猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的分离培养及药敏试验

对从湖南永州市30多个猪场送检的疑似猪传染性胸膜肺炎的病猪中,用PPLO培养基进行了胸膜肺炎放线杆菌的分离,并测定了该菌的培养特性、致病性和对药物的敏感性。结果成功分离到了15株胸膜肺炎放线杆菌,该菌对先锋霉素和氯霉素较敏感。     

鸭疫里默氏杆菌病研究进展

1病原 鸭疫里默氏杆菌为革兰氏阴性小杆菌,不形成芽胞,不运动,纯培养物涂片可见菌体呈杆状,有的呈椭圆形,单个、成对或呈短链状排列,大小不等,(03～05)um×(1～5)um,瑞氏染色有两极染色特征,用印度墨汁染色可见到荚膜.本菌为严格需氧菌,对营养要求较高,在普通琼脂和麦康凯琼脂培养基上不生长,在胰酶大豆琼脂、巧克力琼脂、血液琼脂培养基上生长良好.     

琼氏不动杆菌形态型Ⅰ的主要性状及系统发育分析

从以败血症感染为特征的石鲽(KareiusbicoloratusL.)中,检出了原发感染的杀鲑气单胞菌(Aeromonassalmonicida),同时还在个别病死鱼中检出了作为继发感染的另一种病原菌。经对6株纯培养菌在形态特征、理化特性等方面的鉴定,表明其为不动杆菌属(AcinetobacterBrisouand Pr啨vot1954)的琼氏不动杆菌(A.juniiBouvetandGrimont1986),但该菌表现在普通营养琼脂培养基28℃培养呈典型形态特征、在37℃培养时出现异常形态;择一个代表菌株(HQ010320B1株)送中国典型培养物保藏中心(CCTCC)予以复核鉴定与分类定名,鉴定为琼氏不动杆菌新形态型菌株并定名为琼氏不动杆菌形态型Ⅰ(AcinetobacterjuniimorphovarⅠ)。同时又择代表菌株(HQ010320B1株)进行了16SrRNA基因序列测定及系统发育分析,其基因序列长度为1427bp(在GenBank登录号为AY787213),与检索出的不动杆菌属细菌序列同源性均在97%～99%。构建了系统发育树。     

副猪嗜血杆菌病原分离应注意的问题

<正>从病料分离副猪嗜血杆菌,通常在接种了金黄色葡萄球菌的血液琼脂上进行,目的是通过金黄色葡萄球菌为副猪嗜血杆菌的生长提供NAD。也可以选用巧克力琼脂或者加有NAD的PPLO培养基。培养时间通常需要24～48h。本菌为难于培养的微生物之一,尤其是从病料中分离时,常常受到杂菌的干扰。解决的办法,一是采用稀释培养法,二是在培养基中加林肯霉素和抗菌肽。由于本菌为上呼吸道常在菌,因此,必须注意由呼吸道分离到本菌并不一     

不同垫料堆肥对无害化处理病死鸡微生物多样性的影响

试验通过研究不同垫料堆肥对无害化处理病死鸡微生物多样性的影响，分析不同处理方法对病死鸡的处理效果。研究结果显示：各试验组OTU数目随着时间的增加有明显上升趋势，说明2种堆肥垫料均有助于提高微生物的数量和种类；厚壁菌门、变形菌门、拟杆菌门分类门代表了无害化处理过程中主要的微生物群，在各试验组中相对丰度没有较大差异。堆肥时使用碳氮比(C/N)均衡的堆肥垫料有利于分解病死鸡中的有机质，促进堆肥的腐熟。     

MIDI自动鉴定系统在贻贝菌相分析中的应用

以7—10月的新鲜紫贻贝为试验材料优化培养基,从中分离纯化出各种细菌,并采用MIDI微生物自动鉴定系统结合PCR的方法分析贻贝整体及各部位的优势菌相。试验结果表明,选用加5%贻贝汁和2.5%营养琼脂作为培养基较好;新鲜贻贝的优势菌主要由弧菌、芽孢杆菌和腐败希瓦氏菌组成,而弧菌和腐败希瓦氏菌集中在表面,芽孢杆菌在肠腺占82%;对分离的蜡样芽孢杆菌菌株进行16SrDNA序列分析,发现其与GeneBank中的4,5,6,7株蜡样芽孢杆菌的16SrDNA序列相似性均达到99%,因此,应用MIDI微生物自动鉴定系统鉴定贻贝中优势细菌是可行的。     

