动物组织HE染色石蜡切片技术的改进

组织切片方法是教学、科研、病理检验工作中广泛应用的一种实验技术.近年来对传统的组织切片方法进行了全面地改进试验研究,使组织固定完全,脱水彻底,透明适度,浸蜡充分,切片较薄,染色良好;不仅缩短时间,简化程序,节省药液,而且提高了组织切片的质量.     

巴西橡胶树抗风研究进展

从品种(系)抗风性评价、抗风力影响因素,以及抗风性早期预测等3个方面,综述巴西橡胶树抗风研究的最新进展,为巴西橡胶树抗风性的深入研究及抗风品种选育提供参考。     

巴西橡胶树胶乳蛋白质组学研究综述

巴西橡胶树胶乳高速离心后大致可分为橡胶粒子、C-乳清和黄色体3种组分,这些组分中含有约200种不同的蛋白质。随着蛋白质组学的发展,巴西橡胶树胶乳蛋白质组学的研究已相继展开。本文综述近年来巴西橡胶树胶乳蛋白质组学的研究,提出了其存在的问题并进行了展望。     

巴西橡胶树倍性育种研究进展

系统概述了巴西橡胶树倍性育种的国内外研究历史与现状、诱导的技术与途径，以及单倍体植株和多倍体植株的特征；提出了改进橡胶树倍性育种的途径与研究方向。     

巴西橡胶树树干施肥效应研究

针对两种树龄的橡胶树,用挂瓶渗透的方式,在海南红光农场进行了两种营养液类型处理的树干施肥试验＿结果表明:约两个月的树于施肥对橡胶树的产量基本没有影响,对橡胶树的叶片营养状况影响较大,与对照相比,各种营养元素都有不同程度的增长,其中,大量元素略有增长:N增长2.3%-6.3%,P增长6.3%-13.3%.K增长1.7%-3%;中量元素增长差异较大:Ca增长不明显,Mg增长6.3%-13.3%,S增长幅度最大.达64.3%-156.0%;微量元素中,Zn增长明显.达20.2%-35.3%,Fe增长1.3%-12.0%,Mn增长6.4%-14.1%,Cu增长6.5%-22.3%,B增长3.3%-17.4%.试验结果为探索橡胶栽培肥料利用率提高、精准施肥、缺素症的矫治、病虫害防治等,提供了新的思路.     

巴西橡胶树的离体微繁殖

以取自巴西橡胶树Hevea brasiliensis Muell．Arg．）种子实生苗的腋芽为外植体,利用含1．0mg／LKT,1．0mg／L2,4-D,20g／L蔗糖,以及4g／L琼脂粉的Ms培养基成功获得腋芽无菌苗。将其转入附加S．0Fng／LNAA,3．0me4LIBA,50g／L蔗糖,以及4g／L琼脂粉的MS培养基可进一步诱导生根。试验中我们还发现,尽管从叶片及腋芽外植体均能诱导出大量愈伤组织,但最终均未能实现体细胞胚胎发生及植株再生。采用合适的培养基能够诱导腋芽外植体离体萌发并生根,这一结果表明,通过进一步的研究和探索,完全有可能借助该途径建立巴西橡胶树的高效离体微繁体系。     

巴西橡胶树表观遗传研究进展

表观遗传是指在不涉及基因组DNA序列改变的情况下,基因功能发生了可逆的、可遗传的改变。研究表明,表观遗传调控在植物的生长发育及逆境胁迫应答反应中起着重要的作用。目前,表观遗传学研究主要集中在DNA甲基化、小RNA调控、组蛋白修饰、染色质重塑及基因组印迹等。与模式植物相比,橡胶树表观遗传的研究相对滞后,主要涉及DNA甲基化及miRNAs研究这2个方面。本文就橡胶树DNA甲基化及miRNAs的相关研究进行了简要综述,并对表观遗传在橡胶树中的研究前景提出展望。     

巴西橡胶树简单重复序列的鉴定及分离

本研究利用巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）这一重要产胶植物的基因组文库进行了简单重复序列（SSRs）,也即微卫星序列的分离鉴定。对来自无性系GTl的小插入基因组文库进行SSRs（AC／TG及CT／GA基序）筛选鉴定共获得154个克隆。采用载体通用引物及重复序列进行PCR扩增发现,其中114个为阳性克隆。限制性酶切分析结果显示,这些阳性克隆中有6个为重复拷贝,故予以剔除。之后,对剩余108个克隆中的50个进行了序列分析。此外,试验中对来自优良无性系RRII105的大插入基因组文库也进行了筛选。所获24个阳性克隆的测序结果也证实了橡胶基因组中微卫星序列的存在。经过最终的序列分析,本研究共鉴定出67个具有不同特点的简单及复合型微卫星序列,其中59个来自GT1,其余8个来自RRII105。所检测到的重复基序包括二核苷酸（TG／AC,AG／TC,TA,AT）,三核苷酸（AAG,AGG,A1T）,四核苷酸（GAAA,AAGG,ATCC,TAAA,AAAT）,以及一个五核苷酸（GAAAT）。与其它作物的报道结果类似,在橡胶基因组中也观察到大量的CT／GA重复。     

