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猪致病性大肠杆菌的质粒指纹图谱分析 总被引:12,自引:0,他引:12
在系统鉴定和药敏试验的基础上,对70株致病性大肠杆菌进行了质粒指纹图谱分析。结果,菌株的质粒得率为100%,可分为32种质粒谱型。分离菌株在遗传距离0.140处聚成4类,在遗传距离0.224处聚成一大类。来源相同的菌株具有相同或非常相似的质粒图谱和质粒酶切图谱,来源不同的菌株具有不同的质粒图谱和质粒酶切图谱。来源相同菌株的质粒谱相同,而耐药谱可相同亦可不同,两者之间无明显规律。 相似文献
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仔猪断奶腹泻是集约化养猪生产中一种典型的多因素性疾病,但从病原角度看,多与产肠毒素型病原性大肠杆菌有关. 相似文献
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在115株猪大肠杆菌耐药性监测的基础上,提取耐药类型最普遍的5株耐药菌的质粒进行质粒指纹图谱分析。结果表明:同一来源、耐药类型相同的菌株有相似的质粒图谱,来源不同者,酶切图谱有提示出它们之间的同源性,说明质粒指纹图谱可作为流行病学调查的工具。 相似文献
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鸡源大肠杆菌的质粒及染色体DNA分析 总被引:4,自引:0,他引:4
为研究鸡源大肠杆菌分子流行病学规律,选用40株鸡源大肠杆菌(均含有质粒),应用指纹法对其质粒及染色体DNA进行了分析。对菌株的质粒图谱比较表明,来源相同的菌株,其图谱相同或相似;来源不同的菌株,其图谱一般不同。选取HindⅢ对质粒DNA进行酶切,进一步证实了质粒图谱分析的结果。对菌株质粒型(plasmidtype,PT)进行数值聚类分析,得出PTs间的聚类树状图,更直观地反映出菌株间的遗传关系。试验中还发现,多数鸡源大肠杆菌含有大质粒,它们可能含有毒力相关基因。选用HindⅢ、EcoRI分别对染色体DNA进行酶切,均能够产生较易于识别的酶切图谱,菌株的图谱与其来源也具有一致性 相似文献
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四种禽源支原体核酸限制性酶切图谱分析 总被引:2,自引:0,他引:2
以EcoRI、HindIII酶解四种食源支原体基因组DNA所获得的片段用琼脂糖凝胶进行电泳。结果表明,四种禽源支原体基因组DNA经上述酶切后所获得的片段图谱有很大的差异性,表明它们之间的相关性很小;8个鸡毒支原体菌株DNA经酶切,电泳后所获得的片段亦具有相对的差异性,说明酶切图谱分析不适用于禽类支原体各的鉴定。由于该技术有很高的分辨率,可以区分同种不同株之间的基因差异,因此,这种技术对禽类支原体病 相似文献
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以EcoRI、HindII酶解四种禽源支原体基因组DNA所获得的片段用琼脂糖凝胶进行电泳。结果表明,四种禽源支原体基因组DNA经上述酶切后所获得的片段图谱有很大的差异性,表明它们之间的相关性很小;8个鸡毒支原体菌株DNA经酶切、电泳后所获得的片段亦具有相对的差异性,说明酶切图谱分析不适用于禽类支原体种的鉴定。由于该技术有很高的分辨率,可以区分同种不同株之间的基因差异,因此,这种技术对禽类支原体病流行病学研究很有意义,并为今后禽源支原体分子生物学研究打下了基础。 相似文献
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从广西各地病死猪器官、组织中分离到17株细菌,经细菌形态、培养特性及生化反应鉴定为大肠杆菌。作本动物回归试验、小白鼠致病性试验和溶血试验结果表明,全部为致病性大肠杆菌。血清定型鉴定结果发现,菌株血清型分布不规律。17株致病性大肠杆菌的质粒指纹图谱显示:来源于不同猪群的菌株GP20-3和GP25-1以及GP18-9和GP8-3分别具有相同的质粒图谱,说明发病猪群传染源的首发菌相同。所有菌株都含有1条大小相同的质粒带,广西流行的猪水肿病主要是由在遗传学上具有高度同源相关性的大肠杆菌的广泛流行传播所引起。菌株GP18-9和GP8-3的质粒指纹图谱相同,但它们的血清型却不一致的现象,可作为自然条件下,同一质粒在不同血清型大肠杆菌中扩散转化的一个生物学依据。 相似文献
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本试验对临床分离的多重耐药鸡源致病性大肠杆菌强毒株的耐药基因进行初步定位,为临床选择合适的治疗策略提供理论依据。从送检病死鸡的肝脏、心脏中分离鉴定致病菌,质粒提取试剂盒提取分离菌的耐药质粒,转化入基因工程菌JM109,通过质粒纯化、电泳和药敏试验对耐药基因进行了初步定位。并用艾叶水煮液对该菌株进行体外耐药质粒消除试验。结果分离鉴定到1株强毒力鸡源大肠杆菌,该菌呈多重耐药性,且仅对氟奇霉素和链霉素敏感;由质粒转化和药敏试验结果可初步将耐环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的基因定位于耐药质粒上,并可随质粒的转移而使转化菌获得耐药性;用艾叶水煮液可使该菌的耐药质粒消除率达60%;质粒消除菌的药敏试验结果表明,消除耐药质粒的细菌恢复了对环丙沙星、青霉素、氧氟沙星、氟哌酸、林可霉素和复方新诺明的敏感性。本研究结果表明,分离菌的耐药基因分别位于质粒和染色体上,艾叶对耐药质粒有较强的消除作用,可作为临床治疗用药。 相似文献
