白色链霉菌JA3453中垩唑霉素生物合成基因簇甲氧丙二酰ACP生物合成基因ozmF的遗传分析

恶唑霉素（oxazolomycin,OZM）是由白色链霉菌JA3453产生的杂合聚酮聚肽抗生素,其结构特征为螺旋链接的β-内酯/γ-内酰胺,垩唑环,（E,E）二烯和（Z,Z,E）三烯链。恶唑霉素具有抗肿瘤,抗病毒和一定的抗细菌的生物活性。前面工作中我们已经从白色链霉菌JA3453中定位了135kb的DNA区域,这个区域覆盖了整个ozm基因簇,对部分片段测序揭示了负责甲氧丙二酰ACP生物合成位点的6个基因。本文通过突变以及互补分析其中的甲基转移酶基因ozmF并证实其与恶唑霉素生物合成相关。这些结论有助于我们通过组合生物化学的方法产生新的OZM衍生物。     

白色链霉菌JA3453中垩唑霉素生物合成基因簇调节基因的中断研究

通过生物信息学分析,在白色链霉菌JA3453菌株的垩唑霉素生物合成基因簇中定位了2个调节基因。其中1个是属于LysR家族的调控因子编码基因ozmR,另1个为编码转录激活因子基因ozmU。为了研究这2个调节基因的功能,选用垩唑霉素的产生菌链霉菌JA3453为实验材料,采用目标PCR的方法,对调节基因ozmR和ozmU分别进行基因中断。HPLC-MS分析显示,ozrhR的中断可以提高垩唑霉素的产量,ozmU的中断则没有对垩唑霉素的产量带来明显影响。这些结论为利用调节基因提高垩唑霉素的产量提供了可能。     

磺胺二甲氧嘧啶免疫小鼠抗体重链可变区基因的克隆及序列分析

应用RT-PCR方法从磺胺二甲氧嘧啶免疫小鼠B细胞扩增和克隆抗SDM抗体VH基因。测序结果表明:抗SDM抗体VH基因为339 bp,编码113个氨基酸。用NCBI GenBank分析表明,抗SDM抗体VH基因符合小鼠抗体重链可变区特征,隶属于小鼠抗体重链SM7家族,由胚系基因VHSM7.a3.93-DSP2.9-JH1功能性重排形成。抗SDM抗体VH基因的克隆为抗SDM单链抗体的构建与表达奠定了基础。