美国进口大豆中菜豆荚斑驳病毒和玉米褪绿斑驳病毒的检疫鉴定

菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)和玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国进境植物检疫性有害生物。2018年6月秦皇岛海关通过反转录PCR(RT-PCR)和双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)方法,从一批美国进口大豆以及杂质中检出BPMV和MCMV;同时利用实时荧光PCR(Real time RT-PCR)和序列比对分析方法进行验证。这是河北口岸首次在进境大豆中截获BPMV和MCMV。     

玉米褪绿斑驳病毒实时荧光RT-PCR检测方法研究

玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国对外公布的检疫性有害生物。本研究根据该病毒外壳蛋白基因的保守序列,设计得到特异性引物及Taqman荧光探针,建立了MCMV的实时荧光RT-PCR方法,并对其灵敏度与特异性进行了研究。该方法针对2个不同来源的毒株均能得到典型扩增曲线,而没有从小麦线条花叶病毒、玉米粗缩病毒和玉米矮花叶病毒的RNA得到扩增曲线,表明引物与荧光探针具有良好的特异性。针对玉米褪绿斑驳病毒RNA不同稀释度样品,实时荧光RT-PCR检测低限达到10-5稀释度,检测灵敏度要比普通RT-PCR高出100倍。因此,本研究建立的MCMV实时荧光方法具有特异性强、灵敏度高和快速有效的优点。     

黑龙江局从德国邮寄进境玉米种子中首次截获检疫性有害生物——玉米褪绿斑驳病毒

2011年2月28日,黑龙江出入境检验检疫局哈尔滨邮局办事处截获了一批由德国邮寄进境的重量达23 kg的玉米种子,后经该局技术中心检验鉴定为携带玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus)。玉     

玉米褪绿斑驳病毒入侵辽宁省风险简析

介绍了玉米褪绿斑驳病毒的地理分布、寄主、为害情况及传播途径,并结合上述特点对该病毒入侵辽宁省的潜在风险做了简要分析。     

玉米褪绿斑驳病毒3种PCR检测方法的建立与比较

 以带有玉米褪绿斑驳病毒(MCMV)的玉米叶片为材料,研究建立了MCMV 的普通RT-PCR、TaqMan 实时荧光RT-PCR 和SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR 检测方法,并比较了3种方法的灵敏度。结果表明:TaqMan 实时荧光RT-PCR 的检测灵敏度最高,最低检出量可达1.61 fg,SYBR Green Ⅰ实时荧光RT-PCR 略逊之,普通RT-PCR 的检测灵敏度则相对较低,与前两者相差10~100倍。     

福建口岸首次截获玉米褪绿斑驳病毒和玉米矮花叶病毒

2011年4月,福建出入境检验检疫局技术中心植物检疫实验室采用DAS-ELISA、RT-PCR及序列测定验证的方法,从一批阿根廷进境玉米种子上同时检出玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)和玉米矮花叶病毒(Maize dwarfmosaic virus,MDMV)。这是福建口岸首次检出上述2种病毒。     

基于Maxent模型的玉米褪绿斑驳病毒潜在地理分布研究

玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus,MCMV)是我国进境植物检疫性有害生物,与马铃薯Y病毒科的部分病毒复合侵染导致玉米致死性坏死病。利用Maxent模型,分析预测了MCMV在当前和未来气候条件下的潜在地理分布区。结果显示,MCMV在全球的适生区主要集中在大洋洲东部局部地区,亚洲、非洲、北美洲的南部地区,南美洲的西北和东北部地区;在我国的适生区范围主要集中在中部和南部地区。根据预测结果,提出对MCMV的防控措施建议。     

