几种水产动物病原菌对壳聚糖碘的敏感性研究

以聚维酮碘为对照,试验了7种水产动物常见病原菌,包括柱状曲桡杆菌、荧光假单胞菌、嗜水气单胞菌、肠型点状气单胞菌、迟钝爱德华菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等对壳聚糖碘的药物敏感性。结果表明：这几种病原菌对壳聚糖碘的MIC为0．3762-0．5029mL／m^3之间,MBC为0．4732～0．839ML／m^3之间。几种病原菌对聚维酮碘的MIC为0．4724～0．5349mL／m^3之间,MBC为0．610-0．900mL／m^3之间。壳聚糖碘的抗菌活性比聚维酮碘强。     

蛋氨酸碘对5种养殖鱼类的急性毒性和抑菌作用

进行了蛋氨酸碘对5种养殖鱼类的急性毒性和抑菌作用的研究,以期为在水产养殖上安全有效地使用蛋氨酸碘防治水生动物疾病和避免鱼类中毒提供科学依据.实验采用静水试验法检测蛋氨酸碘对鲫(Carassius aura-tus)、鲢(Hypophthalmichthys molitrix)、团头鲂(Megalobrama amblycephala)、中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)和草鱼(Ctenopharyngodon idellus)的急性毒性,其48 h半数致死浓度(LC50)分别为11.70、10.50、11.50、12.40、14.60mg/L,安全浓度(SC)分别为1.13、1.03、1.13、1.13、1.38mg/L;采用试管稀释法进行了蛋氨酸碘对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)及荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)3种鱼类常见致病菌的抑菌试验,最低抑菌浓度(MIC)分别为0.01562、0.06250、0.03125μL/mL,最低杀菌浓度(MBC)为0.06250、0.25000、0.06250μL/mL.试验结果表明,蛋氨酸碘具有较好的抑菌和杀菌作用.     

五倍子对三种致病菌的体外抑菌试验和对鲤鱼的急性毒性研究

采用试管两倍稀释法测定五倍子水煎煮液对鱼类三种常见致病菌的最小抑茵浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)，并进行了对鲤鱼的急性毒性试验。结果表明，五倍子煎煮液对温和气单胞茵、爱德华氏茵、柱状屈桡杆菌的最小抑茵浓度分别为6．250mg／ml、3．125mg／ml、0．781mg／ml；最小杀茵浓度分别为12．500mg／ml、12．500mg／ml、3．125mg／ml。五倍子对鲤鱼的48h半致死浓度为1、1015g／kg，安全浓度为0．1102g／kg。五倍子具有较好的杀茵防病效果。     

替米考星对水产致病菌体内外抗菌和对异育银鲫毒性作用

研究替米考星对3种水产致病菌体外抗菌作用,替米考星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophilia)感染异育银鲫的防治效果和替米考星对异育银鲫的急性毒性作用。应用二倍稀释法研究质量浓度为0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128 mg/L的替米考星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hyolrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)和鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并计算MBC/MIC比值。腹腔注射0.3 m L浓度为9×10~8CFU/m L的嗜水气单胞菌菌液感染体质量为(217.65±25.26)g的异育银鲫,分别在感染后1、24和48 h以0、50、100、150 mg/kg鱼体重的剂量分别口灌替米考星,计算替米考星对嗜水气单胞菌感染异育银鲫的保护率。应用剂量为0、260、300、340、387、440 mg/kg的替米考星口灌异育银鲫,记录异育银鲫的死亡率,计算替米考星对异育银鲫的半数致死量LD_(50)。结果表明,替米考星对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和鳗弧菌的MIC分别为4.00、0.50和1.00mg/L,MBC分别为64、32和32 mg/L,MBC/MIC比值分别为16、64和32;100和150 mg/kg鱼体重剂量的替米考星对嗜水气单胞菌人工感染异育银鲫的保护率可达100%;替米考星对异育银鲫口灌的24、48、72和96 h的半数致死剂量LD_(50)分别为344.0、306.3、298.5和298.5 mg/kg。替米考星对3种水产致病菌具有一定的体外抗菌效果;替米考星对嗜水气单胞菌感染的异育银鲫具有一定的保护作用;但同时替米考星对异育银鲫也具有中等毒性。本研究可为替米考星在水产养殖中的合理使用提供参考。     

