pGRF基因质粒对猪生产性能、胴体品质及内脏器官的影响研究

试验选用30头杜洛克×太湖和汉普夏×太湖二元杂仔猪,平均44日龄断奶,体重10.30kg±1.80kg,研究了经腿部肌肉注射0、0.25、0.5、1.0和2.0mgpGRF基因质粒对猪生产性能、胴体品质及内脏器官的影响。猪达100kg体重时结束试验,各处理组各选3头猪屠宰。0mg,1mg,2mg组3头屠宰猪进行胴体分割。试验结果表明,10￣20kg阶段以0.5mg的效果最佳,日增重(ADG)和每千克增重耗料(F/G)较对照组分别提高28.3%(P<0.10)和减少12%(P<0.05),0.5mg与1mg和2mg之间无显著差异。20￣40kg阶段以1mg最佳,ADG较对照组提高17.51%(P<0.05),F/G减少15.7%(P<0.05);1mg与2mg之间无显著差异;40￣100kg阶段以2mg最佳,ADG较对照组高5.38%(P>0.05),F/G减少14%(P<0.05),2mg与1mg无显著差异。100kg屠宰,2mg组对胴体品质改善最明显,瘦肉率提高3.59%,眼肌面积提高11.8%,三点膘厚降低6.2%;内脏器官的大小、重量与对照组均无显著差异。     

给猪注射pGRF基因质粒安全性的研究

将56头35日龄断奶DLY仔猪,随机分为4个处理,每个处理2个重复,每个重复7头猪。4个处理分别为对照组、3 mg组(第1天注射3 mg pGRF)、6 mg组(第1、45天分别注射3 mg pGRF)、9 mg组(第1天注射3 mgGRF、第45天注射6 mg pGRF)。到150 d时结束饲养试验,每个处理选择8头猪进行放血屠宰。屠宰前采试猪的全血10 mL制备血浆,分别测定血浆GH、SS和GRF的含量;屠宰后取心、肝、脾、肺和肾各一块用于制作组织切片;另取心、肝、脾、肺、肾、注射质粒部位肌肉和非注射部位肌肉各一块用于检测质粒的残留。结果表明:屠宰前各处理血浆激素的浓度没有显著差异(P>0.05),注射3 mg和6 mg使猪肝脏的器官系数显著下降(P<0.05),对其他器官和功能没有产生不良影响;注射9 mg使肝脏和肾脏产生广泛的颗粒变性。质粒的残留仅在9 mg组注射部位肌肉中能检测到。综合各项试验结果6 mg以下注射剂量的pGRF基因质粒在养猪生产上的使用是安全的。     

猪生长激素释放因子基因质粒对猪生长发育的影响

试验选用 30头杜洛克×太湖和汉普夏×太湖二元杂仔猪 ,平均 4 4日龄断奶 ,体重 (10 .30± 1.80 )kg ,研究了经腿部肌肉注射 0 ,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0和 2 .0mg猪生长激素释放因子 (pGRF)基因质粒对猪生产性能、胴体品质和血液参数的影响。试验结果表明 ,pGRF基因质粒对猪不同生长阶段生产性能的影响不同 ,10～ 4 0kg阶段促生长效果好于 4 0～ 10 0kg阶段 ,且促生长效果与剂量有关。相对于促生长效果 ,在猪整个生长阶段pGRF基因质粒对饲料利用率的改善效果更明显。 10 0kg体重屠宰 ,2mg组对胴体品质改善最明显 ,但对肉质无影响 ;血液中GH、IGF I、GRF及血糖浓度和血清尿素氮与对照组均无显著差异     

猪生产中GRF基因质粒的应用研究进展

随着分子生物学的发展,将生长激素释放因子(GRF)基因质粒注入到动物体内,并改变动物机体的生长机能和营养调控已成为现代营养学研究的热点。本文主要从pGRF的来源、作用特点、作用机理及在猪生产中的应用等方面进行了概述。     

