球形芽孢杆菌(Ts—1)在水体中消长动态以及对蚊幼虫的残效

本实验观察了球形芽孢杆菌(Ts—1)在清水和污水中细菌和芽孢数量消长动态和残效。在水体中,细菌和芽孢均以指数函数衰减。污水对Ts—1生长存活无害,但对致倦库蚊幼虫残效期较清水中为短。水体中死亡虫体对保持球形芽孢杆菌的残效有重要作用。     

球形芽孢杆菌1593株的发酵条件

发酵条件对1593菌株杀虫活性影响试验的结果表明:氮源起重要作用,以植物性花生蛋白为最高;碳源影响不明显。氰钴胺虽能刺激生长,但不能提高杀虫活性。Mg~(++)有促进作用,Cu~(++)有抑制作用。以pH6—9,温度24—28℃,培养24小时,最为适宜。     

球形芽胞杆菌Cry48Aa/Cry49Aa毒素在苏云金芽胞杆菌中的共表达及杀蚊活性

球形芽胞杆菌Cry48Aa/Cry49Aa复合杀蚊毒素对库蚊有高毒力,并能杀死二元毒素BinA/BinB抗性蚊虫,是一种比较有潜力的新型杀蚊毒素蛋白,但Cry48Aa在野生菌株中表达量较低限制了该毒素的开发与应用。本文将cry48Aa基因启动子置换,并将cry48Aa和cry49Aa在苏云金芽胞杆菌中进行共表达。SDS-PAGE检测重组蛋白表达,可见120 kD左右的Cry48Aa蛋白带和53 kD的Cry49Aa蛋白带,cry48Aa在自身启动子下表达量偏低,在置换强启动子Pcry1Aa后表达量明显提高,但Cry48Aa仍低于Cry49Aa的表达量。重组菌株BMB171-pBU-cry48Aa-cry49Aa和BMB171-pBU-Pcry1Aa-cry48Aa-cry49Aa产生典型的双锥型和方形2种晶体。两菌株发酵液对实验室饲养的二元毒素敏感(CqSL)和抗性致倦库蚊(CqRL/C3-41)品系4龄幼虫都表现出高毒力,LC₅₀分别为3.05和3.45以及0.65和0.82 μL/mL。     

球形芽孢杆菌TS—1野外水体灭蚊幼试验

利用球形芽孢杆菌TS—1水悬剂在野外水体连续8年灭蚊幼虫。试验表明:使用1—15ppm浓度,每毫升含菌量10~3—10~4,24小时后,防治淡色库蚊幼虫效果90％以上;对凶小库蚊幼虫可达48—94％。使用浓度在10ppm以内时,有效期5～7天,残效与投药浓度成正比。多次坑沟水体7280m~3试验,TS—1灭蚊效果好,对水生生物无不良影响,     

灭蚊幼球形芽孢杆菌漂浮颗粒剂研制与应用

根据蚊虫的生活习性和球形芽孢杆菌BS-10灭蚊特点,以玉米棒芯颗粒为载体、以球型芽胞杆菌BS-10为杀虫活性物质,加工制成生物灭蚊漂浮颗粒剂新剂型,经试验与示范应用,该颗粒剂具有高效,毒力效价达106.5 IU／mg,每平方米水面使用颗粒剂2 g,对蚊幼虫(孑孓)杀灭效果达95%以上;持效期长,药后12 d,灭蚊效果达96.8%;性质稳定,室内常温储存1 a,药效无变化;生产工艺简单,药剂使用方便,与环境相容性好。     

球形芽孢杆菌Ts—1对十种蚊幼虫毒效测定

用球形芽孢杆菌Ts—1冻干菌粉,对国内10种蚊幼虫生物测定的结果表明,不同蚊种之间敏感性有很大差异。库蚊属蚊虫(特别是淡色库蚊和致倦库蚊)对Ts—1敏感性很高,按蚊其次,而伊蚊属除东乡伊蚊外对Ts—1均不敏感。此外,同一蚊种不同地理株之间,对Ts一1的敏感性也有显著差异。     

