响应面法优化玉木耳原生质体制备条件

[目的]优化玉木耳原生质体制备条件,获得高质量、高产量的原生质体,为后续玉木耳遗传育种、优良性状筛选和品种改良提供良好的试验材料.[方法]以玉木耳原生质体产量为考察指标,结合单因素试验和响应面优化法,建立原生质体制备回归方程,探究玉木耳原生质体的最佳制备条件.[结果]单因素试验结果表明,玉木耳原生质体制备的适宜条件为:酶解时间3 h、酶解液浓度2.0%、酶解温度35℃.响应面试验结果表明,各因素对原生质体制备影响程度的排序为:酶解温度>酶解时间>酶解液浓度,酶解温度与酶解时间的交互作用对原生质体产量有极显著影响(P<0.01),酶解时间与酶解液浓度的交互作用影响显著(P<0.05).响应面试验优化后,获得玉木耳原生质体的制备条件为:酶解液浓度2.0%、酶解时间3.4 h、酶解温度35℃,此条件下玉木耳原生质体的平均产量为17.5×106 CFU/mL,与理论产量(17.77×106 CFU/mL)偏差小.[结论]利用响应面法可确立玉木耳原生质体制备的最佳条件,获得较理想的原生质体产量.     

红酵母原生质体制备和再生条件研究

［目的］初步探讨红酵母原生质体制备和再生的条件。［方法］以红酵母为试材,研究渗透压稳定剂pH值、酶浓度、酶解时间、预处理时间4个因素对红酵母原生质体制备率和再生率的影响。［结果］pH值在6.5～7.0,原生质体的制备率和再生率随着渗透压稳定剂pH值的升高而上升。当酶浓度从0.2%上升到1.0%时,原生质体制备率上升较快,而原生质体再生率下降较慢。随着酶解时间的增加,原生质体的制备率逐渐增加,而原生质体的再生率逐渐下降。在5～15 min,原生质体制备率和再生率均随着预处理的时间的增加而降低。［结论］当渗透压稳定剂pH值为7.0,蜗牛酶酶浓度为1.0%,酶解时间为60 min,预处理时间为5 min时,原生质体的制备率和再生率能分别达到较高的值。     

平菇原生质体制备条件的研究

从综合酶种类、酶浓度、菌龄、酶解温度、酶解时间及稳渗剂等方面,探讨平菇原生质体制备的条件。     

茶薪菇原生质体制备条件的分析

以茶薪菇为出发菌株,对其原生质体制备条件进行研究,具体分析了酶浓度、菌龄、渗透压稳定剂以及酶解时间和温度等因素对茶薪菇原生质体产出量的影响。结果表明:采用液体发酵培养第5 d的菌丝体,以0.4 mol/L KC l作渗透压稳定剂,加入0.20%混合酶(纤维素酶与蜗牛酶按1∶1混合)在25℃下酶解3 h,制备原生质体效果最佳,原生质体产出量可达2.5×107个/mL。     

秦巴蛹虫草原生质体的制备及再生条件研究

【目的】研究秦巴蛹虫草原生质体制备及再生的最适条件,建立高效制备和再生原生质体的方法。【方法】以秦巴蛹虫草无性型菌株CM-16为材料,研究细胞壁裂解酶种类、酶解时间、酶解温度、菌丝体菌龄及稳渗剂种类对原生质体制备及再生效果的影响,并在单因素试验结果基础上进行正交优化试验。【结果】(1)以0.6mol/L NaCl为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄6d的菌丝酶解3h,原生质体的产量最高。(2)以0.6mol/L甘露醇为稳渗剂,用混合酶(质量分数1%纤维素酶和质量分数0.5%蜗牛酶按1∶1体积比混合)在(26±1)℃对菌龄5d的菌丝酶解2h,原生质体的再生率最高;验证试验结果表明,在此条件下,原生质体再生率平均为25.7%,此时原生质体平均产量为83.42×105 mL-1。【结论】对酶解温度、酶解时间、菌丝体菌龄、稳渗剂及酶系种类等条件的优化,可提高秦巴蛹虫草原生质体的产量及再生率。     

南阳酵母原生质体制备与再生条件研究

研究南阳酵母原生质体形成与再生的最佳条件。获取原生质体采用酶法,再生采用双层高渗平板法,因素重要性分析采用正交试验。结果表明:菌龄10h,以2.0%蜗牛酶加0.5%纤维素酶的混合酶液进行酶解破壁,酶解温度30℃,酶解时间2.5h,以0.6mol.L-1蔗糖做再生培养基的渗透压稳定剂,原生质体形成率91.40%,再生率10.56%。不进行预处理,在试验条件下,对南阳酵母原生质体形成与再生影响因素依次为:菌龄>酶解时间>酶浓度>渗稳剂。     

