温度对小鼠睾丸生精机能的影响

研究了不同水浴温度对小鼠睾丸组织及生精机能的影响。结果表明：30℃水浴对公鼠睾丸组织无明显影响（P＞0．05）；35℃水浴组，公鼠睾丸组织的曲细精管出现明显退化变性现象（P＜0．05）；40℃水浴组公鼠睾丸组织退行性变化极显著（P＜0．01）。生精细胞对温度的敏感程度依次为：精子细胞＞合线期初级精母细胞＞A型精原细胞；生精上皮对温度也较为敏感，支持细胞及间质细胞对温度敏感性较差。     

三氧化二砷诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的研究

[目的]观察不同剂量的三氧化二砷对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。[方法]40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为0.375、0.750、1.500 mg/kg 3个染毒组和对照组,灌胃法连续给药16周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数,并计算每日精子生成量。采用甲基绿—派诺宁染色法和TUNEL法检测大鼠生精细胞凋亡情况。[结果]中剂量组(0.750 mg/kg)和高剂量组(1.500mg/kg)睾丸精子头计数和DSP均低于对照组;与对照组相比,中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数(AI)均显著升高(P<0.01);生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关(r=-0.563,P<0.01)。[结论]一定剂量的As2O3可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少,产生生殖毒性。     

中国美利奴羊睾丸生精过程的季节性变化规律研究

用组织学方法对中国美利奴公羊四季睾丸的生精过程研究结果表明,公羊的各级生精细胞数量、精子发生率以及精子日产量等均呈季节性变化,秋季最高,冬春季最低(仅为秋季的60%～70%);繁殖季节与非繁殖季节差异极显着(p<0.001);睾丸中曲细精管直径、生精上皮高度以及生精细胞、内分泌细胞的数密度呈现明显的季节性规律变化。     

毒死蜱对大鼠生精细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的：探讨毒死蜱对大鼠睾丸生精细胞增殖及相关因素的影响。方法：SD大鼠30只随机分为3组,对照组、低剂量0．8mg／（kg&#183;d）和高剂量8．0mg／（kg&#183;d）染毒组,28d后观察大鼠体质量、睾丸脏器系数变化,采用免疫组化SP法检测睾丸生精细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：低、高剂量染毒组体质量分别为（278．86&#177;20．47）、（244．80&#177;21．18）g,低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;生精细胞PCNA增殖指数P1分别为（22．66&#177;2．59）％、（14．26&#177;2．31）％,均低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：毒死蜱可降低生殖细胞PCNA的表达,对雄性生殖系统造成损害。     

改良培养基对体外培养生精细胞增殖分化的影响

探讨改良培养基对体外培养小鼠生精细胞的增殖分化效应。根据培养基的不同分为:A组(基础培养液组);B组[基础培养液+胶质细胞神经营养因子(GDNF)+表皮生长因子(EGF)组];C1、C2和C3组[A组+20%、40%、80%睾丸液(TA)];D1、D2和D3组(B组+20%、40%、80%TA)。采用上述8种培养基对7~8日龄小鼠生精细胞进行体外培养,通过细胞形态学观察、细胞存活率和粗线期精母细胞特异性基因P19、单倍体精子细胞特异性基因TP1检测及染色体倍性分析,探讨TA、GDNF和EGF对小鼠体外培养生精细胞的增殖分化效应,结果如下:(1)形态学观察表明,B组生精细胞生长速度快,形态好,细胞集落多,A组最差;C组和D组细胞传代后培养时间最长,可达4个月。(2)生精细胞存活率结果显示,培养20 d的B组细胞存活率显著高于其他各组(P0.05),C、D组在各培养阶段与A组间无显著性差异。(3)TP1/P19培养15 d后B组的TP1/P19显著高于其他各组(P0.05),其他各组间均无显著性差异。(4)单倍体精子细胞比例结果表明,培养15 d后的B组单倍体细胞比例显著高于其他各组(P0.05),其他各组间单倍体细胞比例均无显著性差异。GDNF和EGF可显著提高生精细胞体外培养的增殖分化效应,而睾丸液可显著延长生精细胞体外培养时间。     

曲阜孔林不同月份黑线仓鼠睾丸组织变化的比较研究

采用形态解剖和组织切片手段,对世界最大的人造园林－－曲阜孔林中不同月份黑线仓鼠睾丸的形态结构及质量变化进行了观察比较。结果表明：黑线仓鼠睾丸质量和曲细精管直径在不同月份呈规律性变化,且二者存在显著的正相关关系。从生殖生物学角度探讨了黑线仓鼠睾丸组织随月份变化的规律。     

