荧光假单胞菌的生物防治机理

<正> 荧光假单胞菌是一类革兰氏阴性杆状细菌,一般可在King's B培养基中产生水溶性荧光色素。自20世纪70年代以来,人们已分离到大量拮抗植物病害的荧光假单胞菌。这些菌广泛分布在世界各地,可产生多种抗生素,对小麦全蚀病、棉花猝倒病等重要植物病害具有拮抗作用,起着天然生物防治的作用。盆栽试验和田间试验都表明,用这些菌浸种或喷洒叶面后,可保护作物免受病害的侵袭。现就国内外有关这些荧光假单胞菌应用于生物防治的研究作简要     

根际促生菌的生防机理及用作生防制剂的潜能

植物根际促生菌是一类可以显著提高植物生活力或植物抗病害能力的天然土壤细菌,除可经由多种途径促进植物的营养吸收与物质积累、提高植物的各项生长参数与生理生化指标外,其还可通过多种途径对植物病害加以防治。根际促生菌的生物防治活性依赖于其在植物根际的定殖,并经由特定生防活性物质的分泌、对植物系统抗性的诱导来加以实现。利用根际促生菌在植物根际的定殖,可对植物病害病原菌的生长造成抑制,这对于一些难以使用化学药剂进行防治的植物病害十分关键。本文论述了根际促生菌的生物防治机理,并探讨了将根际促生菌用作植物病害的生物防治剂的可能性,可为生态农业的发展提供了新思路。     

生物农药在西洋参种植中的应用效果研究

以菌丝生长速率法,针对生物农药对西洋参病害病原菌所产生的抑制作用进行测定,并选取4种药剂进行田间防效试验.室内抑菌测定结果得知,嘧菌酯、多黏类芽孢杆菌、2％氨基寡糖素水剂和荧光假单胞杆菌农药对黑斑病菌落生产形成抑制作用,嘧菌酯、2％氨基寡糖素水剂对疫病菌所产生的抑制效果相对较好,多黏类芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌对锈腐病菌...     

荧光假单胞菌工程菌株的构建及对黄瓜枯萎病的防治效果

采用基因工程的方法,将含有2,4-DAPG基因的质粒pMON5122导入到野生型荧光假单胞菌株中,探索了不同热激时间、不同CaCl2浓度和荧光假单胞菌的不同生长时期对转化子形成的影响;研究了荧光假单胞菌工程菌株对黄瓜枯萎病的防治效果。结果表明,荧光假单胞菌生长到OD约0．53时,用0．025mol／L CaCl2处理细胞,热激3～4min,转化频率最高;荧光假单胞工程菌株对黄瓜枯萎病的盆栽防治效果达到75．0％,并且能够提高黄瓜出苗率。     

芽孢杆菌生物防治植物病害研究现状

应用芽孢杆菌防治植物病害非常广泛。此文主要综合评述了芽孢杆菌防治植物病害现状和遗传改良研究进展,阐述了芽孢杆菌防治植物病害的主要作用机制,主要包括拮抗作用、竞争作用、诱导植物产生系统获得抗性和促进植物生长等4个方面。最后说明了利用芽孢杆菌防治植物病害存在的问题及展望。     

8种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌的室内毒力测定

为了筛选出有效防治温郁金弯孢霉叶枯病的药剂,采用菌丝生长速率法测定8 种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌(Curvularia clavata)的抑菌效果。8 种生物农药对温郁金叶枯病病原菌抑菌效果好的为0.5%氨基寡糖素AS、3%中生菌WP、荧光假单胞杆菌WP和枯草芽孢杆菌WP。毒力最强为荧光假单胞杆菌WP,EC50值为0.93 mg/L;其次为哈茨木霉菌WP、枯草芽孢杆菌WP、0.5%氨基寡糖素AS和3%中生菌素WP,EC50分别为1.30、3.27、6.14、8.42 mg/L。荧光假单胞杆菌、0.5%氨基寡糖素AS、枯草芽孢杆菌和3%中生菌素WP均可有效抑制温郁金叶枯病病原菌的生长,可进一步用于田间试验。     

8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌的室内毒力测定

为了筛选出有效防治温郁金弯孢霉叶枯病的药剂,采用菌丝生长速率法测定8种生物农药对温郁金弯孢霉叶枯病病原菌(Curvularia clavata)的抑菌效果。8种生物农药对温郁金叶枯病病原菌抑菌效果好的为0.5%氨基寡糖素AS、3%中生菌WP、荧光假单胞杆菌WP和枯草芽孢杆菌WP。毒力最强为荧光假单胞杆菌WP,EC50值为0.93 mg/L;其次为哈茨木霉菌WP、枯草芽孢杆菌WP、0.5%氨基寡糖素AS和3%中生菌素WP,EC50分别为1.30、3.27、6.14、8.42 mg/L。荧光假单胞杆菌、0.5%氨基寡糖素AS、枯草芽孢杆菌和3%中生菌素WP均可有效抑制温郁金叶枯病病原菌的生长,可进一步用于田间试验。     

