疣粒野生稻原生质体再生小植株

 以我国特有的疣粒野生稻成熟胚和幼穗作外植体诱导愈伤组织 ,挑选致密颗粒状愈伤组织建立胚性细胞悬浮系并分离原生质体 ,将原生质体固体包埋后添加液体培养基进行培养。在培养过程中调节培养体系渗透压诱导产生胚状体 ,成功得到疣粒野生稻的原生质体再生植株 ,对提高原生质体再生频率的途径进行了探讨。     

橡胶树热研8-79原生质体培养再生植株

[目的]优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础.[方法]以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率.[结果]酶组合为纤维素酶1.50%+果胶酶0.15%+离析酶0.50%、酶解时间为12h时,继代培养第5d的胚性悬浮细胞达最高产量(3.6 ×107个/mL PCV);用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%.原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株.[结论]通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系.     

橡胶树热研8—79原生质体培养再生植株

【目的】优化橡胶树热研8-79原生质体分离和培养条件,建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系,为橡胶树体细胞杂交育种奠定基础。【方法】以橡胶树热研8-79花药愈伤组织建立的胚性细胞悬浮系为试验材料,设计不同酶组合、酶解时间和悬浮细胞继代时间进行原生质体分离,采用不同培养基、看护细胞浓度和接种密度进行原生质体培养,对原生质体分裂发育的小愈伤组织进行体细胞胚诱导及植株再生培养,统计原生质体的产量、分裂频率、体胚数及体胚萌发率。【结果】酶组合为纤维素酶1.50%＋果胶酶0.15%＋离析酶0.50%、酶解时间为12 h时,继代培养第5 d的胚性悬浮细胞达最高产量（3.6 ×107个/mL PCV）;用酶解细胞和看护细胞继代培养基分别作为原生质体液体培养基和看护培养基,比使用KPR培养基更有利于原生质体的分裂,当看护细胞浓度为5%、接种密度为5 ×105个/mL时原生质体的分裂频率最高,达54%。原生质体持续分裂形成肉眼可见的小愈伤组织增殖后经体胚发生途径发育成完整的小植株。【结论】通过优化橡胶树热研8-79胚性悬浮细胞原生质体分离的酶组合、酶解时间、继代培养时间及看护培养过程中培养基组成、看护细胞浓度和接种密度等影响因素,可以建立橡胶树原生质体培养植株高效再生体系。     

国庆1号温州蜜柑原生质体培养再生植株

通过对国庆1号温州蜜柑Guoqing No．1(citrus wnshiu)原生质体培养获得的愈伤组织，经体细胞胚发生途径再生植株的研究。结果表明，两步法建立的国庆1号胚性愈伤组织悬浮系，分离的原生质体产量高、活力强，在MA培养基上培养20d时，可获得颗粒性强，具有体细胞胚发生能力的细胞团。这些细胞团在甘油(MT 质量分数2％甘油)培养基上可以获得最好的胚状体诱导效果。但诱导出的小胚状体不能进一步发育，需及时转入液体乳糖(MT 质量分数5％乳糖)培养基上振荡培养20～30d。然后将长至1.0～2.0cm的胚状体转入固体乳糖培养基上，可促使其进一步发育成墨绿色的正常胚状体，最终在生芽培养基上诱导其再生植株。     

软化菊苣高效原生质体培养及植株再生

为了进行体细胞杂交和基因工程改造的尝试,采用10mL酶解液处理12h,1g鲜重叶片游离出4.5~5.9×106个原生质体,生活率达78%~85%。原生质体分别用3种培养基进行培养,以软化菊苣种子无菌苗的叶片为起始材料进行了叶肉原生质体分离、培养和植株分化的研究,并建立高频率的植株再生系统。结果表明:最适合培养基为改良KMP,原生质体的分裂率和植板率分别达到48.0%和27.5%。同时对原生质体培养的时间长度与愈伤组织的胚胎发生能力及植株分化频率进行了试验比较,培养时间28~41d为最佳时间,愈伤组织的胚性(81.2%)和分化率(70.9%)最高;培养时间42~55d,胚性愈伤及植株分化的比例分别为55.0%和45.2%;培养时间56~69d,愈伤组织的胚性(22.5%)和分化率(16.5%)较差。原生质体再生植株在不含激素的1/2MS培养基上,部分植株直接生根,未生根植株转至1/2MS+IBA 0.3mg·L~(-1)+0.1%活性碳可以生根。     