不同能量蛋白水平对绵羊睾丸生精细胞凋亡及相关基因表达的影响

为研究不同能量蛋白对绵羊睾丸生精细胞凋亡及相关基因的影响,选择健康状况良好体重相似的绵羊公羔,将其随机分配到不同能量蛋白水平的3组日粮:100%自由采食组、65%采食组和35%采食组,进行饲喂,当100%自由采食组体重达到35kg后各组取样检测。结果表明,35%采食组中的Bcl-2,Bax mRNA表达量和生精细胞凋亡数量均显著高于其它两组(P<0.05)。65%采食组Bax mRNA表达量和生精细胞凋亡数目均高于100%自由采食组,但是差异均不显著(P>0.05)。100%自由采食组中Bcl-2mRNA表达量高于65%采食组,但是差异不显著(P>0.05)。说明不同能量蛋白水平日粮对绵羊生精细胞凋亡是有影响的,而Bcl-2,Bax参与了此凋亡调控过程。     

成年公猪无精症的诊治

成年公猪无精症的发病率较低,在实行本交时,不易被及时发现和准确诊断,往往给种猪场造成巨大损失。最近,作者于2002年在新乡某猪场调研母猪返情率偏高的过程中,发现所饲养的部分种公猪精液稀薄无精子,现将诊治结果介绍如下。     

一种有效分离及在体外扩增成年小鼠精原干细胞的方法

尝试建立一种简便有效的成年小鼠精原干细胞分离培养及扩增的方法。从单只成年小鼠的睾丸中经过两步酶消化法分离精原干细胞,并在去除间质细胞、纯化后的支持细胞饲养层上培养与扩增,获得稳定增殖的精原干细胞系。此方法可显著提高建系成功率,保证细胞系的单一基因型,显著降低体外培养精原干细胞的成本。为成体基因来源的转基因动物的制作和疾病模型的建立提供技术支持。     

睾丸外伤影响孩子将来生育吗

睾丸是男性的内生殖系统器官之一，其主要功能是产生精子，所以睾丸的正常与否与生殖功能有很大的关系。在日常生活中，淘气的男孩子很可能发生睾丸受伤的情况，如被人踢伤．骑车撞伤，高空坠落伤等。睾丸受伤后有轻重之分，是否会影响将来的生育能力，要视具体情况作具体分析。     

己烯雌酚多克隆抗体的制备研究

合成了具有己烯雌酚基本分子结构特性并带有一个羧基活性基团的半抗原CP-DES,用混合酸酐法将其与BSA偶联后免疫6只BALB/c雌性小鼠,获得了特异性的己烯雌酚多克隆抗体。以所得抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附分析法(cELISA)用于己烯雌酚的检测,最低检测限为0.04 ng.mL-1。交叉反应表明,己烯雌酚的特异性抗体与其结构类似物无明显交叉反应。     

已烯雌酚对贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶活性的影响

采用比色法测定已烯雌酚(diethylstilbestrol,DES)对性未成熟贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性的影响.结果表明:DES能够使贵州香猪睾丸一氧化氮合成酶(Nitrioxide synthase,NOS)活性显著增强(p＜0.01).睾丸中NOS和cNOS的活性在DES用量为0.3 mg/kg时最强(p＜0.01);当增大到3 mg/kg用量时,二者活性又降低(p＜0.01).诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的活性在DES为0.03 mg/kg时最强(p＜0.01);当DES在0.3 mg/kg和3 mg/kg时,其活性显著降低(p＜0.01).DES使附睾中NOS活性显著减弱(p＜0.01),随着DES用量的增多,附睾中NOS活性增强.主要表现在对结构型一氧化氮合成酶(cNOS)活性有显著增高作用(p＜0.01),但其活性还是低于对照组(p＜0.01).研究结果认为DES能增强性未成熟贵州香猪睾丸中NOS的活性而抑制附睾中NOS的活性.     

高效液相色谱法测定水产品中己烯雌酚的残留量

[目的]建立用高效液相色谱法测定水产品中己烯雌酚的分析方法.[方法]样品经甲醇提取,以保留时间定性,外标法定量.[结果]己烯雌酚峰面积与其质量分数有着良好的线性关系（r =0.999）,最低检测限为0.05 mg/kg,加标回收率为89.0％ ～ 98.5％,RSD为1.1％ ～4.1％.[结论]该试验建立的方法能快速、准确地检测出水产品中的己烯雌酚残留量,适用于水产品质量检测工作.     

