欧美杨"山地1号"组织培养再生系统的建立

欧美杨“山地1号”是美洲黑杨与欧洲黑杨(P.deltoides×P.nigracv.,‘shandis1’)杂交培育成功的杨树优良品种。本研究以叶片作为外植体进行组织培养,建立了欧美杨“山地1号”组织培养再生系统。分别用植物生长调节剂α-萘乙酸(NAA)和细胞分裂素6-苄氨基嘌呤(6-BA)诱导芽的分化,促进侧芽生长;用3-吲哚丁酸(IBA)诱发根生长,使根多而长,本研究筛选出诱导率最优的培养基和激素浓度:分化培养阶段——以1/2MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)诱导分化获得再生芽;继代培养阶段——以MH培养基(6-BA0.5mg/L与NAA0.05mg/L)进行继代培养获得丛生芽;抽茎培养阶段——以MH培养基(6-BA0.1mg/L与NAA0.05mg/L)进行抽茎培养获得丛壮无根苗;生根培养阶段——以1/2MH培养基(IBA0.3mg/L)诱导生根。然后,选择根系发达、主茎高达2～3cm且木质化程度高的幼苗移栽到塑料大棚中,约14d后长出新根即可成活,移栽成活率达90%。本欧美杨组织培养再生系统可用于基因的遗传转化。     

‘黑珍珠’番茄植株再生体系的研究

为了研究‘黑珍珠’番茄植株再生,以‘黑珍珠’番茄幼嫩叶片为外植体诱导愈伤组织,通过愈伤组织诱导培养、愈伤组织分化培养、不定芽增殖培养、生根培养和试管苗移栽,建立高效快速的‘黑珍珠’番茄再生体系。结果表明：最适宜的诱导叶片愈伤组织的培养基为MS+ 1.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA,叶片外植体愈伤组织诱导率最高可达98.2%;诱导出的愈伤组织在MS+ 1.5 mg/L 6-BA+ 0.2 mg/L IBA培养基上能很好的分化出不定芽;MS+4.0 mg/L KT+ 0.01 mg/L IBA 培养基可实现不定芽芽增殖;最适宜的生根培养基为1/2MS+ (0.05~0.08) mg/L NAA,试管苗移栽成活率达92%。     

文冠果工厂化育苗组织培养技术体系建立

文冠果(Xanthoceras sorbifolia Bunge)是中国特有的一种抗旱耐盐的油料绿化树种,千花一果、植株变异大;扦插、嫁接等无性繁殖方式受母株繁殖材料数量和质量限制,组织培养尚存在不定芽增殖系数低、生根困难、试管苗移栽成活率低等问题。本研究基于植物组织培养进程5个阶段,分别研究其关键技术,发现文冠果茎段以有效氯浓度1.0%的二氯异氰尿酸钠水溶液消毒20 min去污染率最高,达46.7%。不定芽在添加6-苄氨基嘌呤0.8 mg/L、吲哚-3-乙酸0.05 mg/L、蔗糖30 g/L的MS培养基上培养30 d,增殖系数达5.22;在IBA 1.0 mg/L的1/2MS草炭、珍珠岩等比例混合基质上培养30 d,生根率达73.3%;在相同处理的琼脂培养基上的生根率为60.0%;在相同处理的琼脂培养基上培养15 d后,转接至活性炭琼脂培养基上培养15 d,生根率为56.7%。混合基质和琼脂培养基上的小植株驯化成活率分别为93.3%和83.3%。本研究为文冠果组织培养工厂化育苗微型快繁技术体系的建立提供基础。     

油桐下胚轴直接再生体系的建立

为了获得油桐的离体再生技术,本实验以油桐无菌苗下胚轴为外植体,采用MS培养基添加不同的植物生长调节剂,通过直接器官发生途径建立了简单的、可重复的油桐离体再生体系。结果表明:下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA,诱导率高达45.37%,平均不定芽数为3.69;最适继代增殖培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA+1.0 mg/L GA3,增殖系数可达3.13;最佳生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L IBA,生根率高达97.78%。驯化后移栽到营养土:珍珠岩:蛭石=2:1:1的混合基质中,成活率达90%以上。     

芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’高效再生体系的建立

矮牵牛(Petunia hybrida)是研究植物芳香性状的理想材料,但目前有关芳香型矮牵牛转基因技术体系的研究较少,为建立芳香型矮牵牛的高效再生体系,本研究以特异挥发苯环类物质的芳香型品种‘Carpet Blue’为材料,进行了表面消毒、愈伤组织诱导与不定芽分化、不定芽增殖、不定芽生根等研究。结果表明:先用75%酒精(C₂H₅OH)漂洗30 s,再用5%次氯酸钠(NaClO)消毒8 min,表面消毒效果最好,无菌外植体获得率可达93.75%;愈伤组织诱导与不定芽分化最适培养基为:MS+1.5 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L萘乙酸(NAA),诱导率可达100%,且能分化出健壮的不定芽;最适不定芽增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,增殖系数可达14.67倍;最适生根培养基为1/2MS+0.05 mg/L吲哚丁酸(IBA),生根率为100%,平均根数达37.67条,平均根长达2.61 cm,生根指数最高,达9.82,单条不定根最长可达5.22 cm;炼苗移栽后,成活率高达92.50%。本研究初步建立了芳香型矮牵牛‘Carpet Blue’的高效再生体系,为后续通过转基因手段研究苯环类挥发物质的代谢规律奠定了坚实基础。     

台湾牡丹樱花快繁体系建立及驯化技术

以台湾牡丹樱花当年新生枝条为原材料,采集生长健壮的枝条腋芽(侧芽)建立诱导、增殖、生根、出棚驯化的台湾牡丹樱花快繁体系。结果表明:采集3月中旬至4月初的当年生枝条最为适宜;外植体消毒时间11 min,污染率最低,诱导率最高;最适的诱导培养基:MS+1.5 mg/L BA+0.1 mg/L IBA+30 g糖;继代培养:MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+30 g糖,增殖系数2.04;生根培养:1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA+15 g糖+1 g AC,生根率为83.21%;移栽采用基质:泥炭土∶珍珠岩∶草木灰=5∶3∶2,移栽成活率最高,达到87%。     

黄芩组培工厂化技术研究

选用黄芩健壮枝条作为材料,进行组培快速繁殖技术研究。结果表明：愈伤组织诱导激素组合以6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L最为有利,所形成愈伤组织生长速度和质量均满足要求;不定芽分化激素组合为6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,增殖方式为器官发生型再生方式;继代培养采用NAA0.5~0.1mg/L+B90.5~0.1mg/L,增殖在10倍以上;生根培养NAA0.5mg/L+IBA 0.1mg/L,一般15d左右生根,平均根量4~5条,生根率近100%,能显著提高移栽成活率,满足植物组织培养工厂化育苗技术要求。     

草莓组织培养与快速繁殖技术

以"红颜"草莓的匍匐茎尖为外植体,选择附加不同激素组合的MS培养基为诱芽培养基和继代培养基,以1/2MS为生根培养的基本培养基,对"红颜"草莓的组织培养及快繁进行研究。结果表明:草莓茎尖在MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基上能很好地诱导不定芽形成,其诱导率高达80%;继代增殖培养基为MS+6-BA2.0 mg/L+IBA0.5 mg/L+IAA0.5 mg/L+GA1.0 mg/L时增殖系数较高;生根培养基为1/2MS+IAA0.5 mg/L时生根率可达99%,移栽至田间后,成活率高且匍匐茎繁殖能力强。     

黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl)组培快繁技术研究

以当年生黄花倒水莲幼嫩带腋芽茎段作为外植体,开展组织培养试验研究.结果表明:最佳外植体诱导培养基为1/2 MS+ BA 2.0 mg/L+ NAA 0.1 mg/L,诱导率可达95.1％;最佳增殖培养基为WPM+ BA 1.5 mg/L+ NAA0.1 mg/L,增殖系数为6.12,周期为25 d,不定芽生长状况好;最佳生根培养基为1/2 WPM+ IBA 0.1 mg/L+ ABT0.4 mg/L,生根率为95.67％;以泥炭土∶黄泥土∶珍珠岩(2∶1∶1)为移栽基质,移栽成活率可达92.6％,苗木长势好,叶色绿.     