注射pGRF基因质粒对猪血清生长轴激素变化规律的影响

本研究旨在探讨注射pGRF基因质粒在猪体内的表达效应及作用规律.试验选择8头体质量相近((15 0.43)kg)的健康长白×大白二元杂交阉公猪,随机分成2组.试验组颈部肌肉注射含4.5 mg pGRF基因质粒的注射液2 mL,对照组注射生理盐水2 mL.于处理后第1、4、7、11、16、21、26、31天空腹采血样制备血清,测定血清中生长激素(GH)、类胰岛素生长因子(IGF-I)、生长激素释放因子(GRF)、生长抑素(SS)的含量.结果表明:试验组在注射pGRF基因质粒后第7天,血清GH含量达峰值,比对照组高了113.47%,差异极显著(P<0.01);然后逐渐下降.到第11天时,比对照组高47.09%,差异显著(P<0.05).到第31天时,与对照组基本一致.试验组血清IGF-I和GRF含量虽然提高幅度不大,但其变化与GH含量存在着显著相关性,均在注射pGRF基因质粒后第7天达到峰值,然后降至对照组水平,其相关系数分别为0.589(P<0.05)和0.678(P<0.05).与对照组相比,试验组血清SS含量在11 d前一直呈下降趋势,第11天时降至最低点,但差异不显著.到第16天时2组均有所上升,21 d后缓慢下降,第31天时与对照组趋于一致.血清SS含量与GH、GRF的含量分别存在显著和极显著负相关,相关系数分别为-0.689(P<0.05)和-0.777(P<0.01).由此可见,pGRF基因质粒在体内快速表达并作用于机体,主要通过提高GRF的含量而促使GH的分泌,同时抑制SS的分泌,一定程度阻止其对GRF和GH的抑制作用,从而达到有效的促生长作用.同时本试验发现,虽然采用了颈静脉导管方法,猪血液中生长轴激素测定值变异仍较大,加强护理和增加测试猪的数量是取得更为客观结果的必要条件.     

猪生产中pGRF基因质粒应用研究

当今世界人口的与日剧增和人类可利用资源缺乏形成的矛盾,促使动物营养学家们不断地探索,以期用最小的成本生产出最好的动物产品。     

EGF、Gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪生产性能、免疫功能及相关激素水平的影响

为探讨表皮生长因子（EGF）、谷氨酰胺（Gln）和pGRF基因质粒不同组合形式对早期断奶仔猪生产性能、免疫功能及相关激素（皮质醇、生长激素）分泌的影响，选择同日龄断奶仔猪42头，随机分为7个处理，每个处理3个重复，每个重复2头猪，做一对比试验，试验期21d。结果表明，EGF、Gln和pGRF基因质粒的不同组合形式在促进仔猪生长、增强免疫功能及调节激素分泌方面均表现出良好效果，其中以三者联合使用的效果最为突出：仔猪末重和全期日增重分别提高48．02％（P〈0．01）与1．68倍（P〈0．01），料肉比降低50．75％（P〈0．01）；日粮粗蛋白表观消化率增加1．13倍（P〈0．01）；毛色分数提高14．03（P〈0．05），而且全期未发生腹泻，其作用远优于两两组合及各自单独使用。对免疫功能的调节效果以EGF＋pGRF基因质粒和EGF＋G1n＋pGRF基因质粒两种组合形式较为明显：断奶后第1周，试验组血清IgG水平分别比对照组增加11．71％（P〈0．05）和11．24％（P〈0．1）；第2周则分别减少9．53％（P〈0．01）和5．06％（P〈0．1）。对仔猪内分泌的影响，亦以三者联合使用的作用最为显著：其血清皮质醇水平在断奶后1～2周分别比pGRF基因质粒单独使用及其与EGF两者合用降低40．40％和88．57％；生长激素水平的变化与皮质醇呈相反趋势，但变化规律与皮质醇相似。     

