玉米转Bt基因后代的抗虫性鉴定及其遗传分析

采用田间接虫鉴定与室内PCR扩增，对玉米4个遗传背景，2个不同回交世代转基因材料进行了抗虫性鉴定．结果表明：回交3代、4代转基因材料平均抗虫性与其阴性对照相比达到了显著或极显著水平，外源Bt基因在回交后代中符合孟德尔定律1:1的分离比例．在4个遗传背景共98株含Bt基因的单株中，田间抗虫性表现高抗73株，抗5株，中抗7株，感2株，高感11株，抗虫株率占86．7％．     

转Bt基因水稻的抗虫性鉴定

利用Basta抗性选择技术快速检测转Bt基因水稻及杂交后代群体单株。试验表明 :阳性单株在田间有良好的抗螟虫性能 ;利用Bar基因能快速鉴定转Bt基因水稻及利用Bar基因进行辅助选择     

与EST-SSR连锁的抗性候选基因潜在功能分析

利用课题组已开发的80个具有良好多态性的EST-SSR标记对已构建的遗传连锁图进行加密.结果表明,共有16个EST-SSR标记在父母本间具有良好的多态性,多态性标记频率为20%;后代群体基因型数据经x2测验符合1:1分离比例;经连锁分析,16个差异EST-SSR标记被整合到已构建的具有19个连锁群的分子遗传连锁图谱中,...     

Bt转基因抗虫甘蓝的研制

以子叶柄为外植体,通过根癌农杆菌介导法将苏云金芽孢杆菌杀虫蛋白基因CryIA（c）加上叶绿体转运肽RBCSsig．导人结球甘蓝栽培品种“夏光”的母本“103”中,共获得48株卡那霉素抗性植株。经GUS染色和PCR扩增检测,选出5株阳性植株进行连续2代自交授粉结合GUS染色检测,获得了5个CryIA（c）基因纯合株系。RT-PCR证明CryIA（c）基因在5个株系中高表达。离体叶片抗虫试验表明,转基因植株抗性较对照显著提高。大田种植试验发现,转基因株系在不施用杀虫剂的条件下依然可以正常生长直至结球,而对照株系遭受虫害严重。     

转Bt基因抗虫棉Bt基因表达的时空动态

以转Bt基因抗虫棉 33B为材料 ,利用ELISA检测方法 ,通过对棉株不同发育时期和同一时期的不同组织或器官Bt晶体蛋白含量的测定 ,研究了转Bt基因抗虫棉Bt基因表达的时空变化。结果表明 ,随着棉株生育进程的推进和株体的老化 ,Bt晶体蛋白含量随着植株体内可溶性总蛋白含量的逐渐降低而降低 ,而Bt基因的表达强度从苗期到蕾期随着棉株营养生长的加快而呈上升趋势 ,至蕾期达到高峰 ,以后逐渐减弱。不同组织或器官Bt晶体蛋白的含量也有较大差异 ,表现在幼嫩组织或器官的含量较高 ,成熟组织或器官次之 ,衰老组织最低。这说明Bt基因表达强度的减弱和Bt晶体蛋白含量的降低是转Bt基因抗虫棉生育后期抗虫性降低的根本原因     

Bt toxin resistance from loss of a putative carbohydrate-modifying enzyme

The development of resistance is the main threat to the long-term use of toxins from Bacillus thuringiensis (Bt) in transgenic plants. Here we report the cloning of a Bt toxin resistance gene, Caenorhabditis elegans bre-5, which encodes a putative beta-1,3-galactosyltransferase. Lack of bre-5 in the intestine led to resistance to the Bt toxin Cry5B. Wild-type but not bre-5 mutant animals were found to uptake toxin into their gut cells, consistent with bre-5 mutants lacking toxin-binding sites on their apical gut. bre-5 mutants displayed resistance to Cry14A, a Bt toxin lethal to both nematodes and insects; this indicates that resistance by loss of carbohydrate modification is relevant to multiple Bt toxins.     

