多棘海盘车酶解多肽体外抗氧化活性研究

[目的]探讨多棘海盘车多肽的抗氧化活性。[方法]对多棘海盘车中水溶性蛋白进行提取,再采用酶解法,以胰蛋白酶和木瓜蛋白酶分别酶解水溶性蛋白,经离心、透析、冻干后分别得到多肽样品T-P、P-P。通过分析T-P、P-P对羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O_2~-·)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)的清除能力及在脂质体系中的抗氧化能力来表征其体外抗氧化活性。[结果]T-P、P-P对3种自由基均具有一定的清除作用,对脂质体系的氧化也有一定的抑制作用;P-P的抗氧化活性优于T-P;T-P、P-P的抗氧化活性均弱于水溶性蛋白。[结论]研究可为多棘海盘车多肽的深入研究及开发利用提供理论依据。     

大鲵糖肽组分的高效液相色谱分析及其抗氧化活性研究

利用高效液相色谱方法对大鲵糖肽进行分析,使用Sino Chrom C18反相柱和紫外可变波长检测器,并测定大鲵糖肽的羟基自由基清除能力。结果表明：大鲵糖肽组分的最佳液相色谱检测条件为：检测波长280 nm;流动相为V（乙腈）∶V（甲醇）∶V（0.1%三氟乙酸）=5∶5∶90;流速1.0 mL/min;进样量20μL。大鲵糖肽在5.78μg/mL浓度时,羟基自由基的清除率达60.19%,具有较好的抗氧化活性。     

乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性研究

[目的]探讨乌贼内脏酶解多肽的制备和抗氧化活性。[方法]以乌贼内脏为原料,用胰蛋白酶对其进行水解,采用单因素和正交试验方法研究酶解温度、酶解时间、加酶量和pH对水解度和抗氧化性的影响;通过检测羟自由基清除率、DPPH清除率和还原力评价不同分子量水解物多肽的抗氧化性。[结果]当酶解温度为35℃,时间为5 h,加酶量为5 000 U/g,pH为7.5时,水解度最大;当酶解温度为40℃、时间为7 h、加酶量为4 500 U/g,pH为8.0时,水解物对羟自由基清除率最大。超滤后不同分子量多肽对羟自由基的清除率为3～5 kD3 kD以下5～10 kD;DPPH清除率:3～5 kD3 kD以下5～10 kD;还原力:3 kD以下3～5 kD5～10 kD。[结论]乌贼内脏酶解多肽具有较好的抗氧化活性,不同分子量多肽的活性不同。     

海参肠高效酶解工艺研究

以水解度为主要指标,进行了海参肠复合水解蛋白酶的筛选,考察了底物质量分数、酶量、水解时间等单因素条件对水解度的影响,并在此基础上通过正交试验和方差分析得到海参肠的最佳酶解工艺。结果表明:双酶水解的水解度要明显高于单酶水解,酶活比对水解度也有影响。双酶复合水解海参肠的水解度受底物浓度、加酶量、水解时间等因素的影响,底物浓度和加酶量对水解度的影响显著,水解时间在选定的水平范围内影响不显著。采用中性蛋白酶与木瓜蛋白酶复配(酶活比为1.5∶1,总酶量为3 000 U/g原料),底物质量分数为8%,水解时间为2.5 h,在此条件下水解度最大,可达55.76%。     

青蛤酶解物抗氧化活性研究

以DPPH自由基清除活性为指标对青蛤酶解条件(即时间、温度、pH、酶添加量和固液比)进行正交试验设计,研究了青蛤蛋白酶解物的抗氧化活性。结果表明,酶解条件为温度40℃、pH 11.5、酶添加量3000U/g原料以及固液比为1∶2(w/w)时,酶解物的DPPH自由基的清除活性最高。对最佳水解条件下所获得的酶解物进行抗氧化活性测试,内容包括DPPH自由基清除活性、超氧阴离子清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力。结果显示,酶解物有较低超氧阴离子清除活性,但却具有较高DPPH自由基清除活性、羟基自由基清除活性和还原能力。     

不同茧色蚕丝酶解产物抗氧化活性差异研究

为了了解不同茧色蚕丝酶解产物的抗氧化活性之间的差异,选取白色茧、天然黄色茧和肉色茧为材料提取丝胶蛋白并进行酶解,以DPPH自由基清除率为指标,探讨其抗氧化活性差异.结果表明:天然黄茧的DPPH自由基清除率为44.96%,肉色茧为30.21%,白色茧为28.85%,因而天然黄色茧的抗氧化活性最高、肉色茧次之、白色茧的抗氧化活性最低.     

