茄类内生菌的分离及拮抗细菌的筛选

[目的]分离番茄、辣椒和茄子3种茄科果蔬的内生菌,并对青枯病拮抗细菌进行筛选与鉴定。[方法]采用研磨液培养法,利用选择培养基对3种植株进行内生菌分离,并采用平板划线法纯化,及菌块对峙培养法对已纯化的内生菌进行筛选。根据分离菌的培养特性及菌体形态特征、革兰氏染色及生化反应等,对筛选出来的内生拮抗细菌进行鉴定归属。[结果]3种植株内生菌分离,共得到53株内生细菌、53株内生真菌、44株内生放线菌。筛选出14株青枯病菌有强拮抗性的内生细菌,分属为芽孢杆菌属、埃希氏菌属、克雷伯氏菌属、土壤单胞菌属、欧文氏菌属、短小杆菌属,其中芽孢杆菌为优势种群,而且芽孢杆菌属菌株对青枯病菌的拮抗作用最强。[结论]提供了探索生物防治茄科植物青枯病的有效途径。     

神农架样品中粘细菌的分离与纯化

[目的]为进一步研究粘细菌中生物活性物质奠定基础。[方法]从神农架森林和野生动物自然保护区内7个区域中采集146份泥土、腐烂植物、树皮、地衣等样品,预处理后进行粘细菌分离和纯化,观察分离粘细菌的营养细胞、粘孢子、子实体形态和菌落形态等特征。[结果]共分离到167株粘细菌,分离的粘细菌有丰富的多样性。分离粘细菌的子实体形态多样,特征明显,可分为10类。在7个区域中粘细菌的出菌率差别不大,平均出菌率为78%。黄土、黑土、腐烂植物样品出菌率较高且种类丰富,而树皮、地衣样品出菌率较低。粘土中营养物质适中,出菌率处于平均水平,而从树叶样品中未分离到粘细菌。[结论]粘细菌在营养丰富的环境中生长较好。     

新疆农田土壤中粘细菌的分离鉴定及其捕食特性

为探究新疆农田土壤中可培养粘细菌的多样性,从中筛选出具有高效捕食能力的粘细菌菌株。以新疆不同地区农田土壤为分离材料,采用兔粪诱导法和大肠杆菌诱导法从中分离纯化粘细菌,将形态鉴定与多位点序列分析相结合进行分类鉴定,确定其分类地位,并以4种植物病原细菌：丁香假单胞菌丁香致病变种(Pseudomonas syringae pv.syringae)、西瓜细菌性果斑病菌(Acidovorax citrulli)、梨锈水病菌(Dickeya fangzhongda)、胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum)为靶标菌,通过平板捕食法测定粘细菌的捕食特性。结果表明,从采集到的134份土样中共分离到126株菌,经纯化后获得46株粘细菌纯培养物。这些菌株分属于4个属,粘球菌属(Myxococcus)34株,原囊菌属(Archangium)7株,孢囊杆菌属(Cystobacter)3株,珊瑚球菌属(Corallococcus)2株。捕食活性分析显示,本研究获得的粘细菌菌株具有广谱的捕食活性,但同一株粘细菌对不同种病原菌的捕食能力...     

淡水样品中粘细菌的分离·纯化及其抗菌抗肿瘤活性研究

[目的]从黄龙溪水中分离与纯化黏细菌,并研究其抑菌活性和抗肿瘤活性。[方法]通过对细菌的形态特征和生理生化特性的分析来鉴定黏细菌,并通过抑菌圈法与MTY法分析黏细菌次级代谢物的生物学活性。[结果]首次从淡水中成功分离到黏细菌,且该菌属于黏球菌属。该菌的次级代谢物具有抑制痢疾杆菌、副伤寒、表皮葡萄球菌的作用,在一定范围内具有浓度依赖性。同时,粘细菌还具有较好的抗肿瘤活性。[结论]淡水样品同样可以分离出黏球菌,其抗菌活性和抗肿瘤活性在医药和农业上具有良好的应用前景。     

1株紫色非硫光合细菌的分离鉴定

[目的]为紫色非硫光合细菌的应用研究打下基础。[方法]从杭州养鱼塘水样和底泥样品中分离纯化到1株紫色非硫光合细菌菌株,通过对其细胞形态观察、活细胞色素吸收光谱测定及生理生化特征研究等进行分类鉴定。[结果]HZ-1菌株可在光照厌氧或黑暗好氧条件下生长;菌体呈短杆状,稍弯,为革兰氏阴性菌株;含有细菌叶绿素a和类胡萝卜素;接触酶试验、吲哚试验、硝酸盐还原试验阳性,硫化氢生成试验、明胶液化试验阴性。[结论]通过对分离纯化的紫色非硫光合细菌菌株的分类鉴定,判断菌株HZ-1为沼泽红假单胞菌。     

