利用农杆菌介导合子胚转化法将Bar基因转入玉米自交系的研究

基于农杆菌介导的合子胚转化方法是一种具有自主知识产权的转基因新方法。利用该方法转化玉米合子胚,可直接获得转化种子。以东北春玉米区玉米自交系8902、Pa91、丹340作为转化受体,通过合子转化法进行抗草丁膦除草剂基因Bar的转基因研究。在获得的3 560份材料中,通过对T_1代种子苗叶面喷施草丁膦除草剂Basta,共获得153株抗性植株,抗性频率为4.3%。PCR鉴定阳性植株为102株,转化频率为2.87%。对PCR检测出的阳性植株进行自交获得T_2代,对材料继续进行抗性筛选,对抗除草剂表型的分离比率进行抗性遗传分析。     

转基因抗草苷膦除草剂棉在美国的试验情况

1997年美国引进抗草苷膦除草剂棉 ,大约种植 30万公顷 ,1 998年超过 1 0 0万公顷 ,1 999年的种植面积仍在增加。当按标签说明在土壤表面喷洒草苷膦时 ,抗除草剂棉的营养生长正常 ,但是花组织的抗性较低 ,在结铃期若过量施用 ,花粉不能发育 ,因此出苗后必须小心地喷洒到植株基部 ,当到达生殖期 ( 5叶期 )时 ,避免喷到叶子上。 1 )转基因试验和广泛的农业试验表明 ,抗草苷膦除草剂基因对棉花特性没有负效果 ,按推荐用量喷洒是安全的 ;2 )喷洒草苷膦后 ,对下部第 5果枝第 1节位结铃情况的观察表明 ,该节位的结铃数减少 ,但是棉株中部和外部的节…     

利用改良的草丁膦筛选系统快速而有效筛选转基因大豆

为提高大豆(Glycine max(L.)Merrill)遗传转化效率建立了一种快速而有效的草丁膦筛选系统.将刺伤的子叶节外植体接种于含有pCAMBIA3201载体的LBA4404农杆菌溶液.目前利用草丁膦筛选转基因大豆的常规方法是在含有5 mg/L草丁膦的芽诱导培养基和含有3～5 mg/L草丁膦的芽伸长培养基上进行筛选.利用此常规筛选方法所获得的大多数植株是非转化体,从而导致转化效率变低,为1.6%;而且这种方法极大地延迟了芽的伸长过程,使多数不定芽的伸长发生在农杆菌处理后的21～41周.为此,对常规草丁膦筛选方法进行了改良.首先将外植体放置在不含有除草剂的芽诱导培养基上培养3周,然后转到含有4 mg/L草丁膦的芽伸长培养基上进行筛选.此时,多数不定芽仅在7～12周内便可伸长.当芽长到3～5 cm时,从外植体上切下来转到含有1～5 mg/L草丁膦的根诱导培养上进行进一步的筛选.结果表明,在添加有3 mg/L草丁膦根培养基上,转化效率达到最大值为6.7%.不定芽对根培养基中的除草剂反应迅速,仅在10d天内所有非转化体都变枯死亡.利用这种改良的筛选系统,大多数转基因植株仅在8～16周内便可获得.Southern杂交结果证实了外源基因稳定地整合在大豆基因组中.GUS检测和除草剂抗性分析结果表明,被整合的外源基因在大豆细胞中得到了稳定的表达.     

转bar基因抗草铵膦油菜对草铵膦抗性的评价

为评价抗草铵膦转基因杂交油菜对草铵膦的抗性,以转bar基因抗草铵膦杂交油菜“7748”为材料,在2个密度水平和4种除草剂下,以油菜单株鲜重、株高、单株叶面积、净光合速率、SPAD值、全株角果数、每角粒数、千粒重等为指标,研究了草铵膦及其对照药剂对抗草铵膦转基因杂交油菜生长、产量及产量构成、品质的影响.结果表明,草铵膦处理后4d之内油菜叶绿素相对含量、净光合速率极显著低于对照,15d左右内油菜单株鲜重、单株叶面积极显著低于对照,20 d左右内油菜株高极显著低于对照,但药后1个月左右均超过对照.密度间、密度与除草剂交互作用差异显著,密度间以高密度的平均产量最高,除草剂间以草铵膦处理的平均产量最高.草铵膦处理后,油菜全株角果数有所下降,但角粒数、千粒重提高.转基因杂交油菜对草铵膦有较强的抗性,草铵膦对转基因杂交油菜安全并能稳定增加其产量,可应用于生产.     

