海带多糖和枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响

在羊精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度的海带多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0mg/mL)、枸杞多糖(0、2.0、4.0、6.0、8.0mg/mL)以及联合添加海带多糖与枸杞多糖(1.0+0、0+4.0、0.5+2.0、0.5+4.0、1.0+2.0、1.0+4.0mg/mL),比较解冻后精液品质(精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性等),以研究海带多糖、枸杞多糖以及海带多糖和枸杞多糖联合应用对羊精液的冷冻保存效果。结果表明:在山羊精液冷冻稀释液中添加一定浓度的海带多糖和枸杞多糖,均能提高山羊精液冻融后的品质,其中二者添加的最适浓度分别为1.0mg/mL、4.0mg/mL;联合添加海带多糖和枸杞多糖能够提高山羊精子活率、质膜完整率、顶体完整率,其中较佳浓度组合为(1.0+2.0)mg/mL组合与(0.5+4.0)mg/mL组合。     

红景天多糖对牛精液冷冻效果影响的研究

为了进一步提高冷冻-解冻后牛精液品质和精子抵抗低温打击的能力,试验将0.02,0.04,0.06,0.08,0.1mg/mL5个浓度梯度的红景天多糖分别添加到牛精液冷冻稀释液中,比较了不同浓度红景天多糖对牛精液冷冻后精子质量的影响。结果表明:红景天多糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高牛精液的冷冻效果,当添加量为0.06mg/mL时,效果良好,与对照组比较活率提高了13.8%,差异显著(P0.05);顶体完整率、质膜完整率和精子运动的各项参数均高于对照组,差异显著(P0.05)。说明红景天多糖对牛精子冷冻保护效果良好。     

红景天多糖对藏猪精液冻后品质及精子基因组DNA甲基化的影响

在藏猪精液的冷冻液中添加不同质量浓度的红景天多糖(0,2,4,6,8,10mg/L),制成高密度细管冻精,以冷冻解冻后精子活率、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为精液品质的评价指标,筛选最适红景天多糖添加质量浓度;用甲基化荧光定量法检测3组(鲜精组、未添加组、最适添加组)精子基因组DNA甲基化的水平。结果显示:添加红景天多糖质量浓度为6mg/L组的精子活率显著高于其他组(P<0.05),该组精子畸形率、精子顶体完整率、精子质膜完整率也显著好于未添加组(P<0.05);这3组精子基因组的DNA甲基化水平(0.610 5±0.080 0,0.945 7±0.043 7,0.680 2±0.051 0)中,最适添加组虽显著高于鲜精组(P<0.05),但却显著低于未添加组(P<0.05)。结果表明:在藏猪精液冷冻液中添加质量浓度6mg/L的红景天多糖不仅可以明显改善藏猪精液冻后品质,而且可以明显减少冷冻对藏猪精子基因组DNA甲基化水平的影响,这将为提高藏猪精液冷冻保存效果的进一步研究提供参考。     

海带多糖对猪精液冷冻效果影响的研究

为了寻找一种可较好地保护精子的天然抗冻剂,通过在猪精液的冷冻基础液中添加不同浓度的海带多糖,研究冷冻后猪精子的活率及线粒体活性、精子质膜和顶体的完整性等各项参数指标,探讨不同浓度的海带多糖对猪精液冷冻保存效果。     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

不同保护剂对藏羊冷冻精液品质影响的研究

本实验研究了不同保护剂对藏羊细管冷冻精液的品质影响。结果表明:含T ris的柠檬酸盐缓冲液可以提高冷冻-解冻后的精子活率(0.41±3.23)和精子顶体完整率(74.45±1.45),以等体积乙二醇替代甘油作防冻剂制作的细管冷冻精液,解冻后的精子活率(0.41±2.87)和顶体完整率(81.23±1.45)。稀释液中添加维生素B12对提高冷冻后精子活率(0.44±3.26)与保护顶体完整率(83.33±1.93)具有良好的作用。     

海带多糖对猪精子冷冻效果影响的研究

精子在冷冻解冻过程中易发生过氧化反应,冷冻解冻后活率、受精率等均大幅下降.海带多糖为褐藻糖胶,是一系列组成相似的杂多糖混合物,具有抗突变和抗脂质过氧化等作用,并且可提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性,对其在很多领域都进行了相关的研究和探讨,但在猪精子冷冻方面的应用尚未见相关报道.     

