舟山野菊花序不同萃取物抑菌活性的研究

对野菊花序采用微波粗提,经石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水得萃取物,通过K-B法和倍比稀释法,分别对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的标准、耐药菌株进行体外抑菌活性测试。结果表明：水相的抑菌活性〉正丁醇〉乙酸乙酯,石油醚萃取物无抑菌效果;水相对大肠埃希菌标准、耐药菌株的MIC分别为15.62 mg/mL和7.81 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的标准、耐药菌株的MIC分别为3.90 mg/mL和1.95 mg/mL,正丁醇相的MIC在15.62~31.25 mg/mL之间。水相和正丁醇相呈现较强的广谱抑菌活性,且具有抗耐药菌作用。     

蒲公英内生真菌的分离、鉴定及抑菌活性研究

蒲公英为药食同源的一种传统植物,具有较好的抗菌消炎的功能,蒲公英提取物中含有多种具有抗菌活性的化合物,而植物内生真菌可产生与宿主植物相同或相似的代谢产物,可为抗菌化合物的开发利用开辟新途径。从蒲公英中分离获得蒲公英内生真菌,并选取金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)、铜绿假担孢菌(Pseudomonas aeruginosa)、白色念珠球菌(Candida sporogenes)等病原菌进行抑菌试验,对蒲公英内生真菌发酵产物进行了抑菌活性筛选,其中菌株PGY5具有较好的抑菌活性,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)值为0.16 mg/m L,最小杀菌浓度(MBC)值为0.31 mg/m L。对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、肠炎沙门氏菌、铜绿假单孢菌和白色念珠菌也具有明显的抑菌效果,最小抑菌浓度(MIC)值分别为0.31 mg/m L,最小杀菌浓度(MBC)值为0.63 mg/m L。通过对菌株PGY5的ITS r-DNA序列进行比对分析,菌株PGY5为烟曲霉菌(Aspergillus fumigatus),与Aspergillus fumigatus JQ356539具有100%的相似性。通过LC-MS/MS检测在内生真菌PGY5乙酸乙酯层中发现了一种活性成分木犀草苷,其常存在于蒲公英叶中。     

汉中天麻多糖抗菌活性研究

采集湿天麻,通过常压蒸煮、切片、烘干、粉碎、超声辅助水提醇沉、脱色等工艺处理,得到天麻粗多糖。利用薄层平板琼脂糖孔穴扩散法定性测定天麻粗多糖抗菌活性,进而采用微量肉汤稀释法测定40株菌株(包括标准株和临床分离株)的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,简称MIC)。天麻多糖具有广谱抗菌活性,对G~-的MIC范围为0.468 75~15 mg/mL,对G~+的MIC范围0.937 5~120 mg/mL,对真菌的MIC范围0.937 5~30 mg/mL,其中对嗜麦芽假单胞菌090223、黏质沙雷氏菌1379、产酸克伯杆菌3株菌的抑菌活性最好,MIC为0.468 75 mg/mL。汉中天麻多糖粗提物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌具有一定的抗菌活性。     

茼蒿粗提物对西瓜枯萎病菌的抑菌活性

以西瓜枯萎病即尖孢镰刀菌西瓜专化型为指示菌,对茼蒿粗提物的抑菌活性进行研究。结果表明,茼蒿粗提物对西瓜枯萎病具有一定抑制作用,以不同有机溶剂萃取,正丁醇萃取的效果最好,其粗提物抑菌率达到了97.5%。最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC)分别为125 mg/m L和500 mg/m L,通过毒力方程的测定,它的半抑菌浓度(EC50)为206 mg/m L。并以0、MIC、EC50和MFC的四种浓度粗提物对西瓜枯萎病菌孢子萌发的研究,在MFC浓度下的孢子萌发率最低。     

淋球菌流行株对阿奇霉素的敏感性分析

目的 了解2013-2015年番禺区临床分离的淋球菌流行株对阿奇霉素的敏感性及耐药菌株的流行特点.方法 采用琼脂稀释法测定菌株对阿奇霉素的最小抑菌浓度(MIC).每批试验均由标准菌株作质控,统计出MIC50和MIC90.结果 3年间共检测出235株淋球菌,其中18株对阿奇霉素耐药(7.7％).阿奇霉素的MIC50及MIC90分别为0.25mg/L和0.50 mg/L.2013、2014、2015年阿奇霉素的耐药率分别为9.4％、6.3％和7.0％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 淋球菌对阿奇霉素的耐药率较高,持续的耐药性监测为临床指导阿奇霉素治疗淋病有重要意义.     