以多胚品种“红江橙”为母本的杂交及幼胚离体培养研究

为获得以多胚优良品种为母本的杂种后代及以四倍体为亲本进行三倍体培育,本文以"红江橙"为母本,分别与沙田柚和柠檬(4x)进行了杂交,并对未成熟幼胚进行了离体培养。结果表明:两个杂交组合的适宜培养时期不同,红江橙×沙田柚幼胚适宜离体培养时期为授粉后80 d,红江橙×柠檬(4x)幼胚适宜离体培养时期为授粉后85 d。而两组合的幼胚适宜培养基为MS+GA31.0 mg.L-1+6-BA 0.4 mg.L-1+7%蔗糖。通过幼胚离体培养两杂交组合共获得植株277株。     

4种基因型烟草叶肉原生质体培养的研究

以K326、云85、红大、G-28等普通烟草品种的叶片为起始材料进行原生质体培养的研究。结果表明,基因型对烟草叶肉原生质体的培养有明显影响作用,并对影响烟草叶肉原生质体的分离、培养和再生植株等环节的其它相关因素进行了研究和探索。     

新疆长绒棉胚性悬浮细胞原生质体的培养及再生

在进行新疆长绒棉胚性细胞原生质体培养期间，比较酶液中不同甘露醇浓度，悬浮细胞不同继代时间及不同培养方法，不同包埋培养基，不同滴加液对原生质体培养的影响。发现琼脂糖珠包埋培养最适宜其培养，获得了原生质体的再生，植板率为２９．８４％（以第八天计），进一步培养，获得再生愈伤组织，愈伤是胚性愈伤。     

小麦单细胞培养与植株再生的研究

小麦单细胞培养研究于１９８５￣１９９５年进行，以六倍体普通小麦８４－５３的幼穗为外植体，在诱导胚性愈伤组织基础上，经振荡悬浮培养获得单细胞再生植株，建立体细胞无性系，并系统研究再生植株后代体细胞无性系的变异规律和遗传稳定性，体细胞无性系有利变异的选择及其在小麦品种改良中应用的可能性，本文报道有关单细胞培养和再生植株的研究结果。     

小麦（Triticum aestivum．L）单细胞培养与植株再生的研究

小麦单细胞培养研究于１９８５～１９９５年进行，以六倍体普通小麦８４—５３的幼穗为外植体．在诱导胚性愈伤组织基础上．经振荡悬浮培养获得单细胞再生植株，建立体细胞无性系，并系统研究再生植株后代体细胞无性系的变异规律和遗传稳定性、体细胞无性系有利变异的选择及其在小麦品种改良中应用的可能性．本文报道有关单细胞培养和再生植株的研究结果．     

西葫芦未受精胚珠离体培养条件的优化及胚囊植株的产生

 【目的】建立西葫芦离体雌核发育高频植株再生体系，以加速自交系选育，有效缩短西葫芦杂种一代育种周期。【方法】将西葫芦未受精胚珠接种至附加2，4-D、NAA、BA的N6培养基上可形成胚状体，该胚状体转接至无激素的N6培养基上可形成再生植株。【结果】试验共获得120棵再生植株（R0），其中41株因生活力低下死亡，8株用于摸索移栽方法死亡，71株移栽成活且生长正常，其中42株性状表现符合二倍体特征且育性正常，已有10株获得自交果实及种子，其余29株育性异常。试验结果表明，胚珠发育时期、培养基、供体基因型及供体栽培季节等均显著影响胚状体诱导频率。【结论】胚状体起源于胚囊成员细胞，再生植株为胚囊植株。试验筛选出3种诱导频率较高的培养基；以开花前1日及当日的胚珠诱导频率较高；秋播材料诱导效果最好。     