鸵鸟卵黄对猪精子冷冻后质量的影响

为了提高猪冷冻精液品质和精子抵抗低温打击的能力,本研究以5%、10%、15%、20%和25%等不同浓度的鸵鸟卵黄作为冷冻保护剂,以20%的鸡蛋卵黄和20%的鸽蛋卵黄为对照,将冷冻-解冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率作为评价指标,分析鸵鸟卵黄对猪精子的抗冷冻保护作用。结果表明：稀释液中添加20%鸽蛋卵黄时,精子活率、顶体完整率和质膜完整性分别为52.11%、55.62%和54.94%,显著高于其他组（P〈0.05）。虽然稀释液中添加15%鸵鸟卵黄时,冷冻-解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率显著高于5%、10%、20%和25%鸵鸟卵黄组,但仍然显著低于稀释液中添加20%鸽蛋卵黄处理组。本研究表明,鸵鸟卵黄在冷冻过程中对猪精子具有一定的保护作用,但相对于鸽子蛋和鸡蛋卵黄效果并不理想。     

水苏糖对猪精液冷冻保存效果的影响

为了提高猪精液冷冻保存效果．试验采用在传统的ZO稀释液基础上分别添加1％、2％、4％、8％的水苏糖的方法．研究不同浓度水苏糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明,水苏糖相对于ZO稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果,其最佳添加浓度为4％,冷冻一解冻后猪精子活力、活率、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高,水苏糖可以明显抑制精子获能,获能处理前精子获能率仅为32．4％,而获能处理后降为28．6％。有利于抑制精子获能,精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为3％,说明水苏糖与甘油共同作用能在冷冻一解冻过程更加有效地保护精子。     

五种糖类对犬精液冷冻保存效果的研究

选取8只身体健康、性欲旺盛的比格公犬,采集其精液,对鲜精进行质量检测,主要包括颜色、射精量、精子活率、活力和pH。选取精子活率达到70%以上犬精液用于后续精液冷冻试验。分别将含有葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖和海藻糖的精液稀释液与精液按照1∶2的比例进行稀释。经冷冻解冻后,进行活率、活力、质膜完整性和顶体完整性的精子质量检测。通过对新鲜精液进行品质检测,结果显示5只合格用犬的平均射精量为2.85 mL,密度为2.01×10~8个/mL,pH为6.56。含有果糖的冷冻稀释液中精子活率和活力最高,分别达59.90%和54.00%;其次是添加葡萄糖和乳糖的稀释液中活率较高,分别为59.21%和56.73%,且两组稀释液中精子解冻后活力均为52.00%。进一步评估精子解冻后质膜完整率,结果显示葡萄糖和果糖组显著高于其他组,分别达48.73%和49.52%;而蔗糖添加组精子质膜完整率最低,为42.21%。稀释液中添加果糖的精子解冻后顶体完整率显著高于其他组,而添加蔗糖组顶体完整率最低。在比格犬的精液冷冻保存中,添加果糖的冷冻稀释液能显著提高精子的活率和活力,从而达到提高冻精质量的效果。     

五种糖对马精子低温保存及冷冻效果的影响

为了研究单独或组合添加葡萄糖、果糖、乳糖、棉籽糖及海藻糖对马精子低温和冷冻保存效果的影响,试验选取4匹6~12岁公马进行精液收集,经离心浓缩处理后置于含有不同糖的低温或冷冻稀释液中保存,低温保存1,24,48,72,96小时时检测活精子比例(total motility,TM)和直线运动精子比例(progressive motility,PM),评价糖对精子低温保存效果的影响,冷冻后精液于37℃水浴解冻后检测TM、PM、质膜完整率及高线粒体膜电势评价不同糖对精子冷冻效果的影响。结果表明:单独添加乳糖和棉籽糖组低温保存24 h后精液TM和PM明显低于葡萄糖、果糖及海藻糖组,葡萄糖、乳糖分别与其他几种糖两两组合低温保存1,24,48,72,96小时时精液TM和PM差异不显著,单独添加棉籽糖组精子冻融后TM和PM显著低于果糖和海藻糖组(P0.05),但精子质膜完整率和高线粒体膜电势显著高于其他各组(P0.05),单独添加葡萄糖、果糖、海藻糖及乳糖组精子冻融后TM、PM及高线粒体膜电势均无显著差异(P0.05),添加果糖组冻融后精子质膜完整性显著低于葡萄糖组(P0.05)。不同糖组合精子冻融后,乳糖+葡萄糖+海藻糖组精子质膜完整率显著高于乳糖+果糖组、乳糖+海藻糖组、乳糖+葡萄糖+果糖组、乳糖+果糖+海藻糖组(P0.05),乳糖+葡萄糖+果糖组精子高线粒体膜电势显著高于乳糖+果糖组(P0.05),与其他组相比差异不显著(P0.05)。仅含棉籽糖、乳糖或棉籽糖+乳糖的稀释液不适合于马精液低温保存,不同糖组合并没有获得比经典葡萄糖+乳糖更好的低温和冷冻保存效果。     

