试纸探针条检测鸡传染性法氏囊病疫苗中病毒含量的试验

试纸探针条可识别市售的国产或进口鸡传染性法氏囊病（IBD）代表性疫苗毒株及其鸡胚培养毒或细胞培养或其接种鸡的囊毒，并可检出经甲醛灭活的IBD标准强毒、田野囊毒、鸡胚培养毒或细胞培养毒。活的或灭活待检疫苗水溶液中IBDV的含量越高，试纸探针条上阳性线显现越快、颜色越深且明显；在30分钟的结果观察时间内，该条可检出每0.1mL样品中800ELD50或10^7.0TCID50的病毒含量，该条检测灭活IBDV的效价是AGP测定效价的32倍以上，试纸探针条为估价疫苗中IBDV的含量或疫苗质量提供了一条简便、快速、经济的新途径。     

检测传染性法氏囊病病毒VP4蛋白抗体试纸条的研制及应用

采用RT-PCR技术从滨州分离株中扩增出传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP4基因,将VP4基因插入到pGEX-4T-1载体上构建pGEX-4T-1-VP4,诱导表达并用谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化得到纯化的重组VP4蛋白。以兔抗鸡IgG为胶体金标记物,以重组IBDV VP4蛋白和羊抗兔IgG为硝酸纤维素膜检测线和质控线的包被物,制备一种能检测IBDV VP4蛋白抗体的胶体金试纸条。结果表明,该试纸条检测IBDV强毒(IBDV BC6/85)免疫的血清检测线显红色,为阳性反应;检测IBDV弱毒(IBDV NB)免疫的血清、新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)标准阳性血清、禽流感H5和H9标准阳性血清、传染性支气管炎标准阳性血清及0.85%生理盐水检测线不显红色,为阴性反应。该试纸条与建立的ELISA方法相比,敏感度低2个滴度;检测320份临床血清,试纸条与ELISA的符合率达99.38%。提示,该试纸条使用方便、操作简单,10 min内可以用肉眼判断结果,可为区分IBDV的强弱毒提供参考数据,具有较大的应用价值。     

鸡传染性法氏囊病快速诊断试纸条的研制及特性测定

以高亲和力和高特异性IBDV单克隆抗体为基础,成功的研制出IBDV快速诊断试纸条,试验结果表明IBD试纸与鸡的NDV、ALV、EDS-76、IBV、ILTV、MDV无交叉反应。IBD试纸条具有良好的特异性和敏感性,其敏感性与琼扩试验相比,则提高了32—64倍,能够识别不同的IBDV毒株包括强毒和弱毒。与ELISA的阳性符合率为100％。对于人工感染IBDV鸡,感染后36h在感染鸡的法氏囊即可检出IBDV,从检测到获得结果仅需要1-2min,IBD试纸具有特异、敏感、快速、简单等特点,不需要任何专业技能和其他试剂,实现了鸡病诊断的一步法。     

IBD野毒株的培育

由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒,使现地鸡群发病率９６％,死亡率６０％以上,为一株超强毒。将该毒株分离,纯化,经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代,得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株,毒价高达２．０×１０８ＰＦＵ／ｍｌ以上。回归本动物,经免疫原性试验,致病性试验及返祖试验,证明该毒株免疫原性较好而致病力降低。     

食品中亚硝酸盐快速检测试纸条的研制

利用与对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺反应显色的原理,探索最佳的试纸卡制作工艺,将对氨基苯磺酸和盐酸萘乙二胺分别浸在试纸上,干燥,组装成亚硝酸盐速测试纸卡。同时制备含量依次为100 mg/L、80 mg/L、60 mg/L、40 mg/L、20 mg/L、10 mg/L、5.0mg/L、2mg/L、1mg/L的亚硝酸盐溶液制成标准比色卡,作为比色对照。经与分光光度法做了灵敏度和准确度的对比,该方法具有快速、简便、灵敏度和准确度高等特点。     

