6种常用抗寄生虫药在鸡的生物药剂学分类研究

[目的]本研究拟建立基于靶动物生理参数的禽用药物溶解度和渗透性测定方法,并依据生物药剂学分类系统(Biopharmaceutics Classification System,BCS)对6种兽医临床常用抗寄生虫药(吡喹酮、阿苯达唑、盐酸左旋咪唑、盐酸氨丙啉、地克珠利、常山酮)进行分类。[方法]1日龄AA内鸡90只饲养至8周龄,分别于1、4和8周龄时测定鸡体温、胃肠液体积和胃肠pH值,通过计算剂量数(D_o)确定6种药物的生理溶解度及分类;以酒石酸美托洛尔为高低渗透性参考标准,结合单层细胞模型和鸡小肠原位灌流试验测定的药物表观渗透系数(P_(app))和有效渗透系数(P_(eff)),确定药物的渗透性并进行分类。[结果]将鸡常用药物溶解度的测定条件规定为41℃及pH1～8的水性缓冲溶液,高溶解度的定义为药物单次给药的最高剂量能完全溶解于21 mL(进食)或7 mL(禁食)的水性缓冲溶液中。D_o计算结果表明盐酸左旋咪唑、盐酸氨丙啉和常山酮在鸡进食及禁食条件下均为高溶解度药物,吡喹酮、阿苯达唑和地克珠利则为低溶解度药物。单层细胞模型法测得吡喹酮、阿苯达唑和盐酸左旋咪唑的P_(app)分别为12.92×10~(-6)、15.12×10~(-6)和14.64×10~(-6) cm·s~(-1),均高于酒石酸美托洛尔(6.58×10~(-6) cm·s~(-1)),故为高渗透性药物。鸡小肠原位灌流试验结果表明,6种药物在鸡体内的P_(eff)分别为0.76×10~(-4)、1.35×10~(-4)、0.93×10~(-4)、0.05×10~(-4)、0.66×10~(-4)和0.31×10~(-4) cm·s~(-1),其中吡喹酮、阿苯达唑和盐酸左旋咪唑的P_(eff)均高于酒石酸美托洛尔(0.68×10~(-4) cm·s~(-1)),为高渗透性药物,与单层细胞模型法测定的结果相一致。综合6种药物的溶解度和渗透性测定结果,确定6种药物的BCS分类为:盐酸左旋咪唑为Ⅰ类药物;吡喹酮和阿苯达唑为Ⅱ类药物;盐酸氨丙啉和常山酮为Ⅲ类药物;地克珠利为Ⅳ类药物。[结论]初步确定了鸡常用药物生理溶解度测定条件以及渗透性测定方法,完成了6种常用抗寄生虫药在鸡的BCS分类,为鸡常用药物BCS框架的建立奠定了基础。     

氟苯尼考与其磷脂复合物在大鼠小肠的吸收差异

【目的】比较氟苯尼考及其磷脂复合物在大鼠小肠中的吸收情况。【方法】采用平衡法测定氟苯尼考及其磷脂复合物的溶解度和脂水分配系数,采用离体外翻肠囊法研究氟苯尼考及其磷脂复合物在大鼠不同肠段的吸收情况,同时采用单向在体肠灌流法重点考察氟苯尼考及其磷脂复合物在大鼠十二指肠的吸收差异。【结果】氟苯尼考磷脂复合物较氟苯尼考原药的溶解度提高了36.14%,脂水分配系数降低了47.62%,且在大鼠小肠各段的促进吸收率大小表现为十二指肠回肠空肠。氟苯尼考磷脂复合物在十二指肠的表观吸收系数(P_(app))、有效渗透系数(P_(eff))和吸收速率常数(K_a)较氟苯尼考原药分别增加了121.93%,109.48%和90.83%。【结论】氟苯尼考磷脂复合物可以促进氟苯尼考在大鼠小肠中的吸收。     