申嗪霉素防治水稻纹枯病效果好

<正>南京市江宁区周岗镇王某来电话说,听说申嗪霉素能用于防治水稻纹枯病,不知道效果怎么样。申嗪霉素是由荧光假单胞菌经生物培养分泌的一种抗菌素,能抑制植物病原菌和促进植物生长。该药杀菌谱广,能有效防治水稻、小麦、蔬菜等作物上的枯萎病、蔓枯病、疫病、纹枯病、稻曲病、稻瘟病、霜霉病、条锈病、菌核病、赤霉病、炭疽病、灰霉病、黑星病、叶斑病、青枯病、溃疡病、姜瘟及土传病害等。     

拮抗油菜菌核病菌的荧光假单胞杆菌的分离与筛选

2003—2005年,在上海市郊采集常见作物的根际土壤样品,经分离和纯化后共得到254个产荧光的细菌菌株。采用平板对峙培养法测定这些菌株对油菜菌核病菌的拮抗效果,结果从这254个菌株中筛选出了一个高效菌株P13。试验表明,它对菌核病菌的生长具有较强的拮抗能力,同时还发现其对多种常见的植物病原真菌具有广谱拮抗作用。通过显微观察发现,P13菌株可致使油菜菌核病菌菌丝生长形态异常,出现菌丝变形、菌丝壁溃解、原生质浓缩及外渗等异常现象,还可在一定程度上抑制菌核的形成。经电镜观察、培养物特征和一系列的生理生化实验鉴定,可初步确定P13菌株为产荧光假单胞杆菌属中的荧光假单胞杆菌。     

荧光假单胞菌Pseudomonas fluorescens RN-88抑菌特性研究

本研究旨在利用拮抗菌防治植物病害,为桃的病害生物防治提供更多可行性的方案。以前期筛选获得的一株桃褐腐病拮抗细菌荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)RN-88为试验材料,采用杯碟法测定发酵液对桃褐腐菌(Monilinia fructicol)的抑菌活性,并结合抑菌圈法,研究了该菌在pH、温度、紫外线(UV)等不同环境中的稳定性。实验结果表明,细菌RN-88能显著降低桃褐腐病的发病率,其发酵液对褐腐病菌(M. fructicol)的抑制率可达44.69%。在过滤除菌后,相对于高温灭菌,发酵液中抑菌物质的损失较小。在pH 7.5～9.0的碱性溶液中,发酵液的抑菌活性有较好的稳定性,但在酸性溶液(3.0≤pH≤6.5)中处理后,其抑菌能力减弱。发酵液的抑菌率几乎不受温度和紫外线(UV)的影响。Pseudomonas fluorescens RN-88细菌具有较好的环境稳定性,具有开发成桃褐腐病生物拮抗剂的潜在价值,本研究为荧光假单胞菌作为新型生防菌的应用提供了理论依据,同时为实现桃病害的生物防治提供了更多可行性的方案。     

天然物质对切割蔬菜中常见微生物抑制作用的研究

应用正离子水和姜黄、虎杖、艾叶、丁香提取物对切割蔬菜中常见微生物(大肠杆菌、荧光假单胞菌、啤酒酵母)的抑制作用进行调查,结果表明,正离子水对大肠杆菌、荧光假单胞菌、啤酒酵母抵制率均为零;而姜黄、虎杖、艾叶、丁香提取物对3种微生物均有一定的抑制作用。     

冷鲜五花肉中假单胞菌预测模型的建立与验证

为了建立冷鲜五花肉中假单胞菌的生长预测模型,采用选择性培养基CFC琼脂对假单胞菌进行平板计数。利用Gompertz模型拟合0℃、5℃、10℃、15℃和20℃下冷鲜五花肉中假单胞菌的生长曲线,得到假单胞菌生长预测一级模型;生长预测二级模型以平方根模型、Arrhenius模型拟合一级模型中所得动力学参数。结果表明：一级模型中回归系数R2>0.99,准确因子(Af)、偏差因子(Bf)都接近1.0,延滞期(LPD)1.6996~0.1212,最大比生长速率(U)0.5782~3.3751。二级模型中平方根模型对延滞期和最大比生长速率回归系数R2为0.9825和0.934均略高于Arrhenius模型。可用平方根预测0~20℃范围内假单胞菌的变化情况,为冷鲜五花肉中腐败微生物的预测研究提供基础。     

PGPR对莠去津污染土壤中结缕草生长及生理的影响

探究接种植物根际促生菌(PGPR)对结缕草幼苗生长与生理代谢的影响,为莠去津污染土壤中种植草坪草提供理论依据.采用双因素试验设计,以结缕草幼苗为材料,将幼苗分为PGPR(荧光假单胞杆菌,Pseudomonas fluorescens)接种和未接种两组,进行莠去津处理(浓度梯度为0、3、15、75 mg/kg),并测定不...     

