利用分子标记技术鉴定西瓜杂交种纯度

以西瓜杂交种"东方红1号"和"8424"及其各自亲本为材料,分别利用RAPD、ISSR和SSR 3种分子标记技术对西瓜杂交种的多态性进行了分析.结果表明:在供试的200条RAPD引物和30条ISSR引物中,均未筛选到能区分杂交种和其亲本的特异引物;从供试的73对SSR引物中,杂交种"东方红1号"和"8424"各筛选到3对特异引物.均可有效地区别杂交种中混杂的母本自交系种子.利用特异SSR引物WS47和WS27分别对杂交种"东方红1号"和"8424"的纯度进行了快速鉴定,结果与田间鉴定结果一致.     

利用SSR标记技术鉴定西瓜杂交种纯度的研究

为快速高效鉴定西瓜杂交种纯度,利用SSR标记技术对西瓜新品种"中青5号"杂交种进行鉴定。结果表明:筛选出SSR25引物在150 bp处扩增出父、母本和杂交种共有的条带,在160 bp和180 bp处扩增出杂交种特征带。SSR25标记适用于"中青5号"杂交种纯度鉴定,SSR鉴定结果的准确性高于大田鉴定结果。研究结果为生产应用提供科学依据。     

利用SRAP标记快速检测西瓜杂交种子纯度

【目的】以设施、露地兼用西瓜杂交品种早佳(84-24)及其父本、母本为试验材料,利用SRAP分子标记技术进行DNA指纹图谱构建,筛选出能够快速检测西瓜早佳(84-24)杂交种子纯度的SRAP标记。【方法】选取28对SRAP引物,对供试西瓜品种早佳(84-24)及其父、母本的基因组DNA进行扩增,筛选出扩增多态性好、条带清晰、稳定的SRAP引物作为候选标记,利用100粒杂交种子进行纯度检测准确性验证。【结果】28对供试引物中有22对引物在F1及其父、母本之间扩增出多态性条带,多态性比率为78.6%,其中有1对为父本显示,母本缺失的显性SRAP引物(Me6F/Em2R)。用显性引物(Me6F/Em2R)对100粒西瓜杂交种子进行纯度检测,经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,纯度为99.0%,与田间形态学鉴定结果(99.1%)基本一致。【结论】利用SRAP标记(Me6F/Em2R),结合聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,可以对西瓜杂交种早佳(84-24)的纯度进行快速、准确鉴定。SRAP分子标记技术在西瓜杂交种子纯度室内快速检测中有很大的应用前景。     

利用SSR分子标记鉴定甜瓜杂交种纯度

以2个甜瓜杂交种东之星、含香雪及其亲本为材料,利用SSR标记对2组杂交种进行纯度鉴定。从供试的72对SSR引物中筛选到亲本间具有多态性的引物,东之星为3对,含香雪为3对,其中1对引物在2个杂交种的亲本间均存在多态性。对2个杂交种东之星和含香雪分别用筛选出的3个多态性的SSR引物进行甜瓜杂交种子纯度鉴定,鉴定结果分别为992%和972%。     

RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度的研究

 应用RAPD标记鉴定番茄杂交种子纯度,从160条随机引物上筛选出BS273引物,能在杂交一代父母本中各自产生特异的RAPD标记,并且父母本的特异标记能在杂交一代中同时表现,从而利用一个引物便可将杂交一代及其父本、母本三者清楚地区分开,同时也能鉴别其它混杂种子。结果表明:利用RAPD标记技术鉴定番茄杂交种子纯度有着快速和准确的优势,对于杂交种子生产具有广阔的应用前景。     

基于SSR分子标记对西瓜杂交种早佳8424纯度的高通量鉴定

【目的】建立西瓜杂交种早佳8424纯度SSR分子标记鉴定体系,满足制种单位种子真实性和纯度的高通量快速准确鉴定的需求。【方法】以早佳8424及其双亲为材料,筛选条带清晰扩增稳定的多态性SSR标记,优化DNA提取和PCR扩增体系,并与传统田间鉴定结果进行比较,验证其准确性。【结果】从72对SSR引物中筛选获得4对在早佳8424上表现为双亲互补带型的引物,分布于第5、第6和第9条染色体上,片段大小约100~300 bp。将扩增片段大小不同的引物组合进行双重或多重PCR扩增,获得4个双重PCR组合。将SSR分子标记WS27+MCPI-05组合对192株种植于温室中的早佳8424杂交种纯度进行鉴定,同田间传统鉴定结果一致。【结论】筛选获得的SSR标记及其组合结合碱裂解法提取DNA可用于早佳8424西瓜杂交种纯度鉴定,效率高,操作简便且可高通量流水作业。     

