鸭疫里氏杆菌油乳剂灭活苗的研制

<正>鸭疫里氏杆菌病(又称鸭传染性浆膜炎、鸭疫巴氏杆菌病)是雏鸭一种常见的急性败血性传染病。预防控制该病的方法是药物防治和菌苗接种,我们以本地分离株制备种子液,再将种子液接种鸭胚增殖培养,收获菌液经甲醛灭活后制备成油乳剂灭活菌苗,进行免疫攻毒试验,保护率为75.0%。在部分鸭场使用该菌苗,结果证明安全有效。     

法氏囊三肽囊素(Bursin)的研究 Ⅱ.Bursin在鸡体免疫器官中免疫组织化学的定位

以抗Ｂｕｒｓｉｎ单抗２Ｆ９－４，用免疫组织化学方法，检测Ｂｕｒｓｉｎ在鸡胚胎期及出壳后１～９周龄雏不同免疫器官中的定位分布。结果表明：胚胎期１２日龄囊（上皮芽、上皮）、骨髓呈阳性；１４日龄囊（上皮芽、芽突）、胸腺髓质有阳性细胞；２０日龄胸腺有阳性细胞。新生雏囊单层或假复层上皮ＦＡＥ和ＩＦＳＥ呈阳性、髓质有稀少ＤＲＥＣ阳性、ＣＭＥ弱阳性。出壳１～３周ＤＲＥＣ与哈德氏腺阳性，反应随周龄增加有所增强，胸腺髓质呈阳性，３周脾脏极少数散在阳性细胞。４周ＣＭＥ、ＤＲＥＣ、ＩＦＳＥ与ＴＤＩＡ的基底膜有阳性细胞。６周ＦＡＥ、ＦＡＥＳＣ、ＣＭＥ、ＤＲＥＣ、ＩＦＳＥ与ＴＤＩＡ的基底膜有阳性细胞。８周ＦＡＥ、ＦＡＥＳＣ、ＣＭＥ、ＤＲＥＣ呈阳性。９周ＣＭＥ、ＤＲＥＣ呈阳性。４，６，８，９周Ｈａｓａｌ小体、６，９周骨髓呈阳性；４，６周脾脏散在阳性细胞；４，６，９周哈德氏腺有阳性细胞。     

鸭疫里氏杆菌分离及免疫研究

近二年，上海市及苏、浙一带，鸭的饲养量急剧增加，传染病的发病率明显增多。通过流行病学，I临床症状，病理解剖，涂片、染色镜检，并进行病原分离和鉴定，确诊为鸭疫里氏杆菌病。通过药敏实验，研究了鸭疫里氏杆菌对抗菌素敏感性，本项目采用平板凝集试验和琼脂扩散试验的结果表明，20株纯培养菌株为同一血清型的里氏杆菌(1型)，从分离菌回本动物试验看，鸭疫里氏杆菌对雏鸭致病力较强，皮下注射和刺种鸭掌都感染发病并引起死亡。研制的佐剂疫苗具有粘度低、宜于注射、乳化完全、免疫原性好的优点。     

Ⅰ型鸭疫里氏杆菌油乳剂灭活苗的研制

以Ⅰ型鸭疫里氏杆菌武汉分离株为菌种制成油乳剂灭活疫苗,测得最佳免疫剂量为0.3mL/只;免疫后3d、7d、10d、14d和21d的攻毒保护率分别为80%、90%、90%、100%和100%;平均保护率可达92%,免疫后3d即能在血清中测出特异性抗体,效价逐渐升高,直至免疫后21d。试验表明,该疫苗具有良好的安全性和免疫原性,能有效预防鸭传染性浆膜炎的发生。     

鸡胚增菌研制鸭疫里氏杆菌灭活苗

鸡胚增菌培养鸭疫里氏杆菌有很好效果 ,增菌后的菌液含菌量一般可达 2 70× 10 8～ 3 0 8× 10 8CFU/ml。通过鸡胚增菌法所研制的鸭疫里氏杆菌灭活苗 ,1次免疫保护率平均可达 82 .4% ,2次免疫保护率平均可达 93 .5 % ,能很好地控制鸭传染性浆膜炎的发生     