玉米茉莉酸信号途径参与抵抗玉米褪绿斑驳病毒的侵染

为研究茉莉酸（jasmonic acid, JA）信号途径在玉米响应玉米褪绿斑驳病毒（maize chloroticmottle virus, MCMV）侵染中的作用,利用外源喷施茉莉酸甲酯 （methyl jasmonate, MeJA）方法,采用病毒诱导的基因沉默技术以及玉米原生质体过表达探究JA信号途径是否参与玉米抗MCMV侵染。结果表明,相比于对照, MCMV在外源喷施MeJA的玉米植株上引起的褪绿和花叶症状明显减轻, MCMV基因组RNA积累水平下降了69%,外壳蛋白 （coat protein, CP）积累水平下降了43%,表明MeJA处理提升了玉米植株对MCMV的抗性。在沉默JA信号途径抑制基因 ZmJAZ5的玉米植株上,相比于对照植株, MCMV引起的褪绿及花叶症状也明显减轻, MCMV的基因组RNA积累水平下降了71%, CP积累水平下降了56%。在玉米原生质体中过表达ZmJAZ5后,与对照相比, MCMV基因组RNA积累水平上升了1.58倍, CP积累水平上升了1.34倍。表明JA信号途径在玉米抵抗MCMV侵染过程中发挥着关键作用。     

广州海关入境运输工具上全国首次截获玉米褪绿斑驳病毒

正2019年12月,广州南沙海关从来自肯尼亚经新加坡中转的入境集装箱空箱中发现残留玉米粒约0.5 kg,玉米粒表现明显的褪色症状。经实验室检疫鉴定,玉米粒携带检疫性有害生物——玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus, MCMV),这是全国口岸首次从入境运输工具残留物中截获该病毒。玉米褪绿斑驳病毒的自然寄主有玉米,实验条件下还可侵染小麦、大麦、燕麦、高粱。主要分布区域为美国、     

玉米褪绿斑驳病毒入侵损失指标体系及直接经济损失评估

玉米褪绿斑驳病毒(Maize chlorotic mottle virus)是我国进境检疫性病毒,严重危害玉米的生长,给玉米生产带来巨大经济损失。文中根据科学性、系统优化、通用可比及实用性原则,结合玉米褪绿斑驳病毒特点,系统构建了玉米褪绿斑驳病毒损失评判指标体系,共1个一级指标、3个二级指标、11个三级指标。并对其在我国可能造成的直接经济损失作出初步评估,经估算,玉米褪绿斑驳病毒对我国造成的潜在直接经济损失达140.95亿人民币。     

侵染葫芦的黄瓜绿斑驳花叶病毒广西分离物分子鉴定

从广西南宁市郊温室大棚中的葫芦[Lagenaria siceraria(Molina)Stand.]上采集到一个表现脉绿、花叶症状的病毒样品,ELISA检测表明,该样品与黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)有密切的血清学关系,利用RT-PCR方法从样品中扩增获得约500bp的DNA片段,序列分析表明,该片段是CGMMV的外壳蛋白基因,暂将该病毒分离物定名为GX-BG。外壳蛋白基因核苷酸序列系统进化树分析表明,已报道的CGMMV主要分为3大群体,GX-BG与中国辽宁分离物(CGMMV-LN)分别属于不同的群体。     

豇豆退绿斑驳病毒(CCMV)突变体的混合侵染研究

 本研究采用PCR点突变的方法,对豇豆退绿斑驳病毒(CCMV) RNA3的cDNA克隆进行突变,突变体TP7是在外壳蛋白基因之前突变形成一个独特的Sal I酶切点;TP8是在3a基因之前突变形成一个独特的Bam H I酶切点;AG 1是在外壳蛋白基因之后突变形成一个独特的Not I酶切点。TP7、TP8、AG1体外转录产物分别与CCMV RNA1、RNA2的c DNA克隆的体外转录产物混和后接种豇豆,结果表明,接种后第6 d TP7植株首先表现出症状,9d后TP8、AG1和野生型CCMV接种的植株表现出症状,TP7的症状发展最快。
采用TP7、TP8、AG1接种20 d的毒源植株,按TP7+TP8、TP7+AG1、TP8+AG1等量混合汁液接种豇豆,接种20 d,通过RT-PCR分析接种植物,在TP7+TP8和TP7+AG1混合侵染中,TP7在混合侵染中占优势,在TP8+AG1的混合侵染中,TP8和AG1的种群十分接近。     

