文心兰育种研究进展

文心兰（Oncidium）又名舞女兰、金蝶兰、瘤瓣兰等兰科文心兰属植物的总称,本属植物全世界原生种多达750种以上（陈璋,2000）,其植株轻巧、花茎轻盈下垂,花朵奇异可爱,形似飞翔的金蝶,极富动感,是世界重要的盆花和切花种类之一。文心兰原生于美洲热带地区,种类分布最多的有巴西、美国、哥伦比亚、厄瓜多尔及秘鲁等国家,其分布地区较广,有热带、亚热带、高山的温带和寒带等。相对其它热带兰花,     

不同外植体对驱蚊草初始培养的影响

以芽、叶片和叶柄为外植体,研究了驱蚊草初始培养中不同的外植体对污染率、死亡率和启动率的影响。结果表明,以叶柄为外植体接种效果最好,污染率和死亡率低,分化出苗的数量最多,有利于驱蚊草组培中无菌体系的建立。     

黑芝麻不同外植体离体培养研究

以黑芝麻无菌苗的下胚轴、幼根、子叶为外植体,以MS+2,4-D1.5mg/L+ZT0.5mg/L为愈伤组织诱导培养基;MS+6-BA2mg/L-IAA0.5mg/L为分化培养基;1/2MS+0.5mg/LNAA+IAA0.25mg/L为生根培养基进行培养.结果表明,幼根能产生少量愈伤组织,尚未分化出苗;子叶愈伤组织能分化出苗,但分化率低;下胚轴愈伤组织不仅可分化出苗(分化率为36%),而且可形成大量具有分化潜力的胚性愈伤组织,分化绿苗的频率可达67%.     

不同光谱能量分布对文心兰组织培养的影响

采用发光二极管(light emitting diode,LED)调制获取不同光谱能量分布的光源,以荧光灯为对照,研究其对文心兰原球茎诱导、增殖及生根组培苗生长的影响。结果表明:红光有利于原球茎的诱导,并促使原球茎产生最高的增殖系数和碳水化合物含量以及最低的分化出芽率;蓝光使原球茎产生最高的蛋白质含量、酶系活力和分化出芽率;单一红光促进文心兰生根苗茎的伸长,但不利于叶片色素的形成;单一蓝光抑制生根苗茎的伸长,促进叶片蛋白质和色素的合成;红蓝光谱分布处理的生根苗的生长量、干重、能效和酶系活力指标均高于荧光灯对照,色素含量与荧光灯对照无显著差异;红光LED促进文心兰原球茎的诱导,蓝光LED促进分化,红蓝光谱构成的LED光源更有利于生根组培苗的正常生长,是替代荧光灯的理想光源。      

不同浓度甲壳素对文心兰生长发育的影响

采用不同浓度甲壳素药液在文心兰正常生长状态下对其进行施肥处理,研究不同浓度甲壳素对文心兰生长发育的影响。结果表明,施用不同浓度甲壳素对文心兰营养生长和生殖生长均具有不同程度的影响。甲壳素浓度较低时,文心兰的植株高度、假球茎高度、假球茎厚度及花穗长度均随甲壳素施用浓度的增加而增加,甲壳素浓度为1 500μg/ml时以上指标均达到最大值,而后呈下降趋势;甲壳素浓度低于1 500μg/ml时,甲壳素施用浓度越高,其出现假球茎及花芽的时间越早,越有利于提高花穗质量。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