生长肥育猪骨骼肌注射表达pGRF基因质粒的效应研究

将猪的GRF基因表达质粒注射于猪的骨骼肌后,研究其促生长效应与机理。选用始重6.3kg的44头去势长白×太湖仔猪,分6组,采用2×3因子安排的完全随机区组设计,按6～10kg、10～20kg、20～50kg、50～100kg4个阶段饲养。4个饲养阶段的饲粮低蛋白水平分别是20.70%,17.90%,15.03%,13.00%;高蛋白水平分别是23.70%,20.90%,18.02%,16.00%。pGRF基因质粒注射剂量设0mg、0.5mg、1.0mg3个水平,于试验开始与试验猪体重达60kg时共注射基因质粒2次。测定各阶段日增重,饲料消耗量,耗料增重比以及30、70、100kg时血液中GH、GRF、IGF-I的浓度。100kg时屠宰进行胴体品质测定。结果表明:饲粮蛋白水平对各阶段及全期试验猪日增重均有显著影响(P<0.05或P<0.01),对50～100kg阶段与全期日采食量和耗料增重比有显著影响(P<0.05或P<0.01)。注射pGRF基因质粒对各阶段及全期日增重均有显著影响(P<0.05),对6～10kg、10～20kg、50～100kg3阶段及全期日采食量有显著影响(P<0.05),对6～10kg阶段、50～100kg阶段及全期耗料增重比有显著影响(P<0.05)。注射pGRF基因质粒对30kg及70kg体重时猪血液中GRF、GH、IGF-I浓度均有显著影响(P<0.05)。提高饲粮蛋白水平与注射pGRF基因质粒均可明显降低超声波测膘厚及屠宰测膘厚、增大眼肌面积(P<0.05)。     

肌注猪促生长激素释放因子(pGRF)基因质粒后猪神经内分泌生长轴激素的变化规律

试验探讨pGRF基因质粒在猪体内的表达效应及作用机理。将10头体重相近([15.24±0.53)kg]、遗传基础相似的健康杜×长×大三元杂交阉公猪安装颈静脉血导管,随机分成2组。试验开始时,试验组每头猪左侧臀部肌肉注射4.5mgpGRF基因质粒,第30d时,试验组每头猪右侧臀部肌肉注射相同剂量pGRF基因质粒,对照组两次分别注射2ml生理盐水。测定采样血浆中GRF、SS、GH及IGF-I的浓度。结果表明:①第一次注射pGRF基因质粒8d时,试验组GH的水平较对照组有显著提高(P<0.05),第12dGH水平达最高,为对照组的157%(P<0.01);第8、12、17、22d的IGF-I水平分别为对照组的185%(P<0.01)、237%(P<0.01)、200%(P<0.01)、131%(P<0.05);第12d试验组的SS水平较对照组有明显下降(P<0.05),其余时间无明显变化;GRF的水平在第12d分泌量达到最高,为对照组的143%(P<0.01),17d为对照组的133%(P<0.05),此后逐步下降又上升,与对照组的水平差异不显著。②在此试验条件下,基因质粒在5～8d开始缓释表达,12d左右达到表达高峰,其有效剂量持续时间在20d以上。③第二次注射基因质粒后,试验组第33d以后GH的水平逐渐升高,到45dGH水平达到峰值,为对照组的144%(P<0.05);第39、45、60d的IGF-I水平分别为对照组的166%(P<0.05)、173%(P<0.05)、117%(P<0.05);GRF的水平在45d分泌量达到最高,为对照组的138%(P<0.05),其余时间无明显变化;SS水平较对照组无显著差异。④相关分析表明:注射基因质粒后,试验组GH与GRF的相关系数为0.81(P<0.01),与SS的相关系数为-0.65(P>0.05);GH、GRF与IGF-I存在着正相关,SS与IGF-I存在负相关性,除GH与IGF-I的相关系数为0.67,达到显著正相关水平(P<0.05),其余指标与IGF-I均未有显著相关。     

pGRF基因质粒对免疫应激断奶仔猪生长抑制的缓解作用

旨在研究pGRF基因质粒对免疫应激断奶仔猪生长的影响,探讨pGRF基因质粒缓解免疫应激引起的生长抑制作用及其可能的机理。选取18头日龄为（35&#177;2）d、体质量为（7.86&#177;0.59）kg未去势的杜洛克&#215;长白&#215;大白（DLY）三元杂交断奶仔猪,采用单向分类试验设计,按体质量相近、性别一致的原则配对,分为3个处理,即pGRF（pGRF基因质粒）组、pGRF＋LPS（脂多糖）组和LPS组,每个处理6个重复,每个重复1头猪。结果表明：pGRF基因质粒可以缓解因注射LPS导致的日增质量的降低（P〈0.05）,饲料转化率有所改善（P〉0.05）;能够抑制由LPS诱导的细胞因子（IL-1I、L-6）浓度的上升（P〈0.05或P〈0.01）和血清IGF-I浓度的降低（P〈0.05或P〈0.01）,同时显著提高血清IgG的浓度（P〈0.05）。结论：pGRF基因质粒缓解了断奶仔猪因注射脂多糖引起的生长抑制,降低了血清IL-1和IL-6的水平,提高了血清IgG的浓度,提高了仔猪的抗病力,从而缓解了断奶仔猪的免疫应激;pGRF基因质粒缓解免疫应激的作用与其促进IGF-I的分泌密切相关。     

