生长因子β1(TGF β1)和孕酮对着床期子宫内膜的调节作用

TGFβ1是一种肽类生长因子，广泛分布于妊娠期的子宫内膜，它和类固醇激素一起参与调节胚泡着床时子宫内膜局部微环境内发生的生殖活动，对妊娠的维持起着重要作用。本文就转化生长因子β1(TGFβ1)和孕酮对着床期子宫内膜的调节作用进行综述。     

CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的调节

采用IL-2的生物学测定方法，IL-4、TGF-β1、TGF-β2试剂盒等方法，对正常妊娠组山羊妊娠早期（15-19d)子宫局部细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β、TGF-β2水平（活性）的变化规律进行了研究，结果发现，妊娠早期山羊子宫两侧局部细胞因子水平（活性）无显著性差异，IL-2活性先上升，后出现下降趋势；IL-4水平一直呈上升趋势；TGF-β1水平较高，但呈不规则曲线变化；TGF-β2先上升，后趋于平稳，并保持在较高水平。证明妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌及活性有一动态变化规律。对CD58处理后山羊妊娠16-18d子宫局部上述细胞因子水平（活性）与同期正常妊娠相比的变化情况的研究发现，CD58极显著抑制IL-2的产生，而明显促进IL-4的产生，对TGF-β2的产生具有一定促进作用，而对TGF-β1无影响，证明CD58对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子的产生具有调节作用。     

雌激素对奶牛子宫内膜组织中生长因子的影响

为了使用雌激素诱导体外培养的奶牛子宫内膜组织,试验采用Western-blot法检测雌激素对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(CTGF)、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、细胞增殖抗原(PCNA)蛋白表达的影响。结果表明:与对照组比较,在雌激素诱导下CTGF、FGF-2、TGF-β1、VEGF、MMP-2、PCNA的蛋白表达水平上升,且呈现时间依赖性增高。说明雌激素能够对奶牛子宫内膜组织中CTGF、FGF-2、TGF-β1、VEGF、MMP-2、PCNA等生长因子的表达产生影响,从而为进一步研究雌激素对奶牛子宫内膜组织生长因子表达影响的作用机制提供可靠的理论基础。     

细胞因子在猪胚胎附植期的作用及机制

猪胚胎的附植是通过广泛的细胞运动和重塑发生。胚胎的成功附植主要取决于胚胎延伸和滋养外胚层与子宫内膜上皮紧密连接的成功，这种紧密连接保证了孕体摄取其存活所必需的子宫腺上皮分泌物质。这些过程需要子宫和胚胎来源的细胞因子完成子宫内膜和滋养外胚层之间的细胞重塑，营造胚胎附植时的促炎微环境，维持附植阶段免疫系统的平衡，协调子宫和胚胎之间的相互作用等。本文主要综述了猪胚胎附植时期，由子宫和胚胎来源的细胞因子包括白细胞介素-1β(IL-1β)、干扰素（IFN）、成纤维细胞生长因子（FGF）、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β(TGF-β)发挥的作用及其作用机理，以期为胚胎附植及发育调控相关研究提供参考。     

瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞增殖、迁移和凋亡的影响

试验旨在明确瘦素在妊娠和非妊娠绵羊子宫内膜组织中的定位特征,探究其对绵羊子宫内膜上皮细胞中胚胎附植的影响。使用免疫组化法检测瘦素及其受体在妊娠和未妊娠绵羊的子宫内膜上皮组织的表达及定位;利用组织块分离培养原代绵羊子宫内膜上皮细胞,CCK8法确定瘦素最适浓度,RT-qPCR和Western blot检测瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞凋亡的作用,细胞划痕试验检测瘦素对绵羊子宫内膜上皮细胞迁移的作用,RT-qPCR检测瘦素对胚胎附植相关因子血管内皮生长因子（VEGF）、白血病抑制因子（LIF）、白细胞介素-6(IL-6)、子宫内膜附植位点黏蛋白（Muc1）、基质金属蛋白9(MMP9)、白细胞介素-1β(IL-1β)、骨桥蛋白（OPN）、泛素样修饰因子（ISG15）等基因mRNA的表达情况。结果显示,瘦素蛋白主要表达在未妊娠绵羊子宫内膜的基质和上皮组织中,主要在妊娠绵羊子宫内膜上皮组织中表达,瘦素受体表达无明显变化;组织块法可成功获得具有典型上皮样细胞特征并表达角蛋白CK18的原代绵羊子宫内膜上皮细胞。250 mg/L瘦素促进绵羊子宫内膜上皮细胞增殖和迁移,并显著上调Bcl-2,下调BAX、Cas...     

