结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

小麦成熟胚愈伤组织的诱导及植株再生体系的研究

以小麦的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生.研究结果表明,在MS+2,4-D(3.0 mg/L)+VB1(1.0 mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为72.3%,但愈伤组织质量较差;在低浓度2,4-D和添加了ABA的继代培养基中,愈伤组织质量明显改善,胚性愈伤组织增加.筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(4.0 mg/L)+NAA(0.3 mg/L)中,分化率达73.18%.该研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体的小麦组织培养再生体系.     

桃胚乳离体培养再生植株的研究(初报)

将早熟桃品种北农早艳的幼嫩胚乳培养在附加0.5—1.0ppm2.4-D 和0.25—0.5 ppm BA 的 MS 培养基上均诱导产生了愈伤组织,并在附加0.5—1.0ppm2.4-D和0.5ppmBA 的培养基上分化出了胚状体。将胚状体转移到加有0.01-0.05ppm NAA 和0.5—2.0ppm BA 的 MS 培养基上后,胚状体很快发育出叶子、根和完全的小植株。     

生药防风不定芽分化影响因素的研究

以防风愈伤组织为材料,研究了培养基、激素组合、光照、愈伤诱导周期和继代培养次数对愈伤组织不定芽分化的影响。结果表明:适合防风愈伤组织芽分化的最佳培养基为MS+NAA0.2+KT0.2+6-BA1.0;继代培养的周期为25d,继代培养2次防风不定芽的分化率较高。随着光照强度从5001x到20001x的增加,防风愈伤组织产生的芽数增加,丛生芽健壮,光照强度20001x最适合防风愈伤分化出不定芽。     

杉木愈伤组织的继代增殖与植株再生

通过建立杉木愈伤组织增殖和植株再生体系,旨在为杉木体细胞杂交和遗传转化等基因工程研究提供高效受体系统。以杉木子叶、下胚轴诱导的愈伤组织为材料,研究了不同激素组合及浓度、培养条件对愈伤组织的继代及植株再生的影响。结果表明:不同激素组合及浓度对愈伤组织的继代有显著影响,2,4-D有利于降低继代过程中的褐化现象,NAA、KT有利于愈伤组织的继代增殖。DCR+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+KT 1.0 mg·L~(-1)+NAA 1.0 mg·L~(-1)和DCR+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+KT1.5 mg·L~(-1)+NAA 1.5 mg·L~(-1)是愈伤组织继代增殖的最佳培养基。暗培养和800 lx光照强度是愈伤组织继代的最佳培养条件。愈伤组织在继代30~45 d期间内需转移至新培养基。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT 1.5 mg·L~(-1)再生芽诱导率最高,诱导率为80%。经过一次继代的愈伤组织比未经过继代的单个再生芽数多,平均可达3~4个。再生苗在1/2MS+IBA 1.0 mg·L~(-1)培养基中生根率高达89.5%。     

薏苡愈伤组织的诱导与分化

为薏苡优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供科学依据,以薏苡气生根、种子胚、嫩茎为材料,研究了2,4-D、KT、NAA不同浓度配比对愈伤组织的诱导、分化和成苗的影响。结果表明,KT是薏苡芽分化及脱毒种苗生成的主要影响因素,气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植体,其最佳分化培养条件为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 0.8mg/L,最佳成苗培养基为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L。     

麻城油茶体细胞胚胎发生及植株再生

为建立油茶通过体细胞胚胎发生方式获得再生植株的技术体系,以湖北麻城油茶7月中旬幼胚为试验材料,消毒后切块接种于分别附加了2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT和5.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT的MS培养基,进行愈伤组织诱导培养。1个月后统计出愈率,两种处理的愈伤组织诱导率分别为83.23%和45.34%;挑选状态良好的愈伤组织继代于附加了1.0 mg/L NAA+1.0 mg/L KT的MS培养基,培养2个月后可见明显的胚状体形成,统计胚状体平均发生率为15.25%;随后将胚状体继代于附加了1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA的MS培养基上进行胚状体发育和植株再生培养,获得具备完整子叶的胚状体后,转移至含有3.0 mg/L 6-BA的1/2MS培养基中进行生根培养,获得完整再生植株后驯化移栽至营养钵中继续生长。本研究建立了麻城油茶6个月内获得体细胞胚胎发生及植株再生的技术体系,为建立油茶农杆菌介导的遗传转化技术体系奠定了基础。     

