琼扩试验的应用及注意事项

琼脂扩散试验(Agar diffusion Tost;AD)也称免疫扩散试验,实际上是抗原-抗体在琼脂中的沉淀反应。它的基本原理是抗原-抗体分子在含有电解质的琼脂中向四周自由扩散,通常是从高浓度向低浓度游动,当抗原-抗体分子相遇时,如出现沉淀线(抗原-抗体的特异性结合物)可说明两者对应。因此,本法可以鉴定抗原,也可以鉴定抗体,在实际应用中以后者居多。在试验中,     

兔粘液瘤病的血清学诊断

<正>1琼脂(糖)免疫扩散试验该方法既能检测抗原又能检测抗体。由于粘液瘤病毒的抗原成分比较复杂,与相应抗血清进行琼脂扩散试验时可形成多条沉淀线,所以试验应出现三条沉淀线。如果试验血清中含有抗体,三条线中至少有一条弯曲向抗原滤纸条,否则成直线。如果试验血清中含有抗原,则至少有一条弯向标准血清滤纸条。样品采集。被检兔的全血或血清,并制备琼脂板。试验方法。将含标准血清和抗原的滤纸条放置于琼脂表面,含被检血清或全血的滤纸条放置于标     

琼脂扩散试验操作方法及注意事项

琼脂扩散试验（简称“琼扩”）是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一。该方法简洁、快速,在临床中应用广泛,特别适用于大量血清样品的检测和流行病学群体的定性诊断。缺点是需要时间过长,灵敏度不高。琼脂扩散试验是根据沉淀试验的原理,利用可溶性抗原和抗体在半固体凝胶中进行的相向扩散反应,当抗原、抗体的分子相遇并达到适当的比例时,就会相互结合,凝集,形成抗原-抗体的结合物,在抗原、抗体比例较适合并有电解质的存在及一定温度的条件下,形成白色可见的沉淀线,此种沉淀反应,称为琼脂免疫扩散试验,本法可用已知抗原测定未知抗体,也可以用已知抗体测定未知抗原。在传染病的实验室诊断中,常用于鸡马立克氏病抗体检测。也曾有用此法检查鸡法氏囊病、小鹅瘟、猪瘟病和炭疽等疾病的报道。现以检测鸡马立克氏病的抗体为例,将其操作方法介绍如下。     

兔粘液瘤病的血清学诊断

1琼脂（糖）免疫扩散试验 该方法既能检测抗原又能检测抗体。由于粘液瘤病毒的抗原成分比较复杂,与相应抗血清进行琼脂扩散试验时可形成多条沉淀线,所以试验应出现三条沉淀线。如果试验血清中含有抗体,三条线中至少有一条弯曲向抗原滤纸条,否则成直线。如果试验血清中含有抗原,则至少有一条弯向标准血清滤纸条。     

监测和诊断禽流感

常规鉴定禽流感病毒的方法是血凝试验 (HA)，血凝抑制试验 (HI)，琼脂扩散试验 (AGP)以及病毒中和试验 (NT)等。 　　检测采取的病料主要是血液、鸡蛋、肝脏等。 　　琼脂扩散试验可以检测出各种血凝亚型的病毒，但检出率较低，往往检测为阴性的鸡群，并不能保证没有感染禽流感。血凝抑制试验可以用于区别禽流感的血清亚型，且敏感性高，但一种血凝抗原只能检出相应的抗体，而不能查出其他血清亚型抗体。不过一个地区流行的禽流感病毒，其血清亚型在一定时间内是相对稳定的，所以用该地区流行的病毒株抗原做血凝抑制试…     

琼脂扩散法检测卵黄抗体效价影响因素的分析

抗体琼脂扩散试验是当前卵黄抗体效价测定的主要方法之一,该方法简洁、快速非常适合于临床中应用,但是该方法容易受到多种因素的影响而导致试验结果判断的不准确。本文就琼脂扩散试验中抗原抗体本身性质、反应特点、最适比例、可逆性、总量以及琼脂、水     

鸡传染性法氏囊病感染日龄与最佳检测方法的选择

鸡传染性法氏囊病(IBD)近年来在我国发生极为普遍,对养鸡业带来严重影响。本病的检测方法,生产上主要应用琼脂扩散试验(AGP),可检测抗原或抗体。为探讨感染鸡体内 IBD 病毒抗原、血清抗体的消长规律,以便根据不同的感染时期选择合适     

应用对流免疫电泳检测鸡传染性法氏囊病病毒抗原和抗体

应用鸡传染性法氏囊病(IBD)血清抗体检测病毒抗原,对流免疫电泳试验(CIET)法比琼脂扩散(AGP)法检出率高50％;而用IBD抗原检测其血清抗体,CIET比AGP有60％血样抗体效价高1～2个滴度。CIET法比AGP法的检测速度快23～37个小时。CIET是一种简易、快速、敏感度较高的检测方法,可用于IBD的检测与诊断。     

琼脂扩散试验结果影响因素的分析

琼脂扩散试验是临床中病原诊断和抗体效价测定的主要方法之一,该方法简洁、快速,在临床中应用广泛。但是该试验容易受到多种因素的影响而导致试验特异性、敏感性、精确性以及结果判断的不准确。本文就抗原、抗体性质、琼脂板以及反应条件等影响因素对琼脂扩散试验的影响进行了逐一分析。     