5-氯甲基水杨醛缩苯丙氨酸过渡金属(Ⅱ)配合物的合成及抗菌活性

在乙醇溶剂中合成5-氯甲基水杨醛缩苯丙氨酸新型Schiff碱配体及其过渡金属M(M=Mn2+、Co2+、Ni2+、Cu2+、Zn2+)配合物.通过元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱及差热-热重方法对其组成和结构进行了表征.采用滤纸片法和试管二倍稀释法试验测定了Schiff碱及其过渡金属配合物对大肠埃希菌Escherichia coli和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus的抗菌活性.结果表明Schiff碱配体为1∶1型电解质,其组成为KHL.H2O(L=C17H14O3NCl2-);合成的5种Schiff碱金属配合物均为非电解质类型,组成为[ML(H2O)].nH2O,配体L中的亚胺基氮、酚基氧、羧基氧均与中心金属离子M配位,另有1个水分子参与配位.荧光光谱试验显示,5种配合物的荧光强度均较相应Schiff碱配体的明显增强,其中锌配合物的荧光强度最大.体外抗菌试验结果表明该Schiff碱配体及其过渡金属配合物都具有一定的抗菌活性,而且配合物的抗菌活性强于Schiff碱配体,其中铜配合物对大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌均表现出最强的抗菌能力,其对这2种细菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为25.0和12.5μg.mL-1.     

EDTA对黏菌素体外抗菌活性的影响

采用微量肉汤稀释法研究了膜通透性促进剂EDTA对黏菌素体外抗菌活性的影响。结果表明:经PCR扩增,在受试的85株沙门菌和大肠杆菌菌株中,有23株检测到mcr-1基因,但未检出mcr-2～mcr-10阳性菌株; EDTA可增强除天然耐药的奇异变形杆菌和摩氏摩根菌以外的所有菌株(mcr-1阳性菌株、mcr-1阴性菌株和标准株)对黏菌素的敏感性,且增强黏菌素抗菌活性的作用随EDTA浓度的加大而增强;与60、30 mg/L的EDTA联用后,黏菌素对分离菌株的最小抑菌浓度(MICs)均显著降低,且沙门菌和大肠杆菌对黏菌素的耐药率均显著下降。因此,EDTA在≥30 mg/L的浓度下,可有效增强黏菌素对mcr-1阳性和mcr-1阴性菌株的抗菌活性。     

紫金标提取物抗菌活性的研究

[目的]测定紫金标（Ceratostigma minusStapf ex Prain）不同萃取相的抗菌活性,为紫金标的进一步开发利用提供理论依据。[方法]采用常规琼脂扩散法进行体外抑菌试验,用微量稀释法测定MIC、MBC值。[结果]紫金标不同萃取相对金黄色葡萄球菌（Staphyloc-cocus aureus）、大肠埃希菌（Escherichia coli）、铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）和白色念珠菌（Candida albicans）均有不同程度的抑制作用,尤其石油醚层对上述4种标准菌和耐药菌的抑制活性均较高,其对这4种菌株的最低抑菌浓度（MIC）值分别为0.005、0.078、0.156和0.005 mg/ml。[结论]紫金标初提物呈现广谱抗菌特性,且具有抗耐药菌作用,这为紫金标的进一步开发利用提供了理论依据。     

花椒油主要活性物质对荔枝霜疫霉的抑菌活性

为寻找新型植物源抑菌物用于荔枝霜疫霉菌(Phytophthora litchi Chen.)的防治,以花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim.)油中主要活性物质柠檬烯、桉树脑、月桂烯等为试验材料,采用菌丝生长速率法测定其对荔枝霜疫霉菌的抑制活性,并将柠檬烯与苦参碱复配,测定复配物的抑菌效果。结果表明,当柠檬烯、桉树脑的浓度分别为32. 0、40. 0 mg/L时,抑菌率均为100. 0%,当月桂烯的浓度为400. 0 mg/L时,抑菌率为88. 2%,柠檬烯、桉树脑、月桂烯等3种活性物质的抑菌中浓度分别为7. 2、6. 5、97. 2 mg/L;当柠檬烯和苦参碱复配时增效比为1. 8,抑菌效果具有增效作用。花椒油中3种主要活性物质均对荔枝霜疫霉菌具有抑制作用,从抑菌中浓度来看,桉树脑的抑菌能力最佳,其次为柠檬烯,月桂烯最弱。柠檬烯与苦参碱复配后抑菌效果更佳。     

