家蚕抗菌肽的诱导及其抑菌作用研究

家蚕抗菌肽是存在于家蚕及蚕蛹的血淋巴内具有抗菌活性的多肽物质,在家蚕的天然免疫中起到至关重要的作用。采用不同剂量的γ-射线照射家蚕、对家蚕进行饥饿、电击和注射大肠杆菌等诱导处理后,提取家蚕抗菌肽,测定其抑菌效果。结果表明：以上的处理均能有效诱导抗菌物质的产生,其中饥饿法处理的家蚕产生抗菌肽的抑菌活性最强。本试验利用家蚕生产抗菌肽为家蚕的综合利用提供了一种新的途径。     

三步层析法分离毕赤酵母工程菌中表达的新疆家蚕抗菌肽

通过离子交换层析、疏水作用层析和分子排阻层析等三步层析的方法,分离纯化了毕赤酵母工程菌所表达的新疆家蚕抗菌肽.结果表明,三步层析后,SDS电泳显示单一条带,分子量约为7.0 kDa;所纯化的新疆家蚕抗菌肽具有较强的抗菌活性.该纯化工艺的建立,为新疆家蚕抗菌肽在饲料添加剂、农用抗生素等方面的广泛应用奠定基础.     

抗菌肽的研究进展

介绍了抗菌肽的分类、分子结构、理化性质和作用机理,及其在各方面研究中的应用。     

鲶鱼部分组织抗菌肽抗菌功效的研究

采用乙酸提取法提取鲶鱼表面黏液、皮肤、鱼肉、内脏等不同组织抗菌肽,采用双缩脲法测定蛋白质含量;以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为受试菌,采用滤纸片法,比较不同组织抗菌肽对不同菌种的抗菌效果,结果表明：各组织蛋白质含量分别为黏液0.336mg/mL、皮肤1.629mg/mL、鱼肉10.284mg/mL、内脏0.562mg/mL。内脏提取物的抑菌效果最好,且对枯草芽孢杆菌抑制效果最佳,抑菌圈直径达10.73mm。     

抗菌肽产生菌的推理选育及抑菌特性分析

对一株抗菌肽产生菌GL08进行选育,采用紫外诱变结合次级代谢产物抗菌肽作为筛选因子的方法,筛选出一株效价比出发菌株提高30%的突变菌株。将筛选出的高产菌株进行发酵研究,发现其分泌的抗菌肽不仅效价稳定,而且抗菌谱广,对多种革兰氏阳性和阴性菌均有较好的杀菌活性。将此菌发酵产物制成粉末制剂,用不同的温度、pH、蛋白酶和有机溶剂处理,发现其热稳定性好,对不同的pH、蛋白酶和有机溶剂均有一定的耐受性,且在室温可长期储存且效价不变。通过菌种选育和对抗菌肽制剂的特性分析,发现该抗菌肽制剂可有望开发成新型饲料添加剂。     

鸡白细胞抗菌肽的体外抗菌活性比较

应用氯化铵裂解、超声波破碎、离子交换层析和SDS—PAGE电泳等方法,对不同品种鸡白细胞中的抗菌肽成分进行了初步提取和分离,再用反相高效液相色谱法进一步分离和提纯．经微量琼脂糖弥散法初步检测体外抗菌活性后,利用微量稀释培养法分别检测了粗提抗菌肽对7个受试菌株的最小抑菌浓度（M1C）．结果表明,在鸡白细胞颗粒中存在着天然抗微生物活性物质,对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有抑制活性,且不同品种鸡粗提抗菌肽的体外抑菌浓度存在显著差异,其中罗曼褐壳蛋鸡粗提抗菌肽的抗菌活性最高,其次是三黄肉鸡,而罗斯308肉鸡较差．     

草鱼肠道抗菌肽的提取及体外抑菌效果初步研究

将新鲜草鱼肠道组织经超声破碎、乙酸浸提后,再经Sephadex G50和Sephadex G25 凝胶柱过滤层析,收集各组分,采用药敏纸片法检测各组分的抗菌活性.收集具有抗菌活性的组分,经Tricine SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色后分析获得1条较明显的蛋白带,相对分子质量约为6 200.该抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜水气单胞菌均表现出较强的抗菌活性,说明抗菌肽对维持鱼类肠道微生物区系稳定具有重要作用.     

