浙东白鹅H5亚型禽流感免疫方案初探

本试验设计两疫苗各5组单次免疫方案,测定相应的抗体消长规律。在单免试验基础上设计双次免疫试验,检测不同方案的抗体消长规律,建立合理、适用性强的免疫方案。试验结果显示,浙东白鹅禽流感H5亚型免疫较为可行的方法是:在禽流感威胁小的区域和季节采用3周单次免疫,每羽鹅颈部皮下注射0.5 mL;在禽流感威胁严重的区域和季节采用1周首免,每羽颈部皮下注射0.5 mL,3周加强免疫,每羽颈部皮下注射1.0 mL。     

禽流感病毒H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对鸡、鸭和鹅的免疫效果研究

为系统评估禽流感病毒(AIV)H5N1变异株灭活疫苗(Re-4株)对家禽的免疫效果,本研究将Re-4株油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡和商品蛋鸡、商品鸭及商品鹅。免疫后每周采集血清测定HI抗体,绘制抗体消长曲线,免疫SPF鸡在免疫后2周、3周和50周时以105EID50剂量的强毒株(CK/SX/2/06)进行攻毒。研究结果显示,该疫苗对蛋鸡、鸭、鹅均具有良好的免疫效果,而且SPF免疫鸡血清HI抗体在4log2以上时能够完全抵抗CK/SX/2/06强毒的攻击。因此,根据实验结果推荐该油乳剂灭活疫苗的对上述禽类的免疫程序:商品蛋鸡10日龄颈部皮下注射0.3mL,60日龄和110日龄(开产前)时依次胸肌注射0.5mL和1.0mL进行免疫;商品鸭、鹅在2周龄均以0.5mL首免,5周龄和4月龄左右时以1mL的剂量肌肉注射方式进行加强免疫。     

不同免疫剂量与次数对蛋鸡禽流感抗体效价的影响

为探讨新型禽流感病毒三价灭活疫苗（H5N6 H5-Re13株+H5N8 H5-Re14株+H7N9 H7-Re4株）对蛋鸡的免疫效果,研究不同免疫剂量与次数对抗体滴度的影响。将160羽35日龄海兰褐蛋鸡随机分为四组,即单次免疫组（Ⅰ组、Ⅱ组）和两次免疫组（Ⅲ组、Ⅳ组）。其中,Ⅰ组接种0.5 mL疫苗,Ⅱ组接种1.0 m L疫苗,Ⅲ组首免和二免各接种0.5 m L疫苗,Ⅳ组首免接种0.5 mL疫苗,二免接种1.0 mL疫苗。在首免接种后的第21 d、90 d、150 d、180 d测定血液抗体滴度。结果表明：免疫接种21 d后,Ⅳ组的3种抗体滴度均达7.9log2以上,合格率达95%以上,两次免疫组（Ⅲ组、Ⅳ组）的抗体保护期达180 d以上,Ⅲ组与Ⅳ组差异不显著。     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)免疫鸡抗体消长规律及免疫程序的初步研究

研究新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对种鸡和肉鸡的免疫原性,并对雏鸡母源抗体和免疫后的抗体进行动态观察,根据试验结果推荐该疫苗对鸡的免疫程序。用HI方法检测种鸡、肉鸡的母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄。结果表明种鸡的母源抗体约能维持10 d多;0.3 mL/羽首免后10 d HI抗体就可达到6.40 log2,3-5周达到高峰期,至免疫17周后(19周龄)HI抗体水平仍然维持在4.88 log2;19周龄时0.5 mL/羽进行二免,有效抗体能维持约20周;280日龄0.5 mL/羽三免后抗体水平均一,下降缓慢,至种鸡淘汰时(三免后29周)抗体水平仍能维持在5.32 log2。肉鸡母源抗体约能维持7d,10日龄时0.3 mL/羽免疫,有效抗体能维持到上市。新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸡的免疫原性确实。     

不同免疫剂量禽流感疫苗对蛋鸡产生的抗体效价影响

本文通过在武威市随机选择的4个蛋鸡场各挑选100羽蛋鸡,对其进行同群饲养管理,颈部皮下注射不同剂量的同一批次禽流感疫苗.间隔一定时间后采样,检测其抗体水平并计算抗体阳性率.结果:免疫剂量为0.5 mL/羽、0.6 mL/羽和0.7 mL/羽的试验组抗体效价阳性率达到(70％以上)免疫合格要求;0.4 mL/羽和0.9 mL/羽的剂量组抗体效价阳性率都未达到70％以上.结果表明:免疫剂量为0.6 mL/羽的免疫效果最佳,并不是免疫剂量与产生的免疫抗体效价阳性率成正比.     

