小麦花粉离体萌发培养体系的筛选

为了准确检测小麦花粉活性,以5个常规小麦品种为材料,4种花粉离体萌发培养体系为候选方法,通过比较不同体系花粉萌发率差异,从而找到最佳的小麦花粉离体萌发培养体系。结果表明：小麦成熟花粉在20%蔗糖+10%PEG4000+40mg/LH3BO3+3×10-3mol/LCa(NO3)2+10mg/LVB1中28℃培养30min,通过镜检观察,可诱导萌发频率高达90%以上。同时,经过K型小麦不育系、保持系和F1材料的鉴定,表明上述培养基适合于小麦花粉离体萌发,能够准确检测小麦花粉活性。     

培养基pH值及蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉体外萌发的影响

为明确培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对百香果花粉离体萌发的影响,筛选出花粉体外萌发的适宜条件、优化液体培养基组分,本研究以'台农一号'百香果花粉为材料,采用液体培养基离体培养的方法,开展单因素及正交试验,并用'台农一号'及'黄果'百香果的花粉验证了最适宜培养基的萌发率.结果 显示:培养时间、培养基pH值、蔗糖、硼酸、PEG-4000对花粉萌发率及花粉管生长均有显著的影响.培养时间为4h,培养基pH值为5.5时萌发率最高,蔗糖、硼酸、PEG-4000为百香果花粉离体萌发的必需物质,适当的浓度可促进花粉萌发及花粉管的生长,但浓度过高起抑制作用,因素间存在明显的互作效应.百香果花粉离体萌发的最佳培养基为:150 g/L蔗糖+150 g/L PEG-4000+25 mg/LH3BO3+300 mg/L Ca(NO3)2·4H2O+200 mg/L MgSO4·7H2O+ 100 mg/L KNO3,'台农一号'百香果及'黄果'百香果花粉在该培养基中的离体萌发率分别为95.99％及92.35％.本研究筛选到的适宜百香果花粉体外萌发的培养条件及萌发率高的液体培养基,为生产及杂交育种中的人工授粉及百香果孢粉学研究提供参考.     

茶树花粉离体萌发条件优化及活力快速检测

以福鼎大白茶(Camellia sinensis cv.Fuding-dabaicha)花粉为研究对象,考虑不同浓度的蔗糖、硼酸、硝酸钙,采用正交试验设计优化茶树花粉离体萌发培养基;通过离体萌发法、TTC染色法的对比,探讨茶树(C.sinensis)花粉活力的快速测定方法。结果表明,硼酸是影响茶树花粉离体萌发效果的主要因素,而不同浓度蔗糖的影响差异不显著,茶树花粉离体萌发最佳培养基为150g/L蔗糖+150mg/L硼酸+100mg/L硝酸钙。离体萌发法和TTC染色法测定茶树花粉活力进行比较,2种方法得到茶树花粉活力最佳分别为90.04%、83.17%,且差异不显著。因此,花粉离体萌发法和TTC染色法都可用于测定茶树花粉活力,10g/L TTC用于快速检测茶树花粉活力效果最佳。     

培养基组分与培养条件对乌桕花粉萌发的影响

以乌桕花粉为试材,采用花粉离体培养法,研究不同培养基组分及温度对乌桕花粉萌发的影响。研究结果表明,乌桕花粉离体培养的合适温度在20～30℃,25℃下萌发率为18.05%;蔗糖、硼和钙能促进乌桕花粉萌发,单因素的最适浓度分别为10 g/L、100 mg/L和60 mg/L,花粉萌发率分别为57.32%、25.45%和31.74%。     

硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长的影响

为明确硼酸、蔗糖和pH值对火龙果花粉离体萌发特性的影响,本研究以新鲜花粉为材料,采用液体培养基离体培养法,结合单因子与正交设计试验,以期优化液体培养基组分。结果表明,蔗糖、硼酸和pH值三因素均对火龙果花粉离体萌发和花粉管伸长产生极显著影响,因素间存在交互作用。其中,对花粉离体萌发率的作用大小表现为硼酸×蔗糖蔗糖蔗糖×pH硼酸硼酸×蔗糖×pHpH硼酸×pH,对花粉管长度影响程度为蔗糖pH硼酸×蔗糖硼酸硼酸×pH蔗糖×pH硼酸×蔗糖×pH。促进花粉萌发的最佳组分为500 mg/L硼酸+25%蔗糖+pH 6.5,促进花粉管伸长的最佳组分为300 mg/L硼酸+20%蔗糖+pH 7.5。本研究为建立最佳火龙果花粉离体萌发的液体培养基配方奠定基础,也为生产中提高辅助授粉效率、加快人工杂交育种进程提供参考。     