苏云金芽孢杆菌杀虫机理及害虫对其抗性机制的研究进展

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。     

Bt水稻杂交后代抗螟虫性鉴定及转基因的遗传分析

在外引国内转Bt基因水稻稳定系的基础上,利用bar基因（抗Basta除草剂）与目的基因cryIA（b）紧密连锁的关系,对Bt转基因水稻及与常规水稻品种杂交的后代单株进行了Basta抗性检测,以及室内和田间抗螟虫鉴定,证明了Basta阳性株与抗螟虫是高度一致的。     

玉米Bt转基因植株抗虫性量化分析

对87-1，8085，综3，N808等4个回交一代Bt转基因材料进行田间抗虫性接卵鉴定的结果表明，成株期转基因材料群体茎秆的平抗虫性对照提高45%以上，差异达或极显著水平，叶片的抗虫性提高30%以上，不同遗传背景的转基因材料，抗性表现不一，回交一代群体内，不同单株的抗虫性差异悬殊，均存在高抗到抗感不等的分离。     

ELISA方法鉴定转Bt基因抗虫棉

采用ELISA（酶联免疫）方法，对转Bt基因抗虫棉种子、子叶及苗期叶片中Bt毒蛋白的含量进行了测定，同时比较了两种不同pH值的样品提取缓冲液及不同的提取时间对测定棉花叶片中Bt毒蛋白含量的影响，以进一步完善测定转Bt基因抗虫棉Bt毒蛋白含量的ELISA方法，并探讨了ELISA方法鉴定转Bt基因抗虫棉的可行性。     

Identification of a new stripe rust resistance gene in Chinese winter wheat Zhongmai 175

Stripe rust is a serious foliar disease posing a grave threat to wheat production worldwide. The most economical and environmentally friendly way to control this disease is to breed and deploy resistant cultivars. Zhongmai 175 is an elite winter wheat cultivar conferring resistance to a broad spectrum of Puccinia striiformis f. sp. tritici(Pst) races. To identify the resistance gene in the cultivar, genetic analysis was conducted using the parents, F1, F2 and F2:3 populations derived from the cross of Lunxuan 987/Zhongmai 175. Segregations in the F2 and F2:3 populations indicated a single dominant gene conferring resistance to stripe rust in Zhongmai 175, temporarily designated Yr ZM175. Bulked segregant analysis(BSA) with wheat i Select 90 K SNP array determined a preliminary location of Yr ZM175. Subsequently, Yr ZM175 was mapped on chromosome 2AS using simple sequence repeats(SSR), expressed sequence tags(EST) and newly-developed kompetitive allele specific PCR(KASP) markers, being flanked by Xgwm636 and Xwmc382 at genetic distances of 4.9 and 8.1 c M, respectively. Comparison of reaction patterns of Yr ZM175 on 23 Pst races or isolates and pedigree analysis with other genes on chromosome 2AS suggested that it is likely to be a new gene for resistance to stripe rust. The resistance gene and linked molecular markers will be useful in wheat breeding targeting for the improvement of stripe rust resistance.     

Bt-8010和Bt-7216对紫外线的抗性研究

用紫外光(uv)对Bt-8010及Bt-7216进行不同照射时间处理,然后再置于平板上培养24h,结果表明,Bt-7216在uv处理11min后全部失活,而Bt-8010在uv处理13 min仍有活性。从uv处理时间的长短及平板上出现菌落的多少得知,Bt-8010对uv的抗性比Bt-7216对uv的抗性强。Bt-8010经紫外线照射13 min,培养24 h后发现有2个菌落发生明显的变异,Bt-7216有1个菌落发生明显的变异;菌落比原始菌落小,涂片后油镜观察,其菌体要比原始菌体小,为明显的变异菌株。     

田间多次交配棉铃虫种群对Bt棉的抗性监测

2008年采用改进的F2代法和含毒饲料法监测河北省邱县和山东省无棣县田间棉铃虫(Helicoverpa armig-era)对Bt棉的抗性,结果表明:邱县和无棣县田间棉铃虫雌蛾普遍存在多次交配现象(1次交配率仅占30.0%~38.2%),改进的F2代法估测得这2个多次交配种群对Bt棉的抗性等位基因频率分别为0.082 6(0.031 1~0.134 0)和0.076 4(0.026 5~0.126 3);含毒饲料法测定这2个地区棉铃虫对Cry1Ac毒蛋白的抗性分别为20.9倍和12.5倍,达到中等水平抗性。说明2个地区棉铃虫的抗性已处于上升阶段,需尽快采取有效的抗性治理对策。     

