1株番鸭源新城疫病毒的分离鉴定及其部分生物学特性分析

从广东地区某养鸭场的患病雏番鸭群中分离到1株病毒,该病毒能凝集鸡红细胞,且这种特性可被ND标准阳性血清所抑制,但不能被减蛋综合征-76阳性血清以及禽流感H5、H7和H9阳性血清抑制。运用特异引物进行PCR扩增,能扩增出大约520bp长度的目的片段。毒力测定结果表明,MDT、ICPI、IVPI分别为56.0h、1.64、2.29,符合新城疫病毒强毒株的毒力判断标准。     

不同抗体水平产蛋鸡群新城疫病毒的分离与鉴定

利用新城疫HI抗体监测技术,对宿豫区大兴镇部分鸡场进行抗体检测及跟踪调查,从跟踪调查的不同抗体水平的鸡群中无菌采集气管及泄殖腔棉拭子样品,接种非免疫胚,进行病毒分离与鉴定,分离到的病毒能凝集鸡的红细胞,而且这种凝集可以被特异性抗血清所抑制,证实分离到的毒株为新城疫毒株,并通过血凝抑制试验(HI)测定血凝效价,分析出HI抗体水平在7 log2—11 log2间血凝滴度低,病毒检出率低;而HI抗体水平在0 log2—7 log2间血凝滴度高,病毒检出率高。此外,试验结果还表明病毒从气管中的分离率较泄殖腔高。     

肉鸡新城疫zMlo株苗免疫效果好

<正>近几年,鸡新城疫发生不受日龄限制,发病日龄提前,早的10日龄左右就发病,并且死亡率高,常常在免疫后就发病,或在20～35日龄发病,这是目前肉鸡养殖面临的重要问题。要做好肉鸡新城疫的防控,重点还是应搞好新城疫疫苗的免疫接种。选择安全性高,免疫原性好的疫苗是关键。资深兽医推荐zMlo株疫苗。zMlo株疫苗一是能提高抗体水平,增强抵抗力;二是zMlo株属于肠道型新城疫病毒,可在肠道和呼吸道两个靶位复制、定     

新城疫病毒(NDV)的分子生物学特征及基因工程疫苗的研究进展

<正>新城疫病毒(Newcastle DiseaseVirus,NDV)属于副粘病毒科(Paramyx-oviridae),副粘病毒亚科(Paramyxoviri-nae),腮腺炎病毒属(Rubulavirus),禽副粘病毒Ⅰ型(Avian ParamyxovirusⅠ,APMV-Ⅰ)。成熟的病毒粒子直径约为100~250nm,有囊膜,呈现多形性,囊膜上有纤突,长约8nm,病毒囊膜上的纤突为2种糖蛋白,一种为HN蛋白(Hemagglutinin Neuraminidase),即血凝素-神经氨酸酶蛋白;另一种为F蛋白(Fusion),也称融合蛋白。病毒粒子的内部为一核心,也就是病毒粒     

基因Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒病毒样颗粒的构建与鉴定

为研究II型草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)病毒样颗粒(viruses-like particles, VLPs)疫苗,本试验利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统(baculovirus expression vector system, BEVS)将编码VP35蛋白的GCRV-S11基因克隆入杆状病毒载体pFastBacHTA^TM,然后将鉴定正确的重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,筛选得到重组穿梭质粒Bacmid-VP35。将穿梭质粒Bacmid-VP35以及实验室前期构建的重组穿梭质粒Bacmid-VP3、Bacmid-VP4分别转染sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒pFHB-VP35、pFHB-VP3以及pFHB-VP4。利用Bac-PAK快速滴定试剂盒测定重组杆状病毒滴度,并通过间接免疫荧光(IFA)和Western Blot鉴定重组蛋白的表达情况。结果显示,本试验获得了较高滴度的重组杆状病毒,并且重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中正确表达。将成功表达的重组杆状病毒pFHB-VP35、pFHB-VP3以及pFHB-VP4共感染sf9细胞组装GCRV-VLPs,通过透射电镜(EM)进行检测。结果显示,GCRV的3个蛋白在sf9昆虫细胞中可以完成自我组装,形成与天然病毒结构形似的VLPs,直径大小为65-72nm。本试验结果为进一步研制安全、高效的GCRV-VLPs疫苗奠定基础。     

