大豆球蛋白基因表达载体的构建及对桑树的遗传转化

为探讨植物转基因技术在桑树品质改良上的应用途径,构建了含大豆球蛋白亚基（ＡｌａＢｌｂ）基因的表达载体,将其转入根癌农杆菌后,用农杆菌介导法转化桑树叶盘与茎尖,经卡那霉素抗性筛选培养,再生形成了不定芽及试管幼苗,ＰＣＲ检测证实ＡｌａＢｌｂ亚基基因已转入桑树。     

桑树原生质体培养再生植株

以桑籽经无菌继代培养的无性繁殖系叶片为材料，酶解分离得到原生质体；在Ｋ８ｐ液体培养基中，进行黑暗、静止、浅层培养，第４天细胞开始分裂，１０天以后形成细胞团；转移到弱光下培养，每隔１０天添加Ｋ８ｐ新鲜低渗培养液，经５－６周培养后形成大小不一的细胞团和小愈伤组织，转到含６－ＢＡ、ＮＡＡ的ＭＳＢ固体培养基上增殖培养，选取其中结构紧密、呈米黄色的愈伤组织在附加６－ＢＡ和ＮＡＡ的ＭＳＢ培养基上进行器管分化；在１／２ＭＳ附加ＩＢＡ的培养基上进行根的诱导，获得桑原生质体再生植株。     

TDZ在木本植物再生中的应用趋势及桑树中的前景

TDZ(thidiazuron,噻二唑苯基脲)是人工合成的苯基脲衍生物,在植物(尤其是木本植物)的愈伤组织诱导、芽的再生、体细胞胚胎发生、原生质体培养等过程中具有重要的作用,被广泛应用于植物组织培养。桑树作为一种多年生生态、经济型木本植物,其多用途综合利用已成方兴未艾之势。随着桑树基因组测序的完成,桑树转基因体系已成为制约桑树功能基因组研究的瓶颈。鉴于桑树再生频率相对较低,本文在分析了TDZ促进木本植物再生的基础上,提出TDZ在建立和完善桑树再生体系中的作用和应用前景。     

桑树同工酶研究进展与应用

桑树同工酶研究进展与应用湖南省蚕桑科学研究所靳永年同工酶（Ｉｓｏｚｙｍｅ）是生物体内代谢的调节者，人们通常把生物催化作用相同（即做同样的工），而其分子结构、理化性质和生理功能不同的酶的分子类型，称为同工酶。早在１８９５年，Ｆｉｓｃｈｅｒ就初步提出了同...     

桑树多倍体及其育种研究进展

列举了天然多倍体桑的种类,我国是桑多倍体资源最丰富的国家,迄今发现的有3倍体、4倍体、6倍体、8倍体和22倍体,还有天然单倍体。阐述了多倍体桑的性状,其中以3倍体的经济性状较好。总结了人工诱导4倍体的方法,其中以0.2％为中心浓度的秋水仙碱注射膨芽、生长点和处理子叶展开期的实生苗较有效。说明了4倍体、2倍体间杂交和诱导二倍化性配子培育三倍体的技术问题。展望了今后桑的多倍体育种前景。     

我所桑树育种研究进展与实践体会

改革开放以来,先后育成湘７９２０、澧州７号等三个桑树新品种,经大面积推广应用,显示出优良的综合经济性状,总结出加强技术交流与协作,正确选择亲本,掌握杂交规律,突出“优质”育种目标及改进育种程序等五项加快育种进程的关键性环节。     

桑树基因工程研究进展

近几年来，植物基因工程的研究进展十分迅速，在植物抗病、抗虫、抗除草剂和改变植物某些成分方面都已得到不少转基因植株，有的已经建立品系，为提高作物的产量、抗逆能力，改进农作物品质，进行快速、优质、稳产的优良选育提供了新的途径，作为生物技术的一个重要部分，植物基因工程的研究和开发利用也早已被列入我国的高技术研究计划之列。     

一种注射桑树冬芽转化方法的初探

桑树是一种重要的经济林木,在茧丝、生态、食品等行业都具有重要地位。传统的桑树研究采用杂交和多倍体育种方法,周期长,且很难定向选育。为此,本文通过注射冬芽的方法,将携带β-葡萄糖苷酸酶(GUS)和卡那霉素(Kan)报告基因的重组根癌农杆菌接种转化72C002果桑冬芽。从GUS染色结果、特异性片段的PCR检测和卡那霉素抗性筛选的培养初步证明了外源报告基因GUS可能已转入桑树,这为今后进一步的桑树转基因技术,及其相关的基础和应用研究提供探索和参考。     

不同桑树品种的叶片培养及植株再生试验

以MS为基本培养基,添加一定量的植物细胞分裂素和生长素,进行12个桑品种的叶片培养.12个桑品种叶片在离体条件下都能生长,分化出不定芽.且经发根处理形成完整植株.不定芽分化率,品种间差异呈极显著,由高到低依次为:璜桑14号、707、吉湖4号、红沧桑、新一之濑、辐1号、湖87号、湖199号、湖197号、育151号、7307、湖32号.     