甲基叔丁基醚对斑马鱼及中国仓鼠卵巢细胞的毒性效应

[目的]研究甲基叔丁基醚(MTBE)对斑马鱼和中国仓鼠卵巢细胞的毒性作用及氧化应激效应,为其科学、合理应用提供依据。[方法]应用半静态试验法研究不同浓度MTBE对斑马鱼的急性毒性效应,以中国仓鼠卵巢(CHO)细胞为模型,分析不同浓度MTBE对CHO细胞增殖水平和氧化应激相关酶活力水平的影响。[结果]MTBE对斑马鱼的48 h LC50值为71.5 mg/L;在细胞试验中,当MTBE暴露浓度高于5.0 mmol/L时,CHO细胞增殖水平受到明显抑制(P0.05);当MTBE暴露浓度达到50.0 mmol/L时,SOD活力明显上升(P0.05)。当MTBE浓度达到25.0 mmol/L时,CAT活力达到最大值且与对照组差异显著(P0.05);当MTBE浓度达到25.0 mmol/L时,CHO处理组GSH-Px活力明显上升(P0.05)。[结论]MTBE暴露可以诱导斑马鱼和CHO细胞的毒性作用,而氧化应激酶活力水平的改变可能是MTBE毒性作用之一。     

己烯雌酚人工抗原的合成及其抗体制备

以己烯雌酚(DES)、琥珀酸酐和牛血清白蛋白(BSA)等为主要原料,采用混合酸酐反应(氯甲酸异丁酯法)将半抗原己烯雌酚与载体蛋白BSA联接制备成人工免疫原。用此免疫原免疫家兔,并以间接ELISA法测定抗体效价。结果表明,人工合成的抗原具有很强的免疫原性,被免疫兔血清中的抗DES抗体效价高达28。本试验为下一步制备抗DES单克隆抗体及研制快速检测DES残留的免疫试剂盒奠定了基础。     

纳米硒对波尔山羊公羔睾丸超微结构的影响

为了研究纳米硒对波尔山羊公羔睾丸超微结构的影响,选用30只2月龄波尔山羊公羔,随机分为3组,预试2周,正试16周,分别饲喂基础日粮(对照组);基础日粮+0.1 mg.kg-1纳米硒(I组);基础日粮+0.3 mg.kg-1纳米硒(II组)。结果显示,I组和II组的睾丸发育明显优于对照组,对照组的各种细胞可以观察到程度不同的膜损伤,部分精子尾部中段纵切面的线粒体出现多形状改变。在6月龄时可观察到II组的精子细胞的数量明显减少,补适量的硒能促进睾丸组织发育,使曲细精管中各种细胞膜和核膜保持完整,使精子细胞尾部中段的线粒体排列整齐、紧凑、结构完整。     

猪带绦虫仓鼠动物模型的建立

 【目的】为开展猪带绦虫的病原学形态观察、生物学特性研究以及解决实验材料来源的问题,建立猪带绦虫的实验仓鼠动物模型。【方法】通过经口感染被免疫抑制的实验仓鼠,观察仓鼠体内绦虫的感染、生长发育及寄生部位等生物学特性,并利用压片技术和组织切片技术对检出的绦虫的形态结构进行研究。【结果】免疫抑制剂在5 mg/只,感染一次就能使囊尾蚴发育到性成熟;在实验仓鼠体内,感染后40 d的仓鼠体内就能检出具有体节的可见虫体,感染80 d后的仓鼠体内能检出孕卵节片;检出的虫体多数吸附在小肠前1/3段,也有寄生在胆囊和胆管中的虫体,甚至偶见虫体钻出胆囊外堆积在肝脏附近;虫体头节上可见4个吸盘及两圈小钩;与人猪带绦虫相比,成熟节片较少。【结论】成功建立了猪带绦虫仓鼠动物模型,这使得成功解决猪带绦虫实验材料的来源问题成为可能,也为猪带绦虫的深入研究奠定了基础。     

LC-MS测定水产品中己烯雌酚方法的研究

建立了LC-MS测定水产品中己烯雌酚的分析方法。采用乙酸乙酯提取,超高效色谱-串联质谱法测定。以甲醇-水梯度洗脱,多反应监测（MRM）方式检测。方法检测限为0.05μg/kg,回收率大于83%,相对标准偏差〈5.5%,并成功用于水产品中己烯雌酚残留量的测定。     

DBP暴露对雄性大鼠睾丸结构与功能的影响

目的利用成熟雄性大鼠为动物模型研究邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对哺乳动物生长发育及生殖的毒性作用.方法将40只健康雄性SD大鼠随机分成4组,分别为500,250,50 mg/（kg.d-1）3个染毒组和1个对照组,灌胃量为5 mL/kg体质量,灌胃法连续给药6周.对体质量、脏器系数等指标进行称量;对附睾中精子密度、精子畸形率等进行检测;对睾丸的组织学形态进行观察.结果与对照组比较,中、高剂量组体质量、睾丸、附睾及睾丸脏器系数指标有统计学意义（P〈0.05）;体质量、右侧睾丸和右侧附睾与染毒剂量呈负性相关（r=-0.771 03,P〈0.001;r=-0.638 9,P〈0.001;r=-0.618 5,P〈0.05）.高、中剂量组精子密度、精子活率分别与对照组和低剂量组比较均降低,差异均有统计学意义（P〈0.05）;高、中剂量组总畸形率分别与对照组和低剂量组比较均增高,差异均有统计学意义（P〈0.05）.结论一定剂量的邻苯二甲酸二丁酯对大鼠的生长发育及睾丸功能具有毒性作用.