香蕉皮多酚氧化酶特性研究

研究了香蕉皮中多酚氧化酶(PPO)的特性。结果表明,香蕉皮PPO的最适温度为35℃,最适p H值为6.5,75℃以上水浴5min、100℃水浴20s可以完全钝化香蕉皮PPO的活性,香蕉皮PPO存在同工酶。香蕉皮PPO的最适反应底物浓度为0.125mol/L。动力学研究结果表明,香蕉皮PPO的Km=0.087922mol/L,Vmax=0.00924OD404/min。考查了柠檬酸、亚硫酸氢钠、抗坏血酸、EDTA-2Na对PPO的褐变抑制效果和PPO酶液4℃保存时间与其活性的关系。     

蘑菇多酚氧化酶酶学特性初步研究

对蘑菇多酚氧化酶活性的研究,确定了蘑菇多酚氧化酶的最适反应温度为50℃、最适反应pH4.5~5.5,并通过底物浓度对多酚氧化酶活性影响的研究,建立了酶促褐变反应动力学方程:υ=0.315/(2.58 [S]),同时考察了几种褐变抑制剂与激活剂对多酚氧化酶活力的影响。     

微型薯多酚氧化酶的特性研究

对分离纯化后的微型薯的多酚氧化酶性质进行研究,以邻苯二酚为作用底物,用分光光度计在波长420 nm处测定不同pH值、反应温度、底物条件下微型薯的多酚氧化酶(PP0)活性,以讨论微型薯的褐变机理.结果表明,微型薯的PPO最适pH值约为5.5,最适反应温度为35℃左右.该酶热稳定性差;最适作用底物为绿原酸、原儿茶酸和咖啡酸;FeSO4和抗坏血酸等化合物可以抑制PPO活性,CaCl2和CuS04等则起促进作用.适度高温、强酸性或碱性条件、FeSO4或抗坏血酸等处理都可以抑制该酶活性.     

苹果梨中多酚氧化酶酶学特性的研究

 以苹果梨中的多酚氧化酶为研究对象, 对其酶的活性变化及其特性的研究表明, 苹果梨中的多酚氧化酶的最适pH 值是4. 6 , 最适温度是40 ℃; 亚硫酸氢钠、维生素C、柠檬酸对苹果梨中多酚氧化酶的抑制作用依次减弱, 硫酸钠几乎无抑制作用。不同底物和同底物不同浓度影响多酚氧化酶特性。     

红星苹果多酚氧化酶某些特性及其抑制剂的研究

用硫酸铵分级盐析及透析法提取红星苹果ＰＰＯ,并分别测定了该酶的最适ｐＨ、最适温度及酶促动力学参数Ｋｍ值和Ｖｍａｘ值,比较分析了常见几种ＰＰＯ抑制剂的抑制作用,结果表明：以邻苯二酚为底物,苹果ＰＰＯ的最适ｐＨ为６．２,最适温度为２８℃,Ｋｍ值为４１ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ值为２３５．３ｕｎｉｔ／ｍｉｎ。在所测５种抑制剂（Ｌ－半胱氨酸、偏二亚硫酸钠、硫脲、谷胱甘肽、抗坏血酸）中,Ｌ－半胱氨酸、偏二亚硫酸钠和抗坏血酸对苹果ＰＰＯ表现出较强的抑制作用,并以Ｌ－半胱氨酸最强。     

蜜柚多酚氧化酶的酶学特性与活性测定研究

以邻苯二酚为底物,采用分光光度法在420nm处测定蜜柚多酚氧化酶(PPO)的活性,研究底物浓度、pH、温度及酶液浓度对PPO活性的影响,并建立了酶促褐变反应动力学方程。结果表明:蜜柚多酚氧化酶的酶促反应符合米氏方程所描述的单底物酶促反应动力学,以邻苯二酚为底物的最大反应速度为:Vmax=22.452U/min,Km=128.2mmol/L。蜜柚多酚氧化酶作用的最适pH6.4,最适温度为10℃。不同时间的蜜柚多酚氧化酶的平均活性呈逐渐下降的趋势。     

