三株柑橘溃疡病生防内生细菌对脐橙感染溃疡病后几种防御酶活性的影响

防御酶活性是寄主防卫反应能力的重要指标,很多生防因子可引起植物的防御酶活性增强。在前期工作中筛选到3株对柑橘溃疡病有防治效果的内生细菌Bacillus sp.、GN222、Kosakonia cowanii GN223和Bacillus subtilis GN232,为明确其防病机理,测定了3株细菌对纽荷尔脐橙感染溃疡病菌后几种防御酶活性的影响。结果表明,在感染溃疡病菌的情况下,3株内生细菌均可不同程度地诱导和增强脐橙树体内防御酶的活性。其中内生细菌对树体多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)的诱导强度小于溃疡病菌对这2种酶的诱导;菌株GN222对树体过氧化氢酶(CAT)的增强作用明显强于其他菌株;菌株GN223对树体过氧化物酶(POD)的诱导作用强于其他菌株;各处理中SOD活性总体较弱。总之,待测内生细菌对脐橙感染溃疡病菌过程中防御酶具有一定的诱导作用,但酶活性变化的时间和幅度因内生菌株不同而有明显的差异。试验结果可为3株内生细菌应用于柑橘溃疡病的生物防治提供理论依据。     

油菜内生细菌yc8发酵条件优化研究

从山西太谷、运城采集的油菜中分离得到40株植物内生细菌,经过初步筛选得到具有生防潜力的菌株yc8,经鉴定为环状芽孢杆菌(B.circulans).采用正交试验设计对油菜内生细菌yc8进行营养配方和发酵条件的系统研究.通过yc8发酵液中细菌浓度、拮抗物质质量浓度和yc8发酵液对油菜菌核病[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary]的抑菌作用综合评定,得到优化配方为:麦芽糖(30g/L)、牛肉膏(50g/L)、酵母粉(7g/L)、MnSO4(2g/L)、FeSO4(1g/L)、ZnSO4(2g/L)、CaSO4(2g/L)、CuSO4(2g/L)、K2HPO4(2g/L)、KAl(SO4)2(1g/L)、发酵温度28℃、装液量40%、摇床转数150r/min、发酵液pH=7.5,使环状芽孢杆菌在摇瓶发酵条件产生拮抗物质质量浓度达到为725.1μg/mL和对油菜菌核病茵的平板抑菌率达到85.3%.     

苦参内生拮抗细菌B36菌株最适发酵条件的研究

为提高拮抗菌株B36发酵生产的菌量和抗菌物质的产率,通过单因子试验和正交试验方法,对其摇床发酵培养基成分及发酵条件进行研究。结果表明,最适宜发酵条件为发酵温度28℃,转速150r·min^-1,接种量20％,初始pH值9．0,在250mL三角瓶的装液量为50mL,发酵36h。最佳培养基组成为葡萄糖2．0％,酵母粉0．5％,大豆粉0．5％,NHaNO3 0．5％,CaCO31．0％。     

藜麦内生细菌LS3发酵条件优化及其抑菌机制初探

藜麦黑茎病是危害藜麦的主要病害之一,可引起藜麦倒伏、籽粒空瘪和不育,严重影响藜麦籽粒的产量和品质。前期从藜麦穗中分离获得1株对藜麦黑茎病菌（Ascochyta caulina）具有良好抑菌活性的内生细菌,命名为LS3,为进一步开发应用该菌株,采用单因素试验法对LS3菌株的最佳培养基、碳源、氮源、温度进行筛选,对其发酵条件进行优化,采用鉴定培养基法对LS3菌株的抑菌活性物质进行检测,对其抑菌机制进行初探。结果表明,LS3菌株发酵所需最佳培养基为YSP培养基,最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为牛肉膏+酵母粉,发酵最佳温度为28℃。对转速、装液量、接种量、pH以及发酵时间5个因素进行正交发酵优化,结合方差分析,并考虑成本因素,最终确定LS3菌株最佳发酵条件为：转速130 r/min,装液量150 mL/300 mL,接种量1%,pH值7.0,发酵时间96 h。对LS3菌株细胞壁降解酶活性检测发现,LS3菌株可分泌β-1,4-葡聚糖酶和胞外蛋白酶,但不能产生几丁质酶和β-l,3-葡聚糖酶。     

