一种高质量葡萄基因组DNA提取方法

针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,对比研究了利用植物总DNA提取试剂盒和改良CTAB法提取葡萄总DNA.结果表明:改良的CTAB法能够从不同葡萄品种和不同生长时期的叶片中获得高质量、完整性好的总DNA,其OD260/OD260介于1.7～1.9之间,无降解现象,RNA去除干净,完全适于进行PCR和酶切等研究.     

一种高质量枇杷基因组DNA提取方法

针对枇杷叶片富含多糖、多酚及其它次生代谢物质的特点,采用改良CTAB法,通过对抽提液、沉淀液和解离缓冲液进行逐步筛选,对其基因组总DNA进行提取,并对DNA进行电泳检测、含量测定和ISSR分析。结果表明:该方法从‘大五星’枇杷幼叶、成熟叶片、花药、组培苗,与幼果中的胚珠,以及栎叶枇杷的幼叶与成熟叶片7种材料提取的基因组总DNA纯度和完整性都较好,OD260/OD280值均在1.8~2.0之间,无降解现象,RNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其ISSR分析条带清晰,多态性好,表明此方法提取的枇杷基因组总DNA质量较高。     

高质量枣基因组DNA提取方法

主要针对枣组织中多糖严重干扰基因组DNA提取质量的问题,比较了常规CTAB法、TE3D法和改良CTAB法3种方法的处理效果。结果表明:常规CTAB法提取DNA难以除去多糖类杂质;TE3D法提取的DNA多糖杂质少,但产率低,易降解,褐化严重;改良CTAB法提取DNA产率高,无明显降解,杂质少,D260nm/D280nm比值1.80左右,通过基因组DNA-AFLP指纹图谱分析,完全满足实验要求。并对改良CTAB法的关键步骤作了具体分析讨论。     

部分梨品种基因组DNA不同提取方法的比较

以不同梨品种为材料,分别采用改良CTAB法、改良SDS法、SDS-CTAB和高盐低pH值法对梨基因组DNA进行了提取.结果表明：采用改良CTAB法在提取各种梨基因组DNA过程中表现最好且纯度最高;SDS法提取的基因组DNA产率最高,但纯度较低;高盐低pH值法产率和纯度均最低.     

一种快速提取南瓜大群体基因组DNA的方法

基因型鉴定是作物分子标记辅助育种和基因功能遗传分析中十分重要的环节,此项技术的应用正日渐频繁,因而迫切需要一种高通量筛选的方法。本试验以南瓜中筛选到的互补型SSR引物为验证手段,在种子阶段比较了钻孔法和萌芽法采用碱煮法提取DNA的效果,并且在成熟植株阶段验证了各组织部位采用碱煮法提取DNA的效果。结果表明:使用萌芽的南瓜种子根尖以碱煮法提取DNA是可用于种子纯度测定的快速方法;成熟植株各部位采用碱煮法提取DNA均可用于植株基因型筛选。     

高通量提取桃树叶片组织基因组DNA的研究

以1个桃树杂交后代群体中不同成熟度的桃叶片组织为试材,以商品试剂盒为对照,采用高通量提取DNA的方法,研究了提取试剂、研磨仪使用钢珠大小和震动频率、时间等参数对提取DNA产物产率、质量的影响。结果表明:在常用的CTAB中添加0.3%的抗坏血酸,并提高PVP浓度至4%,NaCl浓度至12%,能有效解决试剂盒提取过程中出现色素及蛋白质、多糖等杂质问题。提取方法和研磨方法优化组合,筛选获得高通量提取不同成熟度桃叶片DNA的方法,表明改良的提取方法采用5mm研磨珠、60s、30次/s或5mm研磨珠、60s、25次/s的研磨预处理,不仅省时省工,适用不同成熟度的桃叶片组织,而且提取效果最好,产率最高,质量符合基因组测序要求。该研究为高效提取DNA提供了技术依据。     

扁桃基因组DNA的提取

通过改良 CTAB 法提取扁桃 4 个品种的基因组DNA.经检测,所提样品OD260/OD280比值在1.68～1.97之间,得率为272～580μg/mL,SSR-PCR检测条带清晰,说明DNA质量较高,完全满足深入的分子生物学研究需要.     

