马铃薯愈伤组织再生体系的研究进展

马铃薯愈伤组织再生体系的建立是进行马铃薯遗传转化的基础。外植体选择、培养基配方以及培养过程中褐化的控制等都是影响愈伤组织诱导和再生体系建立的关键因素。本文主要从愈伤组织诱导、愈伤组织继代和分化三个阶段进行详细总结,并提出愈伤组织诱导,建立再生体系中存在的问题及今后的研究方向,以期为建立马铃薯愈伤组织再生体系提供理论参考和技术借鉴。     

马铃薯品种愈伤组织的形成

广泛应用细胞组织离体培养,是育种生物技术的基础。而愈伤组织发生是细胞组织培养的重要阶段。它在体细胞变异育种中对于获得广泛多样的基因型和获得细胞悬浮液,以及在值物体细胞杂交和基因工程条件下形成多细胞聚合体以求得器官发生都是必要的。1987～1989年,在远东农业科学研究所进行了一系列试验,从而找到马铃薯品种愈伤组织发生的参数。供试品种是针对进一步变化的细胞和基因工程方法而选择的。同时还研究了     

水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织再生体系的建立

采用水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体，通过优化激素组合和调节培养基渗透压，建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系，将水稻成熟胚诱导愈伤组织分化再生的过程划分为3个不同时期，即成熟胚盾片愈伤组织诱导，胚性细胞诱导保持，胚性愈伤组织分化再生，以CultureI(LS 2,4-D2.0mg/L)诱导成熟胚盾片愈伤组织，愈伤组织剥离后接种于Culture II-3(LS 2,4-D 2.5mg/L 山梨醇3g/L)上诱导胚性愈伤组织，继代后接种于Culture Ⅲ-2(MS NAA 0.5mg/L 6-BA 1.0mg/L Kinetin 2.0mg/L 山梨醇8g／L）上分化成苗，培养结果表明，该再生体系所获得的胚性愈伤组织分化再生率均在60％－80％之间，利用本研究建立的高效再生体系建立水稻外源基因遗传转化系统，使转化过程中所得转化愈伤组织高效再生成苗，从而顺利获得转化植株，可以提高水稻外源基因转化的效率，为水稻品种的定向遗传改良提供优良的遗传转化技术体系。     

剑麻愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以剑麻H.11648为材料,研究外植体类型、激素种类及其浓度对剑麻愈伤组织的诱导和植株再生的影响,并且建立剑麻茎尖愈伤组织诱导及高频再生体系.结果表明:MS基本培养基、6-BA/NAA激素组合有利于淡黄绿色愈伤组织的形成,SH基本培养基、6-BA/IBA/NAA激素组合有利于不定芽的分化;最佳愈伤组织诱导和分化培养基分别为MS+3.0 mg/L6-BA+0.2 mg/L NAA,SH+5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA.在该培养条件下,H.11648麻茎尖愈伤组织的诱导率为86.67％,分化率为(98.33+1.67)％,分化系数为(13.19±0.58).再生植株在不加激素的MS基本培养基上培养4周后的生根率为100％,平均生根数为(5.39±0.70)条,根长为(8.44±0.25)cm,该研究结果为剑麻转基因的研究和种质创新奠定了基础.     

青葙愈伤组织诱导研究

目的 筛选诱导青葙愈伤组织的最佳外植体和最佳诱导条件.方法 选取青葙饱满成熟种子培养无菌苗,以其叶片和茎段为外植体,分别接种于添加NAA、6-BA、2,4-D组合的MS培养基中诱导愈伤组织,通过正交试验筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体和培养基.结果诱导愈伤组织的最佳外植体为试管苗茎段,MS+0.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA是愈伤组织诱导的最佳培养基,其愈伤组织诱导率为92.5％.结论该研究建立的青葙的愈伤组织培养方法,为青葙的快速繁育体系及工厂化生产提供了技术参考.     

几个籼稻品种的成熟胚愈伤组织植株再生体系的建立

组织培养技术在作物改良上的成功应用需要合适的植株再生体系。本试验以7个籼稻成熟胚为材料，通过优化激素配比，建立适合于水稻遗传转化的高频植株再生体系。研究结果表明，NB 2mg／L2，4-D适合于供试品种的成熟胚愈伤组织的诱导，诱导率达90％以上；在分化培养基中添加3．0-3．5mg／L KT，0．5～1．0mg／L NAA和5．0mg／L ABA的激素配比，明恢81、N175、航1号的最高分化率分别达72．7％、80．0％和78．0％；移栽成活95％以上。     

紫罗兰愈伤组织诱导及植株再生的研究

以紫罗兰幼苗子叶、子叶柄、下胚轴作外植体接种MS附加不同激素的培养基诱导愈伤组织，并进一步诱导分化出芽及再生植株。子叶和下胚轴外植体在MS＋0.1mg/LNAA培养基上愈伤组织发生率达100％，下胚轴愈伤组织转移MS 0.1mg/L 6-BA培养基上易诱导分化出小苗，分化频率达67％，再生小苗在1／2MSA＋0.2mg/L IBA培养基上生根率达86％。     

工厂化生产马铃薯脱毒苗的成本控制分析

马铃薯脱毒试管苗生产是马铃薯脱毒微型薯产业化的重要环节,但组培苗生产成本较高,严重制约了脱毒种薯产业化的发展。本文以工厂化生产组培苗直接成本与间接成本为线索,从经营管理与技术更新上提出一些既能保证试管苗质量,又能降低生产成本的有效管理措施,对非机械化生产组培室有一定的参考价值。     