黄柏与抗菌药联合抗耐药大肠杆菌的作用研究

为研究黄柏水提取物与抗菌药联合体外抗含fos A3和β-内酰胺酶(ESBLs)型耐药基因大肠杆菌的效果,对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,采用二倍微量稀释法分别检测黄柏水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的黄柏水提取物与抗菌药联合抑制耐药大肠杆菌。结果显示,分离到含fos A3和CTX-M耐药基因大肠杆菌;黄柏水提取物的MIC大于0.5 g/m L,以1/2 MIC的黄柏水提取物与14种抗菌药联合使用3代后,抗菌药抗菌活性显著增强,黄柏水提取物可显著降低抗菌药MIC,头孢曲松钠、阿莫西林、环丙沙星、左旋氧氟沙星、黏杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、加替沙星、头孢他啶、头孢噻呋钠、氟苯尼考、磷霉素的MIC均降到1.562 5μg/m L以下。黄柏水提取物联合抗菌药应用可能具有协同抑菌作用,可用于耐药细菌感染疾病的临床治疗。     

苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病带菌种子萌发的影响

采用抑菌圈法测定苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的毒力,平皿培养法测定苋菜活性物对带菌西瓜种子萌发的影响。结果表明,苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌的最小抑菌浓度为5 mg/m L,EC50为146.349 2 mg/m L;无菌种子、带菌种子、16.6%乙醇处理的带菌种子、苋菜活性物处理的带菌种子的发芽势分别为87.3%、42.7%、48.0%、60.0%,发芽率分别为93.3%、54.7%、58.7%、90.0%;经5 mg/m L的苋菜活性物处理的带菌西瓜种子的发芽势和发芽率分别为64.7%和90.7%,而经80 mg/m L的苋菜活性物处理的带菌种子的发芽势和发芽率分别为3.3%和4.7%。这表明苋菜活性物对西瓜细菌性果斑病菌有较强抑制作用,在低浓度时既有抑菌效果又可促进种子萌发,极具开发和应用前景。     

广西地不容内生真菌疣孢漆斑菌DBR-11的抑菌活性

为了研究广西地不容内生真菌的抑菌活性,从广西地不容块根中分离纯化出18株内生真菌,采用拮抗试验测定了其对10种植物病原真菌的抑制活性,发现疣孢漆斑菌DBR-11对多数供试菌有很好的抑制活性。进一步测定了DBR-11菌株发酵产物的抑菌活性,发现发酵产物的乙酸乙酯萃取物对病原菌的抑制活性较高,质量浓度为5 g/L时,对10种植物病原真菌的抑菌率均在90%以上,有效中浓度(EC50)为0.007 2~0.446 5 g/L,其中对烟草黑胫病菌的毒力最高,EC50值为0.007 2 g/L;发酵产物的乙酸乙酯萃取物质量浓度为2 g/L时,72 h对15种供试动物病原菌中的7种能完全抑制,最低抑制浓度(MIC)为0.062 5~0.25 g/L,其中对痢疾志贺氏菌的抑制活性最高,MIC值为0.062 5 g/L。DBR-11发酵产物乙酸乙酯萃取物有广谱的抗菌活性,具有潜在的应用价值。     