梨树内生拮抗细菌的筛选及发酵条件的研究

以梨黑斑病菌(Alternaria alternata)为指示菌,从梨树木质部分离的8株内生芽孢杆菌中筛选出一株抑菌效果最佳的拮抗菌株LP5。为明确该菌株在发酵生产中的最佳营养组分及发酵条件,运用单因素试验和正交试验方法测定了不同因素下LP5菌株发酵液的OD600值及其抑菌作用。研究结果表明:最有利于菌体生长及抗菌物质积累的营养条件是以含蔗糖1.5%,蛋白胨1.0%,酵母粉0.5%,NaCl 0.5%的液体培养液,最适发酵条件为30℃,pH 7.0,发酵培养48 h~72 h。     

硅酸盐细菌发酵条件的优化

通过正交实验对硅酸盐细菌JXSD-18菌株的发酵条件进行了优化研究,结果表明,比较理想的发酵条件为:摇床转速200 r/m in,起始pH值7.0,温度32℃,装液量30mL,在此条件下硅酸盐细菌的溶磷效果达到最好。     

龙牙百合内生拮抗灰葡萄孢菌细菌的筛选与鉴定及发酵条件优化

采用平板分离法、平板对峙法从龙牙百合内生菌中筛选获得了具有抑制灰葡萄孢菌活性的98号菌,其抑菌率为74%;对98号菌进行生理生化测定及16SrDNA序列分析,鉴定为唐菖蒲伯克霍尔德菌(Burkholderia gladioli)。通过单因素和正交试验优化该菌株的发酵条件和最适发酵培养基配方,结果表明,pH值为7、培养温度为32℃、接种量为发酵液体积的6%、250 mL三角瓶装100 mL牛肉膏蛋白胨液体发酵培养基、180 r/min的摇床培养5 d,其抑菌活性最大;优化后的最适培养基配方为硫酸亚铁0.15 g、玉米粉20 g、牛肉膏15 g,水1 L。     

红绒盖牛肝菌发酵条件及对杨树溃疡病的防治效果

为探究外生菌根真菌的发酵条件,并进行杨树溃疡病的田间防治试验。以红绒盖牛肝菌[ Xerocomus chrysenteron (Bull.： Fr.) Quél]为实验材料,分析不同的接种量、溶解氧及pH值对其液体发酵的影响,发酵产物并用于杨树溃疡病的田间防治。结果表明：接种量7.2％,发酵中后期溶解氧浓度不低于33％,培养基pH保持5.5左右时可有效提高红绒盖牛肝菌菌丝生物量,且缩短了发酵周期;灌根法研究红绒盖牛肝菌对杨树溃疡病的田间防治效果,防治效果可达到54.5％。该实验所得出的红绒盖牛肝菌发酵条件和野外防治数据可为今后该菌株田间应用提供参考。     

植物内生菌对柑橘溃疡病的生物防治作用及应用前景

从植物内生菌的抗病机理及生物防治病害作用方面综述了利用植物内生菌防治柑橘溃疡病的机理与优势,并对其生物防治应用前景进行了展望。     

一株拮抗细菌HJ5高产抗菌物质发酵条件优化

从黄顶菊茎中分离得到的内生细菌H J5,是一株具有拮抗玉米大斑病菌活性的枯草芽孢杆菌.研究发现,H J5菌株通过产生并分泌某种胞外物质发挥拮抗活性.为了增强HJ5菌株发酵产拮抗物质的能力,对HJ5菌株发酵条件进行单因子试验以及正交试验,从而确定了H J5菌株发酵产抗菌活性物质的最佳培养基配方为1％葡萄糖作为碳源、1％大豆蛋白胨作为氮源、0.01％ MnC12作为添加无机盐,初始pH为8.对HJ5菌株发酵工艺参数优化结果为:50/250mL的装液量、2％的接种量、28℃180 r/min振荡培养66h.经发酵条件优化后较基础培养基,HJ5菌株拮抗活性增强了近1倍.     

