核酸适体及其在疫病诊断中的应用

核酸适体是采用指数富集配体的系统进化技术从随机单链寡核苷酸库中筛选出的能与靶物质高特异性、高亲和力结合的配体.因其具有亲和力高、特异性强、精确识别、易体外合成与修饰等优点,逐渐成为抗体的代替或补充试剂,已成功应用于生物芯片、生物传感器、分子信标等多种疫病诊断技术平台,显示出了良好的应用前景,在未来的疫病诊断中将发挥越来...     

核酸适体在乳及乳制品检测上的运用分析

我国乳制品行业发展迅速,检测需求逐渐增加。随着食品安全相关法律法规完善和监管力度加强,传统乳制品检测方法存在诸多不足。核酸适体在食品和医疗领域应用广泛,具有良好生物相容性、低免疫原性、高稳定性和高特异性等特点,有利于检测体系构建。核酸适体是一种以指数形式存在的单链DNA或RNA分子。利用适配体的特异性识别能力,可通过双链DNA或RNA杂交得到荧光信号,用于检测蛋白质及各种酶等生物材料。与传统检测手段相比,核酸适体具有可设计性强、合成简便快速、成本较低等优势。     

核酸适体在乳及乳制品检测中的应用

核酸适体技术是新型检测技术,因其特异性、高亲和性、快速、低成本等众多优点被广泛应用于乳及乳制品等动物源食品安全检测领域。本文对核酸适体筛选技术的原理和类别进行介绍,并对其在乳及乳制品中添加剂、激素、抗生素残留、真菌毒素、病原微生物污染检测等方面的应用和研究进展进行综述。     

鲤春病毒血症病毒核酸适配体的筛选及分析

核酸适配体(Aptamer)是一类单链短DNA或RNA片段,具有一定的空间结构,对特定靶分子具有亲和力。本研究采用指数富集配体系统进化技术(SELEX),首次筛选出针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)的核酸适配体A2和A15,经过荧光PCR、凝胶阻滞和病毒中和实验,证明了其对SVCV具有结合力和抑制作用,在该病的检测和防治方面具有良好的前景。     

基因芯片技术在动物疫病检测中的应用研究进展

基因芯片技术具有高通量、高特异性、高敏感性等优点,作为1种新型的快速检验检测技术被应用于动物疫病的检测诊断,并显示出良好的临床检测效果。文章介绍了基因芯片技术的设计原理、基本特点以及在多领域动物疫病检测诊断中的开发现状,展望未来发展前景,为基因芯片技术在动物疫病检测诊断中的应用提供参考。     

核酸适体检测赭曲霉毒素A荧光方法的建立

赭曲霉毒素A(Ochratoxin A,OTA)普遍存在于谷物等粮食和动物饲料中,是一种可以引起癌症的霉菌毒素。为了快速检测OTA,利用荧光染料PicoGreen识别双链DNA原理,建立了一种基于核酸适体与PicoGreen检测毒素OTA的方法。在10 mmol/L Tris,120 mmol/L Na Cl,5 mmol/L KCl,20 mmol/L CaCl2(pH8.5)缓冲液中,PicoGreen与双链DNA结合后,释放的荧光在3 min内达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。从加样到荧光检测,整个流程可在40 min内完成。检测OTA的灵敏度为1μg/L;检测范围为1μg/L~200μg/L。特异性实验表明:OTA核酸适体-Pico Green方法与黄曲霉毒素B1、伏马毒素B1、桔毒素和玉米赤霉烯酮等霉菌毒素无交叉反应。本方法在检测敏感性和特异性方面与传统抗体ELISA方法相当(Kappa值为:0.857)。由于核酸适体成本比抗体低,因此本方法比抗体ELISA方法更具实用价值。     

核酸探针技术及其在大肠杆菌诊断中的应用

核酸探针又称基因探针,是随着分子生物学及分子遗传学的深入发展而产生的一种新的检测技术。与常规的实验室检测方法相比,核酸探针技术具有高度特异、敏感、快速、简便等优点。近几年,基于探针只能和靶细菌等的 DNA 杂交,而不与其它 DNA 杂交的原理,已将探针技术作为一种有效的检测手段,应用于细菌、病毒、疟原虫、钩端螺旋体等的鉴定和分类,并收到一定效果。     