平菇原生质体制备及再生培养研究

平菇菌丝原生质体的释放以菌龄４～６ｄ的幼嫩菌丝,用２％Ｌｙｗａｌｚｙｍｅ采用０．６ＭＫＣｌ为渗稳剂在ｐＨ值为５．５、温度为３５℃、酶解２～２．５ｈ生长较好,可达１０７个／ｍＬ,孢子释放原生质体在１．５％溶壁酶和１．５％纤维素酶混合作用,同样外界条件下原生质体转化率可达１００％。原生质体再生以２号培养基在０．６Ｍ甘露醇的作用下,用载片悬浮滴式再生法,再生率可达１２．３％。     

层出镰孢菌原生质体制备条件的研究

[目的]研究层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)原生质体的最佳条件,建立高效制备层出镰孢菌原生质体制备的方法.[方法]通过对菌丝体菌龄、酶解液组合、酶解反应温度及酶解时间等影响因素进行优化,对层出镰孢菌原生质体的制备条件进行研究.[结果]菌块在CMC液体培养基中25℃培养分生孢子3 d后,过滤离心后转移至YEPD液体培养基中培养12 h,该菌丝最适于层出镰孢菌原生质体的制备;用1.2 mol/L KCl溶液配制含有5 mg/m L裂解酶、25 mg/m L崩溃酶、0.05 mg/m L溶壁酶的酶解液在30℃下对菌丝酶解1.5 h,此时原生质体的数量最大,为2.47×10~9个/m L.原生质体再生培养时,使用40%PTC溶液恢复细胞壁,在TB3液体培养基中30℃过夜培养,离心后与TB3固体培养基混合后倒入平板培养,原生质体再生率可达39.75%.[结论]通过对菌丝体菌龄、酶解液浓度、温度、酶解时间等条件的优化,可提高层出镰孢菌原生质体的产量及再生率,为进一步研究层出镰孢菌致病分子机制提供理论依据.     

玉蕈生物制剂对小鼠体液免疫功能的影响

[目的]探讨玉蕈生物制剂对小鼠体液免疫功能的影响。[方法]分别以1、2、4 g/(kg.bw)3个剂量组的玉蕈生物制剂灌胃小鼠30 d,测定抗体生成细胞和血清溶血素。[结果]玉蕈生物制剂能提高小鼠抗体的生成细胞数和血清溶血素水平。[结论]玉蕈生物制剂具有增强小鼠体液免疫功能的作用。     

龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)原生质体制备与再生条件研究

报道了龟裂链霉菌（ Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｒｉｍｏｓｕｓ） 原生质体制备与再生最佳条件和该原生质体对抗生素的抗性结果。在 Ｓ生长培养基中加入φ＝ １ ％ 甘氨酸进行菌丝体培养２４ ｈ ,原生质体制备最佳条件为：溶菌酶浓度φ＝ ３ ％ 、酶解温度２８ ℃、酶解时间９０ ｍｉｎ ,其制备的原生质体数达到６ ．０ 亿个／ ｍ Ｌ 以上;原生质体最佳再生培养基为 Ｒ５ 再生培养,其再生率达到４６ ％ 。     

真姬菇功能食品抗疲劳研究

[目的]研究真姬菇功能食品的抗疲劳功能。[方法]选用160只雄性昆明种小鼠,体重18~22 g,按体重随机分成4个组;真姬菇功能食品设12、4、g/(kg.bw)低、中、高3种剂量,去离子水为对照组,对试验小鼠连续30 d经口灌胃给予,30d后分别测定各组小鼠游泳时间、尿素氮、肝糖原、血乳酸含量。[结果]与对照组相比,低、中、高剂量组的真姬菇功能食品小鼠游泳时间比明显延长(P<0.01),肝糖原含量明显升高(P<0.01);高剂量组游泳后的血乳酸曲线下面积明显降低(P<0.01);真姬菇功能食品对小鼠血清尿素氮含量无影响。[结论]真姬菇功能食品能显著延长小鼠游泳时间,增加肝糖原含量含量,降低运动后小鼠血乳酸曲线下面积。真姬菇功能食品具有抗疲劳功能。     

真姬菇多糖的提取和组分研究

研究了真姬菇多糖的提取工艺和多糖组分。结果表明,真姬菇多糖的最佳提取工艺为：浸提比1：15,浸提时间1h,浸提温度100℃;真姬菇多糖的组分为半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖。     

