台湾桤木花粉生活力的测定方法初探

【研究目的】探讨台湾桤木花粉萌发的适宜培养基组成、培养温度及台湾桤木花粉生活力的快速测定方法。【方法】以台湾桤木新鲜花粉为试材,采用花粉离体培养萌芽法及TTC染色法、I2-KI染色法、过氧化物酶沉淀法等方法进行研究。【结果】台湾桤木花粉离体培养的适宜培养液为：10%蔗糖+100mg/L硼酸;最适培养温度为25℃。过氧化物酶沉淀法是快速测定台湾桤木花粉生活力的适宜方法。【结论】蔗糖和硼是台湾桤木花粉萌发的必要条件     

核桃花粉形态及生活力的比较

为了给核桃花粉的保存、人工授粉及授粉树的配置提供理论依据,笔者测定了核桃楸、河北核桃、11个普通核桃品种花粉的形状、大小及不同保存条件下花粉生活力的差异。结果表明：核桃花粉形状为椭圆形或圆形;花粉生活力种间、品种间均存在一定的差异;用染色法测定表明,11个被测品种的花粉均有较强的生活力;常温条件下花粉保存时间较短,冷藏冷冻条件下花粉保存时间较长。     

油梨花粉形态观察和花粉生活力的测定

为筛选适合检测油梨花粉生活力的方法,本研究以‘哈斯’‘富尔特’‘桂研10号’为材料,采用形态观测法、联苯胺染色法和蓝墨水染色法对油梨的花粉生活力进行了测定。结果表明,在显微镜下观察,油梨花粉粒均呈现圆形,颜色呈黄色或淡黄色。采用形态观测法发现油梨的花粉生活力在78.32%～86.44%之间,联苯胺染色法测定油梨的花粉生活力在62.76%～72.08%之间,以上两种方法均测得‘哈斯’的花粉生活力较高。采用蓝墨水染色法测不同油梨品种花粉生活力均低于20%,不适用于油梨花粉生活力的测定。因此,形态观测法是一种较适合快速判断花粉生活力的方法,为油梨的授粉、花粉贮藏、杂交育种等工作提供了理论依据。     

辣椒花粉生活力最佳测定方法的筛选

研究结果表明：I－KI染色法，醋酸洋红染色法，TTC染色法，过氧化物酶沉淀法和培养基离体萌发法等5种方法的适用测定现采花粉的生活力，而要测定贮藏花粉的生活力只能用TTC染色法和培养基离体萌发法。不论对何种来源的辣椒花粉进行生活力测定，以离体萌发法所得结果最为直观，稳定，是测定辣椒花粉生活力的最佳方法。     

洋水仙花粉生活力的测定方法初探

以洋水仙品种‘Albany’、‘Mount Hood’、‘Geranium’的新鲜花粉为试材,采用TTC染色法、醋酸洋红染色法和离体萌发测定法来测定其生活力,以探寻测定水仙花粉生活力的最适方法。结果表明：醋酸洋红染色法和离体萌发测定法均能够准确测定出水仙花粉生活力,而TTC染色法不适合用于洋水仙花粉活力的测定,其中醋酸洋红染色法适用于洋水仙的花粉生活力快速测定,而离体萌发测定法则适合于洋水仙的花粉生活力准确测定。经过对9种培养液组合的方差分析显示：0.1g/ml蔗糖+0.1×10-3g/ml硼酸为最佳培养液组合。     

酸枣花器官结构、花粉形态及生活力比较研究

为了给酸枣花器官研究、花粉生活力的快速测定提供理论依据,笔者测定了不同的酸枣类型花器官结构、花粉形态及花粉萌发率和生活力的差异。结果表明：（1）不同的酸枣类型花序花朵数、花冠直径、蜜盘直径、雄蕊长度等方面都有不同程度的差异。花序花朵数一般在2~9个;单花雄蕊个数为5个;蜜盘颜色一般有淡黄色和黄绿色2种。（2）酸枣花粉比较小,通常在18.86~26.19 μm,以近球形为主,萌发孔以三孔沟居多。（3）不同的酸枣类型花粉的萌发率存在显著差异,其中酸枣4的萌发率最高,为32.54%;TTC法和I-KI法测定的花粉生活力显著高于离体培养法,测定值误差较大,故离体培养法更适合酸枣花粉生活力的测定。     