成都地区黏细菌物种资源的分离和区域分布

利用兔粪诱导法、VY/4多菌灵琼脂培养基诱导法和无机盐琼脂培养基诱导法从来自成都各区县的水样、土样、兔粪、羊粪、朽木、风化岩石共35个样品中分离纯化黏细菌,经过生理、生化和形态学鉴定,共得到42株黏细菌。这42株黏细菌分属于黏球黏细菌属（Myxococcus）、粒状黏细菌属（Chondromyces）、囊球黏细菌属（Angiococcus）、原囊黏细菌属（Archangium）、蜂窝黏细菌属（Melittangium）、堆囊黏细菌属（Sorangium）和标桩黏细菌属（Stigmatella）7个属。按样品的采集地域、样品种类和生态环境进行了种群分布及多样性的统计分析,发现成都地区黏细菌的数量和种属均较多,特别是黄龙溪古镇河水一个样品就得到5个属的7株黏细菌。同时也发现旅游景区样品中黏细菌出菌率最高,其次是森林样品,草地样品和果树林样品出菌率最低。并且旅游景区黏细菌的得菌率和种属多样性明显高于其他环境。     

低温生物膜中耐冷菌的分离与鉴定

[目的]对组成低温生物膜的耐冷菌进行分离纯化。[方法]从低温生物膜上分离纯化耐冷细菌,对其进行生理生化鉴定,并测定其在4℃和30℃时的生长曲线。[结果]组成低温生物膜的微生物有很多种,其中8种分别属于丛毛单胞菌属、黄杆菌属、节杆菌属、芽孢杆菌属、微球菌属、假单胞杆菌属、无色菌属和弧菌属。这8株菌中S3生长速率最高,S2生长速率最低,其他6株菌的生长速率相差不大．它们在30℃时的生长速率均高于在4℃时,且在24h时均进入对数生长期。[结论]该研究对于解决低温污水处理问题具有一定的意义。     

西瓜枯萎病土壤拮抗菌的初步筛选

[目的]从土壤中筛选对西瓜枯萎病具有稳定拮抗作用的细菌,以反施于土壤进行枯萎病生物防治。[方法]采用稀释分离平板法分离土样中的放线菌、荧光菌和芽孢杆菌,纯化菌落后用改良对峙培养法作抗性筛选,并对拮抗效果最佳的菌株进行鉴定归属。[结果]从39份土样中共筛选出29株对西瓜枯萎病具有稳定拮抗作用的细菌,其中荧光菌15株,芽孢菌5株,放线菌9株。从中选出拮抗作用最强的3个拮抗菌FM2F、M3F、M4进行初步鉴定。[结论]菌株的培养特征和形态学观察及生理生化测试结果表明,FM2为枯草芽孢杆菌,FM3F、M4为微球菌属。     

普洱茶渥堆发酵过程中细菌种群的分离与分子鉴定

[目的]对普洱茶渥堆发酵过程中的细菌进行分离、纯化和鉴定。[方法]采用传统培养方法与分子生物学方法相结合,对普洱茶渥堆发酵各阶段的细菌进行了分离、纯化及鉴定。[结果]试验表明,普洱茶渥堆发酵各阶段的细菌包括了芽孢杆菌、克雷伯氏菌、鞘氨醇杆菌、短杆菌、红球菌、假单胞菌、鲍曼不动杆菌7个种类,其中芽孢杆菌所占比例远大于其他细菌,处于绝对优势地位。[结论]研究可为研制普洱茶高效发酵剂、缩短发酵时间、改善普洱茶品质,以及实现普洱茶清洁化和产业化生产提供一定的理论依据。     

斑点叉尾鮰鲇鱼爱德华氏菌的分离与鉴定

[目的]研究爱德华氏菌的鉴定方法,为爱德华菌病的快速诊断及防治提供参考依据。[方法]选取患病斑点叉尾鮰的表皮、肝脏和肾脏组织进行细菌分离,对选择性培养基上生长出来的疑似菌株进行革兰氏染色、氧化酶试验、葡萄糖发酵及生化特性试验鉴定菌株。[结果]共分离得到3株形态不同的肠杆科细菌,经过鉴定其中1株为鲇鱼爱德华氏菌。[结论]患病斑点叉尾鮰感染了爱德华氏菌。     

抗真菌活性粘细菌的筛选及鉴定

[目的]筛选出具有抗真菌活性的粘细菌并对其进行种类鉴定。[方法]从全国23个省、自治区的200个腐殖质土样中分离纯化出237株粘细菌;将菌株在4种不同培养基中发酵培养,发酵产物通过甲醇提取得到代谢产物;以白色念珠菌为模型对次级代谢产物进行高通量筛选。[结果]复筛后得到1株编号为ZJ2的粘细菌,其次级代谢产物具有抗白色念珠菌的活性,对该菌株进行16SrDNA克隆并测序,结果表明ZJ2为橙色粘球菌（Myxococcus fulvus）。[结论]菌株ZJ2的次级代谢产物中,存在对白色念珠菌生长有显著抑制作用的生物活性物质,具有潜在的研究和药用价值。     

