与妊高症患者胎盘中Ghrelin、GHS-R mRNA的表达研究

[目的]通过比较正常孕妇与妊高症患者胎盘中Ghrelin及其受体GHS-RmRNA水平的变化,探讨Ghrelin及其受体与妊高症的发病是否相关。[方法]采用实时荧光定量RT-PCR技术检测了正常孕妇胎盘和妊高症患者胎盘中Ghrelin及其受体GHS-RmRNA水平相对表达量的变化。[结果]正常孕妇胎盘组织中mRNA水平与妊高症患者胎盘组织中mRNA水平无显著性差异,但Ghrelin受体GHS-R在两者之间的mRNA水平有显著性差异（P〈0．05）。[结论]Ghrelin及其受体在妊高症患者和正常孕妇胎盘中表达的相对变化表明,Ghrelin受体缺乏可能成为妊高症发病的因素之一。     

大豆凝集素在猪消化道内活性残留规律的研究

用经N-乙酰基-D-半乳糖胺-epoxy-sepharose 6B亲和层析体系纯化的大豆凝集素制备兔抗大豆凝集素多克隆抗体,建立大豆凝集素间接抑制ELISA定量检测方法,检测下限低于10 ng/mL。以含质量分数为20%的生大豆和1%Cr2O3(外源指示剂)的日粮饲喂长白猪(70日龄)2周,检测其胃、十二指肠、空肠前、空肠中、空肠后、回肠、盲肠、结肠内食糜中大豆凝集素的活性残留率分别为(35.35±1.06)%(、23.90±1.13)%(、16.30±0.82)%、(12.80±0.90)%、(11.20±0.66)%(、9.98±0.74)%(、6.20±0.68)%和(4.30±0.51)%。其中由胃到十二指肠和由十二指肠到空肠前的残留率变化均达到了显著水平(P<0.05)。     

芸豆凝集素受体在小鼠生殖细胞上的分布及作用研究

[目的]探讨芸豆凝集素（PHA）受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布及作用。[方法]应用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的芸豆凝集素作为分子探针,确定其PHA受体在小鼠精子和卵母细胞上的分布。通过不同浓度PHA处理精子和卵母细胞,研究PHA预处理对精子获能和顶体反应,以及对卵母细胞FITC—PHA染色的影响。l结果]PHA受体主要表达于小鼠精子整个尾部区域和顶体反应后的头部质膜,2mg／mlPHA预处理有抑制顶体反应的作用;卵母细胞透明带和细胞膜都有PHA受体的存在。不同浓度PHA处理卵母细胞对其透明带阿FTIC—PHA染色影响不大,但对其细胞膜染色有较大影响,且不同浓度之间差异明显。[结论]芸豆凝集素受体是小鼠精子和卵母细胞受体的重要组成部分,且在精卵质膜融合过程中发挥重要作用。     

整体荧光原位杂交用于检测水稻特异DNA程序的研究

文章报道了整体荧光原位杂交应用于检测水稻特异ＤＮＡ的实验程序。利用该实验方法,以经地高辛（ＤＩＧ）标记的ｒＤＮＡ作为探针,成功地在水稻根尖和花药内部组织检测与探针互补的片段。对于实验方法,结果表明,整体荧光原位杂交的成功与否受到多种因素的影响,包括组织的种类、固定剂的种类以及固定后的处理方法（主要是酶解与否）等。检测根尖ＤＮＡ可以采用φ（福尔马林）＝１％固定加上酶解;检测花药（花粉发育处于单核期）     