培养条件对甘草不同外植体愈伤组织中黄酮形成的影响

[目的]筛选生产次生代谢产物黄酮的最佳外植体和培养基配方及培养条件。[方法]采用L1（4^5）正交试验设计和对比试验设计方法,研究ZT、ABA、Kr、6-BA和NAA5种外源激素在不同培养条件下对由甘草根和芽诱导的愈伤组织中黄酮形成的影响。[结果]测验表明,弱光照条件（100～300Ix）有利于黄酮产量的形成;根诱导的愈伤组织是黄酮产量形成的适宜外植体。F检验表明,5种外源激素对黄酮产量的形成存在极显著差异,对根诱导的愈伤组织中总黄酮含量的影响顺序是：KT〉6-BA〉ZT〉ABA〉NAA;对芽诱导的愈伤组织中总黄酮含量影响顺序是：6-BA〉KT〉NAA〉ABA〉ZT。经过优选获得最佳激素组合为：ABA 1．0mg／L＋KT 2．0mg／L＋ZT 1．0mg／L＋6-BA 1．0mg／L＋NAA 2．0mg／L.[结论]该研究为工业化生产次生代谢产物黄酮提供了理论依据。     

朱砂根外植体消毒及启动培养的研究

以朱砂根优良单株为材料,进行朱砂根外植体表面消毒及启动培养研究,从外植体材料、消毒试剂、消毒流程以及启动培养的基本培养基、植物激素等因素进行试验,通过完全随机试验设计和正交试验设计优化出最佳的外体植消毒流程和启动培养的培养基组合。结果表明,带腋芽茎段外植体的最佳消毒流程是先用75%乙醇消毒50~60 s,再用0.1%Hg Cl2溶液灭菌7 min,其污染率控制在28.9%,成活率达66.7%;朱砂根启动培养的培养基最佳组合为改良MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。该研究结果为朱砂根的组培工厂化育苗奠定重要基础。     

不同细胞分裂素对文心兰试管苗增殖的影响

以文心兰(Oncidium)金西(Onc．Kinsei)品种试管苗为材料，比较了细胞分裂素6-BA、KT、Ad及其不同浓度对文心兰试管苗增殖的影响。结果表明：3种细胞分裂素在与0．2mg／LNAA配合使用时，对文心兰试管苗增殖影响较大，试管苗在不同培养基上产生新芽的时间、增殖系数和生长状况等差异较大。6-EA最适于文心兰试管苗增殖，其使用浓度范围是2．0～4．0mg／L，最大增殖系数可达7．3。而不同浓度的KT和Ad则在此培养条件下均不适合用于文心兰试管苗的增殖。     

不同外植体对红掌初代培养及愈伤组织诱导的影响

[目的]研究红掌优良品种相配套的组培快繁技术体系。[方法]以盆栽红掌新品种‘YNG5’为研究对象,采用附加6-BA 2.0mg/L和2,4-D 0.2 mg/L的1/2MS培养基,探讨了外植体的灭菌方法、材料种类、生理状态及取材部位对红掌初代培养效果的影响。[结果]在红掌叶片、叶柄、腋芽、花序及佛焰苞片5种外植体中,叶片与叶柄的培养效果较好,出愈率可达70%以上;在选取叶片与叶柄作为外植体时,用0.1%HgCl2处理5 min,可获得良好的灭菌效果;采用叶片为外植体时,以展叶5～8 d、不带主脉的幼嫩叶片为宜,采用叶柄为外植体时,以未展开叶、形态学上端的部位为宜。[结论]研究获得了红掌新品种‘YNG5’组织培养的最适外植体种类及灭菌方法,初步建立了红掌初代培养的技术体系。     

高分子树脂膜培养容器在文心兰试管苗培养中的应用

以低成本、高品质试管种苗培养和规模化生产为目的,采用具有高透气性、低透湿性、耐高温和易于成型加工的四碳氟乙烯树脂膜为材料制作新型培养容器（CP）,以文心兰'Aloha Iwanaga'为实验植物材料,在常规培养条件下探讨了树脂膜培养容器在文心兰试管苗生产中的有效性.与传统培养容器三角瓶相比较,CP内生长的试管苗在株高、叶长、叶幅、根数、根长、鲜重、干物重、干物率和叶绿素指数等生长指标上高于常规培养容器（三角瓶）.采用SSR法进行比较（显著水平P≤0.05）,其中在株高、叶长、叶幅、鲜重、干物重等重要生长指标之间存在显著性差异.实验结果表明,使用CP作为培养容器对促进文心兰试管苗的生长和提高其品质效果明显.     