盐酸克伦特罗喷射式流动注射电化学发光检测方法的研究

基于盐酸克伦特罗对于Ru(bpy)32+电化学发光的增敏作用,利用流动注射电化学发光法对盐酸克伦特罗进行检测,研究并考察流速、扫描速率、缓冲液pH值、Ru(bpy)32+浓度对电化学发光的影响;在优化的条件下建立电化学发光强度增加值与盐酸克伦特罗浓度的关系。结果表明:当流速为30μL·s~(-1)、缓冲液pH值为9.0时,Ru(bpy)32+浓度为1.0×10~(-4) mol·L~(-1)是检测盐酸克伦特罗的最佳条件。当盐酸克伦特罗浓度在1×10~(-10)~1×10~(-6) g·mL~(-1)的范围内,电化学发光强度与其浓度的负对数呈良好的线性关系,最低检出限为1×10-10 g·mL~(-1)。     

粘红酵母RG-31产虾青素发酵条件优化

以粘红酵母RG-31为研究对象,通过单因素试验和正交试验对其合成虾青素的培养基和发酵条件进行初步的研究。试验结果表明:粘红酵母RG-31最适培养基为葡萄糖10 g·L~(-1)、牛肉膏3 g·L~(-1)、酵母粉5 g·L~(-1)、K_2HPO_4 1.5 g·L~(-1)、MgSO_4 0.5 g·L~(-1)、CaCl_2 0.2 g·L~(-1);最适培养条件为pH 6,培养温度28℃,转速240 r·min~(-1),培养时间60 h后,虾青素含量为7.41μg·mL~(-1),是优化前(2.84μg·mL~(-1))的2.61倍,生物量为20.5 g·L~(-1),是优化前(10.8 g·L~(-1))的1.90倍。     

菊芋光响应曲线最佳模型选择及其环境适应性

为揭示菊芋的光合特性,以草地、林下两种不同生长环境的菊芋(Helianthus tuberosus L.)为研究对象,利用便携式光合仪LI-6400进行光响应曲线的测量,并选取最佳拟合模型,计算并对比两种环境条件下的光合参数,深入分析菊芋生理生长特性与生长环境间的关系。结果表明:改进指数模型为菊芋的光响应曲线最佳拟合模型,拟合所得R~2为0.999,光饱和点(I_(sat))为1 600μmol·m~(-2)·s~(-1))、光补偿点(I_c)为37.637μmol·m~(-2)·s~(-1))、最大净光合速率(P_(max))为27.256μmol·m~(-2)·s~(-1))、暗呼吸速率(Rd)为-2.218μmol·m~(-2)·s~(-1)),初始量子效率(φ)为0.059;菊芋为阳生植物,耐高温耐干旱;因此菊芋应种植在高温干燥的生境中,草地更适宜于菊芋的生存。     

木鳖子生物碱部位提取物抗氧化活性研究

目的:研究木鳖子生物碱部位的抗氧化作用,为开发新的抗氧剂和进一步开发木鳖子药材提供实验依据。方法:使用试剂盒法测定木鳖子生物碱部位提取物总抗氧化能力(T-AOC)、羟基自由基清除能力、过氧化氢酶(CAT)活力。结果:提取物浓度在26.880 94.080μg·mL~(-1)范围内与T-AOC呈正相关,在1 344.0008 604.000μg·mL~(-1)范围内与羟基自由基清除率呈正相关,在2.688 9.408μg·mL~(-1)范围内CAT活力在5.376μg·mL~(-1)时最高。结论:首次证明木鳖子生物碱部位提取物具有一定的抗氧化活性。     

高效液相色谱法测定欧李不同部位γ-氨基丁酸的含量

采用柱前衍生化高效液相色谱法测定欧李不同部位的γ-氨基丁酸(GABA)含量。色谱条件采用C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%乙酸溶液为流动相,检测波长为254 nm。γ-氨基丁酸在5~100μg·mL~(-1)范围内线性关系良好。结果表明,欧李不同部位的GABA含量差异较大,含量由高到低顺序为:当年生茎芽叶花花蕾果肉根,当年生茎中GABA含量最高(912.9μg·g~(-1)),根中GABA含量最低(263.3μg·g~(-1))。该方法操作简便、结果稳定、适合于欧李不同部位中γ-氨基丁酸含量测定,为欧李资源的综合开发提供了基础数据。     