不同除草剂单独相继使用和混合使用防除小麦田虉草的效果比较

草是小麦田的主要杂草 ,尤其是水稻—小麦复种田块发生较为严重。用异丙隆防除　草已有 2 0多年的历史 ,防治效果十分显著。但近来有研究表明　草已具有对异丙隆的抗性。本试验研究了不同除草剂单独相继使用与混合使用对该杂草的防治效果。结果表明 ,播后 60 d,出苗前喷施氟乐灵和第一次灌水后喷施异丙隆的处理 ,除草效果最佳 ,而在成熟期 ,第一次灌水后喷施噻黄隆的处理具有与以上处理同样的防治效果。虽然使用异丙隆的处理产量最高 ,但一些除草剂单独相继使用也具有很好的杂草防治效果 ,小麦产量显著高于未用除草剂的对照。作者认为 ,在　草防治上存在有异丙隆抗性的地区 ,可以使用本研究中的一些除草剂     

大豆对草丁膦敏感性研究

分析了大豆品种东农50对不同浓度草丁膦(Glufosinate)的敏感性表现。结果表明:施用50 mg.L-1草丁膦后3 d东农50开始表现枯黄、萎蔫,随着浓度增大毒害作用增强,扩散整个叶片;子叶、茎、真叶不同位置的草丁膦处理显示新叶、子叶对草丁膦最敏感,茎的敏感性最低;全株喷施75 mg.L-1草丁膦时可直接观察到草丁膦对叶片的毒害作用,二次喷施效果显著,易于观察。     

转基因耐除草剂玉米ZZM030对草铵膦、草甘膦及非靶标除草剂的耐受性评价

采用田间试验,鉴定小区随机区组排列,对转基因玉米ZZM030和对应的非转基因对照祥249进行不同用量的草甘膦、草铵膦及非靶标除草剂的喷施处理,分别在用药后7、14、28 d调查和记录成苗率、植株高度、药害症状,评价该转基因玉米品系的目标性状有效性和对非靶标除草剂耐受性。结果表明,转基因玉米ZZM030对草铵膦和草甘膦具有良好的耐受性,对玉米田其他常用除草剂阿特拉津和烟嘧磺隆也具有良好的耐受性,不耐受玉米敏感型除草剂精喹禾灵和稀禾啶。     

2种除草剂防除茶园杂草试验效果对比分析

选取艾敌达57%石蜡油EC、保试达18%草铵膦AS两种除草剂进行了除草试验。结果表明:艾敌达57%石蜡油EC有机除草剂对茶园常见的杂草均有较好防效,推荐有机茶园中使用艾敌达57%石蜡油EC15倍液药液防治杂草;保试达18%草铵膦AS药后14 d和21 d防效均达100%,推荐无公害茶园防治杂草使用300倍液的保试达18%草铵膦AS药液。     

抗精噁唑禾草灵耿氏硬草乙酰辅酶A羧化酶基因研究

为明确耿氏硬草抗性种群SD-23对乙酰辅酶A羧化酶(ACCase)抑制剂类除草剂的抗性水平及靶标抗性分子机理,采用整株水平测定法测定了SD-23种群对6种ACCase抑制剂类除草剂的抗性,扩增和比对了抗性和敏感种群间的ACCase基因序列,并测定了耿氏硬草种群SD-23对其他4种除草剂的敏感性。结果表明,SD-23种群对精噁唑禾草灵产生了高水平抗性,抗性倍数为12.7,对炔草酯和精吡氟禾草灵产生了低水平抗性,抗性倍数分别为5.2和4.5,对烯禾啶、烯草酮和唑啉草酯较敏感。与敏感种群SD-1相比,SD-23种群ACCase的CT区域第2096位甘氨酸突变为丙氨酸(Gly-2096-Ala);甲基二磺隆、啶磺草胺和异丙隆对抗性和敏感种群均有较好防效,其防效达86.7%以上,干重防效达77.4%以上。ACCase的Gly-2096-Ala突变第一次在耿氏硬草中被报道,该突变可能是导致SD-23种群对精噁唑禾草灵产生抗性的重要原因之一。     

