新城疫单抗酶联试剂盒对鸡群中强毒感染的监测试验

用新城疫(ND)单抗酶联试剂盒检测从疑有新城疫病毒强毒感染的鸡群中采集泄殖腔棉拭样品68份,检出阳性20份。随机对其中15份样品进行病毒分离,结果阳性符合率为100％(15/15)。结果表明,该试剂盒特异性强,灵敏度高,诊断快速,易于基层推广应用。为ND的确诊和免疫鸡群中NDV强毒感染的监测提供了新方法。     

应用单抗ELISA试剂盒检测免疫鸡群新城疫强毒感染

新城疫（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅ,ＮＤ）是鸡的一种烈性病毒性传染病〔４〕。尽管国内外已知的新城疫病毒（Ｎｅｗｃａｓｔｌｅｄｉｓｅａｓｅｖｉｒｕｓ,ＮＤＶ）毒株达数百种之多,毒力差异很大,但是其血清型只有一个。由于疫苗的广泛使用,从现场免疫鸡群...     

应用新城疫单抗酶联试剂盒快速诊断绿孔雀新城疫

应用新城疫单抗酶联试剂对一群发生疑似新城疫的绿孔雀进行快速诊断，采用肛门泄殖腔棉拭取样方法对病孔雀取样，应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检出多数病死孔雀新城疫强毒抗原阳性，诊断该群绿孔雀发生了新城疫，用流行病学调查，临床症状观察，病理剖检，病毒分离，鉴定和毒力试验的经典诊断方法及新城疫疫苗紧急防疫效果观察验证表明，新城疫单抗酶联试剂盒诊断孔雀新城疫简便，快速，准确。     

应用新城疫单抗酶联试剂盒快速诊断绿孔雀新城疫

应用新城疫单抗酶联试剂对一群发生疑似新城疫的绿孔雀群进行快速诊断,采用肛门泄殖腔棉拭取样方法对病孔雀取样,应用双单抗夹心ＥＬＩＳＡ试验检出多数病死孔雀新城疫强毒抗原阳性,诊断该群绿孔雀发生了新城疫。用流行病学调查、临床症状观察、病理剖检、病毒分离、鉴定和毒力试验的经典诊断方法及新城疫疫苗紧急防疫效果观察验证表明,新城疫单抗酶联试剂盒诊断孔雀新城疫简便、快速、准确。     

应用单抗EL试剂盒检测免疫鸡群新城疫强毒感染

A ELISA kit based on monoclonal antibodies was used to detect the infections of virulent Newcastle disease virus (NDV) in the experimentally immunized SPF chicken flocks. When cloacal samples from chickens infected with different pathotypes of NDV were assayed, only infections with virulent strains could be detected during the days 3～16 post-challenge, while infections with commonly used mesogenic and lentogenic vaccine strains, it couldn′t be detected. The results in this presentation indicated that the ELISA kit could be used for detecting and monitoring virulent NDV infection in chicken flocks.     

免疫鸡群中新城疫强毒感染流行趋势的探讨

采用运用ND单抗酶联免疫试剂盒作为ND流行病学调查手段,对本地区部分免疫鸡群中ND强毒感染进行监测,结合测定个体HI抗体,探讨免疫鸡群中ND强毒感染流行原因和趋势,为制定合理的ND控制计划,尤其在改进免疫程序、降低群体感染水平方面提供依据。     

免疫鸡群新城疫病毒强毒株感染的实验研究

ＳＰＦ试验鸡在８、２５日龄时接受了２次新城疫基础免疫，６０日龄时分别以标准新城疫病毒强毒株，中等毒力和弱毒疫苗株人工感染攻毒。应用单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒，对所有试验鸡泄殖腔棉拭样品进行了３０ｄ的连续检测。结果表明：从攻毒后第３ｄ起强毒株试验组检测出多例阳性，检出高峰分别在攻毒后第４￣６ｄ和１１￣１５ｄ，与鸡群症状表现的时间相一致；中等毒力和弱毒疫苗株对照组均呈检测阴性。本研究证明单抗ＥＬＩＳＡ试剂盒     

免疫鸡群感染新城疫的诊断及其对策

本文报道免疫鸡群感染新城疫后,产蛋下降24%和HI 抗体水平上升4倍以上,并继发感染大肠杆菌而死亡。对此鸡群进行接种NDI 系苗表明,接种组产蛋率很快由56%恢复到70%,而对照组无恢复现象,这为免疫水平不高(抗体效价相似文献   

单抗夹心ELISA检测免疫鸡群新城疫病毒

用SPF鸡胚将送检的免疫鸡群泄殖腔棉拭样品盲传一代,再用新城疫单抗夹心ELISA对F1代尿囊液进行新城疫病毒(NDV)快速检测,同时用世界动物卫生组织(OIE)推荐的NDV分离及鉴定的方法加以验证。通过对3423份样品的检测,检出阳性样品453份,阴性样品2959份,可疑样品11份,两种方法的阳性符合率为99．3％,阴性符合率为99．7％。对全部阳性样品进行病毒分离,经血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验证明均含有新城疫病毒(NDV),再将全部阳性样品分离物进一步作毒力鉴定,结果有强毒力株、中等毒力株及弱毒力株,因此用新城疫单抗夹心ELISA检测免疫鸡群泄殖腔棉拭样品F1代尿囊液新城疫病毒快速、准确率高,呈阳性者不全是NDV强毒力株感染,还有NDV中等毒力株或弱毒力株感染。     