湘南脐橙柑橘黄龙病的PCR检测及内生细菌的分离

为确保湘南脐橙产业发展安全,严格防控柑橘黄龙病,从湘南地区几个脐橙种植园采集柑橘黄龙病疑似病株样品和健康植株样品,利用文献报道的柑橘黄龙病PCR检测常用引物对样品进行分子检测,并从病株组织中分离内生细菌进行分析鉴定。结果表明:在柑橘黄龙病的常规PCR检测中,湘南脐橙总核酸对P400引物的灵敏度最高,是湘南地区脐橙中柑橘黄龙病害常规PCR检测的最佳引物,其次为P535引物,而OI和16S这2对引物的灵敏度较低;对脐橙中柑橘黄龙病病株组织内生细菌的分离鉴定发现,柑橘中可培养内生细菌主要归类为7个属,分别为短杆菌属(Curtobacterium)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、异常球菌属(Deinococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、甲基杆菌属(Methylobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、芽孢杆菌属(Bacillus);其中,LB和1/10LB培养基中的优势菌属为短杆菌属、鞘氨醇单胞菌属和芽孢杆菌属;而脐橙树叶汁培养基中的优势菌属为短杆菌属、鞘氨醇单胞菌属和微杆菌属。     

具抑菌活性的诺丽内生真菌发酵条件的优化

为了研究发酵条件对诺丽内生真菌M2抑菌性的影响,笔者采用传统方法和ITS rDNA测序方法相结合,将本实验室筛选出的抑菌效果突出的诺丽内生真菌M2初步鉴定为棘孢曲霉（Aspergillus aculeatus）,在NCBI数据库中登录号为MK560191。通过单因素试验和正交设计对内生真菌M2进行发酵优化,筛选出最优发酵条件:（1）内生真菌M2优化后的培养基方案为200 g土豆煮沸30 min浸出液、葡萄糖20 g、硝酸钠5 g、磷酸二氢钾0.2 g、七水合硫酸镁0.2 g、1 000 mL双蒸水;（2）发酵条件为150 mL锥形瓶装液50 mL、温度25 ℃、培养基初始pH8、转速170 r·min?1。     

内生细菌作为生防因子的研究进展

详细综述了内生细菌作为生防因子的四大优点即占据有利的生态位，能经受住植物的作用与病菌直接作用 及作为外源基因的载体等。阐明了其生防机制，包括产生抗生素、某些酶类等次生物质，诱导植物产生ISR，促进植物生长，与病菌竞争生态位等，另外对内生细菌在植物体内的转运情况，及对未来内生菌大田应用需要解决的问题也进行了讨论。     

番茄内生放线菌Fq24发酵条件的优化

【目的】确定番茄内生放线菌Fq24的最佳发酵液培养基配方和最佳发酵条件。【方法】通过测定Fq24菌株发酵液对灰葡萄孢的抑菌作用,研究了Fq24菌株在不同发酵培养基、培养时间、接种量、装液量、起始pH、培养温度、碳源、氮源条件下的生长情况及其代谢物活性,以确定其最佳发酵条件。【结果】Fq24发酵液培养基的最适配方为:葡萄糖20 g,黄豆饼粉20 g,玉米面30 g,淀粉10 g,牛肉膏1 g,KNO32 g,NaCl 2 g,MgSO40.3 g,CaCO36g,KH2PO40.2 g,H2O 1 000 mL;筛选出的最佳发酵条件为:培养时间7 d,接种量10%,500 mL容量瓶中装液量100mL,起始pH值6.5,培养温度28℃,碳、氮源分别为葡萄糖和KNO3。【结论】在最佳发酵液培养基和培养条件下,Fq24菌株发酵液对灰葡萄孢的抑菌率可达到92.1%。     

新疆块根芍药内生菌XJU-PA-6产灵菌红素发酵条件的优化

[目的]通过对块根芍药内生菌XJU-PA-6产灵菌红素发酵条件的优化,提高其产灵菌红素的能力。[方法]通过单因素试验初步研究碳源、氮源、无机离子、氨基酸、植物添加油及接种量对灵菌红素合成的影响,确定提高灵菌红素产率的最优培养基配方和培养条件。[结果]通过优化试验,菌株XJU-PA-6产灵菌红素最佳发酵条件:40 g/L麦芽糖,20 g/L蛋白胨,0.01 mol/L Mg2+,0.001 mol/L Fe3+,1%脯氨酸,6%葵花油,28℃,180 r/min,振荡培养2 d。在此优化条件下,灵菌红素产量达到290.92 mg/L,比原来提高3.896倍。[结论]优化后的MEA培养基是一种适合内生菌XJU-PA-6生产灵菌红素的优良培养基。     