籼稻遗传转化高频再生体系的建立

选用21个籼稻品种进行成熟胚离体培养试验，结果发现大多数品种可通过添加一定配比的外源植物激素使愈伤组织诱导率大大提高，继代培养基中添加KT NAA可明显改善愈伤组织的生长状况；连续继代可显著提高愈伤组织的再分化率；预分化培养后转入再分化培养可显著提高愈伤组织再分化率，建立了一套适于籼稻遗传转化的高频再生离体培养体系。     

小黑麦原生质体的植株再生

<正> HC—3无性系,是从八倍体小黑麦花粉植株的幼穗诱导得到的单倍性胚性愈伤组织,继代6年后仍有一定的植株分化能力,但已不易用来建立悬浮系,为此,根据愈伤组织的状态变换,使用不同培养基对其进行改造,在M_1培养基上连续继代和选择3次,挑选出HC—3—Ⅱ型愈伤组织,建立悬浮系,取悬浮细胞分离原生质体,培养在附加2,4—D2mg/L、KT0.2mg/L、NAA0.1mg/L、琼脂糖0.5%的MS培养基中,5天后见到第一次分裂,3周后可见小愈伤组织,此时补加葡萄糖减半的MC培养基,愈伤组织长到0.5mm时,将其再转到附加2.4—D1mg/L的MS培养基上,20天后转到M_3和M_4固体培     

水稻体细胞培养与无性系变异——Ⅰ,不同基因型不同外植体的培养

对水稻5个品种的种胚和11个品种的幼穗在含不同激素浓度的MS培养基上培养,诱导愈伤组织并再生绿苗。品种间在愈伤组织诱导率、绿苗分化率和对激素的诱导效应表现了基因型差异。幼穗愈伤组织诱导率和绿苗分化率高于种胚。种胚的盾片愈伤组织分化能力高于胚轴,胚芽鞘的未分化得绿苗。去分化培养基添加2,4—D2mg/1+KT0.5mg/1,诱导愈伤组织的效果甚佳,并促进绿苗分化。选择胚性愈伤组织继代培养,种胚的培养270天,幼穗的培养210天,仍有部分品种保持较高的绿苗分化率。     

长柄紫果槭愈伤组织培养研究

对长柄紫果槭的嫩茎、叶柄和叶片进行愈伤组织的诱导研究,结果表明各个外植体诱导愈伤组织的难易程度为嫩茎>叶柄>叶片;6月份采摘的外植体分化能力强,褐化少,染菌率低,最适合诱导愈伤组织;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L组合诱导愈伤组织诱导率为63%,诱导出的愈伤组织结构致密;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+KT1.0 mg/L组合的继代培养基,增殖系数达到2.9。     

陆地棉愈伤组织诱导影响因素初探

以品种中棉所69无菌苗的下胚轴为材料,筛选出适合陆地棉胚性愈伤组织诱导的培养基配方.结果表明,0.1 m/L 2,4-D+0.1 mg/L KT+ 0.5 mg/L NAA+ MSB培养基配方较适合愈伤组织的诱导,诱导率达到了90％;而在0.10 mg/L KT +0.20 mg/L NAA+ MSB的培养基配方中,胚性愈伤组织长势良好,且继代增殖状态较佳.     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

玉米自交系幼胚培养体系的建立

以重庆地区常用的8个玉米自交系幼胚为外植体,研究不同基因型和培养基对玉米幼胚愈伤组织诱导率的影响.结果表明:自交系082在N6B5培养基的愈伤诱导率最高,达到98%,Hy04未诱导出愈伤组织,不同基因型愈伤诱导率的差异具有高度统计学意义.海09042在G1继代培养基的胚性愈伤组织呈颗粒状分散、结构松软、淡黄色,愈伤接种在加KT或加NAA的分化培养基中,以加NAA的绿苗数多.     