不同菌源诱导免疫的黄粉虫抗菌肽提取物对26种病原菌抑菌活性分析(英文)

[目的]探索经不同菌源诱导黄粉虫所产生的免疫物质——抗菌肽对病原菌是否存在活性差异。[方法]对饥饿后黄粉虫幼虫通过饲细菌、针刺饲真菌(放线菌)法产生诱导免疫反应,研磨、冷冻离心法获得抗菌肽提取物,采用抑菌圈法测定其对26种病原菌抑菌活性,利用三等分法划分四种类型评价抑菌活性及抑菌谱。[结果]经不同菌源诱导黄粉虫所产生的抗菌肽抑菌活性及抑菌谱上均存在明显差异。[结论]生防菌源在诱导昆虫体液免疫物质——抗菌肽表达上具有明显优势。     

鹿白细胞中抗菌肽的提取及抗菌活性鉴定

应用NH4Cl裂解、超声波破碎、离子交换层析和蛋白质电泳等方法,对鹿白细胞中的抗菌肽成分进行了初步提取和分析,经平板抑菌试验初步检测了提取物的抗菌活性后,采用微量反应板法进行了最小抑菌浓度（MIC）测定.结果表明,在鹿白细胞颗粒中存在着天然抗微生物活性物质,其主要活性成分为多肽部分;MIC试验显示,该提取物对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌和真菌均具有抑制活性.     

家蚕肠道感染细菌后6种抗菌肽基因表达的变化

【目的】研究感染绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)后,家蚕中肠和脂肪体中6种抗菌肽基因表达的变化,为家蚕肠道免疫研究提供一定的理论依据。【方法】给家蚕喂食感染绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌,以喂生理盐水为对照,利用半定量RT-PCR方法,检测感染不同时间(1,2,4,8,16,24h)后中肠和脂肪体中6种抗菌肽基因表达的变化。【结果】喂食绿脓杆菌1,2h后,中肠中抗菌肽Gloverin2、Lebocin、CecropinB6、CecropinD和Moricin的相对表达量显著上调;喂食金黄色葡萄球菌1,2,4h后,中肠中6种抗菌肽的相对表达量均显著上调。在脂肪体中,感染两种细菌后,仅抗菌肽CecropinD、Moricin和Attacin2相对表达量的变化较为显著。【结论】家蚕在感染不同细菌后所诱导的免疫机制不同。细菌经由口器进入家蚕肠道,可同时引起上皮免疫反应和体液免疫反应。     

特用蚕品种天然丝胶蛋白的乳化活性研究

[目的]通过品种生产来直接获得大量、优质全天然丝胶蛋白质原料。[方法]对"绿S"和"白S"2种全天然丝胶茧品种及现行推广普通蚕品种"菁松×皓月"的丝胶蛋白乳化活性进行了比较分析。[结果]试验表明,"绿S"和"白S"2个丝胶茧品种的丝胶蛋白含量极高,达95%以上,分别是对照品种茧的3.47倍和3.53倍,可以称之为全天然丝胶蛋白质;研究还表明,"绿S"品种的乳化特性也明显高于"白S"和"菁松×皓月",在保健食品领域具有更为优越的利用价值。[结论]该研究可为家蚕特用品种大量生产全天然、纯丝胶在非绢丝产业的广泛应用提供依据。     

小蚕人工饲料育对蚕卵生理生化及蚕生长发育的影响

以家蚕原种为研究材料,探讨小蚕用人工饲料育及继代中,蚕生长发育、蚕卵蛋白质质量分数及SOD和CAT活力的变化情况．结果表明：（1）932和芙蓉经过3代的选择,疏毛率分别从14．6％和9．4％提高到52．4％和53．8％,存活率从20．5％、19．2％提高到38．2％、32．0％;而湘晖、7532选择效果不明显．（2）人工饲料育的湘晖和7532的卵蛋白质质量分数都比桑叶育低;而932和芙蓉三代的卵蛋白质质量分数分别保持在52．50～55．00和41．50～52．50mg／g,与桑叶育基本保持不变．（3）蚕卵的SOD和CAT的活力与蚕品种和饲料有关,人工饲料育蚕卵的SOD和CAT活力比桑叶育高．     

新疆北部地区(北疆)苜蓿属植物秋眠性的研究

以紫花苜蓿栽培品种为对照,对新疆北部地区(北疆)28份四倍体苜蓿属植物种群即紫花苜蓿(Medicago sativa)、黄花苜蓿(M.falcata)、多变苜蓿(M.varia)的秋眠性进行了研究.结果表明,北疆苜蓿属植物种群和国内紫花苜蓿种群相对秋眠性等级值水平为1～3级,其中野生种群表现为极秋眠性(1级),反映了中国苜蓿种质资源蕴藏着较强的抗寒性种质.针对我国苜蓿属植物资源研究现状和国际研究趋势,提出了加强秋眠性研究的建议.     