葡萄原花青素和花青素对丙烯酰胺致细胞损伤的保护作用

用丙烯酰胺诱导人结肠癌细胞HT-29和人神经母细胞瘤SH-SY5Y损伤建立细胞损伤模型,研究葡萄籽原花青素和花青素提取物对两种细胞的保护作用。结果表明:用100~700μg·mL~(-1)丙烯酰胺分别对HT-29和SH-SY5Y细胞孵育6和8h,两种细胞存活率分别下降至44.6%~80.5%和52.0%~81.0%,表明丙烯酰胺对细胞均有损伤作用。经葡萄籽提取物或葡萄皮提取物(5、10、20μg·mL~(-1))预先对HT-29细胞孵育1h后,再用300μg·mL~(-1)丙烯酰胺处理6h,HT-29细胞的存活率均显著高于丙烯酰胺损伤组(69.8%),其中10μg·mL~(-1)的葡萄籽提取物和葡萄皮提取物对HT-29细胞的保护作用最强,细胞存活率分别达到92.4%和93.8%。用葡萄皮提取物(5、10、20μg·mL~(-1))和葡萄籽提取物(5μg·mL~(-1))对SH-SY5Y细胞预先孵育1h,同样能够显著增加SH-SY5Y细胞的存活率。其中,葡萄皮提取物的保护作用较强,低、中、高浓度组的细胞存活率分别为80.7%、89.3%、91.5%。葡萄原花青素和花青素具有抑制细胞损伤的作用。     

羊骨胶原肽对去卵巢大鼠的骨质改善作用

[目的]探讨羊骨胶原肽(collagen peptide,CP)对去卵巢大鼠的骨质改善作用,为畜骨的高值利用和骨质疏松非药物防治的研发提供试验依据。[方法]切除大鼠双侧卵巢,设置切卵巢组(OVX)、雌激素组(E_2)、羊骨胶原肽的高、中、低剂量组(CP-H、CP-M、CP-L),另设假手术组(SHAM)。各组8只,饲喂基础日粮,CP各剂量组灌胃相应受试物,SHAM组和OVX组灌胃等体积蒸馏水,E_2组注射雌激素。灌胃9 w后处死大鼠,取股骨进行骨密度、骨矿物质、羟脯氨酸含量测定,并测定血清PINP及β-CTx水平。[结果]OVX组骨密度((1.767±0.031) g·cm~(-3))、骨矿物质(Ca、Mg、Zn、Mn)((9.73±0.14) mg·g~(-1),(0.34±0.01) mg·g~(-1),(30.48±1.48)μg·g~(-1),(1.70±0.24)μg·g~(-1))以及羟脯氨酸含量((1.922±0.12)μg·mg~(-1))均显著低于SHAM组((2.283±0.47) g·cm~(-3),(12.59±2.78) mg·g~(-1),(0.49±0.10) mg·g~(-1),(33.78±0.43)μg·g~(-1),(1.94±0.29)μg·g~(-1),(2.258±0.22)μg·mg~(-1)),血液PINP((3 528.37±154.74) pg·mL~(-1))和β-CTx((529.67±23.63) pg·mL~(-1))水平显著高于SHAM组((2.283±0.47) g·cm~(-3),(2 258.55±140.87) pg·mL~(-1),(370.98±61.89) pg·mL~(-1)),说明骨质疏松模型建模成功,CP各剂量组和E_2组骨密度、所测骨矿物质含量、羟脯氨酸含量均显著高于OVX组,血清PINP及β-CTx水平显著低于OVX组(P0.05)。[结论]羊骨胶原肽可提高去卵巢大鼠股骨密度,抑制骨矿物质和骨有机质的丢失,降低血清骨代谢标志物水平,从而具有骨质改善作用。     