当前新城疫的流行特点及防治建议

<正>新城疫(ND)是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一种急性、高度致死性的禽类传染病,是目前严重危害我国养禽业、必须通过疫苗进行防控的重大动物疫病之一。目前NDV只有一种血清型,但研究表明NDV不同毒株之间的抗原性差异正在逐渐加大,再加上生产中新城疫疫苗的使用频繁且混乱,导致近些年     

新城疫病毒分离株融合蛋白基因的遗传变异分析

根据GenBank中报道的NDV融合蛋白基因(F)序列,设计了一对特异性引物,用该引物对所分离的LN-SN株进行了RT-PCR扩增;将扩增得到的PCR片段纯化后与pGEM-T连接得到重组质粒pGEM-F,用于核苷酸序列测定。结果该基因ORF长1662bp,编码553个氨基酸;将LN-SN毒株与GenBank中已报道的NDV毒株进行比较,F基因核苷酸序列的同源性在83.1%～98.9%之间,推导的F蛋白氨基酸序列的同源性在88.1%～99.5%之间。     

肉种鸽新城疫与蛔虫病混合感染的诊治

<正>鸽子的新城疫病是一种高度接触性传染病,是危害养殖业也是养鸽业的重大疫病之一,死亡率可高达95%以上。而鸽的蛔虫病是鸽子常见的一种内寄生虫病,临床上以鸽子明显消瘦,消化功能障碍,生长发育受阻,长羽不良等为主要特征。各种日龄的鸽都可感染发病,尤其是幼鸽易受感染,病情也较成鸽严重。二者都可给养鸽     

新城疫检测方法的研究进展

<正>新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle diseasevirus,NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性传染病。该病发病急、致死率高,对养禽业的发展构成严重的威胁,因此被国际兽医局定为A类烈性传染病。新城疫的暴发流行给养禽业带来巨大的经济损失。目前,由于疫苗的使     

草鱼呼肠孤病毒HZ08株的分离与鉴定

从浙江省湖州地区采集发病草鱼(Ctenopharyngodon idellus)样本中,取症状明显病料的肝、脾、肾组织,经过滤除菌处理后接种草鱼肾脏细胞(CIK).盲传8代,CIK细胞未出现明显细胞病变,但感染细胞固定后经电镜观察发现,细胞质内有大量病毒聚集,病毒无囊膜,近球形,直径约70 nm,形态与已报道的草鱼呼肠孤病毒(Grass Carp Reovirus,GCRV)相似.将病毒提纯后分别经DNA酶、RNA酶和绿豆核酸酶消化,证实为双链RNA(dsRNA)病毒.十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)结果显示,病毒基因组由11个dsRNA组成,呈现水生呼肠孤病毒基因组典型特征.采用RNA水平3味端加接头的方法获得了S6节段的全长序列,测序结果表明,S6由2 030个核苷酸组成,推测其编码一个分子量约为68.4 kD的蛋白.聚类分析结果显示,该病毒为水生呼肠孤病毒,但在氨基酸水平上与草鱼呼肠孤病毒代表株873株的差异较大,同源性为33%,提示该病毒为一株新型的草鱼呼肠孤病毒.本研究旨在为草鱼出血病防治方法的深入研究奠定基础.     

Study on the distribution and expression of a DNA vaccine against lymphocystis disease virus in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus)

The distribution and expression of lymphocystis disease virus (LCDV) vaccine, on the basis of DNA vaccine (pEGFP-N2-LCDV0.6 kb) construction, were analyzed in tissues of the Japanese flounder by PCR, RT-PCR and fluorescent microscopy. Results from PCR studies indicated that the vaccine-containing plasmids were distributed in injected muscle, muscle located opposite the injection site, hind intestine, gill, spleen, head kidney, liver and gonad 7 days after vaccination. However, these vaccine-containing plasmids disappeared by 90 days following vaccination. Fluorescent microscopy observations revealed that green fluorescence appeared in muscle, muscle located at the opposite side of the injection site, hind intestine, gill, spleen, head kidney and liver of fish 36 h after vaccination, and that green fluorescence did not appear in control tissue. The green fluorescence became weaker at 60 days post-vaccination, however, it remained detectable in the spleen 90 days post-vaccination. Results from RT-PCR studies indicated that the Mcp gene is expressed in all tissues of vaccinated fish 7-20 days after vaccination. These results demonstrate that the DNA vaccine is distributed and expressed in different tissues of vaccinated fish, and therefore, may have provided an antigen producing specific immune response.