运用SRAP分子标记对胡麻杂交种纯度的鉴定研究

以胡麻杂交种陇杂1号、陇杂2号及其父母本自交系为试材,从9对引物中筛选出2对M10/E3和M2/E5分别进行SRAP分析。结果表明,在陇杂1号母本1S和父本873中均能扩增出至少1条特征带。陇杂1号与父母本相比均有差异带,陇杂2号中产生双亲互补带型。这2对引物均可应用于陇杂1号和陇杂2号的纯度鉴定。     

利用ISSR分子标记鉴定苦瓜杂交种纯度

[目的]采用 ISSR分子标记对苦瓜杂交一代品种秀玉1号纯度进行鉴定,为生产上提高苦瓜新品种纯度鉴定效率提供参考。[方法]利用ISSR技术和91条引物,对苦瓜品种秀玉1号及其亲本的DNA指纹进行分析。[结果]从91条引物中筛选出两条特征引物能同时扩增出F1代及其父母本的多态性条带,分别是ISSR-845和 ISSR-891,两个特异位点分别位于510和300 bp处。其中ISSR-891能够准确区分母本自交系与杂种 F1,经群体验证表明该标记与田间鉴定结果高度一致。[结论] ISSR技术具有准确、简便、高效和实用强等优点,可用于生产上苦瓜种子纯度的快速鉴定。     

利用ISSR分子标记鉴定苦瓜杂交种纯度

【目的】采用ISSR分子标记对苦瓜杂交一代品种秀玉1号纯度进行鉴定,为生产上提高苦瓜新品种纯度鉴定效率提供参考。【方法】利用ISSR技术和91条引物,对苦瓜品种秀玉1号及其亲本的DNA指纹进行分析。【结果】从91条引物中筛选出两条特征引物ISSR-845和ISSR-891,能同时扩增出F1代及其父母本的多态性条带510 和300 bp。其中,ISSR-845能够区分父本机械性混杂,ISSR-891能够准确区分母本自交系与杂种F1代;经群体验证,该标记与田间鉴定结果高度一致。【结论】ISSR技术具有准确、简便、高效、实用性强等优点,可用于生产上苦瓜种子纯度的快速鉴定。     

RAPD分子标记鉴定甜瓜种子纯度试验

利用RAPD分子标记技术对11个甜瓜品种进行品种区别和种子纯度鉴定.结果表明,采用优化的RAPD-PCR条件以及利用引物W97225、97255、W97274、W97276、W97295可以将11个甜瓜品种区别开来,同时还利用引物W97295对银辉甜瓜的种子纯度进行了鉴定.     

利用RAPD和ISSR分子标记对西瓜作图亲本的多态性分析

以西瓜为材料,对基因组DNA的RAPD和ISSR分析体系中的Mg2+、dNTPs和引物浓度进行了优化.筛选出的RAPD优化体系(20 μl)为:引物0.4 μmol/L,dNTPs 200 μmol/L,Mg2+ 2.0 mmol/L,DNA 20 ng,1 × Buffer缓冲液,Tap 酶1.0 U;ISSR优化体系(16 μl)为:引物0.25 μmol/L,dNTPs 160 μmol/L,Mg2+1.0 mmol/L,DNA 20ng,1×Buffer缓冲液,Taq酶0.64 U.以远生态西瓜品种自交系64+1⊕ -3和6⊕-2、及23⊕-1和4-1⊕-2为作图亲本,利用筛选好的RAPD和ISSR体系对作图亲本的多态性进行分析.结果表明,在作图亲本64-1⊕-3和6⊕-2中,181个RAPD引物中有11个引物不能有效扩增,其余170个引物产生了525条扩增带,平均每个引物在基因组中可检测到3.08个基因位点,其中可检测出多态性位点的引物有55个,产生了77条多态性扩增带,平均多态率为14.67%;62个ISSR引物中有17个引物不能有效扩增,其余45个引物产生了188条扩增带,平均每个引物产生了4.18条扩增带,15个多态性引物可以在双亲间检测到多态性位点23个,平均每个多态性引物能扩增出1.53个多态性位点,多态率为12.23%.在作图亲本23⊕-1和4.1⊕-2中,利用499个RAPD引物进行了基因组的扩增,其中43个引物为非有效引物,456个引物产生了1 431条带,平均每个引物产生3.14条带,142个多态性引物检测到了240个多态性基因位点,平均多态率为16.77%.表明西瓜作图亲本问的遗传背景较狭窄.     

