5种常用病毒灭活剂的应用概述

病毒灭活是利用物理或化学方法使病毒失去感染性的过程。病毒的灭活效率常受到病毒特性、灭活剂种类、灭活目的等多个因素的影响。通常病毒特性和病毒灭活后的用途决定了灭活剂的选择，疫苗研制需病毒完全灭活的同时保持病毒保护性抗原表位结构完整，以诱导有效的宿主免疫反应；分子生物学检测则需要病毒基因组完整等。因此选择适宜的灭活剂对高致病性病原进行灭活是病原分子诊断、血清学分析以及疫苗开发等后续工作的重要保障。目前越来越多的病毒灭活剂被开发和利用，本文选择5种实际工作中常用的化学类病毒灭活剂：甲醛（Formaldehyde）、β-丙内酯（β-propiolactone）、胍基离序盐（Guanidium based chaotropic salts）、补骨脂素（Psoralen）、过氧化氢（Hydrogen peroxide），对其灭活机理、病毒灭活特点以及灭活病毒在后续工作中的应用进行如下概述。     

仔猪大肠杆菌K88—ST1—LTB三阶基因工程灭活疫苗的应用实验

对妊娠14－16周母猪颈部肌肉注射仔猪大肠杆菌K88－ST1－LTB三价基因工程灭活疫苗（以下简称三价灭活苗）的结果表明：三价灭活苗可以大大降低仔猪大肠杆菌的发病率和死亡率，差异极显著（P＜0．01）；对仔猪生长安全、无副作用；三价灭活苗的使用效果明显优于仔猪大肠杆菌K88－K99双价基因工程灭活疫苗（以下简称双价灭活苗）；疫苗现场应用免疫保护率明显高于双价灭活苗，差异极显著（P＜0．01）。     

悬浮培养生产口蹄疫病毒灭活工艺研究

采用单独使用二乙烯亚胺（BEI）灭活剂30℃、26℃灭活以及二乙烯亚胺-甲醛（BEI-FA）联合灭活3种方法对悬浮培养生产的猪口蹄疫O型ZK/93病毒液进行灭活,考察和评价各种方法对该毒株146S的影响及灭活安全性。根据对3批口蹄疫病毒灭活后检测结果来看,单独使用BEI 26℃灭活方法虽然对146S的损失率小,但存在一定的安全隐患,未经过大量试验证实及确认之前不应使用。而经BEI-FA联合灭活方法获得的抗原安全性检验符合规定,但该方法对口蹄疫抗原146S的损失率较高,不宜推广和使用。与上述两种方法相比,用BEI灭活剂30℃灭活28 h仍是最佳的灭活方法。     

不同高致病性禽流感疫苗的免疫效果试验

应用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）对三组肉鸡进行禽流感免疫效果观察,首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）。结果表明：接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的免疫效果比接种禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果好;首免用重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）,二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗（rL-H5株）的效果比仅接种重组禽流感病毒灭活疫苗（H5N1亚型,Re-1株）的效果好。     

不同剂型禽大肠杆菌疫苗免疫保护试验初探

测定了禽大肠杆菌Ｏ７８～１６６株全菌灭活Ａｌ（ＯＨ）３佐剂苗、超声波裂解Ａｌ（ＯＨ）３佐剂苗和全菌灭活油佐剂苗免疫对人工感染同一苗株的保护力。结果表明：全菌灭活Ａｌ（ＯＨ）３佐剂苗保护力最好，全菌灭活油佐剂苗免疫后的间接血凝抗体滴度最高。     

新型复合消毒剂——癸甲丙二醇氯铵复合碘实验室抗病毒试验

通过对新型复合消毒剂——癸甲丙二醇氯铵复合碘抗病毒效果的定量试验和定性试验,结果表明,癸甲丙二醇氯铵复合碘（含碘50g／L）按1：500稀释,对猪瘟兔化弱毒和鸡新城疫病毒的灭活率均为100％,对新城疫病毒10min即达到完全灭活作用;按1：1000稀释对猪瘟兔化弱毒、鸡新城疫病毒及牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的灭活率分别为99％、100％和100％,而1：1000稀释的聚维酮碘（含碘50g／L）对照灭活率为90％,癸甲丙二醇氯铵复合碘的抗病毒效果好于聚维酮碘。     

菌毒王消毒剂对猪细小病毒和猪瘟病毒的灭活试验

菌毒王消毒剂对猪细小病毒和猪瘟病毒的灭活试验王在时（中国兽药监察所北京，１０００８１）受山东曲阜圣亚兽药有限公司和北京中龙生物科技总公司的委托，为检验两公司联合出品的菌毒王消毒剂对猪细小病毒（简称ＰＰＶ）和猪瘟病毒（简称ＨＣＶ）的灭活效果，根据农业部...     