异噁唑草酮·噻酮磺隆在玉米不同种植区应用的除草效果和安全性研究

2016～2017年在东北春玉米种植区和黄淮海夏玉米种植区设立田间试验基地,研究除草剂异噁唑草酮·噻酮磺隆悬浮剂在不同区域玉米田播后苗前处理的杀草谱及除草效果、对玉米安全性及对下茬作物生长的影响。结果表明,26.7%异噁唑草酮·噻酮磺隆悬浮剂141.75～283.5 g ai/hm2在玉米播后苗前使用,对东北春玉米种植区主要杂草稗草、狗尾草、藜、反枝苋、苘麻、刺儿菜和黄淮海玉米种植区主要杂草马唐、牛筋草、反枝苋、马齿苋、铁苋菜等禾本科杂草和阔叶杂草均有理想效果,药后40～45 d,异噁唑草酮·噻酮磺隆上述处理对杂草鲜重防效仍在95%左右,可实现一次施药控制玉米全生长期的杂草,在玉米田具有较好的除草增产作用;对后茬播种的小麦、大豆、花生、油菜、菠菜生长无影响。     

Nitrogen-enhanced phytotoxicity to cucumber of low concentrations of EPTC and metolachlor

The impact of nitrogen source on the response of cucumber (Cucumis sativus) seedlings to sub-toxic concentrations (<10⁻⁶ ) of metolachlor and EPTC was studied in nutrient solutions. Nitrogen increased the phytotoxicity of low concentrations of both herbicides. The presence of a relatively high ammonium level (5m ) in solution enhanced growth inhibition (up to 50%), increased total nitrogen (20%) and protein content (26%), and resulted in less K⁺ (50%) and Ca²⁺ (70%) absorption. Under optimal nitrogen nutrition conditions, metolachlor temporarily inhibited plant growth, and both herbicides decreased the protein content in cucumber leaves. The effect of herbicides at the high ammonium level on plant growth was stronger and more long-lasting compared with control growing conditions.     

名优绿茶鲜叶摊放过程中主要生化成分的动态变化

以一芽一叶茶鲜叶为原料,进行连续摊放(水分78%～61%)处理,取不同含水率摊放叶,分别进行液氮速冻和冷冻干燥,测定茶多酚、儿茶素各组分、氨基酸及各游离组分、咖啡碱、叶绿素、维生素C及可溶性总糖等含量,研究茶鲜叶摊放过程中主要生化成分的动态变化。结果表明,随着摊放时间的增加,茶鲜叶中含水率下降逐渐加快,干物质质量下降;茶多酚和儿茶素总量呈现前期下降后期有所上升的趋势,酯型儿茶素总量逐渐下降,鲜叶和摊放叶中检测不到没食子酸儿茶素(GC);氨基酸总量呈上升趋势,不同游离组分呈现不同的变化趋势;咖啡碱和可溶性总糖含量呈逐渐上升趋势,叶绿素和维生素C含量呈逐渐下降趋势。摊放过程中茶鲜叶不同生化成分具有不同的动态变化规律,本研究为提高名优绿茶品质提供一定的理论基础。     

Effects of sulphur,nitrogen, phosphorus,potassium, and water stress on dietary fibre fractions,starch, amino acids and on the biological value of potato protein