紫甘薯多酚氧化酶性质探讨

甘薯是世界上一种重要的粮食和能源作物,由于加工过程中其组织中的多酚氧化酶易催化多酚类物质氧化成黑色素,严重影响了其加工品质.以济薯18为材料,研究了pH值、温度、底物浓度等对其多酚氧化酶(PPO)活性的影响.结果表明:紫甘薯济薯18中PPO活性在360 am处最大,其最适反应时间为11 min,最适pH值6.5,最适温...     

雪莲果多酚氧化酶性质及其抑制方法研究

从雪莲果块根中提取多酚氧化酶(PPO),对其最适反应pH、最适反应温度、热稳定性进行研究,同时研究了VC、氯化钠、柠檬酸、蔗糖、柠檬汁和橘子汁对PPO活性的影响。结果表明:雪莲果PPO的最适反应pH为6.4,最适反应温度为30℃,在80、90、100℃分别处理300、240、220 s时完全失活。NaCl和蔗糖对雪莲果PPO活力没有影响,VC、柠檬酸、柠檬汁和橘子汁对其有很好的抑制作用,柠檬汁和橘子汁可作为天然抑制剂应用于雪莲果加工中。VC、柠檬酸对PPO的抑制作用高度显著,橘子汁、VC与柠檬酸的交互作用对PPO活性有显著影响。     

双孢蘑菇多酚氧化酶的分离、纯化及特性分析

 通过分步盐析,DEAE-Cellulose-52阴离子交换层析和Sephadex G-100凝胶柱层析,对双孢蘑菇中的多酚氧化酶（PPO）进行了分离纯化,并对在分离纯化过程中蛋白得率及酶活性进行了测定。最终得到纯化倍数为103.2,比活为566.57 U · mg^-1,蛋白得率为0.47%的酶液。经SDS-PAGE电泳检验,所得到的PPO呈单一蛋白带,分子质量为25.5 kD。利用扫描探针显微镜对该酶的分子形态进行了观察,发现双孢蘑菇中的PPO分子呈椭球状,分子高度在8 ~ 12 nm之间。     

贮藏温度对鸡腿菇多酚氧化酶的影响及其应用

用柠檬酸缓冲溶液法对食用真菌鸡腿菇的多酚氧化酶（PPO）进行提取，并用分光光度法测定酶活，得出鸡腿菇的PPO提取参数。研究鸡腿菇在4种不同温度条件下多酚氧化酶的变化特点，结果表明，4℃可明显抑制鸡腿菇多酚氧化酶的活性，并对用表面喷洒可食用盐溶液的保鲜方法进行初步探究，为鸡腿菇的保鲜提供理论依据。     

鸭梨多酚氧化酶基因CDS区的克隆及表达

以鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.)果皮基因组DNA为模板,根据已经发表的多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)基因保守序列设计引物,利用PCR技术,克隆得到鸭梨多酚氧化酶编码区序列,将此核酸序列克隆到载体pGEM-T,酶切鉴定后测序,结果表明该段序列含有1782个核苷酸,编码593个氨基酸。对鸭梨多酚氧化酶基因片段的一致性分析和进化树分析表明,该片段与沙梨(Pyrus pyrifolia,AB056680)、苹果(Malus domestica,L29450)、李(Prunuss alicina,AY866432)以及杏(Prunus armeniaca,AF020786)的一致性分别为99%、96.3%、82%和51.4%,绘制的进化树和形态学分类地位相一致。将该片段连接到表达载体pET39b上,获得的重组子命名为pET39b-PPO,热激法转化表达受体大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG进行诱导。SDS-PAGE分析表明,PPO基因在大肠杆菌中被诱导表达蛋白质相对分子质量约66ku,检测表明具有多酚氧化酶的活性。     