新城疫病毒单克隆抗体研究Ⅲ酶标单克隆抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原

应用双抗体ELISA夹心法检测禽类新城疫病毒(NDV)抗原,用单克隆抗体或多克隆抗体包被固相载体,将活化的40孔板作为捕捉待检新城疫病毒抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)与单克隆抗体的结合物作为示踪抗体,比较了单克隆抗体和多克隆抗体的捕捉效率.结果表明,NDV单抗2C₁₂、4H₁₀优于血清IgG,同时确定了双抗体ELISA夹心法对不同日龄健康鸡组织产生背景反应的O.D.值基本参数,以X+2SD为判定阈值.捕捉抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为500～400μg/ml;示踪抗体2C₁₂、4H₁₀的工作浓度为1:3000～1:2000,ELISA夹心法的灵敏度可达4μgNDV蛋白/ml;对NDV不同毒株感染鸡各脏器的NDV检出率为:肾100%、肺90%.证明用双抗体ELISA夹心法检测鸡新城疫病毒抗原特异,敏感,是禽类新城疫病毒检测的新途径.     

肉仔鸡强毒新城疫的诊断与治疗

近年来,河南省肉仔鸡发生新城疫的病例逐渐增多,其临床症状和剖检病变与低血糖综合征、药物中毒等极为相似,容易发生误诊,延误治疗时机。为此,笔者将近年肉仔鸡新城疫的发病特点和治疗方法进行了总结。     

免疫鸡群暴发新城疫的诊断方法

通过简要论述新城疫发生的原因,并重点论述发生新城疫的诊断方法,使养殖者在养殖过程中能够通过文中的诊断方法,尽快找到传染源,使其免遭更大的损失。     

单抗标记检测新城疫病毒免疫胶体金试纸条的研制

利用柠檬酸钠还原氯金酸,形成胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒标记单克隆抗体4E8,用兔抗鼠二抗喷洒在硝酸纤维素膜上作为对照线,用另一株单抗5E6作为检测线,制备成胶体金试纸条。用试纸条检测120份泄殖腔样品,结果与病毒增殖后HA法测得的结果符合率为95.8%,HA效价在1∶2以上,试纸条均能检测为阳性,与其他病毒的阳性血清没有交叉反应,且室温下可有效保存6个月。试纸条应用方便、快速,适合临床推广以及流行病学调查。     

应用聚乙二醇介导的单抗夹心ELISA监测湖南新城疫病毒强毒感染

采用新城疫病毒强毒快速检测法聚乙二醇介导的单抗夹心酶联免疫吸附测定（ELISA）对湖南省新城疫病毒（NDV）强毒感染进行了监测，共检测来自30个新城疫发病群和28个无明显新城疫病症群共58个禽群的泄殖腔棉试样品1719份，并对97份样口进行了病毒分离鉴定。结果表明，NDV强毒感染的禽种多，易与其他疫病混合感染，免疫鸡群在发生形式上呈非典型化趋势，养禽场普遍存在NDV强毒且临诊健康群有一定比例的强毒感染率，这些是目前ND难以控制和净化的主要原因。结果还表明，所采用的ELISA是监测NDV强毒感染并指导免疫的可靠的快速检测方法。     

新城疫的分子生物学诊断技术

随着新城疫病毒(NDV)分子结构、分子结构与致病性关系、强弱毒株分子结构差异等研究的深入,为新城疫(ND)分子水平上的特异性诊断技术,特别是为从病原体检测角度建立特异性诊断技术奠定了基础。其中,发展比较快的有单克隆抗体技术、RNA指纹图谱技术、核酸探针技术和基因片段的体外扩增技术等。这些技术不仅用于新城疫病毒的检测、鉴定、特性研究及致病型的确定等,还可以据此追踪病毒的来源及流行情况。笔者仅就新城疫分子生物学诊断常见技术目前的研究情况简要综述如下。     

新城疫病毒单克隆抗体的制备及鉴定

以纯化的新城疫病毒ND35免疫Balb/C小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合.经筛选,获得5株能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株.特异性试验表明,7G5单克隆抗体仅与ND35病毒株反应,而不与禽流感病毒AIV(H5亚型)、产蛋下降综合症病毒(EDS-76V)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病毒(IBDV)、马立克氏病毒(MDV)、禽肺病毒(APV)反应.通过Western-blot对7G5单克隆抗体进行鉴定,发现其在相对分子质量47 500～62 0130之间出现条带,表明其与NDV抗原有特异性结合.这5株单克隆抗体属于IgGl、IgG2b亚类,κ轻链.     

新城疫弱毒联苗对雏鸡新城疫免疫效果的观察

本试验雏鸡在相同饲养管理条件下,14日龄时分别用N79单苗、N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗接种对照组(ND)、ND+IB组、ND+IBD组试验雏鸡,接种后的第7天、14天和21天,通过HA和HI实验,随机抽样测定其血中抗新城疫抗体的含量及其消长,发现N79-H120联苗、N79-IBD(三价)联苗产生的抗鸡新城疫的抗体效价明显低于N79单苗,差异极显著(P＜0.01).