新流二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫产蛋鸡、肉鸡后的抗体水平监测

为探讨鸡新城疫、禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合免疫商品蛋鸡与商品肉鸡后的抗体消长规律,试验选用商品蛋鸡与商品肉鸡各40只,商品蛋鸡随机分为A、B、C、D组,商品肉鸡随机分为E、F、G、H组,每组10只,A、E组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只;B、F组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,同时肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;C、G组鸡于7日龄颈部皮下注射新流二联灭活疫苗0.25 m L/只,于免疫后第7天肌肉注射0.5 m L/只的禽流感抗体;D、H组鸡不免疫,作为阴性对照组。各组鸡均于免疫前及免疫后的第2,6,10,14,21,28,35天采血检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:商品蛋鸡B、C组在免疫疫苗过程中配合注射禽流感抗体,禽流感的抗体效价呈先上升然后下降再上升的变化趋势,而A组未注射禽流感抗体的鸡,禽流感抗体效价则呈先下降然后上升的变化趋势;商品肉鸡各免疫组禽流感抗体效价均呈先下降然后上升的变化趋势,疫苗免疫后的前期注射禽流感抗体组的禽流感抗体效价相对高些。说明商品蛋鸡免疫新流二联灭活疫苗时配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体短期提升效果较明显,可提高禽流感疫苗的免疫效果;而在商品肉鸡上配合注射禽流感抗体对机体的禽流感抗体提升效果不明显。     

H5N1亚型禽流感灭活疫苗免疫鸵鸟后抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨鸵鸟对H5亚型禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好鸵鸟禽流感的防控工作,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型禽流感疫苗,不同剂量免疫鸵鸟,用HI方法检测母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄.结果表明,雏鸵鸟母源抗体能维持约3周～8周;8周龄时分组首免,C1组产生的免疫反应优于C2组,抗体峰值能达到7.50 log2,维持时间为9周左右;17周龄时C1组以3.0 mL/羽进行二免,2周后抗体达到7.40log2,3周～7周抗体维持在高峰值,最高达8.80log2,以后逐渐下降,有效抗体水平能维持至接种后25周左右.二免后25周进行三免,以5 mL/羽三免后2周抗体可达到9.80log2,2周～4周抗体维持在最高峰,以后缓慢下降,期间抗体时有起伏,但有效抗体水平约可维持1年时间.三免后45周内抗体水平合格率均在70%以上.根据抗体消长规律,初步推荐了鸵鸟的免疫程序.     

鸡胚源H5亚型禽流感疫苗的免疫效果及应用

将试验动物分为鸡(A1/A2组)、鸭(B1/B2组)4个组,利用新型高效的鸡胚源H5亚型高致病性禽流感疫苗进行两次免疫,免疫前、首免及二免21 d后采血检验H5亚型禽流感病毒抗体。结果显示,首免后各组免疫抗体合格率达到90%以上,二免后各组免疫合格率为100%。首免鸡H5亚型禽流感病毒抗体滴度较高且均匀,鸭的抗体滴度相对偏低且离散分布较广。二免后鸡、鸭抗体滴度非常高,在8~10 log2之间。推广应用于种禽场、商品代规模场、农村散养户等,禽类免疫合格率达到89.32%。     