外源激素在玉米离体培养中的作用研究

以玉米自交系黄早4、综31的幼胚为材料,对外源激素在玉米离体培养中的作用进行了研究。结果表明,2.0 mg/L的2,4-D可以诱导出高频率的胚性愈伤组织,而添加高浓度的6-BA不利于胚性愈伤的诱导;6-BA(0.5 mg/L)+KT(1.0 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)的激素组合对于胚性愈伤组织的分化明显优于其他的激素组合;单独使用1.0 mg/L的NAA有利于根的生长和发育,虽然NAA1.0 mg/L+多效唑2.0 mg/L的激素组合中,根的平均数量和平均长度不如单独使用1.0 mg/L的NAA,但是幼苗的移栽成活率二者无显著差异。     

小麦“5389”悬浮细胞系建立的条件摸索

以小麦"5389"的幼胚为外植体诱导愈伤组织,研究了培养基中2,4-D、KT、ABA及其配比对愈伤组织诱导和愈伤组织继代培养的影响。结果表明:以MS+2,4-D 3.0 mg/L培养基的诱导效果最好,出愈率最高达93.42%;在MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基上进行继代培养获得松脆型愈伤组织,以MS+2,4-D1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基进行液体培养建立了状态良好的悬浮培养细胞。     

宁夏水稻成熟胚离体再生体系的建立

以34个宁夏粳稻品种的成熟胚为材料,N6和MS为基本培养基,研究了基因型、激素、分化,继代对宁夏粳稻成熟胚培养特性的影响.结果表明,基因型对宁夏粳稻成熟胚培养的影响较大,参试材料中优育28的培养特性最好;诱导愈伤组织中2,4-D质量浓度以2 mg/L较好;分化培养中参试品种均表现为KT 2mg/L+NAA 1 mg/L+IAA 0.5 mg/L处理的分化效果最好;成熟胚诱导的愈伤组织继代1～2次对分化没有显著的影响,继代3次以上,其分化能力明显减弱.通过本研究,初步建立了宁夏水稻成熟胚高频再生体系.     

茶树不同外植体组织培养与试管苗保存研究初探

选取福鼎大白茶的种子、子叶、叶片、根、短穗作为外植体,进行愈伤组织诱导培养、愈伤组织继代培养和愈伤组织分化培养,结果表明:(1)叶片是诱导愈伤组织最好的外植体,适合的诱导培养基为N6+2,4 D(2.5mg.L-1);(2)愈伤组织通过多次继代培养扩大繁殖,可获得充足的愈伤组织;(3)愈伤组织在20种分化培养基中分化生长,绝大多数愈伤能长出绿色小突起,有一部分愈伤能分化出根。     

蚕豆愈伤组织的诱导和再生苗的研究

本试验用蚕豆的下胚轴、子时和去子叶胚三种外植体诱导愈伤组织,出愈率最低为83.3%,最高为100%。诱导培养基为改良N_6培养基附加2mgL~(-1)2.4—D或2mgL~(-1)NAA。下胚轴愈伤组织和子叶愈伤组织都能分化出绿苗。40块下胚轴愈伤组织中有4块分化出11个绿芽,其中有3块各分化出3个绿芽。在13号培养基上的5块子叶愈伤组织中,有一块长出了3个绿芽并长出3条幼根。     

激素对杜仲幼茎愈伤组织诱导及生长的影响

以MS为基本培养基,添加不同浓度的2,4-D,NAA,IBA,BA,KT或其组合,研究杜仲嫩茎愈伤组织的诱导及生长情况。结果表明,3种生长素均可100%诱导出愈伤组织,以0.5mg/L2,4-D,0.5～1.0mg/LNAA,1.0mg/LIBA效果较好;2,4-D和BA及KT的组合均不利于愈伤组织诱导,低浓度的BA与NAA和IBA组合能促进愈伤组织的诱导和生长,其中1.0mg/LNAA+0.3～0.5mg/LBA,1.0mg/LIBA+0.5mg/LBA诱导出的愈伤组织生长旺盛,富有光泽,适合进一步继代培养,而高浓度则起抑制作用;KT的加入对愈伤组织的诱导及生长均起抑制作用。