pGRF基因质粒对猪胴体性状和肌肉品质的影响

为研究猪生长激素释放因子(pGRF)基因质粒对猪胴体性状和肌肉品质的影响,试验选用24头大白×长白二元杂交去势公猪平均体重(17.25±0.62)kg,随机分为4个处理,每个处理6个重复,分别经臀部注射0、4.0 mg、6.0 mg和8.0 mg的pGRF基因质粒。结果表明:注射4.0 mg和6.0 mg的pGRF基因质粒有提高猪宰前活重、眼肌面积、屠宰率、胴体直长、胴体斜长及降低背膘厚的趋势,其中6.0 mg组宰前活重和胴体斜长与对照组相比差异显著(P0.05)。注射pGRF基因质粒对猪肌肉品质无显著影响(P0.05)。     

EGF、Gln和pGRF基因质粒对早期断奶仔猪肠道发育的影响

为研究表皮生长因子（EGF）及其与谷氨酰胺（Gln）和pGRF基因质粒的不同组合形式对早期断奶仔猪肠道发育影响的差异,选取同日龄断奶仔猪30头,等分到EGF、EGF＋Gln、EGF＋pGRF基因质粒、EGF＋pGRF基因质粒＋Gln和对照组（生理盐水）共5个处理中,每个处理3个重复,每个重复2头猪,进行对比试验,试验期21d.试验结束时,从每个处理的每个重复中随机选取1头仔猪,空腹称重后屠宰取样.结果表明：EGF与pGRF基因质粒、Gln的不同组合形式对肝脏、胰脏和胃主要消化器官重量没有显著影响（P＞0.05）,但均不同程度促进了仔猪小肠的发育.其中,以EGF＋Gln＋pGRF基因质粒的效果最为明显,小肠、空肠前部、空肠中段、空肠后段及整个空肠的重量分别超过对照组37.12%（P＜0.1）、103%（P＜0.05）、86.27%（P＜0.05）、100%（P＜0.1）和96.02%（P＜0.05）.空肠绒毛长度提高89.68%（P＜0.1）,细菌移位率为零.但在本试验中,各处理对黏膜刷状缘碱性磷酸酶的活性都没有明显影响（P＞0.05）.     

鸡甲状旁腺素基因质粒对蛋鸡生产性能、蛋壳质量及血液激素水平的影响

试验选用56周龄新扬州鸡产蛋鸡150只,随机分为3个处理,每个处理5个重复,各重复10只.研究经腿肌注射0、200和400μg鸡甲状旁腺素基因质粒(pCEP4-PTH)对蛋鸡生产性能、蛋壳质量和血液部分激素的影响.试验结果表明,pCEP4-PTH基因质粒可改善蛋鸡生产性能;200μg注射量可显著改善蛋壳强度(P<0.05),400μg注射量对蛋壳质量影响不显著;pCEP4-PTH基因质粒可在蛋鸡体内良好表达,甲状旁腺素(PTH)水平均显著升高(P<0.05),且注射400 μg时达到极显著水平(P<0.01),注射400 μg pCEP4-PTH基因质粒具有促进内源降钙素(CT)和雌激素(E2)分泌的作用(P<0.05),因而不利于其生物学效应的发挥,两试验组骨钙素(BGP)与对照组差异不显著,提示生产性能和蛋壳质量的改善未对骨骼造成不良影响.pCEP4-PTH基因质粒可改善蛋鸡生产性能和蛋壳质量,且不影响骨骼质量.     