不同日龄小尾寒羊和滩羊小肠pH及其主要消化酶活性的变化

【目的】研究断奶后不同日龄绵羊(小尾寒羊和滩羊羔羊)小肠pH及其主要消化酶活性的变化规律,为酶制剂和代乳料研制提供依据。【方法】选用健康无病的小尾寒羊和滩羊各36只,在相同条件下饲养,45日龄断奶,分别于80,120,160和200日龄屠宰取样,测定十二指肠、空肠和回肠内容物的pH值及其主要消化酶活性。【结果】绵羊小肠内容物pH值随日龄增长缓慢上升,从偏酸性转变为中性;小尾寒羊和滩羊小肠内容物pH值差异极显著(P<0.05);十二指肠、空肠和回肠3部位内容物pH值间分别存在极显著差异(P<0.01)。随着日龄增长,绵羊小肠内容物中乳糖酶活性逐渐降低(P<0.01),并存在品种(P<0.05)和部位(P<0.01)间的差异。绵羊小肠内容物中淀粉酶活性随日龄增长逐渐上升(P<0.01),没有表现出品种之间的差异,但部位间差异极显著(P<0.01)。【结论】绵羊内容物中淀粉酶、乳糖酶活性随日龄变化而变化,但pH值较稳定;小肠内容物中pH值和乳糖酶在品种间存在显著差异(P<0.01);十二指肠、空肠和回肠内容物中pH值、乳糖酶和淀粉酶活性在部位间存在极显著差异(P<0.01)。     

不同砧木对‘绿岭’核桃叶片光合和叶绿素荧光特性的影响

为了解不同砧木对‘绿岭’核桃光合及叶绿素荧光特性的影响,以中宁强、中宁异、北加州黑核桃和核桃作砧木嫁接‘绿岭’核桃的2年生幼树为试验材料,研究了‘绿岭’核桃叶片光合特性及叶绿素荧光特性。结果表明,4种砧木‘绿岭’核桃的净光合速率日变化均呈双峰曲线,其最大净光合速率依次为核桃(17.92μmol·m~(-2)·s~(-1))中宁强(14.17μmol·m~(-2)·s~(-1))北加州黑核桃(13.02μmol·m~(-2)·s~(-1))中宁异(12.34μmol·m~(-2)·s~(-1));蒸腾速率和气孔导度日变化均呈现单峰曲线;最大蒸腾速率依次为中宁异(5.36mmol·m~(-2)·s~(-1))核桃(5.11mmol·m~(-2)·s~(-1))北加州黑核桃(4.90mmol·m~(-2)·s~(-1))中宁强(3.41mmol·m~(-2)·s~(-1));气孔导度最大值依次为中宁强(0.22mol·m~(-2)·s~(-1))中宁异(0.21mol·m~(-2)·s~(-1))北加州黑核桃(0.19mol·m~(-2)·s~(-1))核桃(0.17mol·m~(-2)·s~(-1));胞间CO_2浓度日变化规律较为一致,均呈倒抛物线型;水分利用效率日均值依次为核桃(5.19)中宁强(4.97)北加州黑核桃(3.63)中宁异(3.49)。4种砧木‘绿岭’核桃的Fv/Fm和ΦPSⅡ日变化曲线均呈倒抛物线型;中宁强、中宁异、北加州黑核桃砧木‘绿岭’核桃的Fm和ETR都呈不规则的双谷型,而核桃砧木‘绿岭’核桃呈单谷型。4种砧木‘绿岭’核桃的P_n与T_r、G_s均呈正相关,P_n与C_i、ΦPSⅡ、ETR均呈负相关,相关性因砧木品种不同而达到显著或不显著水平。通过主成分分析对4种砧木‘绿岭’核桃光合及叶绿素荧光特性进行综合评价,其综合评价值分别为0.66、-1.59、-1.83和2.75,表明在光合和叶绿素荧光特性方面,核桃作为‘绿岭’核桃的砧木优于其他3个品种,是适合‘绿岭’核桃的优良砧木。     