In pot experiments with greatly differing rates of N, P, K, and S, and 3 levels of water, dry matter (DM) yields of tubers varied from 28 to 454 g/pot. Especially P-, K- and S-deficiency reduced the starch content of boiled potatoes, from P from 74 to 59% in DM. S-deficiency increased soluble, insoluble and total digestible fibre (TDF) from about 9 to 12.4% TDF in DM of boiled potatoes. Lignin content of fresh potato DM was increased from 0.7 to 2.0 and from 0.8 to 3.7% by P- and K-deficiency. P-deficiency considerably increased arabinose, galactose, and uronic acid, and decreased glucose content. N-application and P-, K- and S-deficiency increased total- and NO₃-N concentrations which varied from 1.32 to 3.67% and from 17 to 400 ppm in DM. Water stress slightly decreased total-N content. Increasing N in DM, due to high N-rates or P- or K-deficiency, decreased concentrations in crude protein (CP) of all essential amino acids, whereas aspartic acid (asparagine) increased. S-deficiency caused particularly strong decreases in concentrations of essential amino acids from 1.28 to 0.49, 1.62 to 1.10, 5.24 to 3.68, and 5.59 to 2.57 g/16 g N of cystine, methionine, lysine and leucine, respectively. Glutamic acid (glutamine) content was increased from 15.7 to 27.6 g/16 g N by S-deficiency. Expressed as g amino acid/kg DM, all amino acid concentrations increased with increasing % N in DM. In N-balance trials with rats, increasing crude protein concentrations in DM of boiled potatoes increased the true digestibility (TD) of the protein from 72 to 90 but decreased the biological value (BV) from 89 to 65. S-deficiency caused a further reduction of the BV to 45. Excluding S-deficiency treatments, linear regression equations between CP concentrations and BV and TD gave correlation coefficients r of –0.94*** and 0.82***, respectively. There was close agreement between changes of BV and concentrations of first limiting amino acids (chemical score), with r=0.96***.     

Fertilizer effects on yield,mineral and amino acid composition,dietary fibre content and nutritive value of leeks

In pot experiments with greatly differing rates of N, P, S, K and Ca, dry matter (DM) yields of leek stems varied from 25 to 164 g/pot. Total-N and NO₃-N concentrations varied from 1.18 to 3.56% and from 10 to 1515 ppm in DM, respectively. Both N applications and P and K deficiency greatly increased total-N and NO₃-N content. S applications increased total-S content from 0.047 to 0.359% in DM, of which between approximately 100 to 25% were found in methionine+cystine. Total-N/total-S ratios decreased from 57 to 6 with the highest S level. P and K applications increased their respective content in DM two- and threefold. Severe Ca deficiency reduced Ca content from 0.495 to 0.045%. Iron, zinc, manganese and copper contents varied from 33–69, 14–26, 11–34 and 3.1–5.7 ppm in DM, respectively. Increasing N contents, whether due to N applications or P or K deficiency, decreased the content of all essential and some other amino acids in crude protein. Both S and severe P deficiency had a pronounced negative effect on amino acid composition and chemical score. Only glutamic acid (glutamine) and arginine were increased by increasing N contents. However, expressed as g/kg DM the concentrations of all amino acids were positively correlated with protein content. S and P deficiency reduced total dietary fibre (TDF) content of DM from 28.3 to 18.6% and 17.4%, respectively, of which between 53 and 60% were insoluble dietary fibre (IDF). Digestible energy (DE) was positively correlated with protein content (r=0.90**). In N-balance trials with rats, increasing protein concentrations (50% of total protein given as casein and supplemented with 1% methionine) raised the true digestibility (TD) of the protein from 44 to 72%. The biological value (BV) of protein was generally high, with a mean of 91.7 N deficiency tended to increase and S deficiency tended to decrease the BV.     

专用配方氨基酸叶面肥对乌龙茶树生理特性及品质的影响

以"铁观音"和"本山"乌龙茶品种为研究对象,开展专用配方氨基酸叶面肥对乌龙茶树的萌芽和产量、叶片形态特征、生理特性及品质成分的影响.结果显示:"铁观音"和"本山"茶树喷施专用配方氨基酸叶面肥,萌芽期可提早5～6d,叶面积、叶片厚度和气孔密度均显著提高,鲜叶产量提高22.87％～35.68％,总叶绿素含量、可溶性糖和蛋白...     

