神农架样品中粘细菌的分离与纯化

[目的]为进一步研究粘细菌中生物活性物质奠定基础。[方法]从神农架森林和野生动物自然保护区内7个区域中采集146份泥土、腐烂植物、树皮、地衣等样品,预处理后进行粘细菌分离和纯化,观察分离粘细菌的营养细胞、粘孢子、子实体形态和菌落形态等特征。[结果]共分离到167株粘细菌,分离的粘细菌有丰富的多样性。分离粘细菌的子实体形态多样,特征明显,可分为10类。在7个区域中粘细菌的出菌率差别不大,平均出菌率为78%。黄土、黑土、腐烂植物样品出菌率较高且种类丰富,而树皮、地衣样品出菌率较低。粘土中营养物质适中,出菌率处于平均水平,而从树叶样品中未分离到粘细菌。[结论]粘细菌在营养丰富的环境中生长较好。     

粘细菌BD105产生的抑瘤活性物质的分离制备

从河北省微生物多样性研究与重点实验室保存的具有抑瘤活性的粘细菌BD105菌株中分离纯化了抑制人宫颈癌细胞的活性物质。应用分析型高效液相色谱对BD105菌株的发酵产物甲醇粗提液进行梯度洗脱,确定混合发酵产物的最适分离条件,再运用制备型高效液相色谱对不同组分进行分离,大量发酵后制备得到组分I（浅黄色粉末状化合物）。应用MTT法对得到的活性组分进行体外抗癌细胞活性检测,发现组分I对人宫颈癌细胞最高抑制活性达91.785%,体内动物实验也显示出高效低毒的生物活性。     

新疆农田土壤中粘细菌的分离鉴定及其捕食特性

为探究新疆农田土壤中可培养粘细菌的多样性,从中筛选出具有高效捕食能力的粘细菌菌株。以新疆不同地区农田土壤为分离材料,采用兔粪诱导法和大肠杆菌诱导法从中分离纯化粘细菌,将形态鉴定与多位点序列分析相结合进行分类鉴定,确定其分类地位,并以4种植物病原细菌：丁香假单胞菌丁香致病变种(Pseudomonas syringae pv.syringae)、西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)、梨锈水病菌(Dickeya fangzhongda)、胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)为靶标菌,通过平板捕食法测定粘细菌的捕食特性。结果表明,从采集到的134份土样中共分离到126株菌,经纯化后获得46株粘细菌纯培养物。这些菌株分属于4个属,粘球菌属(Myxococcus)34株,原囊菌属(Archangium)7株,孢囊杆菌属(Cystobacter)3株,珊瑚球菌属(Corallococcus)2株。捕食活性分析显示,本研究获得的粘细菌菌株具有广谱的捕食活性,但同一株粘细菌对不同种病原菌的捕食能力...     

一株粘细菌H-1的分离鉴定及抗菌活性分析

粘细菌是一类具有复杂的多细胞行为的革兰氏阴性细菌.其代谢产物具有丰富,多样,新颖的生物活性,具有极大的研究价值.本文采用兔粪诱导的方法,对内蒙古贺兰山土壤中分离到的一株粘细菌(H-1)进行了子实体和菌落形态学的初步观察、生理生化和分子鉴定、抗细菌与抗真菌的活性分析.结果显示,该菌株具有与黄色粘球菌相似的形态及生理生化特征,且其16S rDNA序列与黄色粘球菌的16S rDNA序列具有100％的同源性,说明该菌株为黄色粘球菌.抗菌活性表明,H-1菌株具有明显的抗大肠杆菌活性,也具有一定的抗枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌活性.该菌株对酿酒酵母、马铃薯晚疫病菌和核盘菌等真菌也有一定的抑制作用,但对黑痣病菌无明显抗性.该工作的完成为内蒙古地区粘细菌的深入研究及新药研发奠定了基础.     