雌二醇对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子基因表达的影响

观察雌二醇(17β-estraidol,E_2)对奶牛子宫内膜组织中结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)mRNA表达的影响,并探讨雌激素对奶牛子宫内膜组织修复的机制。体外培养奶牛子宫内膜组织,应用荧光定量PCR技术检测E_2对奶牛子宫内膜组织中CTGF mRNA表达的影响。结果显示,与空白对照组相比较,E_2能够极显著(P0.01)地抑制CTGF mRNA的表达。由研究结果可知,E_2能够对奶牛子宫内膜组织中CTGF的基因表达产生调节作用。     

孕酮对小鼠妊娠早期子宫内膜转化生长因子β1Ⅰ型受体表达的影响

采用免疫组织化学SABC法，研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1Ⅰ型受体(TGFβRⅠ)表达的影响。结果显示：(1)孕4d，注射2mg孕酮组，子宫表面上皮、腺上皮及基质中TGFpRI表达增加，与对照组和注射孕酮4mg组差异显著(P＜0．01)。注射孕酮4mg组，表面上皮TGFβRⅠ表达无显著增加；腺上皮细胞TGFβRⅠ表达稍有下降，但与对照组差异不显著；基质细胞TGFβRⅠ表达明显增加，与对照组差异显著(P＜0．01)。(2)孕5d，试验组表面上皮和腺上皮TGFβRⅠ随着孕酮剂量的加大，其表达下降；基质细胞TGFβRⅠ表达则随孕酮剂量的增加而增多，且3组间差异显著(P＜0．01)。(3)孕6d，注射2mg组，表面上皮及基质细胞TGFβRⅠ表达增加，与对照组差异显著(P＜0．01)，而腺上皮TGFβRⅠ表达呈下降趋势。注射4mg组，表面上皮、腺上皮及基质表达变化趋势同孕5d。结论：外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1型受体表达有一定影响，即孕酮可显著提高基质TGFβRⅠ表达，但对腺上皮TGFβRⅠ的表达有下调作用；对表面上皮TGFβRⅠ的表达作用不定，2mg使表面上皮TGFβRⅠ表达增多，4mg使TGFβRⅠ表达降低。     

妊娠期母-胎界面TGF-β与妊娠

TGF- βs是一大类多功能与调节细胞生长、分化的细胞因子 ,在子宫局部 ,可通过旁分泌或自分泌 ,调节胎盘的形成 ,调节母-胎界面有益细胞因子和生长因子的产生 ,并在子宫局部免疫抑制调节中发挥重要作用 ,以利于胚胎附植和妊娠维持。本文从TGF- βs的生物学特点 ,TGF- βs在子宫局部的存在及 TGF-βs在子宫局部的生物学功能等方面综述了其在动物妊娠中的作用。     

内皮素对动物生殖的调控

内皮素作为缩血管多肽、激素调节肽及促有丝分裂因子、局部溶黄因子 ,通过自分泌、旁分泌作用 ,参与下丘脑 -垂体 -卵巢及胎盘激素的调节 ,在黄体溶解、胎儿胎盘循环稳态、子宫内膜周期性变化及妊娠、分娩中发挥重要的生理调节作用。     

硒对妊娠早期山羊子宫局部细胞因子分泌的调节

为了探索硒对妊娠早期子宫局部细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β1及TGF-β2的调节作用,将妊娠山羊分为试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组和对照组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组山羊分别以0．3、0．5和0．7mg／kg剂量的硒灌服亚硒酸钠溶液,对照组灌服1mL／kg的蒸馏水,每周1次,连续3周。用ELISA试剂盒检测子宫局部细胞因子IL-2、IL-4、TGF-β1及TGF-β2的动态变化以观察硒对其分泌的调节作用。结果表明：（1）妊娠早期（15～19d）山羊两侧子宫角中IL-2、IL-4、TGF-β1及TGF-β2水平无显著差异。妊娠早期山羊两侧子宫角的子宫液IL-2水平在15～18d呈上升趋势,19d时趋于下降;IL-4水平一直呈上升趋势;TGF-β1水平较高,呈不规律变化;TGF-β2呈现先升高、后趋于平稳的趋势。（2）灌服亚硒酸钠溶液,可以显著降低妊娠16～18d子宫液IL-2的水平（P〈0．05或P〈0．01）;同时可显著升高IL-4的水平（P〈0．05或P〈0．01）,且呈一定的剂量依赖关系。（3）0．5和0．7mg／kg剂量组显著升高妊娠16～18d子宫液TGF-β1水平（P〈0．05或P〈0．01）;同时对妊娠16～17d子宫液TGF-β2水平也有显著的升高作用（P〈0．05或P〈0．01）,但对18d时的TGF-β2影响不显著。试验表明,硒对妊娠早期山羊子宫局部IL-2、IL-4、TGF-β1及TGF-β2的分泌具有一定的调节作用。     