不同浓度大豆卵磷脂替代蛋黄对东佛里生奶绵羊精液冷冻保存效果的影响

本试验皆在研究添加不同浓度大豆卵磷脂（SL）冷冻保存东佛里生奶绵羊精液的效果。我们在Tris基础稀释液中,添加18%蛋黄为对照组,添加0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%SL设为试验组,检测冷冻精液解冻后的精子活率和顶体完整率。结果显示,添加0.5%、2.5% SL冷冻稀释液稀释的精液,解冻后精子活率和顶体完整率与其他组之间存在显著差异（P<0.05）;添加18%蛋黄和1%～2% SL冷冻稀释液稀释的精液,冷冻解冻后精子活率和顶体完整率之间无显著差异（P>0.05）;添加18%蛋黄和1.0%～1.5% SL冷冻稀释液稀释后的精液,进行人工授精后母羊的妊娠率与对照组无显著差异（P>0.05）。因此,大豆卵磷脂可以作为冷冻保护剂用于东佛里生奶绵羊精液的冷冻保存,其最佳添加浓度为1～2%（g／L）。     

稀释液中添加精氨酸和牛血清白蛋白对驴冻精品质的影响研究

为了探究在驴精液冷冻稀释液中添加不同浓度的精氨酸和牛血清白蛋白(BSA)对德州驴冷冻精液品质的影响,并找出两种试剂混合最佳添加浓度,试验用分别添加不同浓度的精氨酸(0.5,1.0,1.5,2.0,2.5 mg/mL)和BSA(1,2,3,4,5 mg/mL)的常规驴精液冷冻稀释液对德州驴精液进行稀释,稀释后的精液液氮冷冻保存30 d后解冻,检测精液的精子活率、顶体完整率及质膜完整率,找出最佳浓度;然后选择精氨酸和BSA最佳浓度及其左右相邻浓度,两两组合成9个浓度组合对德州驴精液进行稀释,然后根据上述步骤找出最佳浓度组合。结果表明：单独添加精氨酸时,浓度为1.5 mg/mL时精液的精子活率、顶体完整率及质膜完整率较优于其他浓度,其中顶体完整率与未添加精氨酸相比显著提高(P<0.05)。单独添加BSA时,浓度为3 mg/mL时精液的精子活率、质膜完整率较优于其他浓度,但对顶体完整率无显著改善作用,其中精子活率、顶体完整率与未添加BSA相比极显著提高(P<0.01);精氨酸和BSA联合添加时(除1.5 mg/mL×3 mg/mL、1.5 mg/mL×4 mg/mL、2.0 mg/...     

不同家禽卵黄对德国牧羊犬精液冷冻的影响

为了探索不同家禽卵黄在德国牧羊犬精液冷冻中的应用效果,分别在精液冷冻稀释液中添加不同家禽(鸽、鸡、鸭、鹅和鹌鹑)和不同浓度(10%、15%、20%、25%和30%)的卵黄,并分别对冷冻前和解冻后的精子活率、顶体完整率和畸形率进行比较分析。结果:在德国牧羊犬精液冷冻稀释液中加入相同浓度的5种不同家禽卵黄,家鸽组冻后活率、顶体完整率和畸形率分别为(52.0±2.1)%、(54.3±3.7)%和(27.7±1.8)%,对德国牧羊犬精液冷冻有最佳的保护效果,其最佳浓度为20%。因此,鸽卵黄可替代鸡卵黄,作为冷冻稀释液的组成成分,用于德国牧羊犬的精液冷冻。     

