嗜酸乳杆菌HUC-La-0812菌株高密度生长培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用单因素试验确定MRS培养基中各物质的增茵效果,以及五种生长因子的增菌效果,然后选出四种对嗜酸乳杆菌增茵效果明显的物质,正交试验优化四种物质的用量,得出最佳培养基配比:酵母膏1.5%,牛肉膏1.5%,西红柿汁15%,黄瓜汁20%,以最优增菌培养基测定生长曲线、DH值和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为14 h,此时活菌数达1.2×1012cfu/mL.     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌促生长因子的研究

研究了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在改良MRS和PYG培养基中,添加生长因子后的增菌效果,挑选出对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌增菌效果最好的三种生长因子后做三因素三水平的正交试验。试验结果表明,在改良MRS液体培养基中添加7％的番茄汁、10％的麦芽汁和6％的胡萝卜汁时,保加利亚乳杆菌的活菌数达到最高;在改良PYG培养基中添加7％的番茄汁、4％的香菇浸汁和5％的啤酒时,嗜热链球菌的活菌数达到最高。     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌促生长剂的研究

研究了保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在改良MRS和PYG培养基中,添加促生长剂后的增菌效果,挑选出对保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌增菌效果最好的三种促生长剂后做三因素三水平的正交试验。试验结果表明,在改良MRS液体培养基中添加7％的番茄汁、10％的麦芽汁和6％的胡萝卜汁时,保加利亚乳杆菌的活菌数达到最高;在改良PYG培养基中添加7％的番茄汁、4％的香菇浸汁和5％的啤酒时,嗜热链球菌的活菌数达到最高。     

不同材料附生乳酸菌对菌糠青贮发酵品质的影响

为研究不同材料附生乳酸菌对青贮菌糠发酵品质的影响,此试验富集红象草、甘蔗梢、菌糠、葛藤和甜玉米秸秆5种材料表面附生乳酸菌,制备成五种绿汁发酵液作为添加剂调制菌糠青贮饲料。5种绿汁发酵液和对照组共6个处理,每个处理分别调制30份,分别在发酵第1、3、7、15、30和60天开封,每个处理每次开封5袋,即5个重复。结果表明:(1)菌糠的营养成分丰富,粗蛋白含量较高(8.13%DM),特别是氨基酸组成丰富,是很有开发利用价值的饲料资源;(2)采用添加外源乳酸菌调制青贮饲料品质显著高于未添加者(P0.05),是一种保存菌糠饲料资源的有效方式;(3)红象草绿汁发酵液组菌糠青贮饲料的pH值(4.42)最低,乳酸含量(0.79%DM)最高,效果最佳;(4)发酵时间在15 d左右效果较好,超过30 d不良发酵产物较多,其机理以及不同材料绿汁发酵液中乳酸菌的种类和数量等需进一步研究。     

红薯渣固态发酵条件优化

本试验旨在选出最佳单一菌株且确定其混合菌比例和发酵路线,再运用正交试验对混合菌固态发酵红薯渣工艺进行条件优化,以达到提高产物粗蛋白质含量的目的。首先采用4株酵母菌,4株黑曲霉菌,5株枯草芽孢杆菌,1株乳酸菌,在相同发酵条件下固态发酵红薯渣,以产物粗蛋白质含量为主要衡量目标,进行单一菌株的筛选;再利用筛选出的4株最佳单菌进行发酵路线选择;最后对选出的发酵工艺以发酵时间、发酵温度、氮源添加量和菌液接种量4个因素为变量进行L16(44)正交试验,通过测定产物粗蛋白质含量,确定最佳发酵条件。结果表明,产朊假丝酵母、黑曲霉41126、枯草芽孢杆菌Y111、乳酸菌为最佳单一菌株;混合菌比例为(黑曲霉41126∶产朊假丝酵母=2∶1)+(产朊假丝酵母∶枯草芽孢杆菌∶乳酸菌=1∶1∶1)的二次发酵路线产物粗蛋白质含量最高,为15.11%;最佳发酵条件为:发酵时间3 d,发酵温度28℃,氮源添加量1%,菌液接种量3%。此发酵条件下,产物粗蛋白质含量达12.35%,较同等氮源添加量原料发酵前提升了85.99%,且产物能量值和氨基酸含量都有了不同程度的提升,尤其几种必需氨基酸含量明显上升。     