金钻蔓绿绒愈伤组织诱导及再生体系的建立

通过诱导愈伤组织途径,建立其组培快繁体系。以金钻蔓绿绒根茎为试验材料,分析不同浓度6-BA、IBA、NAA组合对金钻蔓绿绒愈伤组织、不定芽诱导、不定芽增殖、生根的影响。结果表明:金钻蔓绿绒的出愈率最高可达85.55%;当6-BA浓度为1 mg/L时增殖系数达到最高,达17.3,经金钻蔓绿绒植株再生体系扩繁的组培苗生根率达100%,移栽成活率为100%。愈伤组织诱导培养基:MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA;不定芽诱导及增殖培养基:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA;生根最佳培养基为:1/2 MS+0.5 mg/L NAA。将植株种植于草炭和珍珠岩3:1基质中,成活率达100%。     

欧报春上下胚轴再生体系的建立

以欧报春(Primula vularis)种子上下胚轴为外植体,通过外植体的消毒、丛生芽诱导和增殖、生根、炼苗和移栽等技术的研究,筛选出各阶段的最佳培养基配方,从而建立欧报春的再生体系。结果表明:欧报春种子上胚轴能诱导出不定芽,但下胚轴不能。欧报春上胚轴不定芽诱导最佳培养基为MS+NAA 0.4 mg/L+6-BA 0.6 mg/L,诱导率达21.67%;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+NAA 0.6 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,诱导率达62.96%;生根最佳培养基为MS培养基,诱导率达95.59%;最佳移栽基质为草炭:珍珠岩=3:1(体积比)的混合基质,移栽成活率可达96.67%。     

药用植物裸花紫珠的组织培养与快速繁殖研究

以种子为外植体,MS为基本培养基,通过比较不同植物生长调节剂种类和浓度配比、培养条件以及生根苗的移栽基质,建立裸花紫珠组织培养快速繁殖体系。结果表明：外植体表面消毒以75%酒精预处理10 s,再用0.1% HgCl2浸泡10 min,效果最好;种子在MS基本培养基上萌发;丛生芽继代增殖的最适温度为28℃,最适光照强度为1500 lx;培养基MS+ 6-BA 2.00 mg/L+ NAA 0.05 mg/L适宜继代增殖,30天的增殖系数为10.87;培养基MS+ NAA 0.50~0.75 mg/L适宜诱导生根,生根率100%;生根苗移栽于河沙、珍珠岩和表土(1:1:1)的混合基质中,成活率96%,高生长量最大。运用该组培快繁技术,可以实现裸花紫珠的工厂化育苗。     

‘凤丹’牡丹胚芽愈伤诱导及不定芽的分化

为提高‘凤丹’牡丹胚芽愈伤组织的诱导率及不定芽的分化效率,本研究以‘凤丹’牡丹种子为试验材料,对种胚愈伤诱导及不定芽分化的培养基配方进行添加与不添加2,4-D的对比试验。结果显示,诱导胚愈伤的最佳培养基为MS+1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,诱导率达33.33%;诱导不定芽分化的最佳培养基为MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA,诱导率达65.33%,表明在没有2,4-D添加的培养基中能获得更高的‘凤丹’牡丹胚芽愈伤诱导率及更多的不定芽。本研究结果可为‘凤丹’牡丹的组培和快繁技术提供一定的技术指导。     

商陆组织培养及其快速繁殖研究

以商陆茎段为外植体,研究其离体培养再生途径。结果表明,MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.05 mg/L适合丛生芽诱导,诱导率达100%;MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.02 mg/L适合继代增值培养;1/2 MS+IBA 0.5 mg/L适合生根诱导,诱导率为86.7%;组培苗移栽成活率达100%。     