天竺葵基因组DNA五种提取方法的比较

以天竺葵为试材,比较分析了CTAB法、简单法、高盐低pH值法、CTAB-SDS法、SDS法对天竺葵叶基因组DNA提取的效果。结果表明：5种方法提取的天竺葵总DNA在纯度上有很大的差别。所得到的DNA提取纯度依次为简单法、CTAB-SDS法、CTAB法、高盐低pH法、SDS法。酶切结果为简单法、CTAB法效果最好,其次SDS法,高盐低pH法、CTAB-SDS法不能被EcoRI酶完全消化。经综合的比较分析,认为简单法是最佳的提取方法。因其步骤简单、快捷,得到的基因组DNA降解少、杂质含量少,能获得高质量的DNA模板,可以用于分子生物学试验研究。     

扩展青霉基因组DNA五种提取方法比较

为寻找一种适合于扩展青霉基因组DNA的提取方法,比较了固体培养、液体静置培养和液体振荡培养3种培养方式的提取效果,分别采用氯化苄法、蜗牛酶法、CTAB法、SDS法及异硫氰酸胍法提取扩展青霉菌基因组DNA,经DNA质量浓度测定及电泳分析,比较5种方法的差异,并利用扩展青霉的多聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase)基因内一段保守序列,设计PCR引物,扩增大小为288 bp的特异目的基因,检测其灵敏性.结果表明:固体培养的方式较适合扩展青霉基因组DNA的提取,另外5种提取方法均能提取出扩展青霉菌基因组DNA,扩增出目的条带,其中氯化苄法和蜗牛酶法所提DNA的纯度均较好,但蜗牛酶法所提DNA量较少.因此,氯化苄法是5种提取方法中最可靠的DNA提取方法,所提DNA浓度高、纯度好、结果稳定,可作为PCR反应的模板进行特异性扩增,且该方法的最低检测限大约为1.01×10-1μg/mL.     

一种测定梨果实体积的新方法

利用连通器原理和虹吸现象,构建一种测定果实体积的简便装置,并通过建立计算模型,可便捷、快速、准确地测定形状不规则的梨果实体积。本方法无需摘下果实,可实现连续、定点、实时测定长在树上的果实体积变化,可准确跟踪果实个体的生长发育状况,避免了果实生长过程中因个体差异造成的误差,对于研究果实的昼夜生长及季节性生长动态均有重要的实用价值。此外,本方法还适用于监测其他作物果实体积膨大动态的特性,具有非常广阔的应用前景。     

辣椒基因组DNA提取方法研究

本项研究采用SDS法、CTAB法和高盐低pH法对辣椒(CapsicumannuumL.)叶片基因组DNA进行提取;紫外吸收检测法与琼脂糖凝胶电泳法对DNA的纯度进行检测。紫外吸收检测结果表明,SDS法提取的辣椒叶片DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,其A260/A280在1.771～1.912之间。SDS法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA谱带,所提取DNA的质量和产率均较高,用该法提取的辣椒DNA进行RAPD分析,DNA扩增效果较好,带形清晰、整齐,说明SDS法提取的DNA分子较为完整,能用作PCR模板来开展辣椒分子水平的研究。     

菊芋基因组DNA提取方法的比较

采用改良CTAB法、改进的高盐SDS法及两种植物基因组DNA提取试剂盒法等４种方法提取菊芋基因组DNA,并进行电泳分析、质量检测及ISSR引物扩增检测。结果表明,改良CTAB法优于其他3种方法,提取的DNA质量较好、纯度较高,能够满足ISSR-PCR扩增要求。     

