双低油菜品种组织培养的反应

在有激素培养基中萌发的油菜种苗的子叶大而厚、根少而短、下胚轴粗短,并有少数愈伤组织出现。2,4—D1～3mg/1均能诱导愈伤组织形成,添加0.1～1mg/16BA有利于愈伤组织的分化培养。子叶愈伤组织诱导率高于下胚轴,三个品种中,双低油菜DSV—SR—50的诱导率最高。来自激素萌发培养基的下胚轴的愈伤组织发生早、发展快、诱导频率高,并有直接分化出芽的。愈伤组织在含有IAA1mg/l和6BA1～7mg/l的B5培养基中都能分化出芽,但以添加6BA3～5mg/l对频率最高。小塔的愈伤组织分化频率最高为45.65％,以下为DSV—SR—5034.32％,Liglando 22.79％。并讨论了前期培养基和材料基因型与愈伤组织诱导分化的问题。     

西洋参的胚状体发生与植株再生

用通过低温阶段的西洋参(panaxquinquefolium L.)种胚,先在MS+24—D(0.5—2.0mg/l)+CA(500—2000mg/l)的培养基上诱导出愈伤组织,继代培养2代,在胚性愈伤组织上发生胚状体,然后接在y2MS+6—BA0.5mg/L培养基上成长为绿色小苗,经过壮苗培养6个月,主根直径0.4厘米,盆栽成活。     

茶树花药培养应用诱导茎切片愈伤组织的适宜培养基条件(摘要)

通过组织培养技术,研究茶树(供试材料薮北种)茎切片和花药愈伤组织诱导的适宜培养基条件,以再生完整植株。采用 Murashige& skoog 培养茎,璃脂0.8——1%。适宜的条件是,蔗糖浓度3%,     

马铃薯极早熟品种东农303再生系统的筛选

以马铃薯品种东农 30 3的脱毒试管苗为供试材料 ,进行了 5种培养基对试管苗茎段愈伤组织诱导和植株再生影响的试验。结果表明 :不同的培养基表现出不同的诱导效果 ,愈伤组织诱导的最佳培养基是 2号培养基 (MS + 0 0 1mg/LNAA + 3mg/LBA) ,愈伤率是 90 4 %。植株再生的最佳培养基是 5号培养基 (MS + 2 2 5mg/LBA + 5 0mg/LGA3) ,再生率是 98 3%。     

大豆花粉离体培养获得愈伤组织

大豆花穗置低温(7°—8℃)冷处理5、8、10、12天,取花药置培养皿中,用盖玻片压出花粉粒,去掉残渣,加入液体培养基。基本培养基是改良的B_5,参照高国楠原生质体培养基附加糖、椰乳、水解酪蛋白等有机物,0.05—0.2mg/l 2.4—D,0 1～0.5mg/l Zeatin,0.5—1mg/l NAA。20天后见花粉分裂,30天见细胞团,40—50天形成肉眼可见的愈伤组织。分裂的花粉最后达接种时培养皿中花粉的60—70％以上。活体观察花粉分裂大致有多细胞型和游离核型。将直径2mm大小的愈伤组织转至固体培养基继代增殖而获得大量愈伤组织。分化培养获得根,未见芽的分化。     

甘蔗（甘蔗属热带种）叶鞘离体培养中的愈伤组织诱导和绿苗分化

甘蔗叶鞘外植体在外加不同生长调节剂(IAA、NAA和2，4—D)，加或不加椰乳的改良MS培养基上培养诱导愈伤组织。结果表明，本研究添加伪不同生长素中，只有NAA和2，4—D能诱导出愈伤组织，其中，各种供试浓度2，4—D诱导愈伤组织助效果都比相应浓度NAA的诱导效果好。经过10天的培养，在不同供试浓度中，3mg／L2，4—D诱导甘蔗品种Isd16和无性系1327—86分别形成具有再生能力的乳白色愈伤组织和谈绿色愈伤组织最多。Img/LBA 0.1mg/LIBA和1mg/LBA 0.5mg/L NAA从这两组生长调节剂使愈伤组织分化绿苗的效果最好。甘蔗无性系1327-86比品种Isd16分化出比较浓密但个体小的绿苗。     

三十烷醇在油菜外植体不定根诱导中的作用

在含三十烷醇的B_5培养基中(蔗糖浓度4％),发现在所试三十烷醇浓度范围内(0.1—10.0mg/l)有明显促进油菜外植体不定根形成。结果表明,诱导子叶和子叶的愈伤组织形成不定根的最适浓度为1.0mg/l,过高或过低效果都不令人满意。下胚轴的诱导效应则随三十烷醇浓度增加而增加。诱导效应的变化与可溶性糖含量和呼吸强度关系很大。     