北京市5种园林树种蒸腾耗水特性研究

采用盆栽称重法研究白皮松、白蜡、银杏、山桃、枸杞的蒸腾耗水特性。结果表明:5种树种的蒸腾速率Tr、光合速率Pn、气孔导度Gs日变化均呈"M"型曲线,存在"午休"现象,水汽压亏缺VPD日变化为单峰曲线。树种蒸腾速率Tr与叶片气孔导度Gs、水汽压亏缺VPD呈线性正相关关系,白皮松相关性显著(R2=0.9795、R2=0.9884)。蒸腾速率Tr为枸杞(3.33mmol·m-2·s~(-1))白蜡(3.22mmol·m~(-2)·s~(-1))=山桃(3.22mmol·m~(-2)·s~(-1))银杏(3.21mmol·m~(-2)·s~(-1))白皮松(2.21mmol·m~(-2)·s~(-1))。树种耗水量为枸杞(0.090g·cm~(-2)·d~(-1))白蜡(0.080g·cm~(-2)·d~(-1))山桃(0.076g·cm~(-2)·d~(-1))=银杏(0.076g·cm-2·d~(-1))白皮松(0.032g·cm~(-2)·d~(-1))。白蜡、银杏月耗水量呈倒"V"曲线,白皮松、山桃、枸杞月耗水量呈"M"曲线,耗水量为7月(0.083g·cm~(-2)·d~(-1))9月(0.078g·cm~(-2)·d~(-1))8月(0.075g·cm~(-2)·d~(-1))6月(0.071g·cm~(-2)·d~(-1))10月(0.060g·cm~(-2)·d~(-1))5月(0.057g·cm~(-2)·d~(-1))。白皮松秋季耗水多,其他树种为夏季耗水多。山桃、银杏抗旱能力强于枸杞、白蜡和白皮松。研究结果可为园林植物的合理配植与水分的合理利用等提供依据。     

光照强度对狼爪瓦松愈伤组织有效物质积累的影响

以狼爪瓦松种子诱导的愈伤组织为材料,研究了光照强度对愈伤组织生物量及黄酮积累的影响。结果表明:光照强度为15~30("mol·cm~(-2)·s~(-1))时,有利于狼爪瓦松愈伤组织鲜重和干重的增加;对于狼爪瓦松中酚的积累,光照强度为15("mol·cm~(-2)·s~(-1))时,其含量(17.4mg/g DW)及生产量(68.53mg/L)最高。而当光照强度达到30("mol·cm~(-2)·s~(-1))时,可得到最高的多糖含量(125.8 mg/g DW)和生产量(615.05mg/L)。对于黄酮类物质,光照强度为15("mol·cm~(-2)·s~(-1))时,最有利于山奈酚-3-O-芸香糖苷的积累,而槲皮素、山奈素、表儿茶素没食子酸酯和异槲皮苷的积累在光照强度为30("mol·cm~(-2)·s~(-1))时最佳;总黄酮的含量(3 816.6mg/g DW)和生产量(18 654.0mg/L)在光照强度30("mol·cm~(-2)·s~(-1))时达到最大值。因此,光照强度是狼爪瓦松愈伤组织有效物质积累和生物量增加的影响因素之一,在愈伤组织培养时将光照强度调节为30("mol·cm~(-2)·s~(-1))较为适宜。     

H_3N_2亚型犬流感病毒鼠/犬嵌合抗体scFv-Fc的制备与活性分析

[目的]为减少鼠源单克隆抗体的异源性在犬临床治疗中引起的宿主免疫排斥反应,针对H_3N_2亚型犬流感病毒(CIV),制备具有犬源抗体恒定区基因(Fc)的鼠/犬嵌合抗体。[方法]从产生具有良好中和活性CIV单抗的鼠源杂交瘤细胞株中扩增抗体重链和轻链可变区基因,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)获得单链抗体基因(scFv)片段,同时从犬外周血单核细胞中扩增得到犬源抗体Fc片段;分别构建单链抗体与嵌合抗体表达载体,通过大肠杆菌表达、纯化后调整蛋白浓度为1 mg·mL~(-1),检测单链抗体与嵌合抗体的ELISA和血凝抑制(HI)效价,并分析其对病毒感染细胞的中和活性。[结果]获得的H_3N_2亚型CIV鼠源scFv的相对分子质量为45×10~3,ELISA及HI效价分别为1∶640(1.56μg·mL~(-1))和1∶160(6.25μg·mL~(-1)),中和效价为1∶160(6.25μg·mL~(-1));鼠/犬嵌合抗体scFv-Fc的相对分子质量为80×10~3,ELISA及HI效价分别为1∶2 560(0.39μg·mL~(-1))和1∶640(1.56μg·mL~(-1)),中和效价为1∶40(25μg·mL~(-1))。[结论]成功制备了H_3N_2亚型CIV鼠/犬嵌合抗体,为犬流感的临床治疗提供了物质基础。     