复合微生物制剂处理污水、藻类和病原菌试验

<正>复合微生物菌剂中益生菌群有芽孢杆菌、酵母菌与乳酸菌,p H值为3.5～3.8。乳酸菌在狭义上是一类通过革兰染色后呈阳性的球菌或杆菌,不形成芽孢,在含葡萄糖的培养基发酵产酸,且能在氧气缺乏的环境条件下生长良好的兼性厌氧细菌的总称^[1]。乳酸菌可调节水质和维持肠道菌群平衡,产生抗菌物质,抑制有害菌的生长,并能定植肠道^[2-5]。而芽孢杆菌代谢产生多种酶类,可促进动物消化吸收,有效分解养殖水体中的有机质,去除氨氮、硫化氢等,     

副溶血弧菌致病因子与耐热直接溶血毒素的研究进展

副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰氏阴性嗜盐菌,作为人类致病菌它能够在很广的范围内造成由食物中毒引起的肠胃炎和败血症[1-2].该菌最早是由Fujino等[3]在日本发生的一次爆发性食物中毒中发现并成功分离的一种多形态杆菌,其在不含盐的培养基内不能繁殖,而在含盐浓度较高(超过3%)的培养基中生长旺盛,并广泛存在于海岸和海水中.     

嗜酸乳杆菌对3种弧菌的拮抗效果及对凡纳滨对虾肠道菌群结构的影响

使用益生菌是预防和控制水产养殖细菌感染的非抗生素方法之一。嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)可在机体内分泌抗菌物质,具有抑制有害菌生长、调节肠道微生态平衡和增强抗毒抗病能力等功能。研究了不同氧环境和不同培养基条件下嗜酸乳杆菌、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V. harveyi)、溶珊瑚弧菌(V. coralliilyticus)的生长情况,并通过牛津杯法和液体培养法结合PCR荧光定量技术、高通量测序技术,系统评价了嗜酸乳杆菌对上述弧菌的拮抗效果及对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肠道菌群的组成和变化的影响。结果显示,在厌氧条件下,哈维氏弧菌的菌量显著高于在好氧环境培养后的菌量(P<0.05)。不同培养基配比对4种细菌的生长均具有显著性影响(P<0.05)。嗜酸乳杆菌对3种弧菌的生长均有良好的抑制效果。在对虾肠道菌群背景下,嗜酸乳杆菌对副溶血弧菌的生长有显著抑制作用(P<0.05)。处理组的弧菌属比例较对照组显著减少,高菌量组的有益菌属均显著增加。研究表明,嗜酸乳杆菌对上述3...     

一株水产用益生枯草芽孢杆菌液体发酵初步研究

为解决工业化生产中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)活菌数量低、成本高的问题,通过正交试验、单因素试验和100 L发酵罐中试,确定了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HJ02工业生产用的优化液体培养基和发酵工艺条件。最佳培养基配方为:葡萄糖10 g/L、玉米粉8 g/L、豆粕粉25 g/L、硫酸锰30.8 mg/L、硫酸镁5 g/L、磷酸二氢钠0.52 g/L、磷酸氢二钠2.33 g/L;最优发酵工艺条件为:培养温度30℃,初始pH 7.0;最佳接种菌龄是18 h。优化后培养基成本降低了50%以上,细菌浓度达到了7.19×109个/mL。     

一株猪丹毒杆菌的分离与鉴定

实验通过细菌分离培养,16srDNA基因序列分析,生化试验鉴定,药敏试验等方法对江苏海安某养殖场病猪的致病菌进行分析。细菌培养结果显示在血平板上有大量针尖样菌落,挑取单个菌落在LB培养基和麦康凯上纯培养后,可见该菌株在LB培养基上生长不良,麦康凯上不生长。镜检后可观察到该菌株为革兰氏阳性杆菌。16srDNA基因序列分析结果与猪丹毒杆菌GenBank accession no.AP012027有99%的相似性。生化试验结果显示分离菌株能够发酵葡萄糖、果糖、乳糖等糖类,硝酸盐还原阳性,尿素酶阴性。由此判定该致病菌为猪丹毒杆菌。药敏试验结果表明该菌株仅对痢特灵,菌必治,美洛西林等高度敏感,对大多数抗菌药物耐药。     