营养海带酸奶的研究报告

笔者以海带汁和鲜牛奶为主要原料,采用单因素试验、正交试验确定最佳发酵条件,并对该条件下发酵过程中的糖度、粘度和酸度变化进行检测分析。结果表明,最佳生产工艺条件为海带汁添加量8%、接种量5%、加糖量7%、发酵温度为42℃、发酵时间为4 h。所得产品的酸度和粘度优于普通酸奶,并且乳酸菌数可达到1.56×109cfu/m L,是普通酸奶的乳酸菌数的7.1倍。     

保加利亚乳杆菌冻干工艺中增菌的研究

本研究采用单因素试验和三因素正交试验对流加碱法和缓冲盐法在保加利亚乳杆菌冻干工艺中的增菌效果进行了研究,为保加利亚乳杆菌冻干菌的生产提供参数。结果显示,流加碱法增菌中,50%氨水溶液的增菌效果最好;缓冲盐增菌中,增菌效果最佳优化组合为5%的添加量、pH值为6.2、缓冲盐体系为C6H8O7.H2O-Na3C6H5O7·H2O;综合比较两种增菌方法,流加碱法效果优于缓冲盐法。     

乳酸菌醇化饮料的研究

本文研究了一种乳酸菌醇化饮料。以麦芽汁浓度、酸奶酸度、用量比和糖用量设计四因素三水平的正交试验,筛选出最佳风味的加工工艺参数。依据这些参数分别控制牛奶的乳酸菌发酵与麦芽汁的酒精发酵进程。结果显示:牛奶经乳酸菌发酵,待其酸度为90°T时,与经酵母24小时发酵的2%(以麦芽糖含量计)的麦芽汁以2:3(mm)相混合,加入10%的白砂糖,经过均质、杀菌过程,得到口味独特的含醇乳酸菌饮料。     

玉米酒糟乳酸菌发酵饲料培养基优化研究

利用一株嗜酸乳酸杆菌 ,以玉米酒糟为主要基质进行了酒糟培养基中的玉米、豆粕、预混料和麸皮等组分添加量的正交乳酸菌发酵试验。试验结果表明 :最佳酒糟乳酸发酵培养基组分为 :玉米 33% ,豆粕 13% ,预混料 3.0 % ,麸皮 2 .5 %。酒糟混合料接种乳酸菌 ,33℃条件下固态发酵15d ,发酵后酒糟混合料水分为 5 8% ,粗蛋白 18.6 2 % ,粗脂肪 3.32 % ,粗纤维 3.95 % ,17种氨基酸总量达 18.3% ;乳酸量 1.93% ,酒糟发酵料每克含乳酸菌菌数为 4 .2× 10 7,发酵饲料总体质量优于鸡用配合饲料 ,适口性好 ,而且可在厌氧状态下长期保存。     

香菇酸奶的工艺研究

以鲜牛乳和提取的香菇汁为主要原料,加入蔗糖、稳定剂等辅料进行调配,经杀菌后接种乳酸菌进行乳酸发酵,制成香菇酸奶,通过正交试验确定出发酵温度在42℃,接种量为4%,发酵时间4 h,鲜奶与香菇汁的比为2：1,制得的酸奶效果最佳。     

乳酸发酵型蓝莓乳饮料的研制

以蓝莓汁、牛奶为原料,将其按一定比例混合,接种经驯化的乳酸混合菌进行发酵,由正交试验确定最佳工艺参数。结果表明:最佳原料配比为:牛奶60%、蓝莓汁添加量14%、蔗糖量6.5%;最佳发酵工艺参数为:接种量3.2%、发酵时间4.4h、温度42℃。     

红茶菌中乳酸菌的分离与生物学特性

红茶菌是酵母菌、醋酸菌和乳酸菌的共生物。为进一步研究红茶菌中乳酸菌的生物学特性,从红茶菌中分离纯化出4 株乳酸菌（HC、HD、HQ、HL）,以形态和生理生化鉴定、产酸情况、生长性能、耐盐性、耐酸性和耐胆盐性测定综合评价红茶菌中4 株乳酸菌的生物学特性。结果表明：4 株菌均为植物乳杆菌;4 株乳酸菌的最适生长温度均为30 ℃,在14 h后均处于稳定期;菌株HC、HD、HQ和HL的最适接种量（体积分数）分别为4%、4%、6%和6%;4 株乳酸菌均有一定的耐盐性,耐酸和耐胆盐性均较好,其中HQ以最佳。     