热研7-33-97袋装苗叶片愈伤组织诱导培养研究

为扩大橡胶树组织培养外植体来源和建立高效稳定的橡胶树叶片离体再生体系,以1年生巴西橡胶树品种热研7-33-97袋装苗叶片为材料,研究叶片的预处理、0.1%升汞不同消毒时间、离体叶片切取部位、3种激素(6-BA、NAA、2,4-D)不同浓度配比对愈伤组织诱导的影响,筛选愈伤组织诱导最适培养基。结果表明:用液体培养基MS+3mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA对橡胶树袋装苗叶片进行预处理,可诱导出愈伤组织;用0.1%升汞对袋装苗叶片消毒15 min,其存活率达2.47%,为最佳消毒方法;用含主脉叶块和含主脉出愈叶块未出愈伤组织部分进行培养所诱导的愈伤组织质地较坚实、呈黄绿色,为橡胶袋装苗叶片培养的最适宜外植体;橡胶袋装苗叶片最佳愈伤组织诱导培养基是MS+3 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+4%蔗糖+3 g/L植物凝胶,用此培养基对含主脉叶块和含主脉出愈叶块未出愈伤组织部分进行培养,其出愈率分别达49.07%和42.22%。结论:大田1年生橡胶树品种热研7-33-97袋装苗叶片经预处理后选择含主脉叶块为外植体,可诱导出理想的愈伤组织。     

小麦幼胚培养基因型的筛选

为了筛选出小麦幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型，以19个小麦品种的幼胚为材料，采用多种诱导和分化培养基进行组织培养，井于分化前对部分愈伤组织进行了冷冻、干燥和置于分化培养基上暗培养等物理处理，研究了基因型、培养基及二者的互作效应等因素对愈伤组织的诱导、分化和植株再生的影响。结果表明，不同基因型间差异显著。其中89(117)在组织培养时反应良好，幼胚愈伤组织的绿原基分化率和出苗率分别为83．3％和32．2％，显著高于19个品种的平均值72．5％和19．6％，立该品种幼胚的出愈率和再生苗生根率也很高，可作为幼胚培养和转基因受体材料的优良基因型；同时，基因型与分化培养基问存在显著的互作效应，如：89(117)、豫麦66和豫麦18—64的出苗率在培养基I、G和E上分别高达61．3％、52．8％和43．6％，而在培养基D、F和C上则只有13．3％、7．4％和21．4％。因此，在筛选优良基因型时应同时筛选出适合于该基因型的培养基。本试验中适于品种89(117)的培养基为：诱导培养基Ⅳ(激素组合为：2，4—D2mg/L ABA0．5mg/L)、继代培养基①(激素组合为：2，4—D 1mg/L ABA0．5mg／L KT lmg／L)和分化培养基A、B、G或I。研究结果还表明，光照分化培养前的干燥和冷冻处理对愈伤组织快速分化出苗有很大的促进作用。     

离子注入后双胚苗突变水稻的无性系诱导

以离子注入后同源四倍体双胚苗突变水稻及其衍生后代为研究材料,利用无性系诱导技术对愈伤组织的脱分化和再分化特性进行了初步研究。研究结果表明,同源四倍体水稻与相应的二倍体水稻在无性系诱导中存在着明显的差异;在试验中将2,4-D浓度由2.0 mg/l提高到2.5 mg/l则可以获得比较高的诱导率;半胚乳处理不但能提高愈伤组织的诱导率,也能提高愈伤组织的质量,干燥处理能提高愈伤组织的分化率。     

国内报刊花生文摘(二)

生长健壮的花生根瘤在CLS(经修改了的LS培养基,其中无机盐、微量元素和有机物成分均与LS培养基相同,附加物成分为2,4-D1mg/L,泛酸钙5mg/L,维生素E100mg/L,维生素H2×10~(-9)mg/L)培养基上诱导出愈伤组织,形成愈伤组织的频率达到26.5％～36.6％。根瘤愈伤组织能多次继代,生长良好,在分化培养基D-57和D-59上已分化形成了根,其生根频率分别为56％和78％。采用石蜡切片和显微镜观察表明,红安直立根瘤愈伤组织分化形成的根具有根的解剖结构。     

剑麻愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以剑麻H.11648为材料,研究外植体类型、激素种类及其浓度对剑麻愈伤组织的诱导和植株再生的影响,并且建立剑麻茎尖愈伤组织诱导及高频再生体系.结果表明:MS基本培养基、6-BA/NAA激素组合有利于淡黄绿色愈伤组织的形成,SH基本培养基、6-BA/IBA/NAA激素组合有利于不定芽的分化;最佳愈伤组织诱导和分化培养基分别为MS+3.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA,SH+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA.在该培养条件下,H.11648麻茎尖愈伤组织的诱导率为86.67％,分化率为(98.33+1.67)％,分化系数为(13.19±0.58).再生植株在不加激素的MS基本培养基上培养4周后的生根率为100％,平均生根数为(5.39±0.70)条,根长为(8.44±0.25)cm,该研究结果为剑麻转基因的研究和种质创新奠定了基础.     