3种木兰科珍稀濒危树种的光合及固碳特性

【目的】阐明木兰科Magnoliaceae珍稀濒危树种光合及固碳特性,为其保护利用提供理论技术依据。【方法】以亮叶木莲Manglietia lucida、香木莲M.aromatica和开甫木莲M.kaifui为研究对象,采用LI-6400便携式光合仪对其光合参数特征进行测定分析,并对其固碳释氧量进行估算,综合评价其适应性及生态效应。【结果】3个树种的净光合速率日变化在7月份表现为双峰型,在10月份表现为单峰型。其光合效率在7月份为:开甫木莲(5.35μmol·m~(-2)·s~(-1))亮叶木莲(2.87μmol·m~(-2)·s~(-1))香木莲(2.78μmol·m~(-2)·s~(-1));在10月份为:香木莲(6.46μmol·m~(-2)·s~(-1))开甫木莲(6.24μmol·m~(-2)·s~(-1))亮叶木莲(5.74μmol·m~(-2)·s~(-1))。3个树种的固碳释氧量为:开甫木莲香木莲亮叶木莲。【结论】参试植物的生长在10月份比7月份更为旺盛;开甫木莲对强光的利用能力最佳,香木莲对弱光的利用能力最佳;固碳释氧能力最强的植物为开甫木莲。     

超高效液相色谱法测定救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷含量

本研究建立了一种定性定量测定救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷的超高效液相色谱方法。用带有二极管阵列检测器的超高效液相色谱仪(UPLC-PAD)对救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷进行色谱分离和快速定量测定。以ACQUITY UPLC~(TM )C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:A项为乙腈,B项为水,进行梯度洗脱;流速:0.35 mL·min~(-1);进样量:2μL;检测波长为210 nm。通过光谱图、保留时间参数对紫丁香苷、长梗冬青苷进行定性定量检测。结果表明,紫丁香苷在10～200μg·mL~(-1)的范围内线性良好(R~2=0.999);长梗冬青苷在30～600μg·mL~(-1)的范围内线性良好(R~2=0.999);方法检出限为2.5μg·mL~(-1)紫丁香苷、7.5μg·mL~(-1)长梗冬青苷,方法定量限为10μg·mL~(-1)紫丁香苷、30μg·mL~(-1)长梗冬青苷,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷的定性定量检测。     