巴西橡胶树抗病性相关基因研究进展

着重介绍Mlo基因、含锰的超氧化物歧化酶(MnSOD)基因、橡胶凝集因子基因、死皮病相关基因、几丁质酶基因等巴西橡胶树抗病性相关基因的研究进展,并对研究中存在的问题及不足提出解决办法,对进一步的研究进行展望.     

巴西橡胶树几个苗期性状的选择及遗传增益

本研究以巴西橡胶树Heveabrasiliensis（Willd．exAdr．deJuss）Muell．-Arg．]20个3年生自由授粉后代群体为材料,对其包括产量在内的5个性状（即干胶产量、生长势、树皮厚度、乳管总列数和乳管口径）的遗传变异及选择效果进行了分析评估。试验地点设置在巴西圣保罗州平多拉马（Pindorama）的北部中心试验站。试验采用随机区组设计,重复4次,每小区种植10株。研究结果显示,不同后代群体之间在大多数性状上均存在极显著的遗传差异（p〈0．01）。产量、生势、树皮厚度、乳管总列数及乳管口径的基因型方差占各自表型方差的比例分别为13．2％、12．3％、9．4％、3．4％和0．23％,其单株遗传力（h^2i）则分别为37％、35％、69％、10％和16％。性状相关分析结果显示,产量与生势、树皮厚度及乳管总列数之间在基因型及表型上均呈极显著正相关。根据以上分析资料,当从20个后代群体中遴选出2个最优群体时,干胶产量及生势2个性状的遗传增益分别为12．3％和6．8％。若从每一后代群体中选出2个最佳的无性系母株,则该2个性状的遗传增益分别为27．7％和9．1％。经过以上2个步骤的选择,该2个性状的遗传增益可分别达~U40％和16％。     

Cu离子对巴西橡胶树组织培养的影响

巴西橡胶树是重要的经济作物,微量元素Cu对巴西橡胶树组织培养成胚、生根及组培苗生根有重要影响。试验以巴西橡胶树花药为外植体,以改良MSB为基础培养基,改变其中Cu的浓度,进行试验,寻找最佳的微量元素Cu的含量。结果表明:培养基中不同铜元素的添加量,对巴西橡胶树胚状体及组培切苗的生根产生明显的促进及抑制作用。     

一种快速高效适于橡胶树叶片AFLP分析的DNA提取方法

以近200个巴西橡胶树种质材料（品种及无性系）幼嫩叶片为材料．采用改良的cTAB法对其基因组总DNA的提取进行了研究。结果表明,该方法提取的DNA溶液无色透明,DD260／DD280的比值均为1．8～2．0,1％琼脂糖凝胶电泳为清晰的一条带,无降解现象,KNA去除干净,能被限制性内切酶完全消化;其AFLP分析（引物EcoRI-TA／MseI—CTT）条带清晰,多态性好,说明此方法提取的巴西橡胶树幼嫩叶片基因组总DNA较适于AFLP分析。     

草甘膦对巴西橡胶树芽接苗叶片莽草酸和4种激素含量的影响

为探究草甘膦诱导橡胶树芽接苗叶片畸变的作用机理,以巴西橡胶树品种‘热研7-33-97’芽接苗为材料,喷施188 g a.i/hm2的草甘膦剂量,分析芽接苗不同形态叶片莽草酸和4种激素含量变化规律。结果表明:莽草酸积累量在草甘膦施药前后呈显著差异,当叶片出现半黄半绿表型时,莽草酸积累量较未施药前上升12.40%,而在2种再生畸形叶(叶片长度7 cm和7 cm)和恢复叶时分别下降75.01%、77.48%和62.69%;喷施草甘膦后各类型叶片生长素和赤霉素的含量均与未施药前对照叶片差异不显著,脱落酸和玉米素含量较对照差异显著,半黄半绿叶片脱落酸含量较未施药对照下降12.40%,玉米素较施药前下降33.54%;2种再生畸形叶出现后,脱落酸含量较未施药前分别升高30.40%和45.61%,玉米素分别升高41.48%和86.02%。说明莽草酸和植物激素共同调节着橡胶树的生长,且影响了橡胶树叶片畸形。     