鸡新城疫疫苗对鹅副粘病毒病免疫效果观察

本研究利用几种常规鸡新城疫（ND）疫苗进行了鹅副粘病毒病的免疫效果试验。240只20日龄ND抗体检测阴性的小鹅分为8组,每组30只。第1～3组鹅用2～5羽份（相对于鸡,下同）Ⅳ系苗首免,2周后用2或5羽份NDI系疫苗二免;第5和6组鹅用2羽份禽流感．鸡新城疫（AI-ND）二联活疫苗（rL-H5株）首免,3周后再用2或5羽份同种疫苗二免;第4和7组鹅分别用2羽份灭活油乳剂苗和2羽份Ⅳ系疫苗单免;第8组鹅为非免疫对照组。定期采血检测各组NDHI抗体水平,分别于单免或二免后第21d和140d每组抽5只鹅用鹅源副粘病毒强毒株JG97进行攻毒试验,攻毒剂量为400LD50/只。试验结果表明,第1～3组鹅免疫后产生的抗体水平较高,免疫保护期也较长。到二免后140d,这三组鹅的平均HI抗体水平仍维持在4log2矿左右,而且可完全抵抗强毒攻击。根据实验结果,建议生产上采用2羽份NDIV系苗首免、2周～3周后以2～5羽份NDI系苗二免的免疫程序预防鹅副粘病毒病。     

雁鹅接种禽流感疫苗后抗体消长规律

通过对雁鹅使用重组禽流感灭活疫苗(H5N1,Re-1株)进行免疫后,定期采样,测定血清HI抗体效价,研究禽流感HI抗体的产生及消长规律。试验选取日龄相近的雏雁鹅320羽,随机分为4组,每组80羽。第1组10日龄免疫,0.5mL/羽;第2组14日龄免疫,0.5mL/羽;第3组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.0mL/羽;第4组14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免1.5mL/羽。结果表明,对于雁鹅禽流感免疫,选择14日龄首免0.5mL/羽,3周后二免接种1.5mL/羽可取得较为理想的免疫效果,而疫苗免疫期应定为4个月。     

重组禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗的鹅免疫试验

为探究重组禽流感病毒(H5+H7)二价灭活疫苗对鹅的免疫特性,将100只27日龄四季鹅,随机分成3组:一免组40只,接种剂量0.5 mL/只;二免组40只,二次接种剂量分别为0.5 mL/只、1.5 mL/只;对照组20只,不免疫。结果显示:一免后21 d H5(Re-8株)免疫抗体平均滴度为5.85 log2,抗体合格率为85%,28 d为7 log2,抗体合格率为100%,但60 d后平均滴度降为5.95 log2;二免后7 d为7.15 log2,39 d为7.95 log2,抗体合格率均保持100%。一免后21 d H7N9免疫抗体平均滴度为5.2 log2,抗体合格率为85%,28 d为6.6 log2,抗体合格率达到100%,60 d后降为3.15 log2;二免后7 d为6.8 log2,39 d为7.05 log2,抗体合格率均保持在100%。结果表明:该疫苗能够有效刺激鹅产生免疫保护抗体,适用于鹅的禽流感免疫;为增强免疫保护效果,建议进行二次免疫。     

重组H5N1亚型禽流感疫苗免疫孔雀后的抗体消长规律及免疫程序的研究

为了探讨孔雀对H5高致病性禽流感灭活疫苗的免疫原性,做好孔雀禽流感的防控,采用哈尔滨兽医研究所研制的重组H5N1亚型高致病性禽流感疫苗,不同剂量免疫孔雀后,跟踪其抗体消长规律。检测结果显示:小孔雀母源抗体能维持约6周;首免0.5 mL/羽颈部皮下注射,有效抗体能维持18周以上;1.0,1.5,2.0 mL/羽3个剂量组肌肉注射进行二免,以1.5 mL/羽组效果最好,有效抗体能维持10个月左右;成年孔雀1.5 mL/羽进行三免,有效抗体能维持1年以上。而且孔雀产生的抗体均一性良好,抗体阳性率均在75%以上。根据抗体消长规律,推荐了孔雀的免疫程序。     

H5N1亚型禽流感疫苗对供港鸡免疫效果评价

针对供港活鸡饲养周期长(85日龄～105日龄),禽流感抗体滴度要求高(21/28检测样品抗体滴度需≥4 log2)的特点,在原有H5N2疫苗对供港活禽免疫效果不理想的情况下,对哈尔滨兽医研究所研制的H5N1亚型禽流感疫苗进行了免疫效果评估.结果显示,H5N1疫苗免疫效果明显高于原有的H5N2疫苗,初步推荐该禽流感灭活疫苗对供港鸡场的免疫程序为:首免7日龄～10日龄,0.3 mL/只,皮下注射;二免45日龄,0.5 mL/只,肌肉注射.     