木瓜蛋白酶酶解核桃饼粕制备抗氧化多肽的研究

以核桃饼粕为原料,研究优化木瓜蛋白酶酶解核桃饼粕制备抗氧化活性多肽的工艺条件。通过研究酶解温度、酶解时间、底物浓度、酶添加量以及酶解pH值对酶解产物抗氧化活性的影响,正交优化酶解工艺参数,并将酶解物利用葡聚糖凝胶层析柱进行分离,测定其抗氧化活性。结果表明,当木瓜蛋白酶在酶解温度为60℃、酶解时间为3.5 h、底物浓度为2.5 g/100 mL、加酶量为6 500 U/g、pH值为6.5的酶解条件下,酶解物的抗氧化活性较好,酶解液对二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)和羟基自由基的清除率分别为52.24%和53.20%;酶解液经葡聚糖凝胶层析柱分离,酶解物分离多肽的分子量越大,抗氧化活性越低。     

氨基酸高效液相色谱分析

本文论述了用柱后衍生法及柱前衍生法测定氨基酸,其中着重论述了柱前衍生法,包括ＯＰＡ法、ＦＭＯＣ法、ＰＩＴｃ法、Ｄａｎｓｙｌ－Ｃｌ法、ＤＡＢＳＹＬ－ＣＬ法、ＮＢＤ－ＣＬ法以及其它几种衍生法,论述了上述几种方法的原理、特点、优缺点以及应用范围,并阐述了微粒柱     

氨基酸高效液相色谱分析

本文论述了用柱后衍生法及柱前衍生法测定氨基酸，其中着重论述了柱前衍生法，包括ＯＰＡ法、ＦＭＯＣ法、ＰＩＴｃ法、Ｄａｎｓｙｌ－Ｃｌ法、ＤＡＢＳＹＬ－ＣＬ法、ＮＢＤ－ＣＬ法以及其它几种衍生法，论述了上述几种方法的原理、特点、优缺点以及应用范围，并阐述了微粒柱、窄径柱与氨基酸分析的关系。     

紫贻贝酶解多肽体外抗肿瘤活性研究

确定了紫贻贝胰蛋白酶水解时的最佳条件,研究了紫贻贝酶解多肽的体外抗肿瘤活性。采用正交实验方法,以料液比、pH、加酶量、酶解温度和酶解时间为因素,以酶解液的氨基氮含量和肿瘤细胞增殖抑制率为指标进行L16（45）正交实验,MTT法检测酶解多肽对DU-145、PC-3、H1299和MGC80-3等肿瘤细胞的抑制活性;HE染色法观察酶解多肽对肿瘤细胞形态的影响;免疫组化法检测酶解多肽对细胞中Bcl-2表达的影响。结果表明：当料液比为1：4、pH为8.5、加酶量为1 000 U/g、温度为45℃、酶解时间为5 h时酶解多肽的水解度最大;当料液比为1：4、pH为8.0、加酶量为1 500 U/g、温度为40℃、酶解时间为2 h时酶解多肽的抗肿瘤活性最强,该肽可以下调肿瘤细胞中Bcl-2的表达。紫贻贝酶解多肽具有抗肿瘤活性,可能是通过诱导细胞凋亡来实现的。     

制备麦胚抗氧化多肽酶解条件优化的研究

为研究优化利用麦胚蛋白的新途径,以提高麦胚蛋白的附加值。采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶三种酶对麦胚蛋白进行水解,考察不同酶解产物、水解时间、水解温度和水解pH值条件下的水解度、蛋白溶解度和硫代巴比妥酸反应物值（TBARS）,确定制备麦胚抗氧化肽的较佳水解参数。研究结果表明：麦胚蛋白水解物具有抗氧化活性,而且制备...     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明:当时间为150 min、酶用量为6%、温度为45℃、pH为7.0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110 min、酶用量为3%、温度为65℃、pH为6.0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1 074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280 nm下的吸收峰值分别相吻合。     

鲶鱼骨酶解物的抗氧化活性研究

主要探讨鲶鱼骨酶解物的抗氧化活性,利用羟自由基（·OH）抑制实验、还原力的测定和油脂抗氧化实验判断酶解物的抗氧化活性。结果表明,酶解物对羟自由基有较强的清除能力,且随着浓度的增大,清除羟自由基的能力增强,半数抑制率（IC50）为0．374g／L;酶解物的还原能力随着其浓度的增加而增强,呈剂量效应关系;在猪油中添加0．0...     