基于MaxEnt模型分析气候变化下玉米褪绿斑驳病毒的潜在地理分布

为明确气候变化背景下玉米褪绿斑驳病毒 （maize chlorotic mottle virus, MCMV）的潜在分布范围,基于MCMV的全球分布数据,筛选影响其分布的关键环境变量,利用MaxEnt模型和ArcGIS软件预测MCMV在历史（1970—2000年）和未来（2021—2040年）气候条件下的潜在地理分布范围。结果表明, MaxEnt模型的受试者工作特征（receiver operating characteristic, ROC）曲线下面积（area under curve, AUC）均值为0.941,预测结果的准确性较高。历史气候条件下, MCMV在全球具有广泛的适生范围,在亚洲、美洲、非洲、欧洲和大洋洲均存在适生区;在我国其适生区主要集中于中部和南部地区,总适生区面积占我国陆地总面积的41.62%。未来气候情景下, MCMV在全球的适生性有所降低,在我国的总适生区面积有所减少,但适生范围仍较为广泛;未来气候变化虽不利于MCMV在全球的进一步扩张,但可能更利于其在欧洲生存。MCMV在我国的潜在地理分布范围广,特别是西南地区,在历史和未来气候条件下均存在高适生区,因此建议进境口岸检疫部门应加强检疫检测,严防MCMV传入;内检部门应加强检疫监测和防控,严防其扩散。     

基于@RISK软件评估玉米褪绿斑驳病毒对我国玉米产业造成的潜在经济损失

为明确玉米褪绿斑驳病毒 （maize chlorotic mottle virus, MCMV）对我国玉米生产的经济损失,通过收集、整理玉米产量、种植面积、市场价格以及MCMV潜在地理分布、危害和防控等相关数据,基于随机模型利用@RISK软件分别预测MCMV在不防控和防控场景下对我国玉米产业造成的潜在经济损失。结果表明,在不防控场景下, MCMV对我国玉米产业造成的潜在经济损失总量的90%置信区间为329.44亿~508.96亿元;而在防控场景下, MCMV对我国玉米产业造成的潜在经济损失总量的90%置信区间为51.62亿~76.23亿元,可挽回潜在经济损失的90%置信区间为278.38亿~437.93亿元。说明MCMV严重威胁我国玉米生产,建议有关部门加强检疫阻截防控工作,保障我国玉米产业安全。     

多花黑麦草斑驳病毒基因组克隆与序列分析

 多花黑麦草斑驳病毒(Ryegrass mottle virus,RGMoV)属南方菜豆花叶病毒属,是牧草病毒病的重要病原。利用反转录技术合成和扩增了RGMoV RNA的cDNA。将cDNA克隆在载体pUC18上,对RGMoV的基因组RNA作序列分析。RGMoV RNA是一个正义单链RNA分子,全长4 210个核苷酸,包含4个开放阅读框架5'非翻译区包含99个核苷酸,3'非翻译区有198个核苷酸。RGMoV ORF的结构和南方菜豆花叶病毒以及水稻黄斑病毒的结构一样。ORF₁编码1个14.6 kD的蛋白质,这个蛋白质的功能还不清楚;ORF₂的产物由947个氨基酸组成,分子量为103.6 kD;ORF₃编码1个19.8 kD的蛋白质;ORF4编码1个25.6 kD的蛋白质,通过N末端氨基酸分析,确认ORF4为病毒外壳蛋白。RGMoV RNA的全序列以及染色体结构已被GenBank登录,登录号分别为AB040446和NC_003747。     

南瓜果实中黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-PCR检测及cp基因序列分析

以来自甘肃的南瓜果实样品中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，序列测定和分析结果表明：扩增片段包含CGMMV的外壳蛋白基因和3’非编码区，证明南瓜果实中存在黄瓜绿斑驳花叶病毒，将其印基因序列与来自国内不同地区的其他CGMMV分离物进行序列比对，发现国内各分离物间的同源率高，有很近的亲缘关系。