正交设计在彩色马蹄莲组织培养中的应用

本试验通过正交设计方法,着重研究彩色马蹄莲组织培养过程中的基本培养基及植物生长调节剂6-BA、KT、IAA、NAA,对不定芽诱导、继代培养和诱导生根的影响。结果显示：初代培养BA2.0mg/L和B5培养基搭配效果最好,继代培养最优组合B5＋BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,诱导生根1/2MS＋NAA0.1mg/L+IBA0.3mg/L对生根率的诱导效果最好。     

大花朱顶红鳞茎不定芽的诱导

以大花朱顶红‘Red Lion’鳞茎作外植体,研究其不定芽诱导的最佳培养条件。结果表明,最佳外植体消毒方法为0.1 %升汞浸泡8 min,污染率仅为5 %,外植体正常生长;最适不定芽诱导培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 1.0 mg/L + 3 %蔗糖+Vc 0.2 g/L,可直接诱导成完整植株;Vc对外植体褐变的抑制效果好于AC;将培养60 d左右的试管苗移栽于草炭、珍珠岩和蛭石体积比为1：1：1的混合栽培基质中,成活率达100%。     

青葙高效再生体系的建立

以青葙茎段为外植体建立高频再生体系,探讨不同激素配比对青葙不定芽诱导、继代增殖和不定根诱导的影响。结果表明:青葙茎段外植体诱导培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.5mg/L),诱导率为100%;继代增殖培养基为MS+6-BA(2mg/L)+IBA(0.01~0.02mg/L),不定芽增加3~5个;不定根诱导培养基为1/2MS+NAA(0.5mg/L)+IBA(0.5~1.0mg/L),诱导率高达100%;组培苗移植到盛有细沙的花盆中,成活率为100%。     

驱蚊香草快繁体系的建立及工厂化育苗主要影响因素研究

以驱蚊香草的幼嫩叶片作外植体,在含不同激素的不同培养基上进行丛生芽的诱导、芽的继代增殖、芽生根与移栽研究,以快速获得再生植株。结果表明,丛生芽诱导培养基以MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L较好,诱导率为96%;增殖培养基以MS（B5）+6-BA0.5mg/L +NAA0.1mg/L较好,增殖系数达8倍以上,且增殖芽生长好;壮苗培养基为MS（B5）+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L为好;生根培养基以1/2MS+NAA0.1 mg/L和MS+IBA0.2 mg/L为最佳,生根率达100%,幼苗生长势旺。影响工厂化育苗的主要因素有激素浓度、继代次数和移栽管理     

千层金组培快繁技术研究

以千层金茎段为外植体进行离体培养,通过试验筛选出各阶段适宜的培养基,建立了千层金组培快繁体系。结果表明：在诱导不定芽的培养基中,MS+6-BA 1 mg/L的芽萌发率最高,芽体健壮;丛生芽继代增殖培养基为改良MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.1 mg/L;生根培养基为1/2MS+1号生根剂0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%,且根系发达;栽培基质以椰糠+腐殖土=2:1较理想,移栽成活率为89.3%。     

‘三白’石榴再生体系的构建

为建立适用于遗传转化和育种研究的‘三白’石榴再生体系,以带芽茎段为外植体进行组织培养研究。结果表明,最佳初代培养基为MS+BA 2.0 mg/L+ IBA 0.2 mg/L+ PVP 2 g/L,成芽率达83.1%,成芽个数为4.9;最佳增殖培养基为B5+ BA 0.8 mg/L+ IBA 0.5 mg/L+ AgNO3 0.2 mg/L+ GA3 0.2 mg/L+椰汁100 ml/L+PVP 2 g/L,增殖系数达5.6;最佳生根培养基为B5+ IBA 1.0 mg/L+椰汁100 ml/L,生根率达95.6%,移栽成活率达87.3%,由此建立了‘三白’石榴的再生体系。