12种中药有效成分对3株水产致病菌体外抑菌试验

选择12种有抑菌作用的中药的有效成分,采用平板挖洞法对3种水产常见致病菌作药物敏感试验,然后采用二倍稀释法测定12种中药有效成分对3种致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：12种中药有效成分对3株细菌都有不同程度的抑制作用,其中没食子酸、槲皮素、黄岑苷、大黄酸、盐酸小檗碱、大黄素甲醚对温和气单胞菌抑制效果最好, 没食子酸、槲皮素对温和气单胞菌MIC,MBC最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml;大黄素甲醚、没食子酸、甘草酸、槲皮素对嗜水气单胞菌抑制效果最好, 大黄素甲醚、没食子酸、甘草酸对嗜水气单胞菌MIC,MBC最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml;大黄素甲醚、甘草酸、没食子酸、盐酸小檗碱对变形杆菌抑制效果为最好,没食子酸,大黄素甲醚、甘草酸对变形杆菌MIC,MBC均最小,MIC为0.03125 mg/ml,MBC为0.0625 mg/ml。     

黄颡鱼源温和气单胞菌的分离鉴定及中草药体外抑菌效果研究

为探明遵义金鼎镇合江源养殖场患病黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)的致病原因,通过对患有腹水、鳍条充血和游动缓慢等症状的黄颡鱼进行了病原菌分离纯化,得到纯培养菌株MLT-1,经过回归感染证实其为黄颡鱼的致病菌,经生理生化和16S rDNA鉴定为温和气单胞菌(Aeromonas sobria)。同时采用乙醇提取法获得30种中草药醇提物,固体培养基打孔测试中药醇提物对MLT-1的抑菌作用,结果显示：诃子、大黄、烟叶、樟叶、桑白皮5种中草药对MLT-1的抑菌效果较好,诃子和大黄的最小抑菌浓度(MIC)及最小杀菌浓度(MBC)均为0.49 mg/mL,烟叶的MIC和MBC均为0.98 mg/mL,樟叶和桑白皮抑杀温和气单胞菌效果相同,MIC和MBC分别为0.195 mg/mL和3.91 mg/mL。结果表明诃子、大黄、烟叶、樟叶、桑白皮5种中草药可用于防治黄颡鱼温和气单胞菌细菌病。     

中华绒螯蟹的致病菌及抗菌药物的筛选

对河蟹育苗场各期蚤状幼体(Z1～Z5)、大眼幼体至Ⅴ期幼蟹进行了病原菌的分离采样。采用"细菌生化鉴定编码"对育苗期的中华绒螯蟹的致病菌进行鉴定,主要为溶藻弧菌(V.alginolyticus)、霍乱弧菌(V.cholerae)、荧光假单胞菌(P.fluorescens)、豚鼠气单胞菌(A.caviae)和梅氏弧菌(V.metschnikovii)。采用扩散法(K-B法)对上述菌株进行了药物敏感性试验,结果表明:上述各菌株对庆大霉素、氟哌酸、头孢哌酮、丙氟哌酸、氟嗪酸、复方新诺明、环丙沙星具有较高的敏感性,抑菌直径>16mm。同时选择氟哌酸和环丙沙星对荧光假单胞菌、溶藻弧菌进行了最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC)的测定。氟哌酸对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MIC分别为25μg/mL和0.78μg/mL;环丙沙星对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MIC分别为6.25μg/mL和0.025μg/mL。氟哌酸对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MBC均为6.25μg/mL;环丙沙星对荧光假单胞菌和溶藻弧菌的MBC分别为50μg/mL和0.1μg/mL。     

喜旱莲子草粗提物对三种鱼类病原菌抑菌效果研究

用乙醇提取法获得喜旱莲子草的粗提物 ,并分别用嗜水气单胞菌、点状气单胞菌和温和气单胞菌进行体外抑菌实验。实验结果表明 :喜旱莲子草的粗提物具有较高的抗菌作用。嗜水气单胞菌对喜旱莲子草的粗提物最敏感 ,最小抑菌浓度 (MIC)为 133 3μL/mL。     

植物源杀菌剂对水产养殖常见病原菌的抑菌作用研究

植物源杀菌剂因其成分复杂、无污染、属性天然等特点,为水产养殖防治病原菌提供了新思路。本文以虎杖、千里光、黄柏、黄岑、苦参等为原材料,研制开发植物源杀菌剂,研究结果表明其对12种水产养殖常见病原菌均有较好的抑菌效果,对大肠杆菌、荧光假单胞菌的的最低抑菌浓度（MIC）为33μL／L,对金黄色葡萄球菌、痢疾志贺氏菌、温和气单胞菌的MIC为25μL／L,对肠炎沙门氏菌、单增李斯特氏菌的MIC为50μL／L,对拟态弧菌的MIC为100μL／L,对溶藻弧菌的MIC为250μL／L,对弗尼斯弧菌、副溶血弧菌的MIC为500μL／L,对创伤弧菌的MIC为1000μL／L。     

鱼病防治实用技术（连载）

（１４）消毒剂１）种类：消毒剂的种类很多，水产上常用的有：含氯消毒剂、含碘消毒剂（如碘伏）、季铵盐类消毒剂（如新洁尔灭、氯苄烷铵）、醛类消毒剂（如福尔马林）、醇类（苯氧乙醇）及其它消毒剂（如食盐、高锰酸钾、染料、喹啉）等。其中甲醛为高水平消毒剂，含氯...     