新-流二联灭活疫苗不同方法免疫后抗体水平检测

为探讨鸡新城疫-禽流感(H9N2 HP株)二联灭活疫苗与禽流感抗体不同组合方法免疫商品蛋鸡和商品肉鸡后抗体水平变化规律,试验分别采用A、B、C三种方法免疫商品蛋鸡与商品肉鸡各40羽,A免疫方法为只接种新-流二联灭活苗,B免疫方法为接种新-流二联灭活苗的同时注射禽流感抗体,C免疫方法为接种新-流二联灭活苗7 d后注射禽流感抗体,D组为空白对照组,各组均于免前及免后2d、6d、10d、14d、21d、28d、35d采血检测新城疫与禽流感抗体水平.结果发现,商品蛋鸡与商品肉鸡各免疫组,免后新城疫抗体均先开始下降,免后第10 d抗体开始上升,第14 d开始快速上升,第35 d达到最高,蛋鸡组最高达8log2,而肉鸡组最高达7log2.商品蛋鸡组中配合注射禽流感抗体免疫组,禽流感抗体先上升,然后下降,再继续上升,禽流感抗体保持较高的水平,不低于3log2.而未注射抗体组,禽流感抗体先下降,至第10 d下降至2log2以下,然后开始快速上升.而商品肉鸡各组禽流感抗体免后均开始下降,未注射抗体组,下降至第10 d后开始上升,注射抗体组免后第10 d时下降的幅度比未注射抗体组小,且下降至第15 d后才开始上升.说明商品蛋鸡免疫新-流二联灭活疫苗时配合注射禽流感抗体,短期内对机体禽流感抗体水平提升明显,而在商品肉鸡上配合注射流感抗体对机体禽流感抗体水平提升不明显.     

肠炎沙门菌疫苗株Sm24/Rif12/Ssq在蛋鸡体内的定殖规律

为明确肠炎沙门菌疫苗株Sm24/Rif12/Ssq在蛋鸡体内的定殖规律,选取50只海兰褐蛋鸡,于0日龄(出雏当日)滴口免疫1羽份(1×10⁸ CFU/只)Sm24/Rif12/Ssq疫苗(首免),分别于免疫后1、3、5、7d采集咽拭子、泄殖腔拭子以及盲肠和肝脏样品测定疫苗株定殖水平,并于免疫后30 d采集血液测定抗体水平;随后选取30只经过首免的6周龄蛋鸡和30只经过二免的16周龄蛋鸡,分别滴口免疫1羽份(1×10⁸ CFU/只)Sm24/Rif12/Ssq疫苗,即为二免和三免,于免疫后4 d采集泄殖腔拭子,测定疫苗株定殖水平,并于免疫后30、60、100 d采集血液测定抗体水平。结果显示,首免后咽拭子、泄殖腔拭子和盲肠样品中疫苗株载量呈先上升后下降趋势,疫苗株核酸检出率60%～100%,肝脏样品中疫苗株载量呈逐步下降趋势,疫苗株核酸检出率50%-90%,但未从血液样品中检出抗体;二免和三免后泄殖腔拭子中疫苗株核酸检出率为17%～20%,血清抗体阳性率呈逐步上升趋势。结果表明,Sm24/Rif12/Ssq疫苗株易定殖于0日龄蛋鸡肠道,而较难定...     

禽流感疫苗免疫方法对北京油鸡生长发育、免疫效力和屠体性状的影响

本研究主要比较不同禽流感免疫方法对北京油鸡生长发育、免疫效力和屠体性状的影响。试验选用180只1日龄肉用型北京油鸡公鸡,随机分为6个处理组,每组30只,每10只为1个重复。禽流感疫苗H5N1来自2个厂家,注射部位有颈部皮下、胸肌、腿肌3个部位,注射剂量有0.3mL、0.5mL两种。测定0、8、16周龄时鸡只个体重,7周龄ND、H9抗体效价,9、14周龄H5、新城疫(ND)和H9抗体效价,以及16周末胸肌率、腿肌率、腹脂率的变化。结果表明:①禽流感疫苗颈部皮下注射可以获得和胸肌注射、腿肌注射相似的免疫效力,同时应激降低;②禽流感二次重免时可适当降低免疫剂量,即2周龄采用H5N10.3mL,3周龄采用ND-H9二联苗0.3mL,5周龄采用H5N10.3mL,均采取颈部皮下注射方法,可获得较好的免疫效力;③较高的禽流感免疫效力往往伴随着屠体性状的降低。     