IBD野毒株的培育

由国内ＩＢＤ高发地区分离到一株ＩＢＤ野毒,使现地鸡群发病率９６％,死亡率６０％以上,为一株超强毒。将该毒株分离,纯化,经鸡胚及鸡胚成纤维细胞传代,得到一株ＩＢＤ超强毒的细胞适应株,毒价高达２．０×１０＾８ＰＦＵ／ｍｌ以上。回归本动物,经免疫原性试验,致病性试验及返祖试验,证明该毒株免疫原性较好而致病力降低。     

试纸法与琼扩法检测鸡IBD母源抗体的比较试验

应用快速检测试纸和琼脂扩散法（AGP）对雏鸡母源抗体消长规律及IBD高免卵黄进行了检测。结果表明，试纸法与琼扩法对雏鸡IBD母源抗体消长规律的检测结果基本一致，但前者的检出率比后者高。对高免卵黄抗体的检测结果表明两种方法具有极显著的直线相关关系，r=0.898。试纸法检测IBD母抗原体与其它方法比较，具有灵敏、特异、快速、简便等优点，为IBD母源抗体的快速检测提供了一种新的方法。     

链霉素胶体金快速检测试纸条的研制

本研究建立了一种基于免疫胶体金技术的链霉素快速检测方法。该方法检测灵敏度10ng·ml-(101ppb),蜂蜜样本检出限是40ng·ml-(40ppb),单个样本检测时间为5～10min。所研制试纸条产品检测变异系数小,批1间、批内检测结果重复性良好,可以应用于蜂蜜样本中链霉素的快速检测和现场筛查,具有较高的市场应用前景。     

禽流感快速检测金标试纸条的研制

用胶体金颗粒标记H5亚型禽流感病毒单克隆抗体A(B5C7),用羊抗鼠IgG和H5亚型禽流感病毒单克隆抗体B(3C4)喷涂于硝酸纤维膜质控线和检测线上,研制出H5亚型禽流感病毒抗原金标快速诊断试纸条。试纸由加样区、显色区和吸附区组成,用禽流感H5、H9标准抗原和新城疫标准抗原作为检测抗原对研制的试纸条进行特异性、敏感性和稳定性试验,试验结果表明该方法操作简单、灵敏度高、特异性强、稳定性好,具有良好的应用前景。     

牛奶中庆大霉素胶体金试纸条检测方法的研究

采用胶体金免疫层析法检测牛奶中庆大霉素残留。制备得到了庆大霉素半抗原,并与载体蛋白偶联得到免疫原和包被原,用免疫原制备特异性单克隆抗体,建立了一种简单、快速和高通量的检测牛奶中庆大霉素残留量的胶体金免疫层析法。试纸条对牛奶样品的检测限为20μg/L,假阳性率为0,假阴性率为0,重复性较好,牛奶样品可直接检测,检测时间只需5min,适合在基层抽检、乳品企业质控、原料奶站现场大量筛查使用。     

用免疫胶体金试纸膜快速检测IBDV的研究

用免疫胶体金试纸膜分别检测了GX8／99株超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)不同传代毒、全国部分省市IBDV地方野毒、鸡胚传代毒、细胞传代毒、临床病料及其他病原材料，试验研究结果表明免疫胶体金试纸膜法与琼脂扩散试验(ACP)相比，具有特异、敏感、快速、简单等特点，不需要特殊的专业技能和其他试剂，能够识别不同的IBDV毒株，包括强毒和弱毒。为IBDV开辟了一条新的、快速的检测途径。     

用免疫胶体金试纸膜检测超强毒IBDV对SPF鸡侵染性变化研究

用免疫胶体金试纸膜检测人工感染GX-8/99株超强毒株传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)SPF鸡,检测9天内这九种病料病毒含量的变化,进一步揭示了VVIBDV对鸡体内各组织的侵染性变化规律.     