甲醛对马立克氏病琼扩抗原的影响

甲醛对马立克氏病琼扩抗原的影响李维义李媛熊永忠＊（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨１５０００１）甲醛作为一种灭活剂,被人们广泛用于抗原和疫苗的生产。目前许多禽用灭活疫苗都是用甲醛来灭活。在甲醛灭活过程中,对被灭活的生物...     

杆状病毒载体灭活方法的研究进展

杆状病毒表达系统作为重要的真核表达系统,有其独特的优势。近些年,将重组杆状病毒灭活后制备疫苗的研究越来越多,本文综述了杆状病毒系统表达流程,以及利用甲醛和β-丙内酯（BPL）这两种常见的病毒灭活剂灭活杆状病毒,并对其安全性进行分析。     

家禽灭活油乳剂疫苗的正确使用方法

家禽灭活油乳剂疫苗的正确使用方法问：如何正确使用家禽的灭活油乳剂疫苗？（湖南省蔡美良）答：灭活油乳剂疫苗是近年来在家禽生产中普遍使用的一类疫苗。由于使用的效果较好，越来越多的养鸡场和专业户已在使用或正在打算使用灭活油乳剂苗。但由干一些使用者对灭活油乳...     

口蹄疫病毒Asia－Ⅰ型灭活的研究

本研究将适应ＢＨＫ（２１）细胞培养的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）亚洲Ⅰ型（Ａｓｉｓａ－Ⅰ）用胺类衍生物作灭活剂进行灭活试验。灭活毒经细胞连续传代检测未产生致细胞病病作用；经接种实验动物观察，无致细胞病作用且有良好的免疫原性。     

减蛋综合征中药佐剂灭活苗的研制：I.中药佐剂灭活苗的安全性及…

对研制的三批减蛋综合征（ＥＤＳ）中药佐剂灭活苗的安全性和免疫效力进行了试验，经试验证明，中药佐剂可灭活苗的安全性和免疫效力良好，用常规油苗免疫剂量（０．５ｍｌ／只）２～３倍的中药佐剂灭活苗注射，未见不良反应，产蛋正常。在开产前注射０．５ｍｌ／只，接种后１０天即可产生免疫抗体，抗体效价达１：８０，１５天达１：６４０以上。ＥＤＳ中药佐剂灭活苗较油乳剂灭活苗具产生抗体早，抗体水平高，免疫效果好，易注射等     

泥蚶血淋巴抗菌活性分析

以泥蚶为试验材料,分别用活的和灭活的副溶血弧菌通过浸泡方式诱导其产生抗菌物质,并以副溶血弧菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌为指示菌进行抗菌活性测定。结果表明：（1）活的和灭活的副溶血弧菌诱导条件对泥蚶血淋巴的抗菌活性影响不显著（P〉0.05）,但比对照组差异显著（P〈0.05）;（2）血淋巴对副溶血弧菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌有抑菌作用,尤其是副溶血弧菌和白色念珠菌。     

鸡新城疫、产蛋下降综合征、传染性支气管炎三联油佐剂灭活疫苗研制

应用鸡新城疫（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ株病毒和产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）病毒、传染性支气管炎（ＩＢ）病毒分别接种鸡胚、鸭胚和鸡胚，增殖病毒，收获感染的胚液，制备抗原液，经甲醛溶液灭活后与油相佐剂乳化，制出三联灭活油苗。对制品的安全性和免疫性进行了测定，具有良好的安全性和免疫效果。     

不同地理株伊氏锥虫灭活苗交叉免疫保护及免疫方法研究

用伊氏锥虫湖北株和广西株制备纯虫灭活苗和含血灭活苗,经小鼠１次、２次免疫,再经强毒伊氏锥虫湖北株、广西株和江苏株交叉攻击。结果湖北株纯虫灭活苗２次免疫鼠,对同株（湖北株）获得３０／３０保护,对异株即广西株和江苏株分别获０／１０和７／１０保护,该苗一次免疫鼠对同株仅获得５／１０保护。广西株纯虫灭活苗２次免疫鼠对同株（广西株）获２０／２０保护,对异株即湖北株和江苏株分别获得０／１０和４／１０保护。含血湖北株伊氏锥虫灭活苗对同株无保护作用,１３只免疫小鼠全部死亡,对江苏株（异株）为９／１０死亡。对照小鼠全部发病死亡。交叉免疫保护试验结果说明,纯虫灭活苗经两次免疫后对伺株虫体产生坚强的免疫保护作用,免疫保护率达１００％,不同地理株伊氏锥虫因抗原变异现象出现不同的免疫保护作用。两次免疫接种小鼠其免疫保护效果比一次免疫的效果好。疫苗中如含有大量非特异物质,虫苗的免疫保护作用将完全丧失。稳定试验表明,灭活苗在室温下保存１个月,在４℃、－２０℃下保存６个月,免疫效果不变。     

传染性法氏囊病组织灭活苗免疫试验及推广

传染性法氏囊病组织灭活苗免疫试验及推广张金坤（常州市郊区畜牧兽医站）阎晓东（常州五星禽蛋总公司）近年来，鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）对养鸡业已构成严重威胁，从１９９２年起，我们在常州某禽蛋公司及郊区蛋鸡场，试用并推广自制的法氏囊组织灭活苗，取得了较好效...     