盐酸处理蚕卵核酸和蛋白质代谢的变化

盐酸处理家蚕滞育性蚕卵后，蚕卵ＲＮＡ和ＤＮＡ的含量在处理后１０小时内未测出变化；以摄入ＲＮＡ的３Ｈ—尿嘧啶量表示的蚕卵ＲＮＡ合成能力在处理后２４小时有微弱上升。处理后４０小时内，蚕卵可溶性蛋白质的含量一直稳定于９２—９８ｍｇ／ｇ·卵；处理蚕卵的蛋白质ＳＤＳ—ＰＡＧＥ图谱与对照未浸酸蚕卵相同，处理卵有一条区带的蛋白质含量比未浸酸卵显著减少，盐酸处理后５小时内，蚕卵酯酶Ａ及酯酶Ａ４的活性有显著地提高，而未浸酸蚕卵仍处低活性状态。说明盐酸处理在激活蚕卵的遗传情报系统大量合成新物质之前，已对蚕卵内存在的某些活性物质产生了影响。     

环介导等温扩增技术及其在动物疫病诊断中的应用

环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplifi cation,LAMP）技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性强、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。本文综述了近年来LAMP在动物疫病检测中的具体应用实例和目前的研究进展,并对LAMP方法在动物疫病诊断中的应用前景做了展望。     

不同免疫方式对仔猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫三种疫苗抗体水平的影响

采用不同的免疫方式,对38头36~38日龄健康仔猪进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗进行免疫,分别于免疫前（0 d）和免疫后15、30、45、60、90 d采血进行这3种疫病抗体检测。结果发现效果最好的方法是先免疫猪瘟和口蹄疫疫苗14 d后再免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗;其次是猪瘟疫苗和高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗分别释稀后混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时分点注射;免疫效果最差的是高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗同时分3点注射。     

饲料中脂肪酸对动物脂肪合成酶及其基因表达的影响

本文综述了饲料中脂肪酸对动物组织中脂肪酸合成酶的酶活性及其酶基因表达的影响,并就脂肪酸与家畜生产性能的关系进行了讨论。     

真胃内灌注不同水平的葡萄糖和酪蛋白对高乙酸比例VFA增重效率调控的研究

3头带有瘤胃和真胃痿管的肉牛(375±25kg)饲喂全羊草以满足其维持需要 ,设计3个对比试验 ,每一试验均向瘤胃内持续灌注高乙酸摩尔比(75 %)的混合VFA。试验一 :真胃每天持续灌注100g、250g和400g 的葡萄糖 ;试验二 :真胃每天持续灌注200g、300g 和400酪蛋白 ;试验三 :真胃每天持续灌注葡萄糖和酪蛋白的混合物分别为250g±200g ,250g +300g以及250g +400g。连续7天持续灌注后用农大KB -1型呼吸测热室测定产热和能氮平衡。试验结果表明 ,①试验一、二、三均能明显降低代谢产热率(HP/ME ,P<0.05) ,增加能量沉积效率(Kf值 ,P<0.05) ,并促进体脂肪和体蛋白的沉积(P<0.05)。试验一和试验二的HP/ME和Kf值十分接近 ,表明在降低代谢产热率和提高Kf值方面真胃灌注葡萄糖和酪蛋白混合物的效果是一样的。但从体组织沉积的组成来看 ,灌注酪蛋白肉牛沉积的蛋白质质量比灌注葡萄糖时高68.47 %。②试验三的HP/ME比试验一下降了4.53个百分点(P<0.05) ,比试验二下降了5.17个百分点(P<0.05) ;Kf值比试验一提高了4.78个百分点 ,比试验二提高了4.56个百分点 ,表明真胃灌注葡萄糖和酪蛋白混合物的效果要优于单独灌注其中之一。本试验条件下 ,在降低HP/ME ,增加Kf值方面 ,真胃单独灌注250g葡萄糖和300g 酪蛋白以及250g葡萄糖与20     

青海省互助县某养殖场部分母羊流产病因的检测

通过虎红平板凝集试验（RBPT）、弓形虫和衣原体间接血凝试验（IHA）,对来自青海省互助县某羊场的19份母羊血清进行了布鲁氏菌、弓形虫和衣原体的血清抗体检测.结果检出衣原体阳性血清1份,阳性率为5.3％;未检出布鲁氏菌和弓形虫的阳性血清.流产胎儿瘤胃液,经PCR检测,为衣原体感染.