甲壳素对文心兰营养元素的影响

[目的]研究施用不同浓度甲壳素对文心兰营养元素含量的影响。[方法]营养饥饿状态下,施用不同浓度（0、500、1000、1500、2000μg/L）的甲壳素,测定文心兰叶片和假球茎中营养元素含量的变化。[结果]甲壳素浓度为1500 μg/L时,文心兰叶片中的N、P、Fe、Mn营养元素含量最高,特别是Fe、Mn表现尤为突出,极显著高于其他处理;在假球茎中N、K、Ca、Mg的含量最高,其中K、Ca、Mg的含量极显著高于其他处理,此外,Zn虽然在叶片中的含量差异表现不明显,但其在假球茎中含量的变化却极显著,处理浓度越大含量越高。[结论]营养饥饿状态下,施用不同浓度的甲壳素对文心兰叶片和假球茎中营养元素含量影响显著,但对叶片中营养元素含量的影响与假球茎中营养元素含量的影响不一致,且存在极显著差异。     

秋水仙素对文心兰离体诱变的影响

以秋水仙素为诱变剂,结合组织培养技术,对文心兰丛生芽和原球茎进行诱变试验,并应用分子标记技术检测诱变后代的变异情况.结果表明：培养基添加秋水仙素混合培养法是文心兰丛生芽诱变的最佳途径,以添加500mg·L^-1的秋水仙素诱导10d效果最佳,植株变异率高达26.7%,变异植株类型包括植株粗壮、多叶、叶片变宽、变厚、矮化、叶片线艺等;经5～6次继代培养,部分变异株系仍保持稳定遗传性状,其中筛选出的稳定绿叶金边、金叶绿边变异株系RAPD 标记表明其在DNA 水平上发生了变异,为文心兰育种提供了新的方法和思路.     

文心兰花梗诱导及继代增殖培养试验

以文心兰的花梗腋芽为试验材料,选择适宜的灭菌方式,研究不同切割方式和激素浓度对继代增殖的影响。结果表明,适合文心兰花梗腋芽的灭菌方式是将70%酒精倒入小烧杯浸泡30 s,无菌水冲洗3次,倒入0.1%升汞浸泡约10 min,再用无菌水冲洗5次,然后剥去外层包叶,切成1～2 cm花梗腋芽接入培养基中。在继代培养中,只切去叶片2/3的情况下,培养基MS+6-BA 2 mg.L-1+NAA 1 mg.L-1为佳。从生长点纵切的方式培养基宜用MS+6-BA 2 mg.L-1。从生长点纵切的方法比只切去叶片2/3的方式增殖倍数较高。     

不同栽培基质对文心兰组培苗生长的影响

[目的]筛选适宜海南省文心兰组培苗移栽成活和生长的栽培基质,为文心兰产业化生产提供参考依据.[方法]以文心兰切花品种南茜(Oncidium Gower ramsey)组培苗为试材,探讨椰纤、椰糠、树皮、河沙、泥炭、珍珠岩、椰糠∶泥炭∶河沙(2∶2∶1)及水苔对文心兰组培苗移栽成活率和生长发育的影响,筛选最适合文心兰组培苗移栽成活的基质.[结果]文心兰组培苗在椰糠∶泥炭∶河沙(2∶2∶1)、泥炭、水苔及椰纤中移栽成活率较高,分别为93.0％、93.0％、92.0％和90.9％,四者的移栽成活率间无显著差异(P＞0.05,下同);文心兰组培苗在椰糠∶泥炭∶河沙(2∶2∶1)及椰纤基质中生长发育最好,其叶长、叶宽、叶片SPAD及假球茎的长、高、厚、平均假球茎数等综合生长指标最优.[结论]椰纤栽培基质来源方便,使用前处理省时,成本低,移栽人工效率高,易于苗期管理和大田移栽缓苗,适合在海南省文心兰产业化育苗中推广使用.     