基于花粉形态与叶片形态的金柑属种质资源亲缘关系分析

本研究利用扫描电镜(SEM)对金柑属、柑橘属和枳属36个不同品种的花粉形态特征进行了观察研究,并结合叶形态观察结果进行了比较分析。结果表明,金柑属花粉粒大小为(21.18～31.35)μm×(14.05～26.18)μm,网脊宽为0.52～0.98μm,网眼为圆形或近圆形,直径大小为0.48～1.62μm;柑橘属花粉粒大小为(25.99～32.53)μm×(17.54～20.05)μm,网脊宽为0.72～0.92μm,网眼直径大小为0.51～1.10μm,多为圆形或近圆形;枳属花粉粒大小为(31.03～32.60)μm×(18.82～19.36)μm,网脊宽为0.38～0.40μm,网眼多为不规则多角形,网眼直径大小为1.45～1.46μm。金柑属和柑橘属的花粉粒大多数都具有4条萌发沟,2份枳属材料具有5条萌发沟。‘富圆金柑’具有较复杂的浮雕状纹饰,其余品种的花粉粒均为网状或细网状纹饰。花粉聚类分析结果显示当欧氏距离为10时,可将36份材料分为4个分支。叶的基本形态具有属的特异性,与花粉聚类分析推断出的亲缘关系一致。本研究结果可以为金柑不同种属的亲缘关系以及品种鉴定提供依据。     

芒花粉的生活力及测定方法比较

本研究先后采用了花粉离体萌发法、FDA染色法和I2-KI染色法测定了芒离体花粉的生活力。结果表明：在离体萌发法中,离体花粉在培养5 min后即开始萌发,培养30 min后花粉管平均长度达到了145.77 μm。芒离体花粉的平均初始萌发率为82.6 %,但花粉生活力下降很快,室温保存90 min的花粉其萌发率已下降至3.0 %。因此利用离体萌发法能够准确有效地测定芒花粉生活力的变化规律。而利用FDA染色法和I2-KI染色法测定的芒花粉初始生活力与离体萌发法的结果基本一致,分别为84.6 %和86.6 %,但这两种染色法不适合用于跟踪测定花粉生活力的变化。     

长期储藏芍药花粉生活力测定方法研究

以培养基萌发法为对照,采用I2-KI法和TTC法对长期储藏于室温、4℃、-20℃条件下的芍药花粉生活力进行研究。结果表明：芍药花粉活力和萌发率随储藏时间的延长逐渐降低,且萌发率下降速度较快;室温下,花粉储藏七天萌发率降为0,I2-KI法和TTC法与对照间呈极显著相关;4℃和-20℃分别储藏六个月和九个月花粉萌发率降为0,4℃储藏四个月内和-20℃储藏七个月内的花粉用I2-KI法测定生活力更准确。     

濒危植物永瓣藤种子生活力测定研究

永瓣藤为我国东部特有的濒危物种,在系统发育、生态和药用等方面具有重要的意义,因其种子具有休眠特性,常规的发芽试验法很难快速、准确测定其种子生活力。采用四唑染色法,设置不同的TTC质量分数、TTC的pH值、染色时间的正交试验,研究永瓣藤种子的生活力测定条件。结果表明,TTC法能快速有效地测定永瓣藤种子生活力,对生活力测定的影响因子从大到小依次为TTC质量分数、pH值和染色时间,其染色最佳条件是用pH值为7.0,1.0%(w/v)TTC溶液避光染色3 h。     

陕北农牧交错带牧草生产力分析

根据陕北农牧交错带的生态环境特点以及牧草生长发育过程对水热资源的要求和利用效率,运用迈阿密模型定量估算陕北农牧交错带七县区牧草自然生产力。并与牧草现实生产力进行比较。研究表明：陕北农牧交错带牧草现实生产力仅为自然生产力的30.80%。基本掌握了该区牧草生产力状况和特点,并据此提出了相应的开发战略和实施途径     

美国梾木(Cornus spp.)花粉活力及萌发特性

为了了解美国梾木花粉活力及萌发特性,采用扫描电镜技术对13个美国梾木无性系花粉形态进行观测与方差分析,并采用荧光显微技术和TTC染色法对无性系2号花粉萌发特性及花粉活力进行观察。结果显示:(1)不同无性系间花粉大小差异不显著,但外壁纹饰差异较大,极面沟距的变异系数最高且遗传最为稳定。(2)花序开花率为75%时花粉活力最高,整花4℃条件下短期保存花粉活力较高。(3)授粉后,多数花粉可在柱头上正常萌发,72 h后花粉管即可进入子房。研究认为,花粉外壁及极面沟距可作为鉴定美国梾木无性系的形态指标,美国梾木花粉活力及萌发特性是抗逆及丰产杂交组合的重要保证。     