鸭疫里氏杆菌病的诊断与治疗

鸭是鸭疫里氏杆菌(Rimerella anatipestifer,RA)的主要宿主。本病主要感染1~8周龄的鸭,其中尤以2~3周龄雏鸭最易感,而1周龄内幼鸭和8周龄以上大鸭则少见发病。该病一年四季均可发生,冬季发病率最高,病鸭主要通过粘液、粪便等废物中排出病菌,经消化道、呼吸道和损伤的皮肤等途径传播,已成为危害养鸭业的主要细菌病。自RA发现以来,已经报道的公认的血清型有21个,养殖场同时可发生多种血清型的混合感染,RA各血清型缺少交叉保护,不同血清型对异型强毒没有保护或保护力很低,几乎所有血清型均只对同源抗血清发生特异型反应,这给本病的预防带来极大困难。目前,已研制出弱毒疫苗、灭活疫苗和中药来控制该病。     

鸭疫里氏杆菌病的诊治

一、病原学 鸭疫里氏杆菌为革兰氏阴性小杆菌,不形成芽胞．不运动。纯培养菌落涂片可见菌体呈单个、成对或呈丝状,菌体大小不一．0．2～0．4微米&#215;1～5微米．用瑞特氏法染色时,菌体两端浓染,呈两极染色特性．用印度墨汁染色可见到荚膜。     

鸭疫里氏杆菌-大肠杆菌二联四价苗研究

从浙江省分离鉴定的67株鸭疫里氏杆菌、43株大肠杆菌中,筛选出免疫原性良好的优势血清型RA二株RA-J(Ⅰ型),RA-Y(Ⅱ型),Escherichia coli二株Ed6(O78)、Ed15(O1)作为制苗菌株,采用改进的液体培养工艺,使RA和E.coli含菌量分别稳定在(220~260)×1010cfu/ml和(230~280)×1010cfu/ml,然后加佐剂研制出鸭疫里氏杆菌—大肠杆菌二联四价苗。免疫剂量1 ml,对RA和E.coli的攻毒保护率分别达95.8%和91.7%;疫苗保存1年,经野外扩大试用,效果良好。     

鸭疫里默菌河南株的分离与鉴定

为了研究鸭疫里默菌的生物学特性及其发病机制,从河南地区某鸭场临床症状、剖检病变疑似鸭疫里默菌病例进行细菌分离,从中分离到1株细菌。对分离的病菌进行形态培养、生化试验、动物试验、琼扩试验和血清型鉴定,鉴定为鸭疫里默菌3型。药敏实验表明鸭疫里默菌对头孢噻肟、卡那霉素、环丙沙星等敏感性较高。     

PCR检测鸭疫里默氏菌的研究

对本研究室分离、鉴定并保存的42株鸭疫里默氏菌(包括8个血清型)、9株鸭源大肠杆菌和4株鸭源禽多杀性巴氏杆菌进行PCR扩增,结果所有的鸭疫里默氏菌均能扩增出809bp的特异性DNA片段,而鸭源大肠杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌均为阴性。试验证明以细菌DNA和全菌体分别作模板,对PCR的扩增结果无影响。经过优化的该PCR方法能检测出的最低DNA量为1pg。     

法氏囊活性肽对鸡传染性法氏囊病弱毒疫苗免疫效果的影响

将不同剂量的法氏囊活性肽 (BS)冻干粉与鸡传染性法氏囊病 (IBD)弱毒疫苗混合 ,对 2 1日龄SPF鸡滴鼻点眼 ,另设免疫对照组和生理盐水对照组 ,于免疫后 7d、10d、14d、2 1d、2 8d、45d、6 0d、75d和 90d采血 ,测定AGP抗体效价 ,并于免疫后 7、14、2 1、2 8d ,每组剖杀 2只 ,计算试验组囊指数与空白对照组囊指数之比 (BBIX) ,免疫后 30d用IBD JS株攻毒。结果表明 :免疫后 7d ,0 48mgBS IBD弱毒苗组AGP抗体阳性率为 5 2 9% ,比免疫对照组高 2 5 % ,BBIX数值也稍大 ;免疫后 45d抗体水平达到高峰时 ,0 96mgBS IBD弱毒苗组的抗体效价比免疫对照组高2个滴度 ,BBIX数值也稍大于免疫对照组。 30d后攻毒 ,各免疫组的攻毒保护率均为 10 0 %。整个试验期间 ,1 92mgBS IBD弱毒苗组的AGP抗体效价及BBIX数值与免疫对照组相比差异不显著。结果表明 :BS在增强机体免疫应答、提高对法氏囊的保护及损伤后的修复作用方面与其剂量有一定的关系。     