西瓜抗枯萎病育种的分子辅助选择（英文）

利用国内公开发表的西瓜抗枯萎病生理小种1基因紧密连锁标记4451_fon,首次对我们抗枯萎病育种选出的二倍体和四倍体种质进行了分子鉴定,结果表明,全部二倍体单系和四倍体单系均表现为抗病基因型,判定为抗病材料,与人工接种鉴定结果完全一致;分子鉴定还表明,这些抗病单系为抗病纯合体,在以后的自交纯化过程中抗性基因不再分离和丢失,因此不必继续对其自交后代进行抗性选择。研究结果认为d CAPS标记4451_fon可以作为西瓜抗枯萎病分子辅助选择(molecular marker assisted selection,MAS)的重要工具,能够实现提高选择效率、加速育种进程之目的。     

利用ISSR和RAPD标记构建红麻种质资源分子身份证

【目的】对来源于不同国家和地区的51份红麻栽培种、野生种和近缘种进行遗传分析,构建红麻种质资源分子身份证。【方法】利用ISSR和RAPD标记对不同类型的51份红麻种质资源进行分析,计算其遗传相似系数,利用UPGMA法作聚类图,建立分子身份证。【结果】19个ISSR标记共产生113条条带,其中101条为多态性带,多态性比率(PPB)为89.38%;20个RAPD标记共产生118条条带,其中112条为多态性带,多态性比率(PPB)为94.92%。品种间多态性丰富,结合特征带、特异谱带类型和不同引物组合3种分析方法,可有效建立51份红麻种质资源的特异分子身份证。【结论】材料间遗传多样性较高,有较远的遗传距离和较宽的遗传基础,ISSR和RAPD标记技术可有效用于建立红麻种质资源分子身份证。     

外源激素诱导西瓜单性结实的研究

 通过 5因子 (1/ 2 )二次通用旋转回归设计与分析 ,探明了各外源激素对西瓜子房发育的影响程度 ,依次是NAA >2 ,4 D >CPPU >BA >GA3 ;在NAA 116～ 118μg·g-1、2 ,4 D 2 7μg·g-1、GA3 2 5 μg·g-1、CPPU 110～ 116 μg·g-1、BA 2 1～ 2 2 μg·g-1时 ,对西瓜子房发育效应最大。外源激素处理西瓜诱导单性结实的适宜时期为子房开花当天及花后 1d ,以微滴喷雾法于开花当天及花后 1d各处理 1次 ,可有效促进西瓜子房发育成正常商品无籽果实。外源激素诱导早、中熟西瓜单性结实 ,其坐果率 (95 %～ 10 0 % )及商品果率 (90 %～ 95 % )均比晚熟品种高 ,但平均单果重小于晚熟品种。外源激素诱导子房所发育的果实 ,可溶性固形物含量较高 ,达 9.87%～ 11.10 %。     

赤霉素处理对西瓜种子发芽率的影响

[目的]研究赤霉素对西瓜(Citrullus lanatus)种子发芽率的影响,为西瓜栽培过程中优质高效育苗提供科学依据。[方法]在恒温30℃条件下,分别用5种不同浓度的赤霉素溶液(0、50、100、150、200、250 mg/L)处理5个西瓜品种(京欣2号、金龙宝、新红宝、金钟冠龙、抗病苏蜜)种子,测定发芽率。[结果]不同西瓜品种的种子所需最适赤霉素溶液浓度不同。用浓度100 mg/L赤霉素对京欣2号种子进行处理发芽率最高,为94.000%;浓度150 mg/L赤霉素对金龙宝来说发芽率最高,为84.667%;浓度50 mg/L赤霉素对新红宝来说发芽率最高,为94.667%;浓度50 mg/L赤霉素对金钟冠龙的发芽率最高,为72.667%;浓度150 mg/L赤霉素对抗病苏蜜的发芽率最高,为81.333%。[结论]使用适宜浓度的赤霉素溶液对西瓜种子进行催芽处理,可以提高西瓜种子的发芽率,但以50～150 mg/L浓度的赤霉素效果较好。     

西瓜全雌基因连锁的SRAP分子标记

采用SRAP技术探寻与西瓜全雌基因连锁的分子标记.以全雌母本和弱雌父本为双亲杂交获得F1,自交获得F2群体,用分离群体分组分析法(bulked segregant analysis,BSA)构建全雌和弱雌2个基因池,筛选957对引物.结果发现,只有引物me16～em20能在两池之间扩增得到2条特异带.经F2代单株验证,...     

玉米种质材料遗传多样性的ISSR分析

[目的]明确山西主要玉米品系的主要遗传多样性特点.[方法]利用ISSR分子标记技术,对供试的玉米种质资源进行遗传多样性分析.[结果]用筛选出的9个多态性高、重复性好的引物对供试种质材料进行扩增,共扩增出清晰条带74条,多态性条带56条,多态性条带比率为75.7％.应用DPS软件对试验结果进行聚类分析,构建聚类分析树状图,在遗传相似系数为0.55处,将供试种质材料分为5个类群.[结论]为今后山西玉米育种与杂交亲本的选择提供理论依据.