兜兰花粉活力及柱头可授性探究

本研究以‘绿肉饼’兜兰为试验材料,用扫描电子显微镜对其花粉块进行研究分析。结果显示,花粉块可分为两半,表面光滑呈现紧密网状结构。为获得‘绿肉饼’人工授粉最佳时间,采用TTC (氯化三苯基四氮唑)染色和联苯胺-过氧化氢法进行花粉活力及柱头可授性的研究。TTC染色法结果表明,‘绿肉饼’的花粉活力呈现从弱到强再到弱的趋势,其中开花15~20 d的花粉活力最大,授粉率较高;联苯胺-过氧化氢法结果表明,‘绿肉饼’的柱头可授性随开花时间先弱后强再变弱,其中开花10~20 d的柱头可授性最高。     

北沙参花粉形态特征、活性及萌发条件研究

为了认识北沙参的花粉粒形态特征和生理特性,利用离体培养法测定花粉粒活性,并对培养条件(蔗糖的质量分数、硼酸的质量浓度和氯化钙的质量浓度)进行筛选,同时与碘-碘化钾(I2-KI)、氯化三苯基四氮唑(TTC法)和亚甲基蓝等花粉活性测定方法进行比较,建立测定北沙参花粉活性的最适宜方法,利用离体培养法进一步检测保存时间、温度和湿度等对北沙参花粉活性的影响,应用扫描电镜观察花粉粒的大小形态等特征。结果表明,亚甲基蓝法适于北沙参花粉粒活性测定,I2-KI法和TTC法不适合。北沙参体外萌发的最适培养基是20%蔗糖+0.1%mg·mL^-1硼酸+0.1%mg·mL^-1氯化钙,萌发率可达72.9%。北沙参花粉在湿度15%~52%,25℃条件下活性最好,4℃、-20℃的低温或大于60%的湿度都会导致花粉活性降低。北沙参花粉粒形态为超长方形,具3个狭长萌发沟,表面为网状。     

地中海仙客来花粉生活力研究

为进行种内繁殖及种间杂交,利用TTC染色法对4种不同类型的地中海仙客来花粉活力进行测定,同时利用I₂-KI染色法和花粉萌发法对H型花粉活力进行了测定。结果表明：TTC染色法是测定地中海仙客来花粉生活力的最佳方法。不同类型地中海仙客来在花粉活力及持续期上均存在明显差异;开花后第2~3天是采集花粉的最佳时期;H型及B型花粉开花后第5天,L型第7天,X型第12天花粉生活力仍在40%以上,可利用此花粉进行授粉。本研究为地中海仙客来杂交授粉提供了重要依据。     

不同贮藏温度条件下3个烟草品种花粉活力、形态及生理指标变化

以烟草品种N. rustica、Maryland 609和云烟85花粉为试验材料,研究不同贮藏温度条件下参试烟草品种花粉的活力、形态及相关生理指标的变化。以烟草品种N. rustica冻存花粉活力检测结果为例,在-196℃和-80℃保存条件下,花粉贮藏16个月后活力分别为0.64±0.06和0.65±0.09,与贮藏前0.66±0.04相比,未出现显著下降,而4℃贮藏的花粉在保存5个月后即丧失活力。花粉电镜图片显示,在-196℃和-80℃贮藏条件下,花粉形态仍然规则饱满,而4℃条件下贮藏16个月的花粉则发生皱缩、畸形,萌发沟扭曲。-196℃贮藏条件下N. rustica的花粉可溶性糖含量（309.276mg/g）、可溶性蛋白含量（55.216mg/g）、游离氨基酸总量（15.817μmol/mg）、脯氨酸含量（1.596mg/g）、超氧化物歧化酶（SOD）活性（4.284U/g）均显著高于4℃贮藏条件下的花粉;-80℃贮藏条件下花粉脯氨酸含量（1.626mg/g）和SOD活性（5.546U/g）高于-196℃（液氮）条件下贮藏的花粉,可能与不同温度下花粉冻结速度有关。结果表明,-196℃和-80℃条件下保存对烟草花粉的活力保持更有利。