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目的建立一套能够同时检测禽流感病毒H7N9经典毒株和新型变异毒株的多重荧光定量PCR方法。方法以禽流感病毒H7N9亚型HA保守基因、HA裂解位点和NA基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,建立三重荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性和敏感性验证。结果参考GenBank收录毒株序列设计引物;探针分别选用ROX、FAM、VIC为荧光基团;阈值设定原则以阈值线刚好超过阴性对照检测荧光曲线的最高点;试剂盒特异性好不受其他亚型流感病毒以及常见禽类病毒的干扰;灵敏度可以达到100~101个EID50。结论该研究建立的荧光PCR检测方法敏感特异,能够用于禽流感病毒H7N9毒株检测。 相似文献
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应用重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株),禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株),首免用重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)对3组肉鸡进行禽流感的免疫效果观察。结果表明:免疫重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)的效果比免疫禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)的效果好;首免用重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)、二免用禽流感-新城疫重组二联活疫苗(rL-H5株)的效果比免疫重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)的效果更好。 相似文献
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根据已发表的H5N1亚型禽流感病毒的HA基因全序列,设计了1对引物,对禽流感病毒新疆株A/Goose/XJYL/10/2003(H5N1)提取RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T载体上,获得长为1758bp的HA全基因序列。序列测定后,分析结果表明,本试验株与广东、香港和东南亚等不同地区的H5N1禽流感病毒HA的核甘酸序列的同源率很高,其氨基酸切割位点附近具有高致病性禽流感病毒的特征。系统进化树分析表明,新疆株为独立分支,属于欧亚种系。 相似文献
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根据已发表的H5N1亚型禽流感病毒的HA基因全序列,设计了1对引物,对禽流感病毒新疆株A/Goose/)(JYL/10/2003(H5NI)提取RNA,经RT-PCR扩增后将其克隆到pMD18-T栽体上,获得长为1758bp的HA全基因序列。序列测定后。分析结果表明,本试验株与广东、香港和东南亚等不同地区的H5N1禽流感病毒HA的枉甘酸序列的同源率很高。其氨基酸切割住点附近具有高致病性禽流感病毒的特征。系统进化树分析表明,新疆株为独立分支,属于欧亚种系。 相似文献
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禽流感(AI)是由A型正粘病毒中的多群病毒引起的,其感染程度差异很大,可从不明显感染到暴发疾病,临诊以从和缓型到与高致病性禽流感病毒(HPAI)相关的灾难性死亡为特征。当生这类AI时,有关当局有责任在24h内向国际兽医局(OIE)报告。相反,对低致病性AI毒株则不需向OIE报告。在过去20年来,已有证据表明,低致病性H5和H7AI的毒株可变为高致病性毒株。突变导致邻近血凝素(HA)链的裂解位点上的碱性氨基酸成为优势氨基酸,后者与毒力的增强有关。 相似文献
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十二大禽病诊断与控制专家谈 第三讲 禽流感的诊断与控制 总被引:3,自引:0,他引:3
禽流感,即禽流行性感冒(Avian Influenza)是由A型流感病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)的感染或疾病综合症。1878年,perroncito首次报道意大利的鸡群暴发的一种严重疾病,当时称为鸡瘟(Fowl Plague)。1995年,Schafer证实“鸡温”的病原为A型流感病毒感染。自1959年以来,苏格兰(1959)、意大利(1966、1980)前苏联(1967-1979)、澳大利亚(1975、1985)、美国(1975、1979、1984)、香港(1975-1978)、比利时(1978、1979)、法国(1979-1980)、以色列(1980)等国家和地区学者相继分离到流感病毒及其亚型。我国台湾(1990)分离到H8N4、H6N5、H12N5、H8N9、N8N6、H8N3、H1N5、H8N5;大陆学者陈伯伦和张泽纪等人1992年在广东从鸡体内分离到禽流感病毒H9N3。除鸡以外,1963年,Long等第一个从火鸡中分离到禽流感病毒(H6N8),以后英国、美国、意大利、以色列、苏格兰等国也相继分离到火鸡流感病毒,最早从鸭中分离到流感病毒是1956年在捷克斯洛伐克和英国,分离的病毒是H4N6、H11N6,以后乌兰克、意大利、加拿大、南斯拉夫、波兰、德国、香港、澳大利亚、日本、比利时,以色列等国也从鸭中分离到流感病毒,台湾谢快乐(1972)、大陆韩冲和徐为燕等(1980)从鸭中分离出流感病毒,郭元吉等(1979)从鸭饮过的186份水标本中分离到58株禽流感病毒。鹌鹑,珍珠鸡、鸭、鹅等也有发病并分离出流感病毒的报道。 相似文献
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应用血凝抑制试验(HI),对采自健康的鹰、鸽子、野鸭和鹌鹑中的54份血清血清学检测,分析结果显示,在总共采集的54份血清样品中,抗新城疫病毒(NDV)抗体流行血清型(seroprevalence)与抗H6亚型禽流感病毒(H6)抗体、抗H9亚型禽流感病毒(H9)、抗H5亚型禽流感病毒(H5)抗体阳性率分别为64.8%、75.9%、29.6%。而根据血凝抑制试验检测结果发现,H5亚型禽流感病毒抗体滴度较低,最高仅为320,其阳性率为29.6%,推断其可能为新近传入的病毒或新近重组变异出现的新病毒,可能为与该次流感爆发相关的新病毒,这一推断还有待于通过对病毒基因序列的分析而做进一步验证;新城疫病毒在该生态系中的稳定循环,构成了对家禽潜在的威胁,我国目前非典型新城疫的一个主要原因是带毒鸟类的传入。 相似文献