草鱼联合疫苗对草鱼苗的毒性检测实验

草鱼联合疫苗是由荧光假单胞茵、肠型点状产气单胞茵、鱼害粘球三种茵联合配制成的三联苗。采用常温静水实验法，用此疫苗对草鱼水花进行毒性检验。结果表明：联合疫苗对草鱼水花的24h、48h、96h的半致死浓度分别为1375g／m^3,354g／m^3、109．375g／m^3,安全浓度为109．375g／m^3。     

五倍子对3种致病菌的体外抑菌和急性毒性试验

采用试管两倍稀释法测定五倍子水煎煮液对3种鱼类常见致病菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）,并进行了对鲤鱼的急性毒性试验.结果表明,五倍子煎煮液对温和气单胞菌、爱德华氏菌、柱状屈挠杆菌的最小抑菌浓度分别为6.250 mg/mL、3.125 mg/mL、0.781 mg/mL;最小杀菌浓度分别为12.500mg/mL、12.50.mg/mL、3.125 mg/mL.五倍子对鲤鱼的48 h半致死浓度为1.1015g/kg,安全浓度为0.1102g/kg.五倍子具有较好的杀菌防病效果.     

恩诺沙星控制草鱼维氏气单胞菌的用药方案

从四川成都一养殖场大规模发病死亡的草鱼(Ctenopharyngodon idella)病灶处分离一株病原菌CiAV01,结合形态学和16S rDNA序列分析,鉴定该菌为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。回归感染实验结果表明,分离菌株感染草鱼致死率为100%,出现了局部出血、腹腔积水等症状。采用琼脂平板扩散法研究了16种抗生素对分离菌株CiAV01的体外抑菌作用,在供试的抗生素中,恩诺沙星对该分离菌株CiAV01最为敏感。选择恩诺沙星对分离菌株进行体外药效学研究表明,恩诺沙星对分离菌株CiAV01的最小抑菌浓度(MIC)为0.25μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为0.50μg/mL,MBC/MIC为2。结合其药物动力学参数和MIC、MBC、防突变浓度(MPC)、突变选择窗(MSW)和抗菌后效应(PAE)制定防突变给药方案为:剂量20 mg/kg、每日一次给药、连续给药3～5 d。     

抗水产病原非O1/O139霍乱弧菌的中草药筛选及抑菌效果分析

为筛选能有效抑制水产病原非O1/O139霍乱弧菌（non-O1/O139 Vibrio cholerae）生长的中草药，本研究通过水煎法获得黄柏、五倍子等23味中草药的提取物，采用琼脂打孔法测定其对非O1/O139霍乱弧菌的抑制作用，并用试管二倍稀释法测定了抑制效果较强的8种中草药对非O1/O139霍乱弧菌的最小抑菌浓度（Minimum Inhibitory Concentration,MIC）和最小杀菌浓度（Minimum Bactericidal Concentration,MBC）。结果表明：五倍子、白芍、黄柏、诃子、山楂、石榴皮、地榆、木瓜等8种草药对非O1/O139霍乱弧菌具有较强的抑制作用，其中非O1/O139霍乱弧菌对五倍子、白芍和黄柏高度敏感，其抑菌圈直径分别为（19.92±1.24）mm、（19.50±0.74）mm和（18.92±2.12）mm。五倍子抑菌和杀菌作用最强，MIC和MBC均为7.81 mg/mL，其次是白芍，MIC为15.63 mg/mL,MBC为31.25 mg/mL。本研究为中草药防治由非O1/O139霍乱弧菌引起的水产动物疾病提供了理论参考。     

新型高效络合碘对鲤(Cyprinus carpio Linnaeus)、南美白对虾(Litopenaeus vannamei Boon)的急性毒性和抑菌效果试验

采用常温静水试验,探讨了高效络合碘对鲤鱼、南美白对虾的急性毒性效应;同时进行了高效络合碘对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的抑菌试验.结果表明:高效络合碘对鲤鱼、南美白对虾的24 h、48 h、96 h半致死浓度(LC<,50>)分别为52.99 mg/L、47.07 mg/L、38.87 mg/L和88.20 mg/L、62.48 mg/L、47.04 mg/L,安全浓度分别为3.89 mg/L和4.70 mg/L.22℃,1%高效络合碘对嗜水气单胞菌的最低杀菌体积分数为2.5×10<'4>,杀菌率达100%.实验表明,新研制的高效络合碘与其它碘制剂相比具有高效、低毒、杀菌抑菌的效果,值得大规模的推广.     