牛粪堆肥高温发酵微生物分离及堆肥效果

[目的]筛选出促进牛粪高效堆肥的高温微生物。[方法]采用平板稀释法,从新鲜牛粪中分离并纯化出9种出现频率高、繁殖速度快的优势嗜热菌（GX1、GX2、GX3、GX4、GX6、GX10、GF1、GF5、GZ1）,同时引入黄孢原毛平革菌。将10种菌株扩大繁殖以后,进行单菌种牛粪堆肥试验。通过观测堆肥过程温度变化,测定堆肥结束后各堆料的pH值、种子发芽指数以及纤维素、半纤维素含量,对各嗜热菌的堆肥效果进行分析。[结果]添加菌剂可以快速提高堆肥温度,促进牛粪发酵腐熟,缩短堆制时间;添加菌剂后堆料的纤维素和半纤维素的降解率明显提高。[结论]黄孢原毛平革菌以及北京农学院有机肥课题组自选菌株GX1、GX2、GX4更能提高牛粪堆肥效果。     

高温纤维素分解菌的分离、筛选及鉴定

［目的］为研制堆肥高温菌剂和生产高温纤维素酶奠定基础。［方法］从牛粪自然堆肥中分离出高温纤维素分解纤维素菌,并测定其外切纤维素酶活（C1酶）、羧甲基纤维素酶活（CMCase）、FPA酶活（FPase）。［结果］从5种高温纤维素分解菌中,筛选出分解纤维素较强的高温细菌HB4和高温霉菌HM。［结论］高温细菌HB4的C1酶、CMCase、最高,分别为0.016 1 IU/ml、0.923 8 IU/ml;高温霉菌HM的FPA酶活最高,为1.053 5 IU/ml。经初步鉴定HB4为热酸菌属（Acidothermus）,HM为链孢霉菌属（Neurospora）。     

新疆部分地区生鲜肉、奶中李氏杆菌的调查分离鉴定

[目的]调查新疆部分地区生鲜肉、奶李氏杆菌的带菌情况及掌握其在畜产品中的生态学分布.[方法]从石河子、奎屯、额敏等地区采集牛、羊、猪、禽等生鲜肉和鲜牛奶检样共680份,参考国标两步增菌法分离李氏杆菌,采用细菌生化鉴定和PCR法鉴定分离株,并通过小鼠感染试验测定致病力.[结果]从680份样品中分离获得8株李氏杆菌,带菌率为1.14;,4株为单核细胞李氏杆菌(LM)带菌率为0 6;,4株LM可导致小鼠发病死亡.[结论]新疆地区新鲜肉奶中李氏杆菌的带菌率较低,但食源性LM分离株都有致病性.调查结果为该地区动物性食品安全评估及李氏杆菌的监测提供参考和科学数据.     

微生物复合接种剂对牛粪好氧堆肥的影响

[目的]研究微生物接种剂对牛粪好氧堆肥的影响,为有效处理鲜牛粪等高纤维废弃物提供理论指导。[方法]以牛粪为堆肥原料进行好氧堆肥试验。试验设3个处理：不添加接种菌剂（C）、添加接种量为0.5 g/kg的复合微生物菌剂（T1）、添加接种量为1 g/kg的复合微生物菌剂（T2）。对堆肥过程中的温度、含水率、pH和C/N比4个指标进行跟踪测定。[结果]与对照相比,添加微生物菌剂的2个堆体升温较快且高温（〉50℃）维持时间较久,含水量较低,pH较高,全氮含量较高,C/N比均降至20以下。[结论]添加微生物菌剂可有效加快堆肥进程,缩短堆肥周期。     

紫花苜蓿根腐性病害生防放线菌的分离与筛选

[目的]分离筛选出对苜蓿根腐病病原具有高拮抗作用的生防放线菌。[方法]利用梯度稀释分离法从来自内蒙古赤峰地区的10个土样中分离得到91株放线菌。以3株苜蓿根腐病菌为靶标菌,采用平皿对峙培养法,对分得菌株进行皿内拮抗作用测定。[结果]获得5株对供试苜蓿根腐病菌有较强抑制作用的拮抗菌株,编号为1-3-6、4-4-2、6-2-25、6-2-27、7-2-13,分别来自1号、4号、6号及7号土样,占分离菌株的5.50%。[结论]该研究可为苜蓿根腐病生物防治奠定一定基础。     

北海山口·大冠沙红树林放线菌的筛选与鉴定

[目的]了解广西北海山口、大冠沙红树林海泥中的放线菌资源。[方法]采用海水配制高氏培养基,分离来自广西北海红树林海洋淤泥中的放线菌样品,从中筛选、分离、提取10株典型放线菌菌株总DNA,用放线菌通用引物对16SrDNA进行PCR扩增,对扩增结果进行DNA序列测定。[结果]10株典型放线菌菌株中,8株（80%）是链霉菌属,为常见放线菌;2株（20%）是拟诺卡氏菌属,为稀有放线菌。[结论]广西北海红树林海洋淤泥蕴含着种类丰富的放线菌。