不同施肥对百香果产量和营养成分的影响

为了筛选百香果最佳施肥模式,本研究设置5种不同施肥处理：不施肥（CK）、氮磷钾肥（NPK）、有机肥（M）、氮磷钾与有机肥配施（MNPK）、高量氮磷钾与高量有机肥配施（2MNPK）,通过分析比较百香果的生长状况、产量、营养成分差异,进一步采用多元统计分析方法进行主成分分析及综合评价。结果发现：与CK处理相比,NPK、MNPK、2MNPK处理百香果生长最快,尤其在定植66 d后效果最明显。NPK、M、MNPK和2MNPK处理均提高了百香果产量及品质,MNPK、2MNPK处理效果最明显。与CK处理相比,NPK、M、MNPK和2MNPK处理百香果产量分别增产112.86%、74.40%、191.00%、244.30%,维生素、矿质元素、糖类物质、氨基酸含量均有上升趋势,总酸呈下降趋势,2MNPK处理总氨基酸、必需氨基酸、风味氨基酸含量分别增加了82.40%、76.11%、76.89%,总酸含量降低了22.61%。对36种指标进行多元统计分析,从中提取了3个主成分因子,其累计方差贡献率为97.925%。建立综合评价模型计算综合总得分排序为2MNPK（123.04）>MNPK（39.06）>M（-12.01）>NPK（-45.36）>CK（-104.73）。说明在这5种施肥处理中,2MNPK处理是百香果种植过程中最佳施肥模式。该研究可以为百香果大面积推广应用奠定理论基础。     

施硅对川西蒙山茶叶品质的影响研究

硅素是一种可以改善农作物品质的有益元素。通过盆栽试验研究硅肥的两种施用方法(土壤施用和叶面喷施)及其不同施用量对川西蒙山茶叶品质的影响。结果表明:施用硅肥对茶叶品质具有显著影响,土壤施硅可使茶叶中氨基酸和可溶性糖含量比对照分别提高38.66%和16.98%,而茶多酚和咖啡碱的含量分别降低15.28%和20.24%;叶面施硅则可使氨基酸和咖啡碱含量比对照分别提高33.47%和28.96%,而茶多酚和可溶性糖含量则分别降低12.39%和13.29%。     

硒锌交互对春茶硒化学形态的影响

通过叶面配合喷施不同浓度亚硒酸钠（Na₂SeO₃）和醋酸锌[(CH₃COO)₂Zn·2H₂O],研究硒（Se）、锌（Zn）及硒锌交互（Se-Zn）作用对春茶硒化学形态的影响。结果表明：（1）单独喷施Na₂SeO₃均能提高醇溶态、水溶态、盐溶态的硒含量,尤以200~400 μg/mL的硒处理对春茶中硒的含量提高效应明显,其中醇溶态硒占总量的比例最大,水溶态次之,盐溶态最小,且醇溶态、水溶态硒占总量的比例分别较对照有不同程度的增加;（2）0.20%~0.40%的锌对3种化学形态硒含量有显著的提高效应,而高浓度锌（1.20%）抑制3种形态硒的吸收;（3）低浓度硒（50 μg/mL）与不同浓度的锌配比,3种形态的硒含量整体都较低,醇溶态、水溶态硒所占比例差异不显著,但均显著大于盐溶态,其余浓度的硒锌配比,硒的化学形态分布与单硒相似,200~400 μg/mL的硒与0.40%~0.80%的锌配合喷施,3种化学形态硒含量提高效应最明显,醇溶态、水溶态硒的比例分别较对照有不同程度的增加,又以200 μg/mL的硒与0.80%的锌配比效果最好。     

NaHSO3对茶树代谢成分的影响

用不同浓度的NaHSO3,喷洒不同品种刚萌芽的生产茶园,生长二十天后,采摘一芽二叶的鲜叶,制成生化样,分析茶多酚类、氨基酸、水浸出物等茶树次生代谢成份含量的变化。结果表明,喷施NaHSO3,能显著提高茶叶内含成份的含量,1mmol／L、2mmol／L处理的效果较明显,其中2mmol／L处理的茶多酚类、氨基酸、水浸出物的含量分别比对照提高5．68％、18．67％、6．91％,不同品种之间以鸠坑种提高幅度较大,差异都较为显著。     

施用冷杉针叶三萜酸对水稻产量和品质的影响

以镇稻8号为材料,研究了不同用量冷杉针叶三萜酸对水稻产量和品质的影响。结果表明,与喷清水对照相比较,施用冷杉针叶三萜酸后能够提高水稻千粒重和产量,并能提高稻米的糙米率、整精米率、直链淀粉含量和蛋白质含量,改善稻米碾磨品质和营养品质。10%冷杉针叶三萜酸水乳液最适施药方法为:播种前拌种剂量80 mL/t、分蘖期和抽穗期喷施剂量80 mL/hm~2,能使水稻增产16.60%。