转化生长因子-β在母胎界面的表达调节作用

转化生长因子-β（TGF-β）是一种多功能细胞因子,在细胞生长、分化、免疫调节和细胞外基质合成以及血管生成等方面起重要作用。TGF-β由多种实质细胞分泌产生,其中包括外周单核细胞、T淋巴细胞和树突状细胞等。TGF-β可影响生殖活动的各个环节,包括性腺轴的调控、子宫内膜周期性变化、胚胎着床和发育。同时,TGF-β在免疫耐受中是主要的调节因子,TGF-β通过自分泌或旁分泌的方式介导母胎界面的免疫调节过程,以防止发生胎儿的免疫排斥反应。文章综述了TGF-β家族在妊娠过程中免疫调节作用的最新研究进展。     

交感神经对妊娠早期小鼠子宫内膜发育的影响

为了研究交感神经对小鼠妊娠早期(妊娠第1～9天)子宫内膜发育的影响,本试验采用交感神经阻断剂6-羟多巴胺(6-OHDA,100 mg·kg~(-1)体质量)腹腔注射成年雌性昆明小白鼠,损毁外周交感神经.利用放射免疫分析法、组织学和免疫组织化学技术,检测了小鼠妊娠早期血清17β-雌二醇水平、子宫腺发育和子宫内膜细胞增殖的变化.结果显示:(1)在妊娠第1天(E1)、E5和E7 6-OHDA处理组血清中17β-雌二醇的含量分别降低了63.4%(P<0.01)、35.7%(P<0.05)和25.5%(P<0.05),而在E3和E9分别升高了79.3%(P<0.05)和156.7%(P<0.01);(2)6-OHDA处理降低了妊娠早期子宫腺的比例,与同期对照组相比分别下降了37.5%、38.6%、41.8%、61.4%和58.1%(P<0.01);(3)6-OHDA处理降低了妊娠早期子宫内膜细胞的增殖,使E1、E3、E5、E7和E9子宫内膜增殖细胞分别减少了27.2%、30.2%、40.7%、27.2%和27.7%(P<0.01).上述结果表明,交感神经对雌激素的分泌以及妊娠早期子宫组织结构的重建具有重要的调控作用,进而调节动物早期胚胎的着床和发育.     

外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β1表达的影响

应用免疫组织化学 SABC法 ,研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜内转化生长因子 β1 (TGFβ1 )表达的影响。结果显示 :试验组皮下注射不同剂量孕酮 (2 mg/只 ,4 mg/只 )后 ,在孕 4 d,上皮内 TGFβ1 阳性着色 ,有的腺导管内具有 TGFβ1 阳性着色 ;且随着孕酮剂量的增大 ,上皮内 TGFβ1 阳性着色由子宫腔面向基面延伸 ,而腺上皮的阳性着色则呈下降趋势 ,基质内 TGFβ1 阳性着色则呈上升趋势。在孕 5 d,上皮内 TGFβ1 阳性着色呈现随孕酮剂量增大而下降的趋势 ,腺上皮和基质的 TGFβ1 动态变化如同孕 4 d。在孕 6 d,上皮、腺上皮及基质 TGFβ1 阳性着色均与孕 5 d的变化趋势相同。由此认为 ,外源性孕酮对小鼠子宫内膜各组织 TGFβ1 蛋白表达有影响。主要表现为 ,外源性孕酮可促进基质中 TGFβ1 的产生 ,对腺上皮 TGFβ1 的表达则具有下调作用     

冢畜胚胎着床和母体妊娠识别的分子调控

着床是指胚胎发育到胚泡阶段 ,与此同时子宫增殖和分化到可接受状态的同步化发育 ,并最后形成胎盘的过程。猪、马、牛、羊等都是表面着床 ,胚泡与子宫内膜只是表面接触 ,并未嵌入子宫内膜中。黄体产生的孕酮对于妊娠维持、子宫内膜接受态的建立以及着床后的妊娠维持都很重要。妊娠早期胚胎诱导母体的内分泌变化以维持卵巢黄体孕酮的持续分泌 ,这是母体对妊娠最早的生理反应 ,以使妊娠与正常的卵巢周期相区别 ,称为母体妊娠识别 ,它是着床起始必不可少的环节。最近证实 ,雌激素启动着床是通过诱导子宫上皮分泌细胞因子、生长因子以及粘蛋白等…     