测定传染性法氏囊病抗体的三种方法比较

目前检测传染性法氏囊病(IBD)免疫水平的方法主要是琼脂扩散试验(AGP)和中和试验(VN)。但前者的敏感性低,且因抗原浓度的差异使抗体难以定量;后者虽有较高的敏感性,但耗时费工,不易推广。为此,作者利用抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)的特异性单克隆抗体(McAb)建立了夹心阻断ELISA,用以检查血清抗体,     

用对流免疫电泳诊断猪瘟的试验

对流免疫电泳技术是 Graber 氏等(1953)将琼脂扩散和免疫电泳结合进行抗原抗体的检测。它具有方法简便,特异性强和出现结果快速等优点。其原理是溶液中的带电质点,在电场的作用下向着相反的电极移动称为电泳。由于抗原在偏碱的溶液中带负电荷,在电场中向正极移动;而抗体球蛋白由于接近等电点,借内渗流的作用与抗原相反缓慢的移向负极。通过将抗原抗体孔作以适     

免疫血清学技术及其在蚕病诊断上的应用(续1988年本刊第二期)

<正> (一)、家蚕抗血清效价的测定什么叫抗血清效价:抗血清效价是抗体与抗原发生凝集或沉淀的最高稀释倍数。在蚕病抗血清方面测定抗血清效价的方法常用的有环状沉淀试验及琼脂双向扩散试验、玻片凝集反应三种:     

鸡传染性法氏囊病抗体检测三种方法的比较

本文对传染性法氏囊病(IBD)抗体检测的三种方法——微量中和试验(TCVN)、间接ELISA、琼脂扩散(AGP)试验的敏感性、特异性和重复性及其临床效果进行比较。     

三种琼脂扩散沉淀试验诊断成年鸡马立克氏病的比较

关于鸡MD特异性诊断,琼脂扩散沉淀试验具有特异性高、方法简单易行等优点。然而以往的研究多局限于实验感染马立克氏病毒的鸡,而用琼脂扩散试验检查生产鸡群的羽囊抗原和血清抗体的报道较少。为此,     

琼脂扩散试验检测附红细胞体抗体

采用琼脂扩散试验检测自然感染猪附红细胞体抗体和兔抗猪附红细胞体抗体,结果表明,猪附红细胞体抗原与自然感染附红细胞体猪血清、首免和二次免疫后收集的兔抗血清的琼脂扩散试验结果均呈阴性,第3次免疫后的血清效价为1∶16。     

一例鸡马立克氏病与沙门氏菌病混合感染的实验室诊断

为确诊思南县某养殖专业合作社饲养的肉鸡发病死亡原因,采集病鸡羽髓、血样及病死鸡肝脏、脾脏进行细菌分离培养、相关病毒琼脂扩散试验和PCR检测。结果:肝脏组织中分离出沙门氏菌;羽髓琼脂扩散试验检测出马立克氏病抗原,血清琼脂扩散试验检测出马立克氏病抗体;肝脏、脾脏PCR检测出马立克氏病病毒核酸。结论:综合诊断为马立克氏病与沙门氏菌病混合感染。     

禽流感的检疫检验

在禽流感的检验中,琼脂扩散试验简便、快捷,是化验室检验中常用的方法之一。该试验是应用抗原和抗体在琼脂凝胶中辐射扩散,当两者比例适合时,于两孔之间形成致密的白色沉淀线,可用于检测禽流感病毒的NP或MP抗体。用已知的阳性血清检测未知抗原时,可用于病毒的鉴定;用已知的阳性抗原检测未知血清时,可用于疫病的诊断和血清学调查。但在实际监测中发现母源抗体对试验的影响不容忽视。     

多株猪源大肠杆菌结构抗原和分泌抗原的研究

选取6株(300、303、316、325、327和343)猪源大肠杆菌免疫家兔制备高免血清,与6株菌的全菌抗原、菌体(O)抗原、渗透因子及外膜蛋白抗原分别进行交叉凝集试验和琼脂扩散试验。结果表明,大肠杆菌的主要抗原为O抗原,其中300和303 2株菌的抗体与其他4株菌的抗原具有广泛的交叉性。     

纸膜免疫金银染色诊断马立克氏病的研究

本研究建立的纸膜免疫金银染色法(P-IGSS)诊断马立克氏病(MD),既可检测抗原,又可检测抗体.检测抗原的灵敏度为0.39μg/点,检测抗体的灵敏度为1.4μg/点.P-IGSS 和琼脂扩散试验(AGP)对抗体检出率分别为42.44%和37.78%,对羽髓抗原检出率分别为96.67%和90%.与9种鸡传染病阳性血清和3种鸡传染病抗原不发生交叉反应.     

用大肠杆菌K99和F41菌毛抗原检测牛血清抗体的琼脂扩散试验的研究

用含２ｍｏｌ／Ｌ尿素的磷酸盐缓冲液以热处理方法提取的Ｋ９９和Ｆ４１菌毛作为抗原,对琼脂扩散试验方法进行研究。结果表明本试验方法简便,特异性强,敏感性高,可用于血清抗体检测;所制备的抗原稳定、重复性好。