快速测定海藻中碘含量样品前处理方法研究

海带及海藻中含有大量的碘，其中碘的测定，目前主要以溴水氧化法为主，样品前处理是制约测定效率的主要因素。本文以海带为研究对象，对测定中样品前处理的方法进行了研究，简化了操作步骤，缩短检测时间3h以上，大大提高了检测效率。经试验验证，测定精密度(RSD)小于2％，与经典方法比较，相对偏差≤1．5％。方法具有简单、快速、准确、适用的特点。     

大鲵温和气单胞菌的药物敏感性试验

为研究从患病大鲵内脏组织中分离出的温和气单胞菌对药物的敏感性,采用奈替米星等20种西药和五倍子等22味单方中草药及由单方组合而成的57味复方药进行了体外抑菌试验。结果表明:该菌对奈替米星等16种西药敏感,其抑菌圈直径为21.50~36.75 mm;对五倍子等11味中草药高度敏感,抑菌圈直径为20.20~37.25 mm;其中,抑菌效果位居前6位的五倍子、苦地丁、乌梅、五味子、诃子、黄芩等6味单方中草药(1 g/m L)的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.98、7.81、7.81、7.81、15.63、15.63 mg/m L,最小杀菌浓度(MBC)分别为1.95、15.63、15.63、15.63、31.25、31.25 mg/m L;对由该6味单方中草药按相同质量分数组成的54种复方药高度敏感,其中敏感性较强的复方1(五倍子、苦地丁、五味子、诃子、黄芩)、复方2(五倍子、苦地丁)、复方3(五倍子、苦地丁、黄芩)和复方4(五倍子、诃子、黄芩)的MIC分别为0.24、0.49、1.95、1.95 mg/m L,MBC分别为0.49、0.98、3.91、3.91 mg/m L。     

百宜杀药敏及最低抑菌浓度试验

百宜杀（Benesept）,化学名：聚烯烃基卡巴嘧啶（单胍类）,为阳离子型表面活性剂,对环境及水体中的多种细菌、真菌、病毒具有较强的杀灭作用,且该药无毒、无刺激、无腐蚀性、可自然降解,药效持久。本试验以药物检测标准质控菌株和药敏检验标准质控菌株为质控参照,以致病性嗜水气单胞菌、河弧菌和柱状黄杆菌G_4为试验菌株,采用纸片扩散法进行药物敏感性试验并与同等条件下的戊二醛、聚维酮碘、新洁尔灭对照;采用倍比稀释法进行最低抑菌浓度（MIC）试验,探索该药对水产致病菌的抑杀效果,以期早日推向水产病害防治领域。     

常用渔药对黑脊倒刺(鱼巴)的急性毒性试验

在室内常温、静水条件下，对黑脊倒刺鲃的急性毒性试验表明，8种药物的毒性大小依次为：硫酸铜＞天使蓝＞菌敌＞高锰酸钾＞百虫杀＞甲醛＞土霉素＞氯化钠，安全浓度分别是：0．02、0．051、0．72、2．53、8．54、16．2、41．3、3012mg／L。试验鱼在敌百虫(50mg／L)、聚维酮碘(60rag／L)中96h全部成活。     

31种中草药及其复方对维氏气单胞菌体外抑菌研究

为筛选对昆明裂腹鱼源维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)有抑菌作用的中草药及复方,本研究通过煎煮法制备31种常见中草药水提取物,以牛津杯法测定各味中草药对该菌的抑菌圈直径,采用二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);选取体外抗菌活性较好的6种中草药,应用棋盘法进行15组二联药方的部分抑菌浓度指数(FIC)试验;按正交设计表配伍25组复方,同样进行药敏试验。结果显示,31种中草药中,五倍子、地榆、诃子、苏木、黄芩、黄连等6种中草药抑菌效果最好;15组联用药方均未发生拮抗作用,其中以五倍子+地榆、诃子+黄芩联用效果最好,FIC分别为0.31、0.50,表现为协同作用;综合复方中草药的抑菌作用,复方F16(五倍子∶地榆∶诃子∶苏木∶黄芩∶黄连=4∶4∶2∶5∶3∶1)的抑菌效果最佳,抑菌圈直径达23.2 mm, MIC与MBC分别为0.98 mg/mL、1.95 mg/mL,可作为昆明裂腹鱼源维氏气单胞菌抑菌药物的首选配伍组合。