临床常用几种抗菌药物对HPS抗菌活性研究

[目的]研究抗菌药物恩诺沙星、环丙沙星、加替沙星对27株副猪嗜血杆菌临床分离株体外抗菌活性,从而观察副猪嗜血杆菌对喹诺酮类抗菌药物的敏感性。[方法]采用微量肉汤稀释法测定MIC,参考标准为美国临床和实验室标准协会(CLSI)。[结果]恩诺沙星(MIC50,MIC90,0.25μg/mL,2μg/mL)、环丙沙星(MIC50,MIC90,0.125μg/mL,2μg/mL)、加替沙星(MIC50,MIC90,0.125μg/mL,1μg/mL)均表现出一定的抑菌活性,且加替沙星的抑菌活性最明显。在耐药性方面,副猪嗜血杆菌对恩诺沙星的耐药性最强(22.2%),环丙沙星(3.8%)和加替沙星(7.4%)具有轻微的耐药性。[结论]抗菌药物恩诺沙星、加替沙星以及环丙沙星对副猪嗜血杆菌临床分离株具有一定的抗菌活性,在耐药性方面,HPS已经对恩诺沙星表现出一定的耐药性,因此,今后在临床上遇到副猪嗜血杆菌引起的相关疾病,可以采用合理的给药方案进行疾病的治疗,对于预防耐药菌株产生至关重要。     

香水百合总黄酮提取液体外抑菌活性研究

建立了香水百合(Lilium casa blanca)中总黄酮提取液体外抑菌活性的测定方法。以70%乙醇水溶液提取香水百合中的总黄酮,以芦丁为标准品,利用分光光度法测定其总黄酮含量。以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌为供试菌,采用滤纸片法和最低抑菌浓度法(MIC)测定了提取液的体外抑菌活性。结果表明,香水百合中总黄酮含量为137 mg/g(13.7%);总黄酮提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌圈平均直径为13.25 mm,对大肠埃希氏菌的抑菌圈平均直径为9.75 mm;最低抑菌浓度分别为0.587 5 mg/m L(金黄色葡萄球菌)和2.350 0 mg/m L(大肠埃希氏菌)。香水百合总黄酮提取液具有一定的抑菌活性,且对金黄色葡萄球菌的抑菌效果比大肠埃希氏菌好。     

金荞麦(-)表儿茶素类活性物质体外抑菌试验

为了探讨金荞麦(Fagopyrum dibotrys)提取液的抑菌效果,试验测得其乙醇提取液中(-)表儿茶素类活性物质含量达到10.019 mg/m L,占其块根干物质重的1.85%;牛津杯法表明金荞麦(-)表儿茶素类活性物质对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、大肠杆菌均有抑制作用,但对黑曲霉、灰绿青霉没有抑制作用;二倍稀释法表明(-)表儿茶素类活性物质对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母的MIC分别为1.252、2.505、5.010、5.010 mg/m L,对金黄色葡萄球菌的MBC为5.010 mg/m L。     

放线菌AF1代谢粗提物对无乳链球菌的抗菌活性

为了确定放线菌AF1代谢粗提物对无乳链球菌的抗菌效果,试验采用分光光度计和平板计数法确定菌株AF1代谢物对无乳链球菌的抗菌作用,并与几种常见无乳链球菌抗菌药物的效果进行比较。结果表明,放线菌AF1代谢粗提物对无乳链球菌有较强的抗菌作用,最小抑菌质量浓度(MIC)为38μg/mL,对无乳链球菌的杀菌作用表现出明显的时间剂量关系。扫描电镜结果表明作用后的无乳链球菌细胞壁严重破裂。静态法测得放线菌AF1代谢粗提物对斑马鱼的LC_(50)为27.44mg/L,拌饲喂食法测得LC_(50)为35.44mg/L,急性毒性表现为低毒。放线菌AF1代谢粗提物对无乳链球菌具有良好的抗菌活性,该研究可为无乳链球菌的防治提供新的线索。     

大叶桉乙醇提取物对茎瘤芥霜霉病的生物活性及其活性成分分析

本试验采冷浸法用乙醇对大叶桉叶抑菌活性成分进行提取,测定了提取物对茎瘤芥霜霉病菌孢子萌发抑制活性,利用气相色谱-质谱联用仪分析了其抑菌化学成分。结果表明,用20 mg/m L、10 mg/m L、5 mg/m L、2.5 mg/m L、1.25 mg/m L的大叶桉提取物对茎瘤芥霜霉病菌孢子萌发均有抑制活性,且抑制作用随着设置浓度的减小逐渐下降。通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)共检测到17种化合物,叶绿醇、1-(2-甲氧基-1-甲基乙氧基)异丙醇、米氏碱是大叶桉乙醇浸提物的主要化学成分,含量分别为38.31%、17.94%、10.26%。该研究明确了大叶桉叶乙醇浸提物的化学成分,为桉树资源综合开发利用奠定了基础。     