马铃薯脱毒试管苗壮苗培养体系的优化

试验采用正交实验设计法,研究了不同浓度的α-萘乙酸(NAA)、比久(B)9)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和大量元素组合对马铃薯品种费乌瑞它脱毒试管苗壮苗培养的影响,以期为费乌瑞它脱毒试管苗壮苗培养优化培养体系的建立提供理论参考。结果表明:在4个因素中对茎粗、根数、根长和单株干重影响大小依次为:大量元素>B9>NAA>6-BA;而对苗高、有效茎节数、活叶数和单株鲜重影响最大的为大量元素,影响最小的为NAA。新复极差法显著性测定结果显示,除4个处理外,其余处理与对照间有效茎节数、活叶数、茎粗、根长、根数、单株鲜重和干重差异均达到极显著水平。MS(100 mL/L大量元素)+0.03 mg/L NAA+10 mg/L B9+2%白糖+0.6%琼脂培养基除根长外各性状的值均最大,表明它是适合‘费乌瑞它’脱毒试管苗壮苗培养的最佳培养基。     

采后脱落酸处理促进甘薯块根愈伤木栓组织的形成

本研究以‘北京1号’甘薯为试验材料,人工模拟机械损伤后采用不同浓度（25、50、100、200 mg/L）脱落酸（ABA）进行愈伤处理,研究采后ABA处理对甘薯块根的愈伤作用。结果表明:采后ABA处理能有效促进甘薯伤口处愈伤木栓组织的形成,其中以100 mg/L ABA愈伤3 d效果最佳。采后ABA处理能有效提高甘薯愈伤组织苯丙氨酸解氨酶（PAL）、过氧化物酶（POD）和多酚氧化酶（PPO）活性,提升总酚、类黄酮含量,减少甘薯重量损失。相关性分析表明,ABA处理甘薯木质素含量与总酚、类黄酮含量之间呈极显著相关（P<0.01）,PAL酶活力与POD和PPO酶活力呈极显著相关（P<0.01）。综上所述,采后ABA处理可通过激发甘薯损伤部位组织的苯丙烷代谢、提高愈伤防御酶活性及次生代谢产物的合成,达到促进甘薯块根愈伤形成的目的。     

马铃薯脱毒试管苗快繁中污染抑菌剂的筛选

在马铃薯脱毒试管苗工厂化快繁过程中,常因各种原因出现细菌污染,严重影响试管苗的生长,给生产带来损失。为了解决这一问题,本试验分别加入卡那霉素、青霉素、链霉素及青霉素和链霉素配合使用的抗生素,研究抑菌剂及抑菌剂浓度在马铃薯快繁过程中的抑制细菌的效果。结果表明:在培养基中加入卡那霉素、青霉素G钠、青霉素和链霉素的混合物都能抑制细菌的污染,但青霉素各处理不仅能抑制细菌污染,而且对试管苗的生长有明显的促进作用,其中青霉素60 mg.L-1的效果最好,同时抑菌剂的抑菌作用具有时效性。     

脱毒马铃薯生产栽培技术

嫩江县位于黑龙江省西北部,土质肥沃,林、草、水源丰富,具有优越的地理位置和丰富的自然资源。该地区昼夜温差大,有利于马铃薯块茎淀粉的积累,所以种植的马铃薯产量高,且品质好。为了充分利用脱毒马铃薯的无病毒感染、结薯早、膨大快、产量高和品质好等优点,总结了适合该地区的脱毒马铃薯高产高效栽培技术,包括品种选择与种薯处理、选地整地、合理施肥、田间管理、病虫草害防治以及收获贮藏。     

我国马铃薯病毒的种类及脱毒种薯生产过程中病毒的检测

对近年来我国各马铃薯产区病毒发生情况进行分析,详细列出马铃薯主产区病毒病种类及各主要马铃薯病毒的分布情况。分析表明,我国很多马铃薯产区尚缺少全面、系统的马铃薯病毒调查。同时比较了我国各地区马铃薯脱毒种薯生产过程中对病毒的检测规程,并分析了马铃薯A病毒(PVA)的检疫风险。     

温度对马铃薯花药愈伤诱导率的影响

采用讷16、克新16、克新13和西北果4个马铃薯品种或品系为试验材料,研究不同温度处理对马铃薯花药愈伤组织形成的影响。研究表明,接种前花蕾经2～8d、4℃低温预处理有利于花药愈伤组织的形成,其中以2～4d处理的效果最好,接种后经24～48h、32℃热激处理有利于花药愈伤组织的形成。试验还对低温预处理和热激处理相配合的效果进行了比较,发现两者配合处理的效果好于单独处理,单独热激处理的效果好于单独低温预处理。     

脱毒马铃薯组培工厂化育苗成本核算

植物组织培养技术经几十年的发展,已成为世界上应用最成功的生物技术之一。试管苗的工厂化扩繁生产随着规模的不断扩大,逐渐建立了一套高效低成本的试管苗工厂化生产技术体系。本文对年产100万株脱毒马铃薯组培苗的成本构成、成本核算进行了计算和分析,旨在为马铃薯及其他苗木组培工厂化育苗计算成本、分析经济效益和降低生产成本提供参考。     

浅谈马铃薯脱毒苗组培快繁技术

通过植株优选、茎尖剥离、病毒检测,培养成无毒健壮组培苗,在防虫温室（网棚）内繁殖微型薯原原种,为提高马铃薯种薯的生产和产业化发展提供重要依据。