鼠李糖乳杆菌乳酸发酵特性及碳氮源研究

通过对鼠李糖乳杆菌利用碳源、氮源能力的研究,探讨菌株产酸的最佳发酵条件。结果表明：高质量浓度葡萄糖对菌体的生长和乳酸发酵有一定的抑制作用;酵母粉是鼠李糖乳杆菌生长和产L-乳酸最理想的氮源,使用廉价的氮源黄豆粉和无机氮源硫酸铵替代培养基中的酵母粉,可以使产酸量基本不变。在接种量5%的情况下,以酵母粉为氮源,当葡萄糖初始质量浓度为60mg/mL时,在恒温厌氧箱培养48h,L-乳酸产量为48.25mg/mL,产率为80.53%。     

副产物乳酸对猪链球菌疫苗株ST171发酵的影响

为提高猪链球菌(S.suis)疫苗的高密度发酵效果,本研究对S.suis疫苗株(ST171)的发酵过程进行检测,利用外源添加试验研究乳酸对ST171发酵的影响,并通过对发酵工艺的优化减少乳酸的生成.结果表明,ST171发酵液中积累有大量对其生长及活菌数量有不利影响的代谢副产物乳酸.经优化确定ST171发酵的最优工艺参数为:溶氧水平20％,初始葡萄糖浓度10g/L,残糖浓度1g/L,最大比生长速率小于0.7 h-1.在优化条件下,发酵过程中乳酸生成量与原工艺相比降低了41.41％,菌体生物量和活菌数量分别提高了70.58％、129.09％,取得了良好的发酵效果.     

苜蓿绿汁发酵液特性的研究

研究加工方法、制汁容器、水草比例、添加白米醋与否对苜蓿绿汁发酵液的影响,以及绿汁发酵液对苜蓿青贮饲料的影响.结果表明,切碎处理绿汁发酵液的pH为3.82,显著低于榨汁(3.97,P<0.05);添加白米醋的绿汁发酵液乳酸菌数对数值为7.90,极显著(P<0.01)低于不添加者(8.15);榨汁或切碎处理中不同水草比及制汁容器绿汁发酵液的pH和乳酸菌数都没有差异.与对照相比,添加绿汁发酵液可显著降低(P<0.05)苜蓿青贮饲料的pH(4.66对应于4.98)和丁酸含量(0.012%对应于0.016%),减少非蛋白氮含量(58.51%对应于70.11%),增加乳酸含量(2.03%对应于1.79%,P<0.05);粗蛋白质含量则以5倍汁处理组最高,为20.99%,对照最低,为20.34%,且差异显著(P<0.05);对照组酸性洗涤纤维含量较低,为28.83%,绿汁发酵液处理组较高,为30.21%,且差异显著(P<0.05).     

陈皮柑汁对柱花草和水稻秸秆青贮品质的影响

为了探究陈皮柑（Citrus reticulata cv.Chachiensis）汁对柱花草（Stylosanthes guianensis L.）和水稻（Oryza sativa L.）秸秆青贮品质的影响，本试验在新鲜柱花草和水稻秸秆青贮中分别添加0%陈皮柑汁（对照组），1%和2%陈皮柑汁（试验组），青贮30 d后测定样品的化学成分和青贮指标，并对青贮发酵结果进行统计学分析。结果表明：与对照组相比，添加2%陈皮柑汁柱花草青贮pH值和氨态氮（Ammonium nitrogen，NH₃-N）含量显著降低（P<0.05），乳酸菌数量和真蛋白含量显著提高（P<0.05）；而添加陈皮柑汁对水稻秸秆青贮的pH值，蛋白质含量，乳酸含量皆无显著影响；添加陈皮柑汁的试验组，大肠杆菌数量皆降低，但差异不显著。由此可知，陈皮柑汁能够提高柱花草的青贮品质，其中，添加2%陈皮柑汁的柱花草青贮品质较好。     