稀释液中添加维生素E对和田羊冷冻精液品质的影响

在和田羊精液冷冻稀释液中添加不同浓度的维生素E,比较其对和田羊冷冻精液品质的影响。结果表明：维生素E添加量为1．2mg／mL时精子解冻后活率（43．56％）显著高于对照组（34．14％）和其他各添加组（P〈0．05）;顶体完整率（51．39％）极显著高于对照组（40．12％）和其他各添加组（P〈0．01）。说明在冷冻精液稀释液中添加适当浓度维生素E可以减缓冷冻对精子的伤害,有效提高和田羊冷冻一解冻后精子活率,改善冷冻精液的品质。     

不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60 mmol/mL)、维生素E(0、0.2、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/mL)、SOD(0、100、200、400、600 IU/mL)、CAT(0、50、100、200、300 IU/mL)、GSH(0、1、5、10 mmol/mL)等抗氧化剂,检测冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子MDA含量,以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明:在冷冻稀释液中联合添加100 IU/mLSOD和200 IU/mL CAT明显提高冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.01)。     

辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响

旨在探讨辅酶Q10对绒山羊精液冷冻保存效果的影响。利用添加不同浓度辅酶Q10(4、40、400?滋g/mL)的精液冷冻稀释液对绒山羊精液样本进行冷冻保存,待冷冻精液解冻后,采用流式细胞仪和计算机辅助精液分析系统(CASAS)分别检测不同精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率、DNA完整率、线粒体膜电位和细胞内ROS水平。结果表明,当冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL辅酶Q10时,经历冷冻—解冻过程的绒山羊精液样本的精子活率、质膜完整率、顶体完整率均显著高于对照组(P<0.05);在冷冻稀释液中添加浓度为40μg/mL或400μg/mL的辅酶Q10均能显著提高线粒体膜电位并降低细胞内ROS水平(P<0.05)。综上所述,在冷冻稀释液中添加40μg/mL的辅酶Q10能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。     

香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的研究

为了研究香菇多糖对牛精液冷冻保存效果的影响,在牛精液冷冻稀释液中添加不同质量浓度(1、5、25、125、625mg/L)的香菇多糖,冻融后检测牛精子活率、动力学参数以及顶体完整率、质膜完整率等。结果表明,25 mg/L组的冷冻保存效果最好,精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别达到42.04%、43.57%和63.87%,显著高于对照组(P0.05)。而过高浓度的香菇多糖(125、625mg/L)则显著降低了冻融精子的质量。牛精液冷冻稀释液中添加香菇多糖具有显著的保护作用,其最佳添加浓度为25mg/L。     

大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究

试验旨在探究在山羊精液冷冻保存过程中单独使用大豆卵磷脂(SL)、卵黄(EY)及其联合使用的效果。以20%EY(V/V)和2%SL(m/V)为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷冻解冻后分别对精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性进行检测,同时利用试剂盒检测活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量变化。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后该组的精子活力、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组无显著性差异,较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量和SOD活性无显著性差异,但精子抗氧化能力较另外2个联合添加组显著提高。综上,山羊精液冷冻基础稀释液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。     

奶牛冷冻精液新型稀释液的开发与利用

本试验旨在探究牛冷冻精液稀释液中添加不同物质对精液品质及人工授精能力的影响。方法为在牛冷冻精液稀释液中添加不同成分的精子质膜保护剂、顶体完整保护剂、线粒体保护剂,然后检测精子存活时间、动力学参数、ATP含量和人工授精的情期受胎率。结果表明,白藜芦醇、褪黑激素、适宜浓度的半胱胺可显著增加冷冻-解冻后的精子活力;适宜浓度的脱盐乳清粉、透明质酸、牛血清白蛋白均能有效保护精子顶体;适宜浓度的红景天多糖、谷氨酰胺、海藻糖、可显著提高精子线粒体能量水平,牛磺酸可显著提高冷冻精液活力。利用上述物质按一定比例配制的新型稀释液可以保护精子顶体膜和线粒体膜完整性,较常规冷冻精液解冻后精子体外存活时间延长6～8h;经人工授精试验,青年牛情期受胎率、经产牛情期受胎率比对照高1.9个百分点、3.1个百分点,具备推广应用价值。