球形芽孢杆菌C3-41和2362菌株的发酵特性和毒力比较

球形芽孢杆菌Ｃ３－４１和２３６２菌株的发酵特性和毒力比较①袁志明刘娥英蔡全信张用梅（中国科学院武汉病毒研究所,武汉４３００７１）ＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＳＯＦＴＨＥＦＥＲＭＥＮＴＡＴＩＯＮＰＲＯＰＥＲＴＹＡＮＤＴＯＸＩＣＩＴＹＯＦＢＡＣＩＬＬＵＳＳＰＨＡ...     

高效微生物杀虫剂对蚊虫的杀灭作用

新疆阿勒泰北屯地区位于额尔齐斯河下游,夏季蚊虫泛滥,严重威胁当地人民的身体健康.本研究跟踪调查了各种水体的幼蚊滋生情况,确定了幼蚊发生的2个高峰期分别出现在5月下旬至6月上旬及6月下旬至7月上旬,同时确定了洪水型积水、排碱渠积水和漫灌林带积水是幼蚊高发的孳生地类型.采集并对蚊虫样品进行形态学鉴定,确定了该地区的优势蚊种为刺扰伊蚊Aedes vexans.用苏云金芽胞杆菌以色列亚种Bacillus thuringiensis subsp.israelensis(Bti)水剂对该蚊种进行了室内生测,其LC50和LC90分别为0.055和0.198 mg/L.分别选取3种高发孳生地的3处积水进行野外试验,发现48 h后该药剂对幼蚊的杀灭率均在96％以上,对大面积孳生地也有很好的杀灭作用.监测显示成蚊出现的高峰时间是每年的6月上旬至6月中旬及7月中旬至7月下旬.连续施药3年后,2013年的成蚊数量相比2011年时下降幅度超过50％.本研究对于北屯地区蚊虫的进一步控制以及Bti制剂在新疆的推广有重要的意义.     

Foliar Persistence and Residual Activity of Tebufenozide Against Spruce Budworm Larvae

A field study was conducted to investigate the persistence of tebufenozide in white spruce foliage. An aqueous suspension concentrate formulation, RH-5992 2F, was sprayed over single trees at three dosage rates, 35, 70 and 140 g of the active ingredient (AI), in 2·0 litre ha⁻¹, using ground application equipment. Foliage was collected at different intervals of time up to 64 days after treatment and tebufenozide residues were measured by high-performance liquid chromatography. Foliage was also fed to laboratory-reared 4th- and 6th-instar spruce budworm (Choristoneura fumiferana Clemens). The data indicated that tebufenozide residues in foliage declined with time according to first-order kinetics. The average rate-constant and half-life of disappearance (DT₅₀) were 0·0340 and 20·45 days, respectively. Larval mortality declined gradually, corresponding to the residues, but was still appreciable (49 to 70%) when the larvae were fed with foliage collected 64 days after treatment. The amount of foliage consumed by the larvae decreased when foliar residues of tebufenozide increased, thus indicating anti-feedant activity of the chemical. The LD₅₀ values for both instars were similar and averagedc.25 ng per insect, but the LD₉₀ values were significantly lower for 4th-instar than for 6th-instar, at 63·6 and 96·1 ng per insect respectively. This implies that, theoretically, at a foliar concentration of 1·0 μg tebufenozide g⁻¹ foliage (fresh wt), the spruce budworm larva needs to consume 65 to 100 mg of foliage in 10 days to cause mortality in about 90% of a population of the insect.     