雄蚕品种夏华×平8夏季饲养试验研究

引进雄蚕品种夏华×平8在实验室进行对比试验。结果表明:雄蚕品种夏华×平8综合性状总体较优,但产茧量有待提高。     

新疆泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法研究（摘要）

[目的]寻找一种有效的泥火山土壤宏基因组DNA的提取方法。[方法]分别采用CTAB法、SDS加酶法、实验室改进法、试剂盒法提取泥火山土壤宏基因组,比较4种方法的提取效果。[结果]试剂盒法的提取效率最高、纯度最好;实验室改进法次之;SDS加酶法提取量最多。实验室改进法获得的DNA,稀释10倍可直接用于PCR扩增。[结论]从经济和DNA质量的角度考虑,实验室改进法可作为新疆泥火山土壤宏基因组DNA提取最有效的方法。     

新疆4种猪毛菜属植物核型分析

采取常规根尖压片法对4种新疆猪毛菜属植物的染色体数目和核型进行了分析.结果表明,长柱猪毛菜体细胞染色体数为18,核型公式为：2n=2x=18m,属1A核型;紫翅猪毛菜体细胞染色体数为18,核型公式为:2n=2x=16m+2sm,属2A核型;短柱猪毛菜体细胞染色体数为18,核型公式为：2n=2x=16m+2sm,属2A核型;钝叶猪毛菜体细胞染色体数为54,核型公式为：2n=6x=48m+6sm,属2A核型.除钝叶猪毛菜为六倍体外,其他3种均为二倍体.根据Бочанцев.В.П.基于形态学特征建立的分组系统,这4种猪毛菜均属于梯翅蓬组,为演化地位较高的类群,而核型分析结果表明,长柱猪毛菜核型上更接近于较原始的类群,紫翅猪毛菜、短柱猪毛菜和钝叶猪毛菜核型地位与所属组的演化地位相符.     

饲养天蚕温度与幼虫生长发育的研究

采用20℃、25℃和30℃,稚蚕1-3龄期,相对湿度70％,大蚕4～5龄期,相对湿度75％,饲养天蚕幼虫,探讨天蚕幼虫在不同温度下的食叶量、消化量以及消化率,对天蚕幼虫的生长发育速度以及茧质等方面进行试验调查。结果表明：25℃区的各项指标优于30℃区和20℃区。5龄期叶丝转化率,雌、雄平均茧层率25℃区8．0％〉30℃区7．5％〉20区6．7％。可确认适宜的饲养温度：1-3龄的稚蚕为25℃～28℃,湿度70％;4～5龄的大蚕为22℃-24℃,湿度为75％。     

新疆设施栽培黄瓜内生细菌研究

[目的]研究新疆设施栽培黄瓜内生细菌,寻求安全有效的生物防治措施控制瓜类病害。[方法]对新疆设施栽培的黄瓜苗各组织的内生细菌进行了分离,并对黄瓜内生细菌的菌群组成和菌群密度进行了研究。[结果]黄瓜不同组织内生细菌的数量有所不同,根中最多（平均含量在2.38×105 CFU/gfw）,其次是叶片（1.12×105 CFU/gfw）,茎中较少（2.73×103 CFU/gfw）。不同品种中内生细菌种群密度差别不大,内生细菌含量为7.96×104～1.51×105 CFU/gfw。菌群由芽孢杆菌属、黄单胞菌属、欧文氏菌属、土壤杆菌属及短小杆菌属等组成,其中芽孢杆菌为优势种群,约占总分离菌株的51.9%,菌群多样性在不同品种间差异不显著。[结论]为寻找瓜类病害的生物拮抗因子奠定了基础。     

新疆婆罗门参属(Tragopogon L.)植物的研究

本研究对新疆境内的婆罗门参属植物作了分类和地理分布的研究。整理出该属在新疆有18种,其中土耳婆罗门参(Tragopogon turkestanicus S.Nikit.ex Pavl.)为分布新记录。并对该属植物作了外部形态的比较,认为总苞片、花和果实的形态特征是婆罗门参属植物的主要分类依据。     

家蚕人工饲养配方研究

比较四种成分不同的人工饲料配方,其饲料成本、疏毛率、蚕体生长发育及防腐性能均有明显 的差异。用豆腐渣、乙醇处理豆饼粉、甲醇处理豆饼粉及未处理豆粉配制成人工饲料饲养小蚕,收蚁后 ４８ ｈ的疏毛率分别为６８．２％,８４．７％,９５．４％和８０．９％,结果表明以乙醇和甲醇浸提处理后的豆饼粉配 制人工饲料,蚕的疏毛率和生长发育速度均有显著改善,其中以甲醇处理为最好。