水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织再生体系的建立

采用水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体，通过优化激素组合和调节培养基渗透压，建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系，将水稻成熟胚诱导愈伤组织分化再生的过程划分为3个不同时期，即成熟胚盾片愈伤组织诱导，胚性细胞诱导保持，胚性愈伤组织分化再生，以CultureI(LS 2,4-D2.0mg/L)诱导成熟胚盾片愈伤组织，愈伤组织剥离后接种于Culture II-3(LS 2,4-D 2.5mg/L 山梨醇3g/L)上诱导胚性愈伤组织，继代后接种于Culture Ⅲ-2(MS NAA 0.5mg/L 6-BA 1.0mg/L Kinetin 2.0mg/L 山梨醇8g／L）上分化成苗，培养结果表明，该再生体系所获得的胚性愈伤组织分化再生率均在60％－80％之间，利用本研究建立的高效再生体系建立水稻外源基因遗传转化系统，使转化过程中所得转化愈伤组织高效再生成苗，从而顺利获得转化植株，可以提高水稻外源基因转化的效率，为水稻品种的定向遗传改良提供优良的遗传转化技术体系。     

茄子游离小孢子培养初探

以10份本地主栽长茄品种为试材,对二倍体茄子游离小孢子培养进行研究.结果表明:7份材料可诱导出愈伤组织,‘黑金刚’长茄愈伤组织诱导率可达8.3个/蕾;单核期小孢子是诱导愈伤组织最佳时期;4～6d蔗糖饥饿结合35℃高温预处理是小孢子脱分化的必要条件;愈伤组织诱导与培养分3段进行,先以1.5 NLN培养基附加甘露醇90g/L、2,4-D 0.5 mg/L、NAA 0.2 mg/L、6-BA 0.2 mg/L 35℃暗培养4～6d,接着添加等体积60g/L蔗糖培养基25℃暗培养3d,再均分成2皿,每皿添加等量30g/L蔗糖的培养基,25℃暗培养5～10d肉眼可见愈伤组织.     

桂糖42号胚性愈伤组织高效诱导及相关内源激素的动态变化

以优良甘蔗品种桂糖42号心叶为外植体,以MS为基本培养基,探究不同浓度2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)及营养成分[水解酪蛋白(CH)和椰汁(CW)]对甘蔗胚性愈伤组织诱导效果的影响,优化甘蔗胚性愈伤组织诱导培养基;测定诱导胚性愈伤组织发生过程中不同组织样品的4种激素[玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA₃)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)]含量。结果表明,甘蔗心叶在添加3.0 mg/L 2,4-D的MS培养基中其愈伤组织诱导率达93.33%,第一代愈伤组织转接于添加3.0 mg/L 2,4-D和100.0 mL/L CW的MS培养基,其胚性愈伤组织诱导率达83.33%;在甘蔗胚性愈伤组织诱导过程中,内源激素ZR和GA₃含量呈下降趋势,IAA和ABA含量呈上升趋势,胚性愈伤组织与非胚性愈伤组织间的4种激素含量均存在显著差异(P<0.05),其中,胚性愈伤组织的GA₃含量是非胚性愈伤组织的1.77倍。本研究将甘蔗愈伤组织诱导培养基优化为MS+3.0 mg/L 2,4-D,继代培养基优化为MS+3.0 mg/L 2,4...     

绿绒海芋Alocasia micholitziana的组织培养及其植株再生的研究

以绿绒海芋Alocasia micholitziana的叶片、叶柄为外殖体,研究不同灭菌剂对外殖体消毒效果的影响、不同激素及浓度配比的培养基对愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖的影响。结果表明：（1）消毒处理时叶柄适于用0.1％ HgCl2浸泡处理8 min,叶片则为7 min;（2）叶柄、叶片在所试培养基中均能诱导出愈伤组织,最佳诱导培养基为MS+2 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,叶柄愈伤组织诱导率可达100％;（3）从愈伤组织诱导不定芽的最佳培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA,诱导率可达100％;（4）在培养基MS+2 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA上,芽增殖效果最佳,苗生长健壮;（5）最佳生根培养基为1/2MS+0.5 mg/L IBA,移栽后苗容易成活;（6）苗移栽时以泥炭土 ∶ 珍珠岩 ∶ 蛭石(3 ∶ 1 ∶ 1)成活率较高,可达98％以上,而且小苗生长健壮。     