小果野蕉家族蛋白序列特征分析和在根际促生菌作用下的表达分析

在真核生物中,Argonaute(AGO)蛋白是基于s RNA的基因沉默通路的效应蛋白,参与基因表达调控、DNA甲基化等分子过程,从而使植物的生长发育有条不紊的进行。同时,根际促生菌对植物生长有促进作用。本研究对小果野蕉的AGO蛋白进行比对鉴定,最终找到16个AGO蛋白,其中14个定位于6条已知染色体上。本研究还对蛋白结构和基因进化等问题以及这些基因对根际促生菌的响应进行了研究。研究发现:这些蛋白可分为4个亚家族,且AGO1亚家族的基因普遍外显子多。表达谱研究发现,属于AGO4和AGO1亚家族的MaAGO2,MaAGO3,MaAGO9三个基因在对解淀粉芽孢杆菌、荧光假单胞菌是都表现出表达的升高,这暗示着植物AGO基因参与的生物学过程可能参与植物对根际促生菌的响应,也有助于以后这方面的研究。     

酵母耐铜基因CUP1改良荧光假单胞菌耐铜性研究初报

利用根际促生菌（PGPR）荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）等微生物的生物修复作用可治理土壤重金属污染。酿酒酵母耐铜基因CUP1编码铜金属硫蛋白（Cu-MT）,对铜有很高的亲和性,可拮抗重金属铜毒性。为提高荧光假单胞菌的生物修复能力,将酿酒酵母耐铜基因CUP1克隆至荧光假单胞菌。通过引物设计,将SD序列添加至酵母耐铜基因CUP1编码序列前端,PCR扩增得到约200bp的CUP1片段,克隆至测序载体pUC19,经测序证明正确后,胶回收CUP1片段连接到具有广泛宿主范围的柯斯质粒pLAFR3上,经三亲接合转移至荧光假单胞菌AS1.1381,得到重组菌株AS1.1381/pL3CUP1。铜实验表明,重组菌株AS1.1381/pL3CUP1的抗铜能力（6mM Cu2+）显著高于AS1.1381/pLAFR3（4.5mM Cu2+）,重组菌株抗铜性得到提高     

香辛料提取物抑菌效果的研究

研究了几种香辛料提取物对食品中常见腐败菌的抑菌作用。结果表明,甘草和姜黄对大肠杆菌,甘草、小茴香和姜黄对荧光假单胞,肉豆蔻对清酒乳杆菌的生长具有明显的抑制效果。     

实时荧光定量PCR在植物病害中的应用

实时荧光定量PCR技术作为一项新兴技术,越来越受到人们的重视。它以快速、准确定量、便捷等优点广泛应用于科学研究各个领域,近年来, 实时荧光定量PCR技术在植物病害研究上不断深入,大大提高了植物病害的检测效率和监测防治水平。本文重点就对实时荧光定量PCR技术在由真菌、细菌、病毒、线虫引发的植物病害的检测与应用;并结合了最近几年来应用于检测和鉴定植物病原病害的实时荧光定量PCR过程中引物与探针的设计、反应过程、结果评价情况做综合论述。     

冷鲜猪肉馅中假单胞菌的预测模型研究

以托盘包装冷鲜猪肉馅为研究对象,研究假单胞菌的生长变化与模型构建。结果表明,Gompertz方程拟合获得的假单胞菌生长预测一级模型,相关系数R~2值均大于0.99,偏差因子和准确因子分别为0.870和1.149;采用平方根模型研究温度对假单胞菌生长动力学参数的影响,得到温度与最大比生长速率和延滞期方程分别为:U~(1/2)=0.066×[T-(-11.606)]和(1/t_(LPD))~(1/2)=0.059×[T-(-15.42)],其中T∈[0,20],R~2分别为0.981和0.811,F统计量检验表明方程具有显著性。构建的生长模型能够较好地预测0～20℃下假单胞菌在冷鲜猪肉馅基质上的生长。     

卤鹅生产销售过程中主要污染微生物及其生长规律研究

分析了卤鹅产品在正常生产、运输、销售条件下的主要污染微生物及其生长规律.初步试验结果表明,金黄色葡萄球菌、霉菌、乳酸菌、假单胞菌、酵母菌、大肠杆菌是卤鹅产品的主要污染微生物;主要污染微生物的种类和数量随着所处的不同阶段而发生不同的变化,其中乳酸菌、金黄色葡萄球菌和假单胞菌的污染贯穿整个生产、运输、销售过程中,乳酸菌的增长速度最快,在300 min内增长了4个数量级,金黄色葡萄球菌和假单胞菌在300 min内增长均超过了2个数量级;大肠杆菌、酵母菌和霉菌污染主要在进入销售门店后产生.     

冷鲜猪肉馅中假单胞菌的预测模型研究

以托盘包装冷鲜猪肉馅为研究对象,研究假单胞菌的生长变化与模型构建.结果表明,Gompertz方程拟合获得的假单胞菌生长预测一级模型,相关系数R2值均大于0.99,偏差因子和准确因子分别为0.870和1.149;采用平方根模型研究温度对假单胞菌生长动力学参数的影响,得到温度与最大比生长速率和延滞期方程分别为:√U=0.066 ×[T-(-11.606)]和√1/tUPD=0.059×[T-(-15.42)],其中T∈[0,20],R2分别为0.981和0.811,F统计量检验表明方程具有显著性.构建的生长模型能够较好地预测0～20℃下假单胞菌在冷鲜猪肉馅基质上的生长.