烟草赤星病高效生防内生细菌的分离筛选及发酵培养条件优化

为提高烟叶安全,探索曲靖烟区烟草赤星病生物防控技术,研究烟草内生菌株对烟草赤星病的防控作用。以曲靖烟区分离得到的烟草赤星病病原菌为靶标,采用平板对峙培养法从健康烟株体内分离筛选出生防内生细菌,并应用Design-Expert软件,采用响应面法对其进行发酵培养基的优化。结果表明,从曲靖烟区健康烟株体内分离筛选出15株对烟草赤星病病原真菌链格孢菌具有拮抗作用的菌株,其中编号为YWF-19-0004、YWF-19-0065、YWF-19-0068、YWF-19-0070、YWF-19-0071的5株内生细菌抑菌带宽≥10 mm、抑菌率≥50%;采用响应面法获得YWF-19-0068菌株的优化培养基配方：大豆粉浓度14 g/L,蛋白胨浓度2 g/L,鱼粉浓度2 g/L,蔗糖浓度11 g/L,玉米粉浓度为7 g/L,碳酸钙浓度5 g/L,氯化钠浓度0.3 g/L,磷酸二氢钾浓度0.3 g/L,磷酸氢二钾浓度0.3 g/L,硫酸锰浓度0.2 g/L,硫酸镁浓度0.3 g/L,硫酸铵浓度0.5 g/L,利用优化培养基进行发酵,YWF-19-0068菌株的菌量是基础培养基发酵所得菌量的4.47倍,说明...     

9种药剂对柑橘溃疡病的防效（英文）

为筛选出适合柑橘溃疡病防治的有效药剂,研究了9种药剂对锦红冰糖橙溃疡病的防治效果。结果表明,77%硫酸铜钙WP、30%王铜SC、46%氢氧化铜WG、30%噻菌铜SC、40%噻唑锌SC对柑橘溃疡病的综合防治效果较好,6%噻霉酮WG一般,3%中生菌素AS、2%春雷霉素AS、33.5%喹啉铜SC的防治效果较差。生产应用中,可以择优轮换使用,或选择复配制剂。此外,在药剂使用中可以考虑加入助剂,是增强药效、减少用药量、延缓抗药性产生的有效途径。     

无花果活性内生细菌的分离鉴定及生长条件优化

本研究选择无花果作为试验材料,从无花果汁中分离鉴定活性内生细菌,并优化其生长条件。结果表明:采用平板对峙法从无花果汁中筛选到2株活性内生细菌,通过分子生物学方法鉴定均为芽孢杆菌属细菌,根据生理生化特征和芽孢杆菌命名依据,分别命名为Bacillus WHG3251和Bacillus WHG3252;对2株活性内生细菌进行革兰氏染色和芽孢染色,2株活性内生细菌均为革兰氏阳性菌、杆状,Bacillus WHG3251芽孢形成时间为25 h,Bacillus WHG3252芽孢形成时间为26 h;Bacillus WHG3251和Bacillus WHG3252生长较旺盛的时间分别为96 h和84 h,培养基最适初始pH值分别为7和6,最适生长温度为30℃;Cr⁶⁺浓度为10 mg/L时对无花果活性内生细菌的生长有促进作用,Cr⁶⁺浓度高于20 mg/L后表现为抑制作用。     

榄仁内生真菌JLR6的鉴定及其发酵条件优化

榄仁是热带及亚热带地区的一种常见药用植物,目前关于榄仁内生真菌的研究较少。从榄仁体内分离出一株内生真菌JLR6,利用对峙生长法测试JLR6对香蕉炭疽菌及芒果炭疽菌的拮抗活性,通过ITS序列分析对其进行初步鉴定,并利用Plackett-Burman设计结合响应面的方法对菌株JLR6的发酵条件进行了优化。结果表明:菌株JLR6对香蕉炭疽菌及芒果炭疽菌有明显的拮抗活性,皿内抑制率分别为45.50%和57.90%,通过ITS序列分析,初步将JLR6鉴定为Diaporthe sp.;优化后菌株JLR6的最适发酵条件为细菌学蛋白胨10 g/L、葡萄糖20 g/L、酵母粉17.82 g/L、装液量87.59 m L、接种量9.06%,于180 r/min、28℃条件下培养7 d,生物量达到4.79 g/L。