猪精液4℃低温保存技术研究

为丰富猪鲜精保存技术、改善与提高精液保存质量,本研究以市场占有率高、性能稳定和可耐受4℃低温的长效稀释剂为对照,探讨本课题组研制的4℃稀释剂(低温Ⅰ号、低温Ⅱ号)对猪精液低温保存效果的影响。结果表明:低温Ⅰ号和低温Ⅱ号稀释剂对猪精液的有效保存时间和总存活时间均显著高于对照组(P<0.05)。保存至第6天时,对照组精子活力显著降低(P<0.05),保存至第10天时,低温Ⅰ号、低温Ⅱ号、对照组精子活力分别为74.6、76.0、0;保存第10天时,对照组pH显著低于2个实验组(P<0.05);保存从第5天开始,实验组质膜完整性显著高于对照组(P<0.05)。综上,本课题组研制的稀释剂对猪精液4℃低温保存效果较好,而且低温Ⅱ号对精子活力和质膜完整性保存效果更优。     

甘油浓度冷冻速度脱脂奶稀释液浓度对绵羊精子冷冻效果的影响

试验用15%脱脂奶稀释液(450毫渗摩—毫克分子浓度/公斤水),0～16%甘油浓度和1～100℃/分的降温速度共同对公羊精子冷冻-解冻存活率(活率和活力)的影响。结果表明4～6%甘油浓度和10～100℃/分的降温速度时精子存活率最高.用8%甘油浓度和5～30℃/分降温速度也获得了近似的结果。虽然在每一种甘油浓度中公羊精子能耐受好几种降温速度,但是提高甘油浓度会使最佳降温速度下降.甘油浓度超过8%就对精子有毒性了,使精子存活率显著下降。15%与19%脱脂奶稀释液(600毫渗摩),以4～6%甘油浓度和10～100℃/分降温速度冷冻均获得了很高的冷冻存活率。     

温度对奶牛冻精解冻后活力的影响

本研究对奶牛冻精解冻后在4℃,15℃,25℃温度下分别保存2 h,4 h,6 h,8 h,10 h的活力进行了测定。结果表明,4℃和15℃保存到10 h精子活力0.381±0.0170和0.379±0.0197,与初解冻接近(P0.05);25℃保存随时间延长精子活力呈下降趋势,和初解冻相比,6 h为0.349±0.0223(P0.05),8 h和10 h分别为0.302±0.0215和0.263±0.0287(P0.01)。牛冻精解冻后在4℃和15℃保存10 h以内,精子活力仍然维持在一个较高水平,符合输精要求,在此温度和时间范围内进行长距离携带,对精液质量影响小,可以达到预期的输精效果。环境温度在25℃左右时,冻精解冻后宜于4 h以内进行输精。     

鸡精液稀释配方对低温保存精子活力和输精效果的影响

为了完善中国南方地区鸡场公鸡精液的保存技术、提高精液的利用率,本试验研究了在低温(4℃)保存的条件下,不同的保存时间(0、4、8、24 h)、不同的稀释液配方(原精液、配方Ⅰ和配方Ⅱ)对精液的精子活力变化以及人工输精繁殖效果的影响。选用33周龄黄鸡母鸡192只、公鸡42只,192只母鸡依笼号分为12组(3种处理精液×4个保存时间),每组16只母鸡,公鸡不分组。统一采精后用两种不同稀释液稀释、低温(4℃)保存至0、4、8、24 h后观察精子活力,并对母鸡输精,分组收集鸡蛋,对各组受精率、出雏率、健雏率进行比较分析,以原精液低温保存作为对照。结果显示,两种稀释液组的精子低温(4℃)保存4、8、24 h,其精子活力极显著高于原精液组(P0.01),配方Ⅱ组精子的活力高于配方Ⅰ组(P0.05);两种配方稀释液组的精液低温(4℃)保存4 h,输精受精率高于原精液组(P0.05);两种配方稀释液组的精液在低温(4℃)保存8 h,输精受精率极显著高于原精液组(P0.01)。表明这两种精液稀释液更有利于精液保存,经稀释后的精液可以显著提高受精率,可为中国南方鸡场种公鸡精液保存技术的完善提供有力的数据支撑。     

L-肉毒碱对牛精液体外保存时间及品质的影响

精液体外孵育保存会使精子品质下降,抗氧化剂L-肉毒碱可促进激活的脂肪酸从细胞质到线粒体基质的转运,减少ROS产生和脂质过氧化反应的发生。研究分析了牛精液体外保存过程中不同浓度L-肉毒碱(LC)(0、2、10和15mmol/L)和不同孵育时间(2、4、6h)对牛精子活力、质膜完整性、线粒体活性和顶体完整性的影响。结果表明:与对照组相比,在牛精液体外保存稀释液中添加10mmol/L和15mmol/L的LC均可显著(P0.05)提高精子活力(33.0%vs 45.6%,42.4%)、质膜完整率(61.2%vs 73.6%,68.4%)和顶体完整率(81.4%vs 88.4%,86.3%),而线粒体活性则是10 mmol/L LC组效果最好;将筛选的最佳浓度10mM LC组于27℃体外孵育2、4、6h后,其精子的活力、质膜完整率和线粒体高膜电位百分率均显著高于对照组(P0.05),顶体完整率仅在孵育6h后与对照组差异不显著(P0.05)。由此可见,LC可保护精子功能和结构免受损伤,不仅能改善牛精液体外保存的品质参数,又可延长牛精液体外保存的时间。     