苜蓿青贮饲料中优良乳酸菌菌株的筛选

本研究从苜蓿（Medicago sativa L.）青贮饲料中分离得到若干株乳酸菌,对所有菌株进行生长曲线和产酸速率测定,发现其中8个菌株产酸速率较快,能于24h内将培养基pH值降至4.0以下。根据形态、生化鉴定及16S rDNA同源性序列分析,鉴定4株为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）,2株为戊糖片球菌（Pediococcus pentosaceus）,1株为类植物乳杆菌（Lactobacillus paraplantarum）,1株为副干酪乳杆菌（Lactobacillusparacasei）。通过适当的工艺处理其有望作为乳酸菌添加剂单独或混合添加入青贮中以提高青贮饲料品质。     

分泌抗金黄色葡萄球菌细菌素乳酸菌的分离鉴定

为分离和筛选产抗金黄色葡萄球菌乳酸菌素的优势乳酸菌,利用乳酸菌分离培养基MRS从收集的各种腌制菜汁中分离培养乳酸菌,通过细菌培养特性、革兰氏染色特点、生理生化特性初步鉴定,同时根据Genbank中乳酸菌的16SrDNA序列设计特异性引物,采用PCR方法进一步鉴定,并以金黄色葡萄球菌为指示菌对乳酸菌的发酵上清液进行抑菌特性研究。结果表明,从腌渍菜汁中分离获得90株产酸菌,通过形态学、生理生化特性和PCR鉴定,结果73株产酸菌为乳酸杆菌;分泌产物抑菌试验表明,有10株菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性,经酸排除和过氧化氢排除试验,仍然有5株乳酸菌的分泌产物具有抑制金黄色葡萄球菌活性。可见,从腌渍菜汁分离到的乳酸菌具有抑制金黄色葡萄球菌活性的特性,主要是通过分泌乳酸菌素来发挥作用。     

表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌微胶囊制备工艺的优化

为使重组乳酸乳球菌在发酵生产后便于存储、运输,本试验利用可表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌pAMJ399-LFBA/MG1363制备微胶囊,优化微胶囊的制备工艺条件,并对胶囊化后重组菌的相关生物学特性进行检测。通过对不同壁材及壁材浓度进行控制单一变量试验,测定其包埋量,以筛选出最佳壁材及浓度。通过模拟胃肠液环境试验,比较微胶囊释放率,并对不同壁材进行保存期试验,比较最低活菌数,利用响应面试验确定最佳工艺条件,使用最佳工艺条件制备微胶囊后进行验证。优化后的结果为:选取海藻酸钠和壳聚糖作为壁材,在海藻酸钠浓度为2.49%,壳聚糖浓度为0.96%,CaCl₂浓度为6.67%,凝固时间为57 min的条件下微胶囊效果最佳,预测包埋量为7.85×10⁸ CFU/g。微胶囊在模拟胃液中稳定存在,在模拟肠液中可完全破裂,能释放出微胶囊内95%以上的乳酸乳球菌。海藻酸钠-壳聚糖微胶囊在4 ℃保存3周后,微胶囊中活菌数为1.41×10⁷ CFU/g。对微胶囊的最佳工艺条件验证结果为微胶囊的包埋量为8.08×10⁸ CFU/g;常温保存2周后,活菌数仍可达到3.89×10⁶ CFU/g;ELISA方法检测微胶囊内重组乳酸乳球菌可见表达的牛乳铁蛋白肽,抑菌试验可见微胶囊内重组乳酸乳球菌表达的牛乳铁蛋白肽对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌仍具有明显的抑制作用。以上结果表明,表达牛乳铁蛋白肽的重组乳酸乳球菌可制备成为低成本、保存期长、耐胃液的微胶囊,为重组乳酸菌在生产中的进一步应用奠定基础。     

赣南脐橙黄龙病相关内生菌的筛选及培养

基于高通量测序技术,对不同时期的患病脐橙树进行内生菌群结构分析比对,寻找黄龙病相关内生菌,然后利用不同培养基对内生菌进行富集并选择合适的培养基用于内生菌分离和纯培养。结果表明,5种菌随着患病时间的增长而增多,分别属于代尔夫特菌属（Delftia）、不动杆菌属（Acinetobacter）、假单胞菌属（Pseudomonas）、伯克霍尔德菌属（Burkholderia）和微杆菌属（Microbacterium）。经筛选后,选取NB果汁培养基和叶片培养基用于5种内生菌的富集、分离纯化和培养。植物内生菌在植物生长和抗病害方面都起着重要的作用,通过本文中的方法能有效的筛选并培养与柑橘黄龙病相关的内生菌,我们的结果将促进对柑橘黄龙病防治的研究。