禽流感-新城疫重组二联活疫苗口服免疫试验

选择未接种禽流感-新城疫疫苗的黄腹角雉所产蛋,经孵化后,于10日龄选黄腹角雉15只,随机分成A、B、C 3组,每组5只,以点眼接种量的10、15、20羽份,直接口腔滴入禽流感-新城疫重组二联活疫苗rl-H5株口服免疫。分别于接种前1 d和3次接种后15 d经翅静脉采血,通过测定其禽流感和新城疫血凝抑制试验(HI)抗体滴度。结果表明,第2次接种20羽份剂量抗体效价达到峰值,新城疫和禽流感HI抗体均值分别为7.5 log2和5.5 log2。     

白羽肉鸭免疫重组H5亚型禽流感灭活疫苗后体液抗体和细胞因子水平变化研究

选取健康无免疫白羽肉鸭160羽分为A、B、C、D、E五组.A组～D组分别免疫0.5 mL、0.5 mL、0.8 mL、1 mL重组H5亚型禽流感油乳剂灭活疫苗,E组为非免疫对照组.在39同龄,B组1 mL剂量进行二免.免疫后,每隔5d用血凝抑制试验和酶联免疫吸附测定分别监测体液抗体和细胞因子(r-IFN、IL-2、IL-4和IL-8)浓度水平.结果表明,A、B、C、D各组试验鸭在疫苗免疫后体液抗体和细胞因子均出现增长并呈一定相关性,E组无增长趋势.     

不同首免时间对禽流感疫苗HI抗体消长影响的研究

通过HI试验,对雏鸭不同首免时间的禽流感灭活疫苗免疫效果进行监测,为更科学制定鸭免疫程序奠定基础。结果表明:(1)对照组鸭(E组)AI-H5母源抗体1d最高,达5.1log2,次日逐渐下降,于10d降至较低水平。AI-H5母源抗体于19d降至为2log2以下。(2)试验各组于免疫后10～12d抗体水平开始上升,于免疫后15～20d抗体水平达到高峰,并维持18～24d,之后呈缓慢下降趋势,于49d仍能检测到较高的抗体,由此说明,禽流感油乳剂灭活疫苗能诱导机体产生良好的免疫应答。(3)从不同首免时间进行禽流感疫苗免疫接种后的HI抗体效价比较来看,C组(15d首免组)HI抗体效价最佳,D组(20d首免组)HI抗体效价其次,B组(10d首免组)HI抗体效价第三,A组(5d首免组)HI抗体效价较差,因此,应根据雏鸭母源抗体水平选择适宜时间进行禽流感疫苗的首次免疫接种。     

雏鸭重组禽流感（H5+H7）三价灭活苗母源抗体消长规律

为探究雏鸭重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗母源抗体消长规律,确定最佳首免日龄,将试验分为A组(种鸭免疫H5N1 Re-11+Re-12株、H7N9 H7-Re-2株、H5N2疫苗)和B组(种鸭免疫H5N2 rSD57株+rFJ56株、H7N9 rGD76株疫苗);选其孵化后的雏鸭各300羽,分别于1、7、14、21、28日龄时采血,每组随机采集100份样品,通过血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验进行禽流感母源抗体检测。结果显示:两组各亚型母源抗体在1日龄时平均滴度均达最高水平( 7.27log2),且离散程度低( 0.22)。两组雏鸭的禽流感母源抗体阳性率均随日龄增长而逐渐下降,7日龄时,平均滴度在4.26log2以上,群体抗体阳性率在76%以上,其中B组阳性率略高于A组;14日龄时,平均滴度都下降到2.55log2以下,群体抗体阳性率下降到25%以下;21日龄时,平均滴度均在0.43log2以下,群体抗体阳性率下降至1%以下。结果表明,高抗体水平种鸭能够使后代雏鸭具有较高水平的禽流感母源抗体,但母源抗体保护时间较短,重组禽流感(H5+H7)三价灭活苗的最佳首免时间为7～14日龄。本研究为鸭禽流感疫苗免疫策略制定提供了参考。