奶牛患子宫内膜炎时神经肽的免疫调节作用研究

肥大细胞（MC）作为免疫系统中重要效应细胞，对器官局部功能和免疫水平具有重要的调节作用。神经肽（SP、VIP等）是MC释放细胞因子的一个重要调节物质。神经肽对MC功能的调节可能是“免疫-神经-内分泌”网络相互作用的一个侧面，深入研究神经肽对MC作用的机理，将推动神经免疫的发展，有助于加深人们对“免疫-神经-内分泌”网络的认识。为此笔者研究通过测量比较正常和患病牛的血液和子宫内膜中神经肽（SP、VIP）的含量，以探讨神经肽对子宫局部免疫的影响。     

TET1基因对小鼠uNK细胞增殖及IFN-γ、VEGF-C和TGF-β1转录水平的影响

本研究旨在了解去甲基化酶1(ten eleven translocation, TET1)对小鼠子宫内自然杀伤细胞(uterine natural killer, uNK)的增殖及其细胞因子分泌表达的影响。采集妊娠9～12 d小鼠子宫内膜，分离淋巴细胞，使用链霉亲和素磁珠法进一步分选uNK细胞进行培养；针对TET1基因合成RNA干扰序列，并将其连接入RNA干扰载体GM-19167,构建干扰表达质粒，包装成慢病毒(lentivirus)并进行病毒滴度的测定；按照慢病毒与细胞数(10～200)∶1的比例转染uNK细胞，168 h后荧光显微镜检测转染效果，收集uNK细胞，以β-actin为内参进行荧光定量PCR检测以验证TET1基因的干扰效果，利用Cell Counting Kit-8 (CCK8)对uNK细胞的增殖情况进行检测，分别合成γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor C,VEGF-C)和β1转化因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)3种细胞因子...     

猪TGFβ1基因及其受体组织表达特性的研究

以妊娠母猪为研究材料,采用RT-PCR半定量方法对猪转化生长因子β1(TGFβ1)及其3种受体组织表达特点进行研究。结果表明:TGFβ1在11种组织中的表达量,由高到低依次为肾上腺、下丘脑、肌肉、卵巢、脾、大脑、肾、子宫、肺、肝和心脏。3种受体的表达,总体上来说在子宫中相对较高。TGFβ1及其受体在肾上腺和子宫等组织中有相对较高的表达量,提示其在繁殖过程中可能发挥作用。     

产后奶牛子宫内膜炎神经肽（SP、VIP）对子宫免疫调节的研究

本试验研究了急性产后子宫内膜炎神经肽（SP、VIP）变化,以探讨子宫内膜炎神经肽对子宫局部免疫的影响。对10头产后急性化脓性子宫内膜炎患牛进行子宫内膜及血清SP、VIP含量的检测,并选择10头产）06-8d健康的奶牛为对照组。结果表明,产后急性子宫内膜炎患牛子宫内膜及血清中SP含量显著升高,试验组与对照组差异极显著（P〈0．01）,而VIP含量显著降低,试验组与对照组差异极显著（P〈0．01）。急性产后子宫内膜炎属于局部炎症,其发生与神经肽（SP、VIP）浓度密切相关,sP含量的升高和VIP含量的降低对机体的免疫起调节作用。     

未孕和3个月孕龄的小尾寒羊子宫内膜β-防御素的表达研究

β-防御素主要分布于哺乳动物黏膜上皮细胞内,是黏膜表面抗微生物屏障的组成成分.小尾寒羊是重要的家畜之一.应用实时荧光定量PCR技术,分别对未孕和孕龄3个月的小尾寒羊子宫内膜β-防御素mRNA的表达进行了荧光定量PCR检测和分析,结果表明,在未孕子宫和怀孕子宫内膜组织中均有β-防御素mRNA的表达,但怀孕的子宫内膜组织中的表达量高于未孕子宫,说明β-防御素在生殖生理中有着重要的作用,为进一步研究生殖生理中的免疫防御机制奠定理论基础.     

先天性免疫分子与奶牛子宫内膜炎的关系

奶牛子宫内膜炎是奶牛常见的生殖系统疾病,因影响繁殖率而引起巨大经济损失。奶牛子宫内膜炎主要是由局部非特异感染引起,而β-防御素、TLR4、TNF-α和NO是决定局部非特异感染的重要炎性因子。探讨奶牛子宫内膜组织中先天性免疫分子与炎症发生的关系,为应用免疫学技术和基因手段来防治奶牛子宫内膜炎提供更多的理论基础,对该病的防治具有重要意义。