自免疫灭活PRRS疫苗与商业性疫苗的药效对比

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）病毒是猪的一种进化迅速的病原体。目前,对安全可靠的高效疫苗需求很迫切,这样的疫苗应该能够定期适应新出现的病毒变种。最近,比利时的研究人员报告,通过一套控制灭活规程可以开发出一种试验性BEI（二乙烯亚胺）灭活PRRS病毒疫苗,     

不同浓度甲醛对几种禽用疫苗病毒灭活效果的研究

为了探究不同浓度甲醛对几种常用禽类疫苗病毒的灭活效果,分别使用浓度为0．1％、0．15％、0．2％、0．25％、0.3％甲醛溶液对鸡新城疫病毒（NDV LaSota株）、禽流感病毒（AIVH9亚型HL株）、减蛋综合征病毒（EDSV AV127株）3种病毒进行灭活试验,观察其灭活前后的效价变化。以便找到各种病毒用甲醛灭活的最佳浓度。结果：NDV在37℃条件下用浓度为0．1％、0．15％、0．2％、0．25％、0．3％甲醛溶液灭活16～18h效价分别下降了2、2、3、4、5个滴度;AIV分别下降了1、2、3、3、4个滴度;EDSV分别下降了1、1、2、2、3个滴度。其中3种病毒全部被灭活。以上结果表明：NDV在灭活时选用浓度为0．1％～0．15％的甲醛溶液为最佳：在灭活AIV时选用浓度为0．1％的甲醛溶液为最佳;灭活EDSV时选用甲醛溶液最佳浓度为0．1％～0．15％。     

新城疫与传染性法氏囊病疫苗对雏鸡联合免疫的研究

将１１４只１１日龄海赛克斯褐公鸡随机分成５组：Ⅰ组为空白对照，Ⅱ组用新城疫（ＮＤ）弱毒苗和ＮＤ油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅲ组用传染性法氏囊病（ＩＢＤ）地方毒株油佐剂灭活苗免疫，Ⅳ组用ＮＤ弱毒苗、ＮＤ油佐剂灭活苗、ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活苗同时免疫，Ⅴ组在Ⅳ组的基础上增加ＩＢＤ弱毒苗免疫。５组鸡分别隔离饲养，定期测定血清ＮＤＨＩ效价与ＩＢＤ琼扩效价。选择时机用强毒攻击，观察各组鸡的保护情况。结果：（１）Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ组鸡均能很好地抵抗ＮＤＶ强毒的攻击，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组鸡无论对ＩＢＤＶ人工感染，还是自然感染，均有坚强的保护力；（２）ＩＢＤ地方毒株油佐剂灭活疫苗不干扰ＮＤ疫苗的免疫应答；（３）ＩＢＤ弱毒苗对ＮＤ疫苗的免疫应答有一定影响，在免疫初期能促进机体尽快对ＮＤ疫苗产生应答，但后期ＮＤ疫苗的ＨＩ抗体降低较快；（４）ＮＤ疫苗对ＩＢＤ疫苗的免疫效果无显著影响。作者提出，对雏鸡首免（无论有、无母源抗体）可采用ＮＤ弱毒苗＋ＮＤ油佐剂灭活苗＋ＩＢＤ（地方毒株）油佐剂灭活苗同时进行免疫，至少可以保护到上笼后或开产前免受ＮＤＶ和ＩＢＤＶ的感染，既简化了免疫程序，又可减少对鸡群的应激，值得推广应用。     

猪细小病毒灭活苗免疫豚鼠和猪抗体反应比较

猪细小病毒（ＰＰＶ）灭活苗对预防由ＰＰＶ引起的母猪繁殖障碍效果良好，Ｊｏｏ等（１９８４）报告了灭活苗接种豚鼠可产生抗体反应．本研究旨在观察豚鼠接种ＰＰＶ灭活苗后的抗体产生规律及特异性．我们用１３批ＰＰＶ灭活苗免疫３９只ＰＰＶ阴性豚鼠和猪，每批次各３只，免疫后阳性率１００％，平均ＨＩ价豚鼠为８２０～１２８０，猪为２０～３２０。