白菜型油菜花粉离体萌发液体培养基组分的优化

筛选适合白菜型油菜花粉管生长的最佳液体培养基,为测定白菜型油菜花粉活力提供一种有效方法。本研究以白菜型油菜陇油4号的新鲜花粉为材料,采用液体培养法,研究了以BK培养基为基础在其中添加不同浓度PEG6000、蔗糖、赤霉素(GA3)和VB1;采用不同pH值、培养时间对白菜型油菜花粉离体萌发生长的影响。研究显示PEG6000可促进花粉萌发生长,最适为50 g/L;蔗糖浓度为150 g/L时最利于花粉萌发和花粉管生长且高浓度蔗糖对花粉萌发有明显抑制作用;2 mg/L的赤霉素明显地促进花粉萌发生长;10 mg/L的VB1可加快花粉萌发速度。本研究表明以BK+150 g/L蔗糖+50 g/L PEG6000+2 mg/L赤霉素+10 mg/L VB1(pH为6.5,35℃恒温)组成的培养基效果最佳。     

水稻花粉的离体萌发

选出适合于水稻花粉萌发的液体培养基： 20%蔗糖+10%PEG4000+40 mg.L-1H3BO3+3m mol/L Ca(NO3)2+10 mg.L-1VB1, 得到80%的萌发频率。 离体萌发时, 花粉管生长很快, 在30 min内可达700 μm。 最适萌发的温度范围较宽, 27～33℃都可以得到较高的萌发频率。     

北沙参花粉形态特征、活性及萌发条件研究

为了认识北沙参的花粉粒形态特征和生理特性,利用离体培养法测定花粉粒活性,并对培养条件(蔗糖的质量分数、硼酸的质量浓度和氯化钙的质量浓度)进行筛选,同时与碘-碘化钾(I2-KI)、氯化三苯基四氮唑(TTC法)和亚甲基蓝等花粉活性测定方法进行比较,建立测定北沙参花粉活性的最适宜方法,利用离体培养法进一步检测保存时间、温度和湿度等对北沙参花粉活性的影响,应用扫描电镜观察花粉粒的大小形态等特征。结果表明,亚甲基蓝法适于北沙参花粉粒活性测定,I2-KI法和TTC法不适合。北沙参体外萌发的最适培养基是20%蔗糖+0.1%mg·mL^-1硼酸+0.1%mg·mL^-1氯化钙,萌发率可达72.9%。北沙参花粉在湿度15%~52%,25℃条件下活性最好,4℃、-20℃的低温或大于60%的湿度都会导致花粉活性降低。北沙参花粉粒形态为超长方形,具3个狭长萌发沟,表面为网状。     

矾根花粉离体萌发培养基组分及培养条件的优化

为筛选出适宜于矾根花粉萌发的培养条件和离体培养基,本研究以矾根‘红妆魅影’为实验材料,采用单因素实验分别对培养基的pH值、培养温度及培养时间进行优化,然后用正交设计试验进一步优化矾根花粉萌发的离体培养基配方。研究结果表明当培养基pH值为5.5、培养温度为25℃、培养时间达100 min时,萌发效率最高;对矾根‘红妆魅影’花粉萌发的影响程度依次为蔗糖>PEG4000>硼酸>氯化钙;最优处理组合为A3B1C3D5(11),即在10 %蔗糖+0 mg/L氯化钙+100 mg/L硼酸+20 %PEG4000的处理组合下,矾根‘红妆魅影’的花粉平均萌发率最高达73.2%。本研究优化所得的培养基组分及培养条件可为矾根属植物有关花粉活力相关研究奠定基础。     

PEG和钙对栀子花粉萌发的影响

以栀子（Gardenia jasminoides Ellis）花粉为试验材料,采用花粉人工培养法研究了培养基中PEG和钙对栀子花粉萌发的影响。结果表明,不同分子量的PEG对栀子花粉离体萌发率的影响不同,PEG-6000较其他3种分子量的PEG促进花粉萌发的效果要好;PEG4种分子量的最适浓度不同,其中PEG-4000和PEG-6000促进栀子花粉萌发的最佳浓度为15 g/L,而PEG-2000和PEG-10000促进栀子花粉萌发的最佳浓度分别为20g/L和10g/L。以0.8%的琼脂+30 mg/L蔗糖+15 mg/L硼酸+15 g/L PEG-6000为基本培养基组分,分别添加不同浓度的CaCl₂,发现适宜浓度的钙有利于栀子花粉萌发,但钙浓度过高抑制萌发,栀子花粉萌发的最适Ca²⁺浓度为2.0 mmol/L。     