甘油浓度与冷冻速率对鸡细管冻精质量的影响

为提高鸡细管精液冷冻质量,采用2%、4%、6%、8%、11%的甘油浓度,离液氮面9种熏蒸高度,两步冷冻法,5℃水浴解冻3min,离心去甘油等,通过活力与人工输精检测冷冻效果。结果表明:(1)以甘油浓度为主效应,8%~11%各组间差异不显著(P0.05),但11%组效果最优;以冷冻速率作为主效应,6~8高度处各组间差异不显著(P0.05),其中第6高度处效果最优;甘油浓度-冷冻速率交互作用下"浓度"、"速率"、"浓度-速率"对活力有极显著的影响(P0.01);去除甘油前与去除后的精子活力成正相关,去甘油导致活力下降程度达50%左右;(2)以受精率为指标,6%甘油浓度组的最高(77.63%),与4%、8%组差异不显著(P0.05);11%组显著低于4%、6%、8%组(P0.05);(3)采用2%甘油浓度组的黑丝羽乌骨鸡冻精,对白莱航鸡和伊萨鸡母鸡进行人工输精,孵化效果无显著性差异(P0.05),但白莱航鸡略高于伊萨鸡。研究结果提示,采用6%甘油浓度,冷冻装置的第6高度处对鸡精液进行冷冻效果最好。     

精清浓度对马精子低温及冷冻保存效果的影响

本研究旨在比较不同精清浓度对马精子低温保存效果的影响。选取4匹4~12岁英纯血种公马,收集精液用含有不同浓度精清的稀释液进行精液低温保存或冷冻,检测保存和解冻后精液质量,评价精清浓度对马精子低温和冷冻保存效果的影响。结果表明:30%和40%浓度精清组低温保存后精液TM、PM、RAP及VAP值均显著低于0%、10%和20%精清浓度组(P0.05),10%精清浓度组低温保存24 h后TM值显著高于0%和20%精清浓度组,但保存至96 h后精液TM显著低于0%精清浓度组。不同浓度精清对精液冷冻效果的研究结果表明,含0%浓度精清组冻融后精液质量最优,随着精清浓度的增加冻融后活力及质膜完整性逐级递减。综上数据认为,进行马精液低温或冷冻保存时不添加精清可获得最理想的保存结果。     

不同浓度的精液保护剂对公猪精子活力及保存时间的影响

使用不同浓度(0.50%、0.75%、1.00%和2.00%)的精液保护剂——靓精稀释公猪精液,并设立对照组,对各组精液样品采用精液自动分析仪每天进行精子活力检测,直至精子活力低于使用要求,从而计算出精液的有效保存时间,以期找到最合适的靓精使用浓度。结果表明,0.75%浓度的靓精既可以提高精子活力,又可以延长精子有效存活时间;0.50%浓度的靓精对精子活力没有显著的提高作用,但是能够延长精子有效存活时间;1.00%及以上浓度的靓精会杀灭精子,精子活力和保存时间均下降。因此认为添加0.75%浓度的靓精在养猪生产中是安全、有效的。     

精浆浓度对4℃保存犬精液品质的影响

为了解精浆对犬精子低温保存的影响,试验通过离心分离鲜精的精浆和精子,将商业化稀释液与精浆混合,制备不含精浆和含25%、50%、75%、100%精浆的稀释液,并用该稀释液于4℃保存犬精子,定期对精子活力、活率、精子运动性、精子质膜完整性进行检测。结果表明:含25%精浆的稀释液保存效果最佳,保存120 h后,精子活力、活率仍超过40%;不含精浆和含50%精浆的稀释液保存效果次之。说明在低温保存犬精液时存在一定浓度的精浆有利于精子存活,在实际生产中,稀释液中含有25%的精浆,即鲜精与稀释液进行1∶3稀释,对维持精子在低温条件下的存活可能有较好的效果。     

稀释液中添加番茄红素对鸡精子保护作用的研究

为了研发新的鸡精液稀释液,试验在YHFB鸡精液稀释液(分别为B1液、B2液、B3液、B4液)中添加浓度分别为0,0.1,0.2,0.05 mg/mL抗氧化剂番茄红素,按1∶1的比例对鸡混合鲜精进行稀释,稀释后置于长时间保存的低温条件(5℃左右)下,定期检查精子活力,当小于或等于0.3时停止检查;置于高温恶劣环境(41℃水浴)下,每30 min检查1次精子活力,直到精子全部死亡。结果表明:低温条件下不同时间精子活力B1、B4液,B2、B3液均差异不显著(P0.05),添加0.1 mg/mL番茄红素的B2液在48小时前精子活力稍大于B3液,48小时后B3液精子活力稍大于B2液;高温条件下不同时间精子活力各组之间无显著差异(P0.05)。说明在低温条件下鸡精液稀释液中添加0.1 mg/mL番茄红素,能显著延长精子活力,但在41℃的高温条件下对精子的保护作用不明显。