长白山斑玉蕈的生物学特性及致濒机理

对长白山野生斑玉蕈生物学特性的研究结果表明:斑玉蕈菌丝生长利用多糖和有机氮的能力较强,菌丝生长的最适温度为25℃,最适pH值为5,最适培养料含水量为65%。在人工条件下,虽然斑玉蕈容易形成子实体原基,但子实体的发育及孢子的大量弹射所需的环境条件范围较窄、对基物的选择范围较小,这些因素可能是其野生种群稀少的内在原因。而适宜其生存的原始森林面积锐减可能是导致其种群分布面积狭小的外在原因。因此,要加强对野生斑玉蕈资源的生态调查和保护斑玉蕈的的生存环境,从而提高其种群数量。     

海鲜菇中总糖提取的影响因素研究

[目的]研究海鲜菇中总糖含量提取的影响因素,为海鲜菇中总糖的利用提供依据。[方法]分析了海鲜菇中总糖热水浸提的最佳提取目数、适合提取原料,在此基础上研究了提取温度、提取时间、料液比对海鲜菇中总糖提取效果的影响。[结果]海鲜菇最佳提取目数为100目,残菇为总糖的最佳提取原料。当提取温度为80℃、提取时间为20 min、提取料液比为1∶20(g∶m L)时,残菇中总糖提取率最高为13.63%。[结论]海鲜菇的残菇中总糖含量最高,适合作为进一步糖类物质研究的基础原料。     

海鲜菇培养室环境监测系统的设计与应用

针对海鲜菇在菌丝生长发育阶段对环境有较强的依赖性,设计了一套融合多种技术的远程环境监测系统,对培养室内的温湿度、CO2浓度等数据进行采集、处理和显示。应用 MATLAB数据拟合工具箱对试验数据进行拟合,得到了环境因子随时间变化的曲线图。通过回归分析建立 CO2浓度的数学模型,并提出调控策略,即通风周期为30 min,通风时长为5 min。     

无公害食品真姬菇工厂化生产技术规程

本规程规定了无公害食品真姬菇工厂化生产的产地环境、设施要求、生产技术、采收与分级、病虫害防治及生产档案等技术要求。适用于山东省无公害食品真姬菇的工厂化生产。     

真姬菇SIEF3136菌株单核体RAPD多态性分析

[目的]探讨真姬菇单核体间RAPD标记多态性,为育种材料的选择提供一定的分子水平依据。[方法]以真姬菇（Hypsizygus marmoreus）工厂化栽培白色菌株SIEF3136的原生质体单核体和不同孢子单核体为材料,进行RAPD分析。[结果]筛选到38条多态性引物,共扩增341条条带,其中253条表现多态性,多态率为74.2%。31个菌株的相似系数为0.34～0.90。除单核体S18-16,同一交配型的单核体间的相似系数都在0.60以上,表现出较高的相似性。在大约0.61的相似水平上,所有菌株分为2组。PM-01与T1、T3聚为第1大类,PM-02与T2、T4聚为第2大类。另外,在不到0.62的水平上S18-16聚为第3大类,显示出极大的差异,这很可能是该单核发生突变所致。[结论]真姬菇子实体上担子在减数分裂中染色体交换很高,RAPD标记可以用于真姬菇单核多态性研究,并可为交配型鉴定提供参考。     

不同灭菌方法对蟹味菇培养料中氨基酸含量的影响

[目的]筛选适合蟹味菇培养料的灭菌方法。[方法]分析3种灭菌方式(常压灭菌、普通高压灭菌、阶梯式高压菌灭)对蟹味菇培养料中氨基酸含量的影响。[结果]阶梯式高压灭菌培养料中氨基酸总含量最高(27.87%),而常压灭菌的氨基酸总含量最低(21.41%)。3种灭菌方式处理后的培养料中谷氨酸含量最高,天门冬氨酸和亮氨酸含量次高。[结论]阶梯式高压灭菌在工厂化规模化食用菌栽培中是一种比较好的灭菌方法。     

LBL评价与真姬菇表观农艺性状相关性分析

对13株真姬菇菌株进行液体培养、可见光谱分析与结实性试验,采用LBL评价方法并结合统计学方法,探究其质量评价结果与菌盖直径、菌盖厚度、菌柄长度、菌柄直径等主要表观农艺性状间的相关性。结果显示:LBL评价结果同10.0～20.0mm与20.0～30.0mm菌盖直径区间、5.0～10.0mm与0～5.0mm菌盖厚度区间、50.0～70.0mm与30.0～50.0mm菌柄长度区间,以及0～5.0、5.0～10.0 mm与10.0～15.0mm菌柄直径区间内有效子实体数量的相关性关系是成立的,且上述区间内有效子实体为各供试菌株有效子实体总数的主要组成部分。