黄刺玫花粉离体萌发的特性

为明确黄刺玫的花粉萌发特征,采用花粉离体培养法,研究蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度及培养温度、采集时间、贮藏方式对黄刺玫花粉萌发的影响。结果表明:培养温度、培养基中蔗糖、H_3BO_4、CaCl_2、NAA、GA浓度均显著影响黄刺玫花粉萌发,一天中不同的采集时间和不同的花粉贮藏方式黄刺玫的花粉萌发率不同。在25℃、15%蔗糖的培养基上萌发效果最好,花粉萌发率达67.51%。基本培养基上分别添加H3BO4150 mg/L、CaCl_2 20 mg/L、NAA 20 mg/L、GA 20 mg/L时花粉萌发率较高。在室温带花、室温离体、0℃~2℃带花、0℃~2℃离体4种条件下贮藏花粉,5 h、10 h后培养,各处理间差异不显著,但在室温下,带花贮藏比离体贮藏效果好;0℃~2℃下,离体贮藏比带花贮藏的萌发率高。花粉于10:00~14:00时段采集较好,12:00时采集萌发率最高。本试验探讨不同条件对黄刺玫花粉萌发的影响,为其杂交育种及理论研究提供依据。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

大丽花花粉活力及离体萌发研究

为筛选大丽花花粉活力有效的测定方法,了解大丽花不同品种的花粉活力,以大丽花栽培品种为试验材料,采用4种方法检测大丽花花粉活力,在此基础上,采用单因素试验和正交设计试验分别对大丽花花粉的离体萌发培养条件及培养基组分进行优化,得到最优方案后进一步检测、比较不同品种之间的花粉活力。研究结果显示,TTC染色法不能使花粉着色,I₂-KI和孢粉染色法不能有效区分有活力和无活力花粉,离体萌发法效果良好,可准确直观地反映大丽花花粉活力状况, 是测定大丽花花粉活力的有效方法。当培养条件为pH 6.0、温度25℃、培养时间2.5 h时,花粉萌发率最高。培养基组分对大丽花花粉萌发的影响程度依次为PEG>蔗糖>硼酸,实际最佳处理组合为A₃B₄C₂,即PEG4000 25 g/L、蔗糖60 g/L、硼酸50 mg/L的处理组合下,大丽花花粉萌发率最高达62.1%。采用上述获得的最优方案检测22个大丽花品种的花粉活力,花粉萌发率为11.75%~78.72%,不同品种的花粉萌发率差异大,其中,‘兰花公主’的花粉萌发率最低,‘波彻儿’最高。大丽花品种的花粉活力多样性丰富,所测定的22个大丽花品种有14个品种正常可育,杂交时可用作父本;8个品种为半不育或低不育,杂交时更适合作母本。     

通过多种培养基优化长白落叶松体细胞胚再生

为建立稳定高效的落叶松体细胞胚再生体系,本研究以长白落叶松未成熟合子胚作为外植体材料,选择生长良好的胚性愈伤组织,依次通过液体培养基A,半固体培养基B,固体培养基C三种成熟培养基诱导体细胞胚形成。其中,愈伤诱导培养基为S培养基+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.3 mg/L,蔗糖20 g/L,琼脂3 g/L;继代培养基为S培养基+2,4-D 0.15 mg/L+6-BA 0.05 mg/L+KT 0.05 mg/L,蔗糖30 g/L,琼脂6 g/L;成熟培养基A为S培养基+PEG-4000 100 g/L+ABA 15 mg/L+Ag NO310 mg/L,蔗糖45 g/L的液体培养基;成熟培养基B和C分别为添加了2 g/L和10 g/L琼脂的成熟培养基A。该方法体胚成熟时间为32 d左右,同步率为78.0%,正常形态体胚比例为83.0%。正常形态体胚形成效率可达223.0个/g胚性愈伤,体细胞胚萌发率可达47.2%。相较于单一成熟培养基,缩短成熟时间,使体胚生成更同步,并提高了体胚产量和质量。为落叶松体胚再生的商业化提供了途径,为大规模化育种繁殖、生理生化研究和转基因改良带来极大的方便,具有较大实际应用价值。     