免疫不同的IBD中等毒力活疫苗对ND(LaSota)疫苗体液免疫应答影响

维扬麻鸡150只分为5组(即Ⅰ-Ⅴ组).其中I、Ⅱ、Ⅲ组为试验组,对应用市售的A、B、C三种lBD中等毒力活疫苗进行两次免疫接种,Ⅳ组为ND免疫对照组,Ⅴ组为空白对照组,在IBD活疫苗二免后定期监测鸡群免疫ND(LaSota)疫苗后的HI抗体消长情况,以评价这3种IBD活疫苗对NDHI抗体产生的影响程度。结果发现,I组(免疫A疫苗)对NDV的HI抗体水平的影响最大,Ⅱ组(免疫B疫苗)对NDV的HI抗体水平的影响次之,Ⅲ组(免疫C疫苗)对NDV HI抗体水平的影响轻微。     

同源相同（IBD）定位在QTL精细定位中的研究进展

综述了近年来发展较快的QTL定位新策略-同源相同(IBD)定位的原理与方法及其在QTL精细定位中的研究进展.     

4株鸡IBD活疫苗对鸡ND免疫抗体的影响

４株不同毒力鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）活疫苗,分别接种３０ｄＳＰＦ公维,４ｄ后再接种鸡新城（ＮＤ）Ｌａｓｏｔａ系活疫苗,同时每组捕杀５只,观察法氏囊损伤情况,另４组用同１天的ＳＰＦ公无接种ＮＤ－Ｌａｓｏｔｑ系疫苗４天后再接种不同毒力的ＩＢＤ疫苗。试验结果表明,４株ＩＢＤ活疫苗对雏鸡法氏囊不同程度损伤,并且对ＮＤ免疫抗体产生有明显抑制作用。     

免疫增强剂对IBD疫苗免疫雏鸡局部黏膜免疫功能的影响

分别将免疫增强剂“禽福”和“Inmunair”与鸡传染性法氏囊病（IBD）中等毒力活疫苗配合使用,检测免疫雏鸡哈德尔氏腺和盲肠扁桃体T细胞及IgA、IgM和IgG抗体生成细胞数量。泪液、气管液、胆汁、肠液中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA含量的动态变化,结果发现,应用免疫增强剂IBD疫苗免疫雏鸡上述局部免疫组织及四种局部体液的相应各项免疫检测指标均较IBD疫苗单独免疫雏鸡不同程度地增高,表明免疫增强剂与疫苗联合应用,能显著提高疫苗免疫雏鸡眼部、呼吸道和消化道局部黏膜免疫功能;而IBD强毒攻击后,疫苗单独免疫雏鸡上述指标明显低于应用免疫增强剂的疫苗免疫雏鸡,同时。后者对IBD强毒攻击的有效抵抗力明显高于前者。     

免疫增强剂"禽福"和"Inmunair"对IBD疫苗免疫雏鸡外周血液免疫学变化的影响

分别将免疫增强剂"禽福"和"Inmunair"与鸡传染性法氏囊病(IBD)中等毒力活疫苗配合使用,检测免疫雏鸡外周血液T、B细胞数量及血清免疫球蛋白IgG、IgM和IgA含量的动态变化,结果发现,应用免疫增强剂的IBD疫苗免疫雏鸡外周血液各项免疫检测指标均较IBD疫苗单独免疫雏鸡有不同程度地增高,表明免疫增强剂与疫苗联合应用,能显著提高疫苗免疫雏鸡全身免疫功能;而IBD强毒攻击后,疫苗单独免疫雏鸡上述指标明显低于应用免疫增强剂的疫苗免疫雏鸡,同时,后者对IBD强毒攻击的有效抵抗力明显高于前者。     

产蛋鸡法氏囊病的诊治

二十世纪末，鸡法氏囊病(IBD)的爆发，给养鸡生产造成了不小的损失，有称为“禽肾病”、也有称“甘保罗病”。“囊病”等由于重视免疫接种，发病率得以控制，近几年随着病毒的漂移，标准株的突变，血清Ⅰ型的亚型变异株不断出现，使鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)由侵害幼鸡、青年鸡转向成年鸡，使开产鸡发生免疫抑制，出现产蛋率低，死亡率高的特征。本文以口子鸡厂开产蛋鸡群发生法氏囊病的诊治情况介绍如下。