木薯脆性胚性愈伤组织原生质体培养与植株再生

【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444 的脆性胚性愈伤组织（FEC）的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol•L-1 TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol•L-1 TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1-2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结果】在5×105个/mL的原生质体培养密度下,长出的都是致密型愈伤组织（能分化胚状体）,而在2×105个/mL的密度下培养长出的有致密型愈伤组织,也有空泡型愈伤组织（不能分化胚状体）。本试验共挑出1 479个致密细胞团,分化获得757个子叶胚,已再生完整植株186棵。【结论】本研究分离的原生质体产量和活性有较大提高,对前人所指出的瓶颈问题有所改进,原生质体再生植株效率有较大提高。     

葫芦科作物未受精子房和胚珠离体培养研究进展

综述了影响葫芦科作物未受精子房和胚珠离体培养的因素,总结了培养获得植株的倍性鉴定和再生二倍体植株的纯合性鉴定方法,同时对单倍体植株的加倍方法进行简要概述,并提出葫芦科作物未受精子房和胚珠离体培养中存在的问题,为下步工作研究提供参考。     

马铃薯原生质体培养体系改良

试验以马铃薯试管苗叶片为原生质体来源，通过研究材料预处理方法对原生质体产量和质量的影响，培养方式及培养基中糖醇与细胞分裂的愈伤组织形成的关系，优化并建立了高效稳定的原生质体培养体系，获得了2个双单倍体系的叶肉原生质体再生植株。     

玉米幼胚体细胞无性系植株再生及其移栽技术的研究

以生产中广泛应用和具有利用前途的 CEE尖端齐等19个玉米自交系为供试材料,进行幼胚培养,通过愈伤组织的诱导,继代,分化和植株再生等阶段,已获得再生植株及其后代种子,对再生植株及其后代进行了观察,本项研究对影响玉米幼胚愈伤组织的诱导,分化,继代、植株再生及其移栽和正常化生长的因素进行了分析,其中CEE自交系胚性愈伤组织已继代14个月以上,仍能保持其胚性和分化能力,为利用体细胞无性系进行抗性变异体筛选的研究,建立了一个有效的再生系统。     

玉米不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生的研究

以玉米自交系18红和18白为材料，取其幼胚、茎尖、成熟胚和下胚轴为外植体，对愈伤组织的诱导和植株再生进行了研究。结果表明：上述4种外植体均可诱导出愈伤，但仅从幼胚和茎尖诱导出胚性愈伤组织．转入分化培养基后获得了再生植株，而成熟胚和下胚轴不能获得再生植株。     

水稻愈伤组织生活力和寿命的研究（Ⅰ报）

水稻单细胞无性系的培养体系已经建立起来,并开始进行人工种子的研究,利用水稻原生质体也业已再生出植株。由水稻单细肥或原生质体培养诱导成植株,其中最主要的途径是经过由愈伤组织的悬浮振荡培养,游离出单细胞或由愈伤组织由用酶解离出原生质体。在这一过程中,所获得的单细胞必须是具有较强生活力和分化能力的胚性细胞。所以,愈伤组织的生活力和寿命是单细胞或原生质体培养的重要基础。关于水稻愈伤组织的生活力和寿命,国内外研究的不多。我们沈阳农业大学农学系     

苹果新品种原生质体培养

对苹果新品种“皇家嘎拉”、“新乔纳金”和“短枝富士”原生质体培养方法进行了研究，由胚珠愈伤组织建立悬浮细胞系分离原生质体，并通过ＬＭＰ包埋培养的原生质体可形成伤组织。     

枇杷原生质体培养再生植株（简报）

枇杷原生质体培养再生植株（简报）林顺权，陈振光（福建农业大学园艺系，福州３５０００２）关键词普通枇杷；原生质体；再生植株中国分类号５６６７．３以普通批把（Ｅｒｉｏｂｏｔｐｅ声ｐｏｎｉｃａＬｉｎｄｌ．）的球形胚、鱼雷形胚和子叶形胚作为胚培养接种材料诱导...     

植物原生质体研究概况

植物原生质体分离、培养及植株再生技术是进行植物育种、基因工程、遗传理论及细胞生理生化特性研究的平台,具有重要的研究意义。该研究对影响原生质体分离和培养的重要因素包括酶、酶解时间、渗透压稳定剂和培养方法等进行了综述,同时提出植物原生质体再生植株遗传性状稳定性、变异规律等问题,为今后植物原生质体分离和培养研究提供借鉴。