2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生

进行了无核白、红地球2个葡萄品系外植体愈伤组织诱导和植株再生的研究。通过葡萄品系无核白、红地球叶片和叶柄外植体的愈伤组织的诱导、再分化,以器官发生途径实现植株再生。结果表明:(1)愈伤组织诱导以MS+BA5mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖40g/L培养基最佳,诱导率为35%;同一葡萄品种的叶片与叶柄诱导愈伤组织的频率基本相同,而红地球外植体诱导愈伤组织的频率高于无核白;(2)不定芽的诱导再生以1/2MS+BA0.5mg/L+NAA0.05mg/L+CH500mg/L+蔗糖30g/L培养基最佳,平均诱导率达35.4%;叶柄来源的愈伤组织诱导不定芽的频率高于叶片愈伤组织;(3)根系的诱导以1/2MS+KT0.5mg/L+IBA1.0mg/L+AC2g/L+蔗糖15g/L培养基最佳,无核白和红地球来源的不定芽诱导生根频率基本相同,都在80%以上。     

陆地棉细胞悬浮培养体的体细胞胚胎发生

1983年10月从3日龄陆地棉(Gossypiumhirsutum)栽培品种C312,RQSX-1-1,C3110,P784,1303,T25和T169幼苗下胚轴产生的6～8周愈伤组织发现含有球状到心形早期胚,以与陆地棉胚珠的胚显微镜观察比较为准。愈伤组织放入液体培养基,其中T25和C3112形成胚胎发生的细胞悬浮体。C312选择为胚发育成成熟植株的典型体系。愈伤组织是从MS 盐类附加100mg/l 肌醇,10mg/l 盐酸硫胺素,1mg/l 菸酸,1mg/l 吡哆醇,30g/l 蔗糖,0.1mg/l 2,4-D 和0.1mg/l 激动素,或0.5mg/l 激动素。装有50ml液体培养基的欧氏三角瓶,接种约0.5g 愈伤组织,旋转振荡120rpm°,培养体经纱布过滤保持,取部分残留物培养在基础培养基上。含有单细胞和小细胞团(10～20细胞)的滤过物,转移到装有基础培养基的瓶内,基础培养基不加荷尔蒙,加谷酰胺,供发育     

小麦不同外植体的组织培养效果研究

良好的组织培养效果是提高植物基因转化效率的基础。以山东省近年来育成并大面积推广的10个优良品种（系）为材料,对这些品种的花药、幼穗、幼胚和成熟胚的组织培养效果进行研究,旨在筛选每一基因型最适合于组织培养的外植体类型,为应用基因工程技术进行小麦遗传改良提供基础材料。结果表明,禽伤诱导率和再生成苗率与基因型和外植体类型（花药、幼穗、幼胚和成熟胚）密切相关。8802在花药和成熟胚培养中表现突出,花药出愈率达119．5％,愈伤分化成苗率19．9％;烟农19的幼穗愈伤直接分化成苗率最高,这43．5％;8802、烟农19和潍麦8号三个基因型的幼胚培养效果差异不显著,其愈伤分化成苗率分别为26．3％、24．5％和24．8％。蔗糖浓度在3％～9％之间,对成熟胚的愈伤组织诱导率影响很小。高浓度蔗糖降低愈伤生长速度。在一定蔗糖浓度下,愈伤诱导率与2,4-D浓度密切相关,高浓度的2,4-D对愈伤组织再生不利。MS＋4mg／L2,4-D对于成熟胚的脱分化相对较好,MS和MS＋0．4mg／L NAA＋0．6mg／L KT作为成熟胚的愈伤组织再生培养基,对不同基因型具有一定的适用性。     

提高水稻成熟种胚体细胞培养力

实验结果认为,水稻成熟胚是一种“竞争性”外植体。高浓度的脱落酸（ABA）能有效地抑制胚芽和胚根的生长,而对水稻盾片愈伤组织的生长影响较小,从而促进盾片愈伤组织的同步健壮生长。这些愈伤组织致密,呈乳白色且分化频率高。调节分化培养基的浓度可减少愈伤组织变褐老化,有效地提高愈伤组织绿苗分化率。在诱导培养期间,较高的2,4－D浓度（大于1 mg/L）和6－BA会抑制种胚体细胞愈伤组织的诱导,其中籼稻比粳稻敏感。在诱导培养基中附加2,4－D 0.5 mg/L,BA 0.5 mg/L,ABA 5 mg/L,B_1 (5－10 mg/L)对成熟籼稻种胚培养是较合适的。