22种中药多糖对猪源金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性

采用超声波辅助法对22种中药多糖进行提取,用牛津杯法和试管二倍稀释法测定中药多糖的抗菌活性。结果表明,川牛膝、黄芩、茯苓、地榆、虎杖等5种中药多糖对猪源金黄色葡萄球菌有较强的抑菌效果,抑菌圈在20 mm以上,最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)在3.9~7.8 mg/m L;9个复方提取物的体外抑菌结果表明,以黄芩、地榆、大黄、虎杖等中药为主的复方对猪源金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌活性,其最大抑菌圈直径可达27.6 mm,MIC和MBC为3.9 mg/m L,表明它们在抗菌消炎方面具有较高的药用开发价值,在中药组方时可优先考虑。     

水产动物源气单胞菌喹诺酮类耐药与PMQR基因、QRDR突变相关性分析

为了解PMQR基因、QRDR突变与气单胞菌喹诺酮类耐药相关性,以116株水产源气单胞菌为研究对象,采用PCR法检测PMQR基因(qnrA、qnrB、qnrS、qepA、aac(6′)-Ib-cr)并分析QRDR靶基因gyrA、parC突变情况,用微量二倍稀释法测定萘啶酸(NAL)、环丙沙星(CIP)、恩诺沙星(ENR)的最小抑菌浓度(MIC)值。结果表明:116株气单胞菌中,有18株(15.52%)菌株携带PMQR基因,其中8株(6.90%)携带qnrS2基因,9株(7.76%)携带aac(6′)-Ib-cr基因,1株同时携带qnrS2、aac(6′)-Ib-cr基因,未检测到qnrA,qnrB和qepA基因;56株(48.28%)菌株发生QRDR靶位点突变,主要突变方式为GyrA:Ser~(83)Ile和GyrA:Ser~(83)Ile+ParC:Ser~(87)Ile;对NAL、CIP及ENR耐药率分别为47.41%、12.07%及11.21%;7株仅携带qnrS2基因菌株未发生QRDR突变,对喹诺酮类药物敏感性略下降,NAL、CIP及ENR的MIC值分别小于4.00、0.50和1.00mg/L;10株携带aac(6′)-Ib-cr基因的菌株均发生QRDR突变并对NAL表现耐药,MIC值均128.00mg/L,其中8株对CIP和ENR表现耐药,MIC值均≥4.00mg/L;发生gyrA单突变或gyrA和parC双突变菌株均对NAL表现耐药,MIC值均≥64.00mg/L,CIP和ENR的MIC值有的4.00mg/L,有的≥4.00mg/L。综上,QRDR靶基因突变可影响水产动物源气单胞菌对萘啶酸的药物敏感性,而气单胞菌对氟喹诺酮类药物耐药可能与PMQR和QRDR协同作用有关。     

14种中药及其复方的体外抗菌活性

选取黄连、黄芩、丹参、连翘等14味中药,分别采用平板打孔和试管二倍稀释法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等临床常见致病菌进行体外抗菌试验,并以抗菌活性较好的药物为主药组成复方,进行中药复方抗菌活性研究。结果表明,黄连、黄芩、丹参和连翘对大肠杆菌具有较好抑菌作用,最小抑菌质量浓度(MIC)分别为16.0、62.5、125.0和62.5g/L,最小杀菌质量浓度(MBC)分别为32.0、125.0、125.0和125.0g/L,黄连、黄芩、丹参、连翘、地锦草和红花对金黄色葡萄球菌具有较好抑菌作用,MIC分别为16.0、32.0、125.0、16.0、62.5和125.0g/L,MBC分别为16.0、32.0、250.0、16.0、125.0和250.0g/L,黄连、黄芩、丹参和连翘对链球菌具有较好抑菌作用,MIC分别为32.0、32.0、16.0和125.0g/L,MBC分别为32.0、64.0、32.0和125.0g/L。复方2和复方3对3种供试菌均具有显著抑菌效果,MIC和MBC为8.0~64.0g/L。说明,黄连、黄芩、丹参、连翘等单味药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌均具有较强抗菌作用,以其为主药组成的复方呈现协同抗菌作用。