解磷细菌的分离纯化鉴定与生物学特性研究

[目的]为解磷菌解磷机理的研究奠定基础。[方法]采用有机磷和无机磷两种不同的培养基,对有机磷细菌和无机磷细菌进行分离,纯化和鉴定获取解磷菌株并对其生物学特性进行研究。[结果]从4种菌肥中分离并鉴定了4种解磷能力较强的菌株,并从菌肥来源上比较了4种菌肥的解磷能力,结果表明源自菌肥肥田生的菌株解磷能力最强,源自菌肥垦易的次之。这4株菌株在含磷酸钙盐比例较小的培养基中透明圈明显,而在比例较大的培养基中的解磷能力受到限制,不出现透明圈。从有机磷培养基中分离得到的菌株5号在无机磷培养基上也有明显的透明圈。[结论]有机磷细菌和无机磷细菌的解磷机理在某些方面是吻合的。     

1株粘细菌CMC0606的分离纯化及其抗菌活性研究

[目的]对成都西岭雪山土壤中粘细菌进行分离鉴定,了解其发酵产物粗提物的抗菌活性。[方法]以滤纸为唯一碳源,得到1株粘细菌CMC0606;通过观察其形态及16SrDNA克隆与测序进行菌种鉴定;向其发酵液中加入大孔吸附树脂XAD-16,收获发酵产物粗提物。[结果]菌株CMC0606被鉴定为珊瑚状珊瑚球菌Corallococcus coralloides CMC0606;其发酵产物粗提物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及辣椒疫霉具有抑制作用。[结论]菌株CMC0606具有抗细菌和抗真菌的活性,尤其对植物致病菌辣椒疫霉抑制作用显著,具有潜在的研究和开发价值。     

淡水样品中粘细菌的分离·纯化及其抗菌抗肿瘤活性研究

[目的]从黄龙溪水中分离与纯化黏细菌,并研究其抑菌活性和抗肿瘤活性。[方法]通过对细菌的形态特征和生理生化特性的分析来鉴定黏细菌,并通过抑菌圈法与MTY法分析黏细菌次级代谢物的生物学活性。[结果]首次从淡水中成功分离到黏细菌,且该菌属于黏球菌属。该菌的次级代谢物具有抑制痢疾杆菌、副伤寒、表皮葡萄球菌的作用,在一定范围内具有浓度依赖性。同时,粘细菌还具有较好的抗肿瘤活性。[结论]淡水样品同样可以分离出黏球菌,其抗菌活性和抗肿瘤活性在医药和农业上具有良好的应用前景。     

有关细菌素分离纯化方法的评价

具有抑菌活性的细菌素在食品保鲜和医疗保健方面有着广泛的应用价值.细菌素由于分子较小和不均质性导致难以分离纯化.本文概述了细菌素纯化的三阶段策略以及不同细菌素分离纯化的方法.     

硅酸盐细菌的分离、纯化、鉴定及生物学特性研究

对两种菌肥进行分离硅酸盐细菌,经纯化、鉴定,得到3种硅酸盐菌株。此3种细菌在阿须贝无氮培养基上及无机磷合成培养基上均能正常生长;在牛肉膏蛋白胨培养基上生长微弱;在硅酸盐细菌培养基上生长良好;具有较强的分解硅酸盐的能力,为革兰氏染色阴性(G-)杆菌,过氧化氢酶阳性,葡萄糖发酵产酸阳性,发酵肌醇产酸阳性,经鉴定均为芽孢杆菌属。     

光合细菌PSB B的快速分离纯化

用自制的简易光照培养箱从山西临汾汾河的表层污泥中分离得到一株光合细菌,命名为PSB-B。该菌株生长速率非常快,厌氧培养物为红色,革兰氏染色呈阴性。通过形态学特征、生理生化特性和活细胞吸收光谱等对其进行了初步鉴定,该菌株可能属红螺菌科红假单胞菌属。     

黏细菌的筛选及其抗菌活性的初步分析

为了从黏细菌中筛选生物活性物质,以兔粪、腐木为原料,采用选择培养基、加热、冷冻等方法分离到3株黏细菌;重点研究了1号菌,发现1号菌胞外物、胞内物均具有抗菌活性,且抗菌谱不同,其中胞外物对G+细菌有较强的抑菌作用,胞内物对部分G+细菌及G-细菌有抑菌作用,两者对真菌均无抑菌作用。将1号菌胞外物进行薄层层析和硅胶柱层析,得到了抑制放线菌生长的单一组分。     