桑树种群遗传结构变异分析

基于探讨桑属植物种群间遗传变异规律 ,采用显性分子标记RAPD技术 ,对我国桑树现行分类的 15个种、4个变种及近缘属的 4 8份供试材料进行了桑属种群的遗传结构分析。结果表明 :桑树具有丰富的遗传多样性 ,多态位点百分率为 78 95 % ;Nei′s基因多样性指数 (h)与Shannon多样性指数 (I)具有相同的群体遗传多样性评价结果 ,即种群组成差异越大 ,h与I指数越大 ,桑属种群的h指数为 0 1893,I指数为 0 30 91;桑属种群总基因流值Nm<1(0 5 2 2 0 ) ,基因分化系数Gst为 0 4 75 3;AMOVA分析表明种群内的变异百分率为 72 6 5 % ,种群内的变异大于种群间 ;UPGMA聚类结果与基因流值、基因分化系数有密切的关系     

桑树遗传转化的受体细胞及其再生

以近15年来国内外桑树遗传转化研究为主线,结合植物基因工程的研究动态,从分子生物学和细胞组织学方面阐述了桑树受体细胞与根癌农杆菌的相互作用和TDNA在感染细胞中的转移过程。用植物形态发生的基本原理分析了叶盘转化细胞再生的主要方式,并对植物细胞的感受态、农杆菌完成贴壁反应的先决条件、TDNA的穿壁通道进行了阐述。     

多年生黑麦草种子愈伤组织诱导和植株再生

研究并建立了多年生黑麦草胚性愈伤组织诱导及其再生体系.结果表明:不同品种的愈伤组织诱导率不同,最适培养基是MS,愈伤组织诱导的最适2,4-D浓度是5mg/L;继代培养时间对愈伤组织的分化率有很大影响;植物凝胶与国产琼脂相比固化效果更好;筛选剂G418对抗性愈伤的浓度在50mg/L和7mg/L时的筛选效果分别达10.31%和6.%.     

多年生黑麦草组织培养与植株再生研究

对多年生黑麦草种子为外植体的植株再生过程进行系统研究,结果表明,在改良的MS培养基(MSM),以MS无机盐+9.9mg/L维生素B₁+9.5mg/L维生素B₆+4.5mg/L尼克酸+1mg/LCH+30g/L蔗糖+琼脂8g/L为基本成分,附加5mg/L2,4-D和0.05mg/LKT时,适合种子的愈伤组织诱导;继代培养基附加2mg/L2,4-D和0.1mg/LKT;分化培养基附加1mg/L2,4-D和1mg/LKT;生根培养基为无激素的MS培养基。完成植株再生约需12周,愈伤组织分化率为70%。     

桑蚕的可动遗传因子

本文概述了桑蚕可动遗传因子的研究进展,桑蚕的可动遗传因子可分为：第一组因子,包括具有长的末端重复的反转录转位因子和不具有长的反转录转位因子;第二组因子,是直接从ＤＮＡ转移到ＤＮＡ,密码自己的转位酶。     

DNA分子标记技术在桑树上的研究进展及前景

本文对DNA分子标记的种类及研究进展进行了综述,并展望这DNA分子标记技术在桑树研究中的应用前景。     

利用桑树特异种质资源的冬芽组织培养再生植株的试验

以不同类型的桑树特异种质资源的冬芽为材料,分别在含有不同种类生长调节剂及添加量的培养基中培养诱导桑树再生植株,考察桑树特异种质资源利用冬芽培养再生植株的可行性,筛选适宜的生长调节剂及其用量。结果表明:供试桑树种质资源的冬芽在不添加生长调节剂的培养基中外植体停止生长,添加生长激素TDZ能较好地诱导和促进愈伤组织的形成与生长,但会抑制生长芽的再生长,而添加细胞分裂素6-BA能促进冬芽的再生,且添加3.0 mg/L 6-BA的培养基中冬芽再生率显著高于添加1.0 mg/L 6-BA的培养基;8份桑树种质资源的冬芽在含3.0 mg/L 6-BA的改良培养基中培养,新疆药桑和小花叶皮桑的丛生芽诱导率最高,其冬芽的再生率均为66.7%,滇桑次之,再生率为55.5%,天目山桑和斯里兰卡的再生率分别为40.0%和25.0%;5份桑树种质资源的冬芽再生组培苗转移至生根培养基中培养1个月后,只有滇桑和新疆药桑分别诱导出再生根系(诱导率为分别为20.0%、14.3%)后移栽成活。研究结果初步显示,离体组织再生培养是保存和利用天然22倍体新疆药桑、渐危种滇桑等珍稀桑树种质资源的有效途径之一。     

桑子叶与胚轴不同区段离体再生植株的研究

以桑的子叶、下胚轴作为外植体,并将子叶等分为子叶尖部、子叶中部、子叶基部(靠近胚芽的一段),将下胚轴等分为下胚轴上段(靠近胚芽的一段)、中段、下段,置于培养基中培养。结果表明:子叶基部与下胚轴的上段离体再生效果好,子叶基部的离体再生成苗率可以达到63.5%,下胚轴上段的离体再生成苗率为47.1%。同时还发现分区子叶和分段下胚轴都是越接近胚芽生长点的部位用作外植体,其诱导出芽的时间短,并且能很好地分化再生成苗。     

植物基因工程在桑树品种改良中的应用进展

综述了桑树基因工程研究进展,并探讨植物基因工程技术在桑树上的应用前景,为将来桑树基因工程研究提供一定的参考。     

日本结缕草胚性愈伤诱导与植株再生(简报)

日本结缕草(Zoysia japonica Steud.)作为低耗水量、抗性强、管理粗放的暖季型草坪草种越来越受到关注。但其绿期短、对褐斑病、刺线虫等病虫害抵抗力较弱。与冷季型草坪草相比,暖季型草坪草更难诱导胚性愈伤组织并再生植株^[1]。虽然已有结缕草愈伤诱导植株再生的报道^[2~4],但缺乏系统研究。本试验拟探讨多个可能影响日本结缕草组织培养的因素,建立其植株再生体系,为下一步的外源基因转化奠定基础。