注射pGRF基因质粒对由脂多糖或三联疫苗诱导的免疫应激仔猪生长和免疫指标的影响

为研究猪生长激素释放因子(pGRF)基因质粒对由脂多糖或三联苗诱导的免疫应激仔猪生长性能和免疫指标的影响,选用36头(28±2)d断奶的杜长大(Duroc×Landrace×Yorkshire,DLY)三元杂交仔猪,按体重相近、阎公猪和母猪各1/2的原则,分为对照组(不注射pGRF基因质粒、大肠杆菌LPS或三联苗)、注射pGRF组、注射脂多糖(LPS)组、注射pGRF+LPS组、注射三联疫苗组(猪瘟兔化弱毒,猪丹毒杆菌G4T10弱毒,猪源多杀性巴氏杆菌E0630弱毒)和注射pGRF+三联疫苗6个处理,每个处理6个重复,每个重复1头猪.试验开始时,pGRF组、pGRF+LPS组、pGRF+三联疫苗组的仔猪大腿肌肉分别注射1.0 mg pGRF基因质粒;试验的第11天给LPS组、pGRF+LPS组仔猪注射100 ug/kg LPS生理盐水溶液,三联疫苗组以及pGRF+三联疫苗组注射2头份三联苗生理盐水溶液,对照组和pGRF组注射生理盐水;第18天时按照第11天的操作重复进行.结果表明,在2次注射LPS或三联苗后,即10～17 d和17～24 d阶段,pGRF+LPS组仔猪的ADG显著(10～17 d,P<0.05)或极显著(17～24 d,P<0.01)高于LPS组,F/G均显著低于LPS组(P<0.05);pGRF+疫苗组仔猪ADG均显著高于疫苗组(P<0.05),F/G显著低于疫苗组(P<0.05).在第11天和第18天,pGRF+LPS组仔猪的血清细胞因子(IL-1、IL-6)水平均极显著低于LPS组(P<0.01),类胰岛素生长因子(IGF-I)和IgG浓度均极显著高于LPS组(P<0.01);pGRF+疫苗组仔猪的血清IL-1和IL-6浓度显著低于疫苗组(P<0.05),lgG浓度极显著(11 d,P<0.01)或显著(18 d,P<0.05)高于疫苗组,IGF-I浓度显著(11 d,P<0.05)或极显著(18 d,P<0.01)高于疫苗组.证明pGRF基因质粒能缓解由LPS或三联疫苗免疫应激引起的仔猪生长抑制;能够抑制由脂多糖或三联苗诱导的血清IL-1和IL-6浓度的上升和血清IGF-I浓度的降低,同时能提高免疫应激仔猪的血清IgG浓度.     

猪外源生长激素释放因子pGRF基因质粒的研究进展

生长激素释放因子(GRF)是由下丘脑合成并分泌的多肽,可促进生长激素的合成与分泌,提高动物的生长速度。随着分子生物学的发展,将GRF基因质粒注入到动物体内,并改变动物机体的生长机能和营养调控已成为现代营养学研究的热点,文章对pGRF的结构特点、合成、表达以及在猪生产中的应     

猪催乳素受体基因对繁殖性能的影响

催乳素受体(PRLR)是细胞分裂素受体超家族的一个成员,与催乳素一起参与动物的繁殖过程。本文主要介绍催乳素受体基因对猪繁殖性能的影响。     

γ-氨基丁酸对猪生产性能及激素水平影响

为探讨日粮中添加γ-氨基丁酸对猪的促生长效果及其与生长、摄食及代谢相关激素之间的联系。试验选用(34.07±0.01)kg的杜长大三元杂交猪60头,随机分到3个处理中,每个处理4个重复,每个重复5头猪。试验采用单因子设计,按日粮添加水平设基础日粮组(0 mg/kgγ-氨基丁酸)、基础日粮 50 mg/kgγ-氨基丁酸和基础日粮 100 mg/kgγ-氨基丁酸3个处理,试验期28 d。结果表明,γ-氨基丁酸对猪的促生长作用明显,但随生长阶段和作用剂量不同存在一定差异,主要体现在试验3~4周,以100 mg/kg的效果较为突出。100 mg/kg组试验猪第3周(P<0.1)、第4周(P<0.05)及0~4周(P<0.1)的ADG和第4周(P<0.01)、3~4周(P<0.1)的ADFI以及0~4周(P<0.05)的F/G都明显超过对照组。日粮中添加γ-氨基丁酸显著促进了试验猪体内生长激素(P<0.05)和褪黑素(P<0.05)的分泌,明显提高了小猪体内促甲状腺激素水平(P<0.1),这也与良好的生产性能吻合,但作用程度随试验阶段和激素种类不同而存在一定差别。总的看来,日粮中添加γ-氨基丁酸能够有效改善小猪生产性能,促进生长,但为获得理想结果必须考虑添加剂量与使用时间。     