磷脂酶的分离纯化技术研究进展

为了充分认识磷脂酶的酶学性质及应用技术,笔者对磷脂酶A1/A2、C、D的分离纯化方法及其发展前景进行了综合论述。     

贻贝抗菌肽的分离纯化

[目的]从贻贝中提取具有抗菌作用的多肽。[方法]以紫贻贝为原料,采用0.5%的乙酸直接提取方式提取抗菌肽,再经过Sephacryl S-100聚丙烯酰胺凝胶色谱进行纯化,收集各馏分并用滤纸片扩散法测定其抗菌活性及对各种细菌的最低抑菌浓度,使用SDS-PAGE测定抗菌肽的分子质量,测定其在100℃条件下不同处理时间和不同pH条件下抗菌活性的变化。[结果]使用0.5%的乙酸作为提取液粗提取抗菌肽具有较高的提取效率,使用Sephacryl S-100纯化抗菌肽,可将抗菌肽纯化为单一物质。分离纯化出的贻贝抗菌肽具有较强的抗菌性,分子质量为5 908,且具有耐高温、耐酸碱的性质。[结论]该研究为抗菌肽的大规模生产奠定了基础。     

辣根过氧化物酶的分离制备和纯化

从辣根块茎分离和纯化了辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）,纯化程度包括匀浆、加热、硫酸铵分级沉淀、丙酮分级沉淀和ＣＭ－２３阴离子交换层析。纯化的ＨＲＰ的Ｋ４值为２．５×１０＾５,ＲＺ值值３．００,酶的比活４０６Ｕ／ｍｇ蛋白。它的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示一条带,酶亚基分子量为４０ＫＤ,等电聚焦电泳呈现三条带,酶不舔生染色呈现多条带,表明有同工酶存在。对酶的分离纯化作了一些改进,如加氨水保持ＰＨ值,加入５ｍｍｏｌ／     

山羊表皮干细胞分离纯化的研究

表皮干细胞(epidermalstemcells,ESCs)干细胞特性的维持是干细胞内在属性和微环境共同作用的结果,体外长期培养ESC的关键是维稳定的微环境。实验将组织块脱出的细胞经分次消化和型胶原快速贴附分离出表皮干细胞,在含20%条件培养基的无血清培养液进行培养。原代细胞表现K19阳性,并且能形成PGC集落样细胞团。从表皮和真皮组织中均可得到上皮样细胞,经纯化后均表现出明显的表皮干细胞特性:呈片状生长,铺路石样形态。将两类细胞分别传至5代和8代,后代细胞β1整合素染色呈阳性。对5代和8代细胞分别进行克隆分析实验,其克隆形成率分别为18.5%和8.5%。实验证明组织块法能够得到较好的维持ESC的微环境,所分离的ESC具有干细胞特性并能稳定传代。     

黄酮类化合物的提取·分离纯化和含量测定方法的研究进展

综述了黄酮类化合物提取方法(溶剂法、微波法、酶解法、超临界流体萃取法、双水相萃取法、超声波提取法),分离纯化方法(柱层析法、薄层层析法、高效液相色谱法、纸层析法、超临界流体分离法、大孔树脂吸附法、液滴逆流层析法、梯度pH值萃取法、金属试剂络合沉淀法、膜分离法、活性炭吸附法),黄酮含量测定方法(分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法、超临界流体色谱法、薄层扫描法),为黄酮类化合物研究工作者提供参考。     

樟芝多糖的分离纯化和抗氧化活性

【研究目的】研究樟芝多糖分离纯化的方法以及其体外抗氧化活性,【研究方法】水浸提樟芝多糖,Sevag法除蛋白,利用sephadexG-200凝胶柱层析进行分离纯化,红外光谱、高效液相色谱测定结构和分子量,并进行樟芝多糖的体外抗氧化试验。【结果】樟芝菌丝体多糖ACP1和樟芝发酵液多糖ACP2多糖含量分别为31.76%和38.09%,提取率分别为1.59%和4.89%,特性粘度为[η]=8.382和[η]=1.999。红外光谱测定表明,ACP1、ACP2具有多糖的特征吸收,并且其糖环为吡喃环。ACP1、ACP2经高效液相色谱GPC柱分离得到三个峰,计算得各组分的数均分子量和重均分子量。利用sephadexG-200凝胶柱层析ACP1和ACP2后各得到2个洗脱主峰ACP1-1和ACP2-1。对ACP1-1和ACP2-1进行纯度鉴定,结果表明两者为均一多糖,超氧自由基的清除率分别达到61.6%和54.7%,【结论】樟芝多糖具有较强的抗氧化能力。