巴西橡胶树HbICE2基因的克隆及表达分析

ICE(inducer of CBF expression)介导的非依赖ABA信号传导途径在植物应对低温胁迫反应中起重要的调节作用。采用RT-PCR技术从橡胶树无性系热研8-79的叶片中扩增到1条全长c DNA,共1 677 bp,包括1 593 bp的开放阅读框,编码530个氨基酸,含有bHLH结构域,其中包含19个特征性的保守KMDRASILGDAI(D/E)YLKELL氨基酸序列,命名为HbICE2(Gene Bank登陆号:KY406163)。该基因编码的蛋白分子质量为58.02 KDa,理论等电点为5.95。荧光定量PCR分析结果表明,HbICE2主要在叶片和树皮中表达,而且在原生皮中的表达量显著高于再生皮,在抗寒性较强的橡胶树无性系PR107的树皮中表达量显著高于抗寒性弱的橡胶树无性系热研8-79。HbICE2可能在橡胶树树皮应对低温胁迫的反应中起重要的调节作用。     

橡胶树胶乳中橡胶粒子凝集相关蛋白研究进展

排胶时间是限制天然橡胶产量的关键因子之一,而乳管伤口堵塞物的形成决定着排胶时间的长短。橡胶粒子凝集与乳管伤口堵塞物的形成密切相关,其凝集过程主要受胶乳中的蛋白质调节。笔者综述橡胶粒子凝集相关蛋白的研究进展,旨在为橡胶树乳管堵塞机理的研究及排胶相关分子标记的研发提供参考资料。     

乙烯利在橡胶树上应用的研究进展

概述了三十多年来乙烯利在橡胶树上应用的研究成果,并对今后生产上使用乙烯利刺激割胶提出一些建议。     

巴西橡胶树树根组织培养外植体消毒研究

[目的]寻找一条降低橡胶树树根组织培养中外植体污染的有效途径。[方法]对巴西橡胶树树根进行组织培养,取林段断根处理30d后的新根为外植体,采用1g／L多茵灵、0．1％HgCl2和不同浓度益培隆对其进行了消毒试验。[结果]在常规消毒前先采用1g／L多茵灵对外植体处理2．5h,再用75％乙醇消毒308及0．1％HgCl：消毒6min,然后接种到添加0．1％益培隆的固体愈伤诱导培养基上,培养30d后外植体污染率下降至44．59％,存活率达25．60％。[结论]为降低橡胶树树根组织培养中外植体污染提供了理论依据。     

槟榔、橡胶化感作用的初步研究

以槟榔、橡胶作为供体,玉米、花生、南瓜、黄豆、稗草、马唐为受体,通过种子萌发的生测和根伸长的生测法来测定槟榔、橡胶的化感作用。结果表明:槟榔叶浸提液在对玉米、南瓜和黄豆的萌发和根生长的影响呈现高浓度抑制、低浓度促进的现象;槟榔叶浸提液高浓度下对稗草和马唐的根生长有抑制作用。槟榔根系周围的土壤对玉米和南瓜的萌发、玉米和黄豆的根生长都有促进作用;而对南瓜的根生长和花生的萌发有抑制作用。橡胶叶浸提液高浓度下对南瓜的萌发有抑制作用;低浓度对花生的根生长有促进作用;橡胶叶浸提液对马唐的根生长有较强的抑制作用。橡胶根系周围土壤对玉米种子的萌发和根生长都有少量促进作用,橡胶根系周围的土壤对花生的萌发和根生长有抑制作用。     

2种在组织切片上鉴别兔脑炎原虫的新方法

[目的]探索在病理组织切片上鉴别兔脑炎原虫的新方法.[方法]用改良的革兰氏染色法和甲基绿派诺宁染色法对病兔脑组织的病变进行染色与鉴别.[结果]普通染色法虽然可清晰观察到脑组织的病理变化,但却不易检出虫体.采用改良的革兰氏染色法,不仅病理结构比较明显,而且可清晰看到染成蓝色的脑炎原虫.用甲基绿派诺宁染色,位于上皮样细胞内的脑炎原虫被染成紫红色.[结论]改良的革兰氏染色法和甲基绿派诺宁染色法对病理组织中的兔脑炎原虫具有良好的染色作用,有助于对兔脑炎原虫病的快速确诊.