星点设计-响应面法优化丹参花粉离体萌发培养条件的研究

以BK为基本培养基,在单因素试验的基础上,采用星点设计-响应面优化山东丹参、川丹参花粉离体培养,以花粉萌发率为响应指标,研究培养温度、蔗糖浓度、硼酸浓度与萌发率之间的响应面关系,优化花粉离体培养的条件。研究结果:温度、蔗糖浓度和硼酸浓度对山东丹参和川丹参花粉萌发率的影响均达到极显著水平(p0.05),响应面优化后的最佳培养条件为:山东丹参BK+温度21.87℃+蔗糖151.20 g/L+硼酸273.83 mg/L,花粉萌发率的理论值为90.30%;川丹参BK+温度26.28℃+蔗糖133.81 g/L+硼酸237.71 mg/L,花粉萌发率的理论值为68.19%。验证得到二者萌发率分别为89.65%、66.31%。试验确立的数学模型的实测值与预测值相对偏差较小分别为-1.8%、-2.2%,可正确预测培养条件对花粉萌发率的影响,同时验证了星点设计-响应面优化丹参花粉离体培养条件优化方法模型的可靠性。该研究结果为今后进一步开展丹参花粉体外保存、人工控制授粉、选育优良杂交新品种以及川丹参不育机制的研究等提供了理论基础。     

木槿花粉活力检测方法筛选

摘 要：以2个木槿（Hibiscus syriacus）品种花粉为材料,用TTC法和离体萌发法对木槿花粉活力进行了检测。结果表明：木槿花粉活力检测不适合用TTC法;以木槿花粉为外植体,采用蔗糖悬浮溶液为培养基,确定适合木槿花粉萌发的条件为15%蔗糖溶液+15 mg/L硼酸在30 ℃恒温培养箱中培育0.5 h即开始开始萌发。     

基于花粉人工培养法下的含笑花粉活力研究

以含笑(Michelia figo)花粉为供试材料,采用花粉人工培养法研究了含笑花粉离体萌发的最优条件。结果表明:在一定浓度范围内,蔗糖和硼酸均可促进含笑花粉萌发,其最适浓度分别为100g/L和50 mg/L,含笑花粉萌发率分别为23.33%和48.62%;花粉最佳萌发温度为25℃,萌发率达50.18%。此外,花粉萌发L933正交试验结果表明,花粉萌发的最佳组合为130g/L蔗糖+80mg/L硼酸+28℃,萌发率可达67.57%。     

茉莉花粉离体培养萌发及花粉管生长特性研究

为了揭示茉莉花粉育性并为其活力检测提供一种高效方法,研究了取粉时间、基本培养基种类及不同添加物浓度、pH值、温度、光照、时间等因素对花粉离体培养萌发和花粉管生长的影响,并应用扫描电子显微镜观察了花粉在柱头上的萌发情况,以对检测方法进行验证。结果显示,早上8：00-9：00所取花粉活力最高,适宜萌发的培养基为BK（成分为100 mg/L的H3BO3、100 mg/L的KNO3、200 mg/L的MgSO4·7H2O和300 mg/L的Ca（NO3）2·4H2O）＋蔗糖80 g/L＋PEG4000120 g/L,适宜的pH值6．0,最佳培养温度为25～30℃、光照为35～50μmol/（ m2· s）、时间为3～4 h。相关性分析发现,花粉萌发和花粉管生长均与光照强度和培养时间呈极显著正相关（P＜0．01）,与培养基pH值呈正相关、与蔗糖和PEG4000浓度均呈负相关、与培养温度分别呈负相关和正相关,但相关性均未达显著水平（P＞0．05）。研究表明,茉莉花粉总体上活力较低,离体培养萌发不失为一种简单、快速、可靠的检测方法,但应注意对培养条件的选择和优化以达到最佳效果。     

赤霉素对移栽独一味花粉体外萌发的影响研究

目的:研究移栽独一味花粉离体萌发的影响因素.方法:用不同浓度蔗糖和GA3对独一味进行花粉萌发试验,研究培养基及GA3对移栽独一味花粉的影响.结果:独一味花粉萌发最适宜的蔗糖浓度为12.5％,最适宜GA3浓度为0.1 mg/L,其萌发率最高可迭76％;0.05 mg/L GA3对独一味花粉萌发有一定的影响;结论:适宜的GA3能够促进独一味花粉的体外萌发.     

适宜水稻花粉萌发的液体培养基的优化

花粉萌发率是检测花粉活力的一个重要指标,但实践中还缺少便捷、可靠的水稻花粉萌发率测定方法。本研究在前人研究基础上,采用液体培养基对相关培养条件进行了优化。结果表明,采用155g/L蔗糖+20mg/L H3BO3+40mg/L CaCl2+5 mg/L VB1相配合的培养基较适合两系杂交中稻两优818花粉的萌发,萌发率最高可达63.78%。此外,该培养方法具有培养条件要求不高、发芽结果稳定性好、培养基分布均匀等优点。