猕猴桃基因组DNA提取方法的研究进展

对猕猴桃基因组DNA提取的各个环节的进展进行综述。经分析得出,干叶片是一种较为理想的材料,容易保存,获得的基因组DNA质量也较高。提取方法主要有SDS和CTAB法,SDS法可以较好的将DNA与蛋白质分开,而CTAB法则可以较好的将基因组DNA与糖等杂质分离开;此外还有一些改良的提取基因组DNA的方法,都是比较实用的。可以根据不同的条件选取不同的方法。     

李基因组DNA提取方法的探讨

本文通过采用改良CTAB法对幼嫩程度不同的李的叶片的DNA的提取进行研究,加大CTAB提取液的浓度,加入抗氧化剂以及RNase最大限度的降低DNA的降解,减少蛋白。多酚类物质的污染和破坏,提高DNA的产量,可以很好地用于PCR扩增和限制性酶切反应中。     

几种三华李基因组DNA提取方法的比较研究

以CTAB法、改良CTAB法、SDS法、改良SDS法、改良陈大明法、高盐低pH值法、SDSCTAB法和氯化苄法等8种目前常用植物基因组DNA提取方法为基础,通过采用异丙醇和无水乙醇进行2次常温短暂沉淀、提高离心力等多种去杂质措施进行适当改进,对它们用于三华李基因组DNA提取的效果进行比较。结果表明,8种方法中以CTAB法最优,改良CTAB法其次,高盐低pH值法稍逊,其他5种方法则不适合于三华李基因组DNA的提取;CTAB法不仅适合于早食李不同季节(4月、8月和12月)和不同成熟度叶(未展开嫩叶、展开嫩叶、成熟叶和老叶)基因组DNA的提取,也适合于华蜜大蜜李、白脆鸡麻李、大鸡麻李、中蜜李、小蜜李、串珠李、从化三华李、红线李、香蕉李、中熟李和软枝三华李等11个三华李品种嫩叶基因组DNA提取。     

脆木耳基因组DNA提取方法优化

木耳属子实体含有大量多糖、蛋白质和色素等物质,严重干扰基因组DNA(gDNA)的提取,普通方法难以提取脆木耳子实体的高质量gDNA.以脆木耳子实体为试材,利用4种方法提取gDNA,以期筛选出最佳的提取方法.结果表明,4种方法提取的脆木耳子实体gDNA浓度及纯度各不相同.改良CTAB法提取的脆木耳子实体gDNA浓度和纯度...     

一种测定梨果实体积的新方法北大核心

利用连通器原理和虹吸现象,构建一种测定果实体积的简便装置,并通过建立计算模型,可便捷、快速、准确地测定形状不规则的梨果实体积。本方法无需摘下果实,可实现连续、定点、实时测定长在树上的果实体积变化,可准确跟踪果实个体的生长发育状况,避免了果实生长过程中因个体差异造成的误差,对于研究果实的昼夜生长及季节性生长动态均有重要的实用价值。此外,本方法还适用于监测其他作物果实体积膨大动态的特性,具有非常广阔的应用前景。     

贡水白柚基因组DNA提取方法研究

以"贡水白柚"为试材,采用盐乙醚处理法、苯酚氯仿处理法、基本CTAB处理法3种DNA提取方法来处理"贡水白柚"基因组DNA,研究不同提取方法对DNA样品的产率、外观、酶切电泳等方面的影响。结果表明:用盐乙醚法所提DNA外观呈纯白色,冷冻沉淀为纤维状,效果最好;用苯酚氯仿法处理幼穗期柚叶片基因组提取DNA产率最高,DNA浓度达118ng/μL;EcoRⅠ酶切图谱用CTAB处理法和盐乙醚处理法效果均较好,苯酚氯仿处理法则拖尾严重,效果差;RAPD引物PCR扩增效果图表明,3种方法均能扩增出清晰条带,均适合于有关"贡水白柚"基因组的相关研究。