浙江省水稻品种对条纹叶枯病抗性鉴定和Stvb-i基因的SSR检测

以浙江省11个粳稻品种(系)对条纹叶枯病抗性进行自然鉴定,并进而用一个与水稻条纹叶枯病抗性基因Stvb-i紧密连锁的RM209微卫星标记进行了分子检测。结果表明,春江051、丙00502SJ、丙00502HSF47、HGP5和HPG6共5个水稻品种(系)检测到Stvbi-抗性基因,其中丙00502HSF47田间表现感病,其它4个品种(系)均表现出良好的田间抗性。Z5、HGP3和HGP4虽未检测到Stvb-i抗性基因,但也表现出较强的田间抗性,推测这3个品种可能含有新的抗病基因或具有其它某种抗病机制。     

17个粗山羊草品种(系)抗叶锈基因的鉴定

为鉴定17个粗山羊草品种(系)中可能含有的抗叶锈病基因,用10株具有不同毒力的小麦叶锈菌混合菌对17个粗山羊草品种进行成株期抗叶锈性鉴定,筛选出7个在田间对叶锈菌有抗性的材料。用抗叶锈基因Lr1、Lr9、Lr19、Lr21、Lr24、Lr28、Lr29和Lr34的STS、SCAR或CAPS标记对这些品种进行分子辅助鉴定。初步明确粗山羊草CN40033和CN30823中可能含有Lr1基因;CN42471中可能含有Lr9基因;CN30942中可能含有Lr21;供试的17个粗山羊草品种中都不含有Lr19、Lr24、Lr28、Lr29和Lr34。     

抗虫陆地棉配合力与杂种优势分析

采用不同来源的常规棉、抗虫棉,按照4×7的NCⅡ设计组配不完全双列杂交得到28个杂交组合,通过2年重复试验,分析F1、F2产量和纤维品质的杂种优势和配合力。结果表明:产量和品质性状广义遗传力和狭义遗传力大多比较低,但衣分的广义遗传力可达92.16%;狭义遗传力大于54.64%的性状为衣分、衣指、断裂比强度和籽指,部分性状的F2狭义遗传力高于F1代。供试组合F1和F2的中亲优势和高亲优势主要表现在产量上;所研究的性状中,F1以皮棉产量竞争优势、中亲优势和超亲优势最高,平均值分别为11.31%、34.17%和13.33%;组合P4/P7(鄂抗棉12/5H303)的皮棉产量比竞争对照邯284增产27.4%。F2杂种优势依然部分存在,但大多性状比F1优势都有衰退。F1籽棉和皮棉产量较优的特殊配合力组合为P4/P7(鄂抗棉12/5H303)、F2籽棉和皮棉产量较优的特殊配合力组合为P4/P10(鄂抗棉12/5H335)、P1/P11(611/5H336)。产量性状一般配合力好的抗虫棉亲本是P8(5H309)、P5(5H181);品质性状一般配合力好的亲本是P1(611),P2(05-5317)和P4(鄂抗棉12)。优选亲本配组可以指导抗虫杂交棉的选育,获得具竞争优势的抗虫杂交棉品种。     

转Bt基因抗虫棉卡那霉素田间鉴定技术研究

对转基因抗虫棉不同时期、不同叶片对卡那霉素不同浓度的反应及其与棉花抗虫性的关系进行了较系统的研究.结果表明,选取4 000 mg·L-1的卡那霉素液在棉花苗期、蕾期涂抹棉株倒二片平展叶最适宜,田间卡那霉素反应与田间棉铃虫发生实况结果吻合率高.说明棉花田间抗卡那霉素反应能够准确检测转基因抗虫棉,可以作为一种快速简便的田间检测转基因抗虫棉的方法.     

高产、抗病转基因抗虫棉新品种鲁棉研37号

鲁棉研37号（原代号鲁253）是山东棉花研究中心以高产、高抗黄萎病的自育非转基因中熟品系鲁9136（豫2067×定陶621）为母本,转B t基因抗虫棉鲁99系（从鲁棉研16号原始系鲁S6145系选）为父本杂交,经过连续多代系统选育而成的常规转基因抗虫棉新品种,