牡蛎抗氧化活性肽的酶解工艺研究

以木瓜蛋白酶和中性蛋白酶为工具酶,利用正交试验法确定了木瓜蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备牡蛎抗氧化活性肽的最佳酶解工艺。结果表明：当时间为150min、酶用量为6％、温度为45℃、pH为7．0时,木瓜蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强;当时间为110min、酶用量为3％、温度为65℃、pH为6．0时,中性蛋白酶酶解液的抗氧化活性最强。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析分析的结果表明,木瓜蛋白酶酶解液中最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1191和826左右,中性蛋白酶酶解液最佳抗氧化活性组分的相对分子质量为1074和735左右,其抗氧化活性峰值与蛋白肽在280nm下的吸收峰值分别相吻合。     

大豆蛋白的小分子酶解产物抗氧化活性研究

以低温冷轧豆粕为原料、大豆分离蛋白为反应底物,进行酶水解反应,酶解产物经离子交换层析,凝胶排阻层析等方法分离,获得了平均分子量为800 D的小分子活性肽(SBP),用邻苯三酚自氧化法测定其抗氧化性。结果表明:此类小分子活性肽对邻苯三酚(PR)自氧化具有较好的抑制作用(1 mg/mL SBP的抑制率为33.3%)。与谷胱甘肽(GSH)进行比较,二者具有相似的抗氧化活性。     

中性蛋白酶酶解谷朊粉制备抗氧化多肽研究

以谷朊粉为原料,采用中性蛋白酶制备抗氧化多肽,并对其酶解工艺进行优化。结果表明,对中性蛋白酶酶解谷朊粉制备抗氧化多肽的影响顺序依次为酶解温度>加酶量>酶解时间;通过响应面分析优化酶解条件为底物浓度8%,加酶量2 800 U/g,温度52℃,时间280 min,此时酶解液羟自由基清除率达到65.3%,多肽含量为60.4 mg/mL。     

混酶水解法制备的鲢鱼皮多肽的抗氧化活性

以鲢鱼皮为原料,采用混酶水解法制备鲢鱼皮抗氧化肽,经超滤膜分离得到SP1(6 ku)、SP2(3～6 ku)、SP3(3 ku)3种组分,研究不同分子质量组分的体外抗氧化能力及SP1和SP3组分的氨基酸组成,并选出体外抗氧化能力最强的SP3组分,进行体内抗氧化活性评价。结果表明:3种组分的羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和还原能力从高到低的顺序均为SP3SP2SP1,而铜离子螯合率无显著差异;氨基酸分析结果显示SP3组分中疏水性氨基酸所占比例较高;体内抗氧化试验显示:相较于损伤模型组,灌服SP3组分的小鼠肝脏和脾脏指数明显增大,且血清和肝脏中的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的酶活力明显提高,丙二醛(MDA)含量明显降低。综上可知,SP3组分在体内外均具有较好的抗氧化活性。     

响应面法优化孔鳐软骨抗氧化多肽的酶解工艺

[目的]探讨酶解法制备孔鳐鱼软骨抗氧化肽的最佳工艺。[方法]以孔鳐软骨为试验材料,以DPPH自由基清除率为考察指标,采用双酶复合法酶解制备抗氧化多肽,通过响应面分析优化为最佳酶解工艺参数。[结果]采用胰蛋白酶与碱性蛋白酶复配(1∶3)组合制备酶解物的抗氧化性最好,酶解的最优工艺条件为:p H 8.5,加酶量6.25%,料液比2.1%,温度50.19℃,预测的DPPH自由基清除率为34.45%。[结论]通过响应面设计优化确定了孔鳐软骨抗氧化多肽的酶解工艺,为软骨鱼类高值化利用提供技术支持。     

沙蚕不同酶解产物抗氧化效果研究

海洋生物蛋白资源是海洋生物资源的重要组成部分,对其进行高值化加工利用是海洋生物技术研究的重要内容,酶解是提高海洋蛋白功能性的有效方式,但酶种类不同,其作用位点不同,可能对酶解产物的活性有一定影响。为了探究了沙蚕不同酶解产物的抗氧化性,采用6种蛋白酶（碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶、胰蛋白酶）酶解沙蚕,测定了不同酶解时间下的水解度、分子量分布、3种自由基（DPPH、O-2·、·OH）的清除率等反映抗氧化水平的指标。结果表明：胰蛋白酶小分子肽得率最高,为70.47%;胃蛋白酶次之,为68.12%。酶解液浓度为5 mg·mL-1时,胃蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解4 h时,DPPH清除率效果较好,分别为90.87%和90.52%。胃蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果最佳,为89.78%;木瓜蛋白酶酶解3 h时,O-2·清除率效果次之,为57.99%。碱性蛋白酶酶解4 h和胃蛋白酶酶解2 h时,·OH清除率效果较好,分别为85.07%和83.37%。胰蛋白酶和胃蛋白酶对提高酶解液水解度和小肽生成作用明显,胃蛋白酶的酶解产物对3种自由基清除率较好,更适用于制备沙蚕抗氧化肽。