苏云金芽胞杆菌JQD117菌株对韭蛆体内几种酶活性的影响

为明确苏云金芽胞杆菌JQD117对韭蛆幼虫蛋白酶和解毒酶活性的影响,测定比较了感染Bt后幼虫体内胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、乙酰胆碱酯酶、谷胱甘肽-S-转移酶和羧酸酯酶的活性。首先采用室内生物活性测定方法明确了菌株JQD117对韭蛆3龄幼虫72 h的LC₅₀为2.8070×10⁷cfu/mL,然后采用10×LC₅₀、1×LC₅₀和0.1×LC₅₀三个浓度饲喂感染韭蛆幼虫,定期取样测定韭蛆体内5种酶活性,结果表明以较高浓度（1×LC₅₀和10×LC₅₀）感染韭蛆幼虫后体内蛋白酶和解毒酶活性变化较大,而以低浓度（0.1×LC₅₀）感染韭蛆幼虫后体内蛋白酶活性变化较小。其中,以1×LC₅₀和10×LC₅₀浓度感染韭蛆幼虫后,胰蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性在24~36 h和6~60 h与对照相比均显著升高;类胰凝乳蛋白酶和羧酸酯酶活性在6~60 h与对照相比均受到显著抑制。以0.1×LC₅₀浓度感染韭蛆幼虫后,胰蛋白酶活性只在36 h时与对照相比显著升高;乙酰胆碱酯酶活性在12~48 h时与对照相比显著升高;羧酸酯酶活性只在6 h与对照相比受到显著抑制;类胰凝乳蛋白酶活性与对照相比均无显著变化。谷胱甘肽-S-转移酶活性在三种感染浓度下与对照相比均无显著变化。可见,感染JQD117对韭蛆体内蛋白酶和解毒酶活性均产生了不同程度的影响,且随感染浓度的升高而增强,扰乱了韭蛆正常的生理代谢和对外源毒素的分解,本文为Bt防治韭蛆应用和开发提供了理论指导。     

荧光增白剂对苏云金芽孢杆菌毒力的增效作用及其缈外防护功效

测试了3种荧光增白剂Tinopal LPW,VBL和JD－3对苏云金杆菌杀虫剂杀棉铃虫初孵幼虫毒力的影响，并检测了荧光增白剂VBL作为佐剂在Bt受紫外线照射的兴保护功效。结果表明，这3种二苯乙烯类光增白剂以10g/kg与Bt复配后的LC50值与不加荧光增白剂的Bt的LC50值相比，其增效比值分别为：1．23、1．49和2．00。说明这3种荧光增白剂对Bt杀铃虫的活性有不同程度的增效作用。而且复混剂（10g/kg荧光增白剂VBL＋Bt）在紫外线处理8h后，其杀虫活性仍保持70％以上，说明了荧光增白剂VBL是Bt一种好的光保护剂，能提高Bt抗紫外线的能力。     

葡萄霜霉病生防菌甲基营养型芽胞杆菌T3的鉴定及其防治效果

为了获得对葡萄霜霉病具有拮抗效果的生防菌株,本研究通过平板稀释法从葡萄园土壤中分离细菌,采用离体叶片混合点样法筛选拮抗菌,并进行了田间防效试验。根据菌株的形态学及16S rDNA序列分析对其进行鉴定,并检测了菌株T3的代谢产物。在分离获得的31株细菌中,菌株T1-2和T3发酵液对葡萄霜霉病菌的室内抑制率与对照枯草芽胞杆菌CN181一致,均为100%;2次田间试验均表明,在7 d时,清水对照的病情指数增加值平均为44.3,菌株T3发酵液的病病情指数增加值平均为21.0,对葡萄霜霉病的相对防治效果为52.4%,与菌株CN181发酵液无显著差异。经鉴定,菌株T3为甲基营养型芽胞杆菌Bacillus methylotrophicus,且该菌株在代谢过程中可产生蛋白酶、纤维素酶和嗜铁素等抑菌物质。研究结果表明,菌株T3对葡萄霜霉病菌具有强烈的抑制作用,并对葡萄霜霉病具有较好的防治效果。     