小麦－簇毛麦杂种染色体的DNA原位杂交研究

以生物素标记的簇毛麦基因组ＤＮＡ作探针与小麦－簇毛麦杂种双二倍体及异附加系染色体进行原位杂交，旨在探索一种鉴定小麦中簇毛麦染色质的分子细胞遗传学方法。首先试验了标记的簇毛麦ＤＮＡ与小麦ＤＮＡ之含量比对原位杂交效果的影响，发现探针混合液中不加未标记的小麦ＤＮＡ时，获得的原位杂交结果较理想。在八倍体小麦－簇毛麦双二倍体（２ｎ＝５６）中，１４对簇毛麦染色体出现明显的棕褐色原位杂交信号，而小麦染色体不显标记，使这２个物种的染色体很易相互区分开来。进一步用生物素标记的簇毛麦ＤＮＡ与小麦－簇毛麦６Ｖ染色体附加系体细胞杂交，也可检测出其中１对附加的６Ｖ染色体。由于该方法标记的簇毛麦ＤＮＡ覆盖各簇毛麦染色体的整个染色体臂，由此，用其鉴定小片段小麦－簇毛麦染色体易位是有效的。     

松毛虫赤眼蜂(Trichogramma dendrolimi)几个种群间繁殖性状的杂交效果分析

应用完全双列杂交设计,对松毛虫赤眼蜂几个种群间繁殖性状的杂交效果进行了研究。通过杂种优势率的统计检验及亲本一般配合力、特殊配合力的分析,得出10个杂交组合中的最优组合为JNYT11×LT,JNYT11×XT。     

卵巢癌3种蛋白的表达及其与化疗耐药性的关系

培养13个卵巢癌细胞系，提取癌细胞蛋白，采用Western印迹法观察NFkB家族蛋白、P53和MDM2的表达，并用四氮唑盐法药敏试验观察与卵巢癌细胞化疗耐药性关系。结果表明：①P65、P50及IKB在胞浆内表达阳性率分别为76．9％、81．8％、84．6％，P65、P50在胞核内表达阳性率分别为15．3％、45．5％，MDM2蛋白表达阳性率为38．5％，P53表达阳性率为46．1％。②2个卵巢癌细胞株P65表达阳性，其IC50显示为明显高值。在MDM2表达阳性的5个卵巢癌细胞株,其中4株IC50显示为高值，P53表达阳性与阴性的卵巢癌细胞中IC50值无明显变化规律。由此说明P65、P50和MDM2与卵巢癌细胞的发生，发展有关；卵巢癌细胞NFkB和MDM2蛋白的表达存在一致性，且两者过度表达与化疗的耐药性有关；NFkB可望成为判断卵巢癌化疗预后新的标志物。     

基因组原位杂交技术及其在植物远缘杂种染色体分析中的应用

本文介绍了基因组原位杂交技术的发展历史,基本原理和要点,评述了该项技术近年来在远缘要种染色体分析中的研究进展和局限性。     

毒鼠磷灭杀森林害鼠的研究

目前,在我国林区广泛使用的杀鼠剂毒性大、不安全,并有二次中毒现象,特别是长期单一使用一种杀鼠剂,容易产生抗药性和拒食性,影响灭鼠效果。为此、研制了以毒鼠磷为主剂的杀鼠毒饵,用以取代氟乙酰胺。主要做了毒力测定、室内和野外药效试验、残效及二次中毒试验等项工作,并搞了大面积飞机防治。结果表明:以毒鼠磷为主剂的杀鼠毒饵灾鼠效果好,经济安全,在我国林区有广泛地推广使用前途。     

不同生长速度牙鲆的肌肉组织基因差异表达研究

为探讨牙鲆生长的分子遗传机理,选取同一饲养环境下生长的60日龄牙鲆,根据体重和体长的显著差异分成大小两组,筛选出14对引物组合,应用mRNA差异显示技术,研究了两组牙鲆肌肉组织的基因表达差异。在8%的聚丙烯酰胺凝胶上共获得241条可重复扩增的条带,占可扩增条带(288条)的77．43%。其中有223条为共有条带,占总条带数(241)的92．53%;差异表达的片段有18条,占总条带数(241)的7．47%;它们只表现为强弱的差异,没有发现“有或无”的基因表达差异现象。实验结果说明:在长期相同的人工养殖条件下,牙鲆肌肉组织中基因的mRNA表达差异较少;相同养殖环境条件下表现出不同生长速度的牙鲆鱼肌肉组织中所存在的强与弱的基因表达差异的原因,可能源于调控其肌肉组织生长发育基因的内含子调控序列存在某些差异。