肉鸭传染性浆膜炎的诊断和防制

郑州市郊某鸭场发生一起临床症状、剖检病变疑似鸭传染性浆膜炎鸭疫里氏杆菌病例,从中分离到1株细菌。对分离的病菌进行分离培养、生化试验和动物试验,鉴定为鸭疫里默氏杆菌。药敏实验表明鸭疫里氏杆菌对头孢噻肟、卡那霉素、环丙沙星等敏感性较高。通过治疗,病情得到了控制。     

鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定

对武汉周边地区的病鸭进行了病理剖检及细菌分离培养,并对分离的菌株进行了生化鉴定,最后确定此病为鸭疫里默氏杆菌(Riemerellaanatipestifer,RA)引起的。感染鸭为2～6周龄,RA易在病死鸭的肝脏、脾脏、血液等处分离到,特别是在脑组织中极易分离。该分离菌株的血清型鉴定结果为Ⅰ型RA,药敏试验结果显示对诺氟沙星高度敏感。     

北京地区鸭传染性浆膜炎的防治

鸭传染性浆膜炎在广大养鸭区域广为流传,成为危害养鸭业的重要传染病之一。其特点是耐药性多变,药物控制效果差,血清型众多,免疫效果参差不齐,各种菌株的致病性亦有差异。综合近年来的研究状况,针对北京地区鸭的特点,对其病原、流行病学、预防和治疗等方面进行探讨。     

鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗的研制

为研制鸭传染性浆膜炎二价灭活疫苗,以鸭疫里默氏菌血清1型 RAf63株和2型 RAf34株为菌种,培养,灭活,浓缩,混合后制成二价灭活疫苗。2倍量接种6 d 樱桃谷鸭测定疫苗的安全性;接种6 d 樱桃谷鸭,免疫后5、10、14、21、35、49、63、70 d,进行攻菌试验,测定疫苗的免疫原性。结果表明,该疫苗安全,免疫后14 d 产生保护,保护率为90％,免疫持续期可达60 d。研制成功可用于预防由血清1型和2型鸭疫里默氏菌引起的鸭传染性浆膜炎。     

鸭疫里默氏菌对氟喹诺酮药物的主动外排作用

为研究鸭疫里默氏菌对诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星等氟喹诺酮类药物的主动外排机制,测定25株鸭疫里默氏菌临床分离株对氟喹诺酮类药物的最低抑菌浓度（M IC ）,同时测定加入主动外排抑制剂碳酰氰间氯苯腙（CCCP）后的MIC ,对二者进行比较分析。结果表明,对5种氟喹诺酮类药物耐药的鸭疫里默氏菌比例分别为84％、72％、76％、68％和36％;76％的菌株同时耐受2种及以上药物。CCCP可以使耐药菌对除左氧氟沙星外药物的敏感性增加,提示主动外排在鸭疫里默氏菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制中发挥重要的作用。     

中药双炎散治疗鸭疫里默氏杆菌病的研究

[目的]为寻求能防治鸭疫里默氏杆菌病的中药,减少抗生素残留奠定基础。[方法]从某养鸭场出现典型病变的病死鸭分离到3株鸭疫里默氏杆菌,探讨中药制剂双炎散对鸭疫里默氏杆菌病的防治效果,并将其与氟甲砜霉素的防治效果进行了比较。[结果]双炎散对鸭疫里默氏杆菌具有显著的治疗和预防作用。对感染里默氏杆菌的雏鸭的有效治疗率为82.5%,与氟甲砜霉素无明显的差异(P>0.05)。双炎散对发病雏鸭的治疗效果与氟甲砜霉素无明显的差异(P>0.05)。双炎散发挥药效的时间较晚,但其治疗效果却稍好于氟甲砜霉素。[结论]双炎散制剂在防治鸭疫里默氏杆菌病中具有广泛的应用前景。