大型真菌多酚氧化酶活性研究

木质素是一种高度复杂的不定形的芳香族化合物,是仅次于纤维素的第二大再生有机资源,木质素的微生物降解及其有关酶类在制浆造纸工业和环境保护方面具有较大潜力。木质素的生物降解酶主要有木素过氧化物酶、漆酶、锰过氧化物酶和多酚氧化酶等。国外该方面的研究已有不少报道［１－５］,但多集中在黄孢原毛平革菌（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶方面的研究;国内有关研究报道较少［６,７,８］。以筛选高酶活菌株为目的,对大型真菌进行酶活分析的研究,至今未见报道,本文就…     

蝴蝶兰多酚氧化酶基因克隆及序列分析

 利用RT-PCR和RACE技术从蝴蝶兰中克隆的多酚氧化酶同源基因, 命名为PhPPO, 其cDNA 全长1 851 bp, 完整的编码框长1 647 bp, 编码549个氨基酸, 生物信息学分析表明其具有酪氨酸酶家族的特征, 具有保守的CuA 和CuB 结合区, 以及向叶绿体运输的导肽结构。将其亚克隆到表达载体pPRoEXHTa上, 在BL21 (DE3) 进行表达, 经ITPG诱导, 获得蝴蝶兰PPO原核表达蛋白。     

野生金针菇CV的特性研究

目前金针菇栽培品系较多,大多数的栽培周期在90～120天,抗病能力较弱.笔者于1989年12月底,在徐州地区采到的野生金针菇子实体,经组织培养,对获得的菌丝体的生长条件、抗逆性、形态特征、产量性状及栽培周期作了研究,并与其它四个菌株作了比较,现报道如下.     

莲藕贮藏中褐变度及多酚氧化酶活性的初步研究

研究了不同温度、不同莲藕状态、不同褐变抑制剂处理对莲藕褐变度及多酚氧化酶活性的影响。实验结果表明，低温、节藕、抗坏血酸（０．２５％）＋柠檬酸（０．２％）和ＮａＨＳＯ３（０．０５％）＋柠檬酸（０．２％），莲藕褐变最轻。多酚氧化酶活性随时间的延长而减弱     

金针菇富硒特性的研究

以金针菇为富硒栽体,通过大量的栽培试验,对金针菇的菌丝体和子实体的富硒、耐硒及其生长特性进行了比较研究。结果表明:金针菇的生长与硒的浓度有关。当培养基中硒的浓度低于200 mg／L时,金针菇的菌丝体和子实体均可以生长,其菌丝体和子实体均为白色,与对照组相同。当培养基合硒浓度为0．01-1．0 mg／L时,其生长速度明显高于对照组,长势好于对照组,当硒浓度小于40 mg／L时,其出菇整齐,与对照组生长状况接近;当硒浓度高于40 mg／L时,金针菇的生长受到明显的抑制;硒浓度高于200 mg／L时,不适于富硒金针菇的培养。同时硒浓度的改变对其干鲜比值基本无明显影响。     

桑叶多酚氧化酶活性研究

以新鲜桑叶为材料,考察不同温度、p H值、底物浓度、激活剂、抑制剂对桑叶PPO活性的影响。结果表明:桑叶PPO酶活性的最适温度为40℃,最适p H值为6.0,最适底物浓度为0.02mo L/L的焦性没食子酸;高温(70℃)短时间(2min)处理能明显抑制酶的活性;蔗糖、硫酸铝和硼酸溶液对桑叶PPO活性有一定激活作用,在0.1mo L/L时激活率分别达到75%、73%、88%;抗坏血酸、柠檬酸、亚硫酸钠对桑叶PPO活性有一定抑制作用,亚硫酸钠、柠檬酸在0.1mo L/L时抑制率分别达到80%、87%,抗坏血酸的浓度在0.6mo L/L时抑制率达到了86%。为深入研究桑叶PPO的酶学特性及应用研究奠定了基础。