青石斑鱼肠道菌群研究

以中国沿海重要经济鱼类青石斑为研究对象,分别以营养琼脂和脑心浸液琼脂培养基检测其肠道中总的好气和兼性厌氧菌及专性厌氧菌的数量,以TCBS(Thiosulfate Citrate Bile Salts Su-crose)、麦康凯、NAC(Nalidixic acid-cetri mide)、锰营养盐、TPY(Tryptone-phytone-yeast extract)和SL(Rogosa SL.)琼脂等6种选择性培养基对青石斑肠道菌群进行计数和选择性分离,并对分离的优势菌株进行16S rRNA基因同源性分析。结果表明,青石斑鱼肠道内好气及兼性厌氧菌的总量可达5.3×105CFU/g。在6种选择性培养基中TCBS培养基上生长的菌落数量最多,约占总好气菌及兼性厌氧菌的36%,优势菌与牙鲆弧菌(Vibrio olivaceussp.nov.)同源性最高;麦康凯琼脂平板中生长的菌落数量次之,约占总好气菌及兼性厌氧菌的24%,优势菌与阿氏肠杆菌(E.asburiae)同源性最高;而NAC和锰营养盐琼脂平板中生长的菌落数量较少,优势菌分别与假单胞菌属(Pseudomonassp.)和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的同源性最高。厌氧菌的数量很少,约为总好气和兼性厌氧菌数量的1%,其中TPY培养基中生长的菌落数量约占总厌氧菌数量的53%,优势菌与拟杆菌(Bacteroidessp.)同源性最高;SL培养基中没有检测到细菌。     

獭兔巴氏杆菌病病原的分离与药敏试验

通过对海晏县某兔场病死獭兔无菌采取肝、脾、肺、肾等8份病料,应用常规分离鉴定技术进行病原的分离与鉴定,同时以多杀性巴氏杆菌C47-8株为质控菌株,结果显示,分离菌株与C47-8株间有一定的生化差异,但符合多杀性巴氏杆菌的生化特性。最后结合流行病学、临床症状、病理变化,确诊为獭兔巴氏杆菌病,并对分离菌株进行了药物筛选,选取敏感药物进行交替治疗,取得了较好的效果。     

芽孢杆菌及其在水产养殖业的利用（二）

二、枯草芽孢杆菌培养基配方的优化 在水产上应用的主要是枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis,BS）,在水体和饲料中添加枯草芽孢杆菌制剂,可起到有效抑制或杀灭水体中或养殖水生动物体内的某些有害菌或致病菌的作用,并能增强有益菌的群落,从而达到防治水产养殖动物疾病的作用。芽孢杆菌具有很强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性,可降解饲料中某些抗营养因子,提高饲料转化利用率,促进养殖水生动物的生长等。     

鳜鱼细菌病病原的生长和生理特性的研究

对鳜鱼细菌病六种病原菌的生长及生理特性进行研究 ,六种菌在合适的培养液中 ,适宜的温度下表现为一定的生长过程。绘制六种菌的生长曲线 ,一般包括迟缓期、对数期、稳定期和衰老期。六种菌在 4～ 8℃范围内及 4 0℃以上不生长 ,10～ 37℃范围内能生长 ;在pH5 5～ 10 0范围内生长 ,低于pH4 5、高于pH11 0下不生长 ;0 5%～ 5%NaCl液体培养基中生长 ,在 0 %、6 %NaCl液体培养基中不生长     