甲基营养型芽胞杆菌WF-3微粉剂的研制及对黄瓜炭疽病的防治效果

以甲基营养型芽胞杆菌WF-3为研究对象,通过对载体、润湿剂、分散剂、保护剂的筛选,确定了甲基营养型芽胞杆菌微粉剂的最佳配方。其最佳配方为：白炭黑10%,润湿剂K12 2%,分散剂NNO 2%,保护剂CMC 0.5%,煅烧高岭土85.5%。测定结果表明,甲基营养型芽胞杆菌WF-3微粉剂含菌量2.07×10¹⁰cfu/g,分散指数83.31%,润湿时间11.4 s,pH 6.8,杂菌率2.6%,含水率0.98%,细度通过率98%（≤8.13 μm）,热贮分解率为4.02%,产品各项指标均达到标准。盆栽条件下,甲基营养型芽胞杆菌WF-3微粉剂对黄瓜炭疽病的保护效果优于治疗效果,防效分别为77.38%和72.69%。     

Mosquito adulticidal activity of a biosurfactant produced by Bacillus subtilis subsp. subtilis

BACKGROUND: A biosurfactant, surfactin, produced by a strain of Bacillus subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), was effective in killing mosquito larval and pupal stages. As it was lethal to the non‐feeding pupal stage, it was presumed that it could kill the adult mosquitoes also. In this study, the adulticidal effect of the biosurfactant was assessed in the laboratory against a malaria vector, Anopheles stephensi. RESULTS: The biosurfactant surfactin, separated from the culture supernatant of the production strain, showed mosquito adulticidal activity when tested as ultralow‐volume (ULV) spray in a Peet‐Grady chamber. Knockdown activity and mortality were found to increase with increasing surfactin dosage. Knockdown dosage (KD) and lethal dosage (LD) were calculated by statistical analysis. The KD₅₀ and KD₉₀ dosages were 10.73 and 26.39 mg m^?3 respectively. The LD₅₀ and LD₉₀ dosages were 16.13 and 39.21 mg m^?3. The average droplet size of B. subtilis surfactin was 17.5 ± 1.07 µm. CONCLUSION: The present study indicates that the biosurfactant surfactin, produced by B. subtilis subsp. subtilis (VCRC B471), is a potential bioadulticide for ULV spray against malaria‐transmitting Anopheles stephensi mosquitoes. This is the first report of a mosquito adulticide from a microbial source. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry     

西藏低温适生芽孢杆菌的分离鉴定及其抗菌和促生作用

从西藏拉萨色拉寺杂草根围土壤中分离到1株低温适生芽孢杆菌LSSC3,对该菌株进行了形态学、生理生化和分子生物学鉴定及抗菌和促生作用研究。菌株LSSC3细胞短杆状,芽孢圆形,10℃条件下生长良好。生理生化特征显示,该菌株与巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium特征一致,但ERIC-PCR指纹图谱分析表明其与B. megaterium模式菌株存在显著差异。16SrRNA基因序列分析结果显示,菌株LSSC3与B. subtilis和B. atrophaeus的系统发育相似性均很高。进一步通过gyrB基因测序和比对,其同源性与B. atrophaeus达到100%,没有找到与B. subtilis的同源性关系。据此,将其鉴定为B. atrophaeus。菌株LSSC3对植物病原真菌和细菌均具有很强的抑制作用,同时对拟南芥有良好的促生长作用。该菌具有耐低温和生防的双重特点,具有在农业生产上应用的潜力。     

拮抗细菌对Bt制剂杀虫效果的影响

从土壤、棉花根际和棉铃虫肠道内分离、筛选出细菌８株,初步鉴定为芽孢杆菌属、假单胞杆菌属和肠杆菌属,对水稻白叶枯、棉铃疫霉、棉花黄萎病原菌进行抑菌试验,拮抗细菌以菌悬液和细胞菌体分别与Ｂｔ制剂混配感染饲料,以２龄棉铃虫生测的结果表明,培养液无杀虫效果,拮抗细菌发酵液、菌体对Ｂｔ制剂杀虫效果有不同的影响。拮抗细菌中５株芽孢杆菌对Ｂｔ制剂有较好的增效作用,其杀虫效果均达７５％以上,防效接近ＨＤ┐７３无晶体突变株