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猪源大肠杆菌质粒和染色体介导的喹诺酮类药的耐药机制 总被引:3,自引:0,他引:3
采用微量肉汤稀释法对31株猪源大肠杆菌进行6种喹诺酮类药物的敏感性测定,聚合酶链式反应检测质粒介导的喹诺酮类耐药(PMQR)基因qnr、qepA和aac(6′)-Ib-cr,并分析PMQR基因阳性菌株染色体gyrA、gyrB、parC、parE基因的喹诺酮耐药决定突变区(QRDRs)突变。结果显示,31株猪源大肠杆菌对兽医临床常用的氟喹诺酮类药物均呈现耐药。在31株猪源肠杆菌中共检测到2株携带qnrB10和4株携带qnrS1基因的大肠杆菌,未检测到qnrA、qepA和aac(6′)-Ib-cr。在PMQR阳性菌株gyrA基因的QRDRs中,低耐药菌株的gyrA基因出现83位S→W突变,高耐药菌株的gyrA基因同时出现83位S→L和87位D→N突变。而在parC基因的QRDRs中,大部分耐药菌株出现80位S→I突变,1株耐药菌株出现45位V→L突变。gyrB和parE基因的QRDRs未检测到突变。结果表明,本地区猪源大肠杆菌对兽医临床常用的氟喹诺酮类药物耐药严重,PMQR的出现和QRDRs的点突变可同时协同贡献对喹诺酮类耐药,而PMQR的出现加速了喹诺酮类耐药基因的快速传播。 相似文献
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为探讨中药对河南省规模化养猪场致病性大肠杆菌(E.coli)耐药质粒消除的效果,本研究在对87个猪致病性E.coli分离株进行耐药质粒检测的基础上,将各分离株分别于含有不同浓度的石榴皮、黄芩、黄连等中药提取液的培养液中培养,进行耐药质粒消除试验;并采用影印培养法和纸片扩散法进行耐药性消除菌落筛选及其对抗菌药物敏感性恢复的检测.结果表明:各分离株均含有2个~8个质粒,大小约为1.0 kb~87.0 kb;经石榴皮、黄芩、黄连作用后,各分离株均可以获得数量不等的耐药性消除菌落,消除率为0.34%~16.2%,以黄连的平均消除率最高,为9.33%;在耐药性消除的各分离株中,有25个分离株未发生质粒消除,其余均消除了1条~3条质粒,并且对7种抗菌药物的平均敏感率由消除前的5.39%分别提高至60.4%、75.2%和76.5%.表明石榴皮、黄芩、黄连对猪致病性E.coli具有质粒消除和耐药性逆转作用,其中黄连作用效果最好. 相似文献
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鸡源大肠杆菌的药敏图谱分析 总被引:2,自引:1,他引:1
对37株大肠杆菌的药敏图谱进行分析,结果表明;分离于同一鸡场的菌株图谱一致;分离于不同地区或同一地区不同地方的菌株,其图谱一致性差。菌株为多重药,其敏感药物为临床上较少应用的。 相似文献
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鹑源减蛋综合征病毒QAVc—94株的酶切图谱分析 总被引:2,自引:0,他引:2
选HindⅢ、EcoRⅠ、PstⅠ、SphⅠ、BamHⅠ、BamHⅠ和BglⅠ6种限制酶,对QAVc-94株和AV-127国际标准株的DNA进行酶切图谱比较结果发现,QAVc-94株用上述6种酶酶切得到的片段数分别为10、3、12、4、6、9条,将各片段碱基数相加得出其基因组长34.7kb,略高于国内的报道,而与Zask等的结果相接近,从分子水平上将QAVc-94鉴定为一株EDSV。对照AV-127株的酶切结果与文献报道相符。QAVc-94株酶切图谱分析显示:HindⅢ和EcoRⅠ的酶谱与报道的其他EDSV分离株基本相似,HindⅢ的酶谱与国内研究最多的AA-2长春分离株一致,EcoRⅠ的酶谱结果与Zask等报道的B8/78株相同。而其他4种限制酶的酶切图谱与已报道的各地分离株相比,差异较大,如PstⅠ和BglⅠ多出2-5个识别位点。说明鹌鹑源EDSV已与鸡源、鸭源、鹅源EDSV有较大的变异,是一株血清型相同而基因型不同的鹌鹑减蛋综合征病毒。 相似文献
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为了探究水禽源大肠杆菌的耐药性、耐药基因携带情况及其与质粒的相关性,试验用纸片扩散法检测62株水禽源大肠杆菌对14种抗菌药物的耐药性,用PCR方法对13种耐药基因和18种质粒进行扩增,并对质粒检出率较高的阳性菌株进行耐药基因的检测。结果表明:62株水禽源大肠杆菌对阿莫西林、美洛西林和链霉素的耐药性较高,耐药率分别为88.7%、74.2%和51.6%;对丁胺卡那和头孢哌酮耐药性较低,耐药率分别为3.2%和1.6%。aac(6′)-Ib、TEM、qnrD及qnrS基因的检出率较高,分别为66.1%、59.7%、46.8%和29.0%;共检出6种质粒IncFIA、IncFIB、IncY、IncI1、IncHI2、IncN,其中质粒IncFIB的检出率最高,为80.6%。IncFIB阳性菌株的aac(6′)-Ib基因检出率为72.0%,qnrS基因检出率为22.0%。说明水禽源大肠杆菌耐药性高,常见耐药基因以aac(6′)-Ib为主,常见质粒以IncFIB为主,质粒IncFIB介导的aac(6′)-Ib基因传播较为流行。 相似文献