外植体对甘薯茎尖培养与植株再生的影响

对甘薯茎尖外植体的取材大小,不同取材季节,不同消毒处理及不同生育时期的试验结果表明,外植体的大小对其茎尖离体培养的成苗率及脱毒率有显著差异,尤其是取材的季节和不同生育时期,对甘薯茎尖培养的效果具有明显的差异,该试验以1~4月份取薯块催芽的外植体材料是甘薯茎尖培养较为适宜的培养时间,其污染、死亡率为15%;茎尖成活率85%以上;品种成苗率可达86%。     

外植体取样时间对沙子空心李诱导培养的影响

【目的】研究取样时间对沙子空心李诱导培养的影响,为沙子空心李组织培养技术提供理论依据。【方法】以不同时间段的沙子空心李半木质化茎段为外植体,经过2种消毒方式后进行诱导培养。【结果】结果表明,使用0.1%HgCl₂进行消毒时,污染率最低,随着外植体取样时间的推移,诱导死亡率逐渐降低,4月25日取外植体时,死亡率与死亡率最低,成活率最高,分别为4%、10%和86%,与2%NaClO消毒效果无明显差异,但其余3次取样时,2种消毒剂的消毒效果差异明显,且0.1%HgCl₂明显优于2%NaClO。【结论】沙子空心李的适宜消毒方式是D2：75%酒精消毒10 s+0.1%HgCl₂消毒5min;诱导组培的外植体适宜取样时间是4月下旬。     

外植体类型和植物生长调节剂浓度对红金银花愈伤组织诱导的影响

以红金银花(Lonicera japonica var.chinensis)顶芽、当年生幼茎和叶片为试验材料,利用仿自然气候的培养条件,采用L9(34)正交试验设计,考察了外植体类型和培养基中添加植物生长调节剂的浓度对愈伤组织诱导的影响.结果表明,外植体类型对红金银花组织培养的污染率及愈伤组织的诱导率均有影响,以顶芽为外植体时污染率低,愈伤组织诱导率高,为最佳外植体.优化后的愈伤组织诱导培养基中KT、6-BA、α-NAA浓度分别为1.5、1.5、0.5 mg/L.     

前培养和外植体部位对芦笋组培苗生育的影响

组培材料采用顶外植体时,茎形成率高于茎中部侧芽外植体和基部侧芽外植体,而中部侧芽外植体对诱导发根强于顶芽和基芽外植体,以NAA1.0mg+KT0.01-0.05mg/l 的培养基生根效果最佳。     

苗龄、基因型和外植体类型对黄瓜离体器官发生的影响

研究了苗龄、基因型和外植体类型对黄瓜离体器官发生的影响。结果表明 ,在水琼脂培养基上萌发的 4个黄瓜材料的种子 ,在萌芽后 1～ 4天时接种的子叶外植体出芽率及每外植体出芽数均较高 ,5天时明显降低 ,以 3～ 4天时最为合适。试验的1 2个不同基因型黄瓜材料愈伤诱导率均较高 ,且均能出芽。出芽率可大致分为高 (≥70 % )、中 (40 %～ 70 % )、低 (≤ 40 % ) 3类 ,以 T5 5 ,M9,P1 7出芽率最高 ,分别为76 % ,71 %和 73% ;以 K5 5 ,S8,S9×Q2 2出芽率最低 ,分别为 2 5 % ,39% ,40 %。各材料中 T5 5 ,P1 7,P1 7×Q2 2每外植体出芽数最多 ,分别为 3.40 ,3.43,3.82个。长春密刺和 K6 6子叶、下胚轴、胚根和真叶等外植体的愈伤诱导率均较高 ,但只有子叶出芽率和每外植体出芽数较高 ,下胚轴明显降低 ,真叶和胚根均未出芽