大西洋鲑循环水养殖水体异养细菌组成的研究

采集养殖池水样,选取Zobell 2216E琼脂培养基、溶菌肉汤琼脂培养基、硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基、脑心浸液琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基、营养琼脂培养基6种常见固体培养基进行细菌分离培养,以平板菌落计数法和菌落外观形态特征辨别及16SrRNA基因测序方法进行异养菌计数和种类组成分析。结果显示:(1)养殖池水体异养菌可分为4大类,分别属于变形菌门(包括α-、γ-变形菌纲)、厚壁菌门、拟杆菌门、放线菌门,其中以γ-变形菌纲为优势菌群。按属分类大多为假交替单胞菌属和弧菌属。(2)不同培养基分离菌落数量2216E培养基溶菌肉汤琼脂培养基胰蛋白胨大豆琼脂培养基脑心浸液琼脂培养基营养琼脂培养基硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基,且2216E培养基菌落数极显著高于其余5种培养基(P0.01);2216E培养基所分离细菌的种类最多,分属于12个属,假交替单胞菌属为优势类群,占比50%,弧菌属仅占3.13%;脑心浸液琼脂培养基、溶菌肉汤琼脂培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基所分离细菌均以弧菌属为优势菌群,分别占33.33%、60%、25%;硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基所分离细菌仅分属于1个属,即弧菌属;营养琼脂培养基无弧菌,但有假单胞菌分离出。     

菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌生长的影响

试验采用在培养基中添加不同浓度菊苣根提取物和在培养基表面覆盖不同浓度菊苣根提取物溶液浸泡的滤纸片,进行枯草芽孢杆菌培养,通过菌落计数法和测量菌圈直径的方法,以研究菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌生长的影响。结果表明:在一定浓度范围内,菊苣根提取物对枯草芽孢杆菌的生长具有促进作用,且随菊苣根提取物浓度升高,促进作用增强。当菊苣根提取物超过一定浓度时,对枯草芽孢杆菌的生长促进作用出现减弱趋势。     

如何在源头堵住病、死猪肉的生产销售

<正>福建高级法院近日公布一起典型案例,犯罪分子林深、赖建华等人在龙岩大量收购病猪、死猪,并雇人进行加工后销售,金额达1 243万余元;犯罪分子张志强等人在龙岩漳平市租用正规屠宰厂场地,收购、私自屠宰并销售病死猪肉,金额达4 300余万元。两起案件销售的病死猪肉达到2 000多t。要想从源头上遏制病死猪问题,既需要在破获案件后,倒查病死猪肉来源、去向,严肃追究大量出售、购买病死猪肉的养殖户、餐馆经营者等人员责任;要对不履行监管     

锦鲤中琼氏不动杆菌的分离与鉴定

对从病死锦鲤(Cyprinus carpio L.)肝组织中分离的2株菌(编号:HC050630D-1、HC050630D-2)进行了形态特征、理化特性、药物敏感性及对健康鲤鱼的致病作用等方面的检验;测定不HC050630D-1株菌的16S rRNA基因序列,构建了系统发育树.结果表明,2株被检菌为琼氏不动杆菌(Acinetobacter junii),对健康鲤鱼未呈现明显致病作用;所测菌株的16S rRNA基因序列长度1450 bp,在GenBank中登录号为EF669479,该菌株16s rRNA基因序列与GenBank数据库中不动杆菌属细菌的16S rRNA基因序列同源性为99%;药敏试验结果显示对供试的头孢拉啶等21种药物坚现高度敏感或敏感,对头孢他啶等7种呈低度敏感,对青霉素G等9种耐药.     

江河船体网箱养殖华鲮烂尾病病原菌分离及其致病性研究

从江河船体网箱养殖的患病华鲮体上分离出2株（HEW-1、HLW-2）纯化细菌。经形态学观察和染色特性鉴定,分离茵在普通琼脂培养基上茵落呈圆形,直径为0．5～0．8mm。微凸,表面光滑、湿润,边缘整齐或波纹状,灰白色：菌体短杆状,大小为0．4～0．5μm&#215;1～1．2μm,中轴直形,边侧膨出,两端圆形,大多数单个或少数两个相连。有运动力,极端单鞭毛,无芽孢,菌体染色均匀,革兰氏染色阴性：致病性试验结果表明。分离菌使试验华鲮于96h内的死亡率达到95％,并从病死华鲮体中回收到与自然病例相同的分离菌。