银耳孢子发酵物及与pGRF基因质粒合用对断奶仔猪生长、部分免疫指标及肠道菌群的影响

本研究探讨了银耳孢子发酵物(TSF)及与猪生长激素释放因子(pGRF)基因质粒合用对断奶仔猪生长、部分免疫指标以及肠道菌群的影响,同时与饲用抗生素效果作比较.选用48头(28±2)日龄的断奶D×L×Y三元杂交仔猪,采用单项分类试验设计,按体重相近、性别一致的原则随机分到对照组、抗生素组(吉他霉素40 mg/kg+硫酸抗敌素20 mg/kg)、TSF(4 000 mg/kg)组和TsF(4 000 mg/kg)+pGRF组4个组中,TSF+pGRF组中pGRF基因质粒是在试验开始时于每头猪后腿肌肉注射1 mg.试验期28 d.结果表明:与对照组相比,3组均显著提高了断奶仔猪的日增重(P<0.05)及改善饲料转化效率(P<0.05).添加有TSF的2组较对照组和抗生素组能显著提高血清IL-2浓度(P<0.05)、T淋巴细胞转化率(P<0.05)和血清猪瘟抗体滴度(P<0.05);T淋巴细胞数量也有明显的提高(P=0.10).添加有TSF的2组乳酸杆菌和双歧杆菌均显著高于抗生素组(P<0.05),与对照组差异不显著(P=0.07).由结果证明,TSF有促生长的作用,而且效果与吉他霉素+硫酸抗敌素相当;同时TSF还能提高断奶仔猪的免疫功能,优化肠道菌群;TSF与pGRF基因质粒合用有进一步提高生长性能的趋势,但对免疫功能和肠道菌群没有进一步的改善作用.     

不同剂量半胱胺对生长猪生产性能的影响

试验选择平均体重为16.31kg的杜长大杂交猪118头,随机分为4组。试验一期,半胱胺在基础日粮中添加量为0、50、100、0mg/kg;试验二期,基础日粮中半胱胺添加量为0、100、150、250mg/kg。试验结果表明,试验一期,CS50组(Ⅰ)、CS100组(Ⅱ)平均日增重分别提高4.45%、2.87%,差异不显著;料重比CS50组(Ⅰ)下降5.26%(P<0.05),CS100组(Ⅱ)下降7.69%(P<0.01);试验二期,CS100组(Ⅰ)、CS150组(Ⅱ)、CS250组(Ⅲ)平均日增重分别提高3.98%、5.98%、5.44%,差异均不显著;料重比分别下降2.90%、8.41%(P<0.05)、4.34%。     

生长激素基因多态性与猪部分生产性能的关系

采用PCR-RFLP对南昌白猪(117头)和大约克夏猪(361头)的GH1基因的-119bp～+486bp进行了扩增,并用HhaⅠ酶切,产生4个等位基因:C1(605bp)、C2(498bp+107bp)、C3(449bp+156bp)和C4(449bp+107bp+49bp)。分析了不同基因型对平均初生重、2月龄体重、6月龄体重、料重比、校正背膘厚、平均背膘厚和瘦肉率等生产性能的影响。结果表明,在南昌白猪中,C2C2基因型猪的2月龄体重比C1C1基因型猪的大,差异显著(P<0.05)。在大约克夏猪中,C3C3基因型猪的初生重最小,与C2C4基因型猪的相比,差异极显著(P<0.01);C2C4基因型猪的6月龄体重最大,与C2C3和C3C3基因型猪的相比,差异显著(P<0.05)。