松针多糖对鸡巨噬细胞HD11的天然免疫调节

【目的】探讨松针多糖对鸡巨噬细胞HD11的天然免疫功能的影响,以期为松针多糖在肉鸡疾病防治方面应用提供科学依据。【方法】试验采用不同浓度的的松针多糖作用于巨噬细胞HD11,试验分为空白对照组、阳性对照组(终浓度为1μg·mL~(-1)的LPS)和松针多糖组(终浓度分别为25、50、100、200、400μg·mL~(-1)的松针多糖)。噻唑蓝(MTT)检测巨噬细胞HD11细胞活性、Griess法检测巨噬细胞HD11细胞上清液中一氧化氮(NO)分泌量、中性红吞噬试验检测巨噬细胞HD11吞噬活性,酶联免疫(ELISA)检测巨噬细胞HD11细胞上清液中干扰素-α(IFN-α)、一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-10(IL~(-1)0)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,荧光定量PCR技术检测HD11细胞中iNOS mRNA表达。【结果】MTT试验结果表明:与空白对照组相比,不同浓度的松针多糖(25、50、100、200、400μg·mL~(-1))对细胞活性没有影响,说明在25-400μg·mL~(-1)范围内对巨噬细胞没有毒性,可以进行免疫调节作用实验。免疫调节作用试验结果表明:与空白对照组相比,不同浓度的松针多糖极显著(P0.01)增加了NO释放量和细胞吞噬活性,极显著(P0.01)或显著(P0.05)提高了细胞因子IFN-α的含量和iNOS的含量及mRNA的表达量,极显著(P0.01)或显著(P0.05)降低了细胞因子IL~(-1)0的分泌量。当松针多糖浓度在50、100、200、400μg·mL~(-1)浓度时,细胞因子IL-6和TNF-α的含量极显著(P0.01)高于空白对照组。与阳性对照组相比,不同浓度的松针多糖极显著(P0.01)降低NO释放量,极显著(P0.01)或显著(P0.05)降低了细胞因子IFN-α的含量、iNOS的含量及mRNA表达量和IL~(-1)0含量。当松针多糖浓度在25、50、100μg·mL~(-1)浓度时,细胞吞噬活性极显著(P0.01)低于阳性对照组,细胞因子IL-6的含量极显著(P0.01)低于阳性对照组。当松针多糖浓度在25、50、100、200μg·mL~(-1)浓度时,细胞因子TFN-α的含量极显著(P0.01)低于阳性对照组。【结论】松针多糖能显著提高巨噬细胞HD11的天然免疫调节能力,且存在剂量依赖效应。     

黄芩中总黄酮提取工艺优化及抗肿瘤活性研究

为了改进乙醇法提取黄芩总黄酮工艺,提高黄芩总黄酮提取量,本研究以黄芩总黄酮提取率为评价指标,分析提取溶剂乙醇的体积分数、提取溶剂与黄芩比例(液固比)及提取温度对黄芩中总黄酮提取率的影响,并采用正交分析方法优化提取工艺。利用MTT法检测总黄酮对人肝癌细胞SMMC-7721和人结肠癌细胞HT-29的抑制效果。结果表明,黄芩中总黄酮的优化提取条件为提取温度60℃,60%的乙醇与黄芩比为40∶1时总黄酮提取率最高,为15.68%;MTT试验结果表明,总黄酮对SMMC-7721细胞在24h、48h、72h时的IC50分别为1024μg·mL~(-1)、533.6μg·mL~(-1)、287.7μg·mL~(-1),总黄酮对HT-29细胞在24h、48h、72h时的IC50分别为830.5μg·mL~(-1)、372.5μg·mL~(-1)、264.2μg·mL~(-1),说明黄芩中总黄酮对SMMC-7721和HT-29细胞具有显著抑制作用,并呈量效关系。本研究为后续进行工业上生产黄芩总黄酮提供工艺参考,并利用黄芩作为抗肿瘤药物提供了理论依据。     

火炬树水浸提液对波斯菊种子萌发和幼苗生长的影响

以火炬树(Rhus typhina L.)和波斯菊(Cosmos bipinnata Cav.)为试验材料,采用火炬树3种不同部位(叶、根、果穗)的水浸提液处理波斯菊种子,设置0.200、0.150、0.100、0.050、0.025、0.017 g·mL~(-1)6个质量浓度,并用清水对照,通过测定超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、可溶性蛋白质量分数,研究火炬树叶、根和果穗不同质量浓度水浸提液对波斯菊种子萌发和幼苗生长的影响,进而探讨火炬树对波斯菊的化感抑制机理。结果表明:火炬树各部位水浸提液均在质量浓度为0.200 g·mL~(-1)时影响最大,其中叶水浸液对种子发芽率抑制作用最明显,发芽率为47%,而根和果穗水浸提液处理下发芽率分别为54%和72%,根水浸提液对波斯菊发芽指数化感作用最强,化感效应指数(RI)值为-0.483;火炬树各部位水浸液随质量浓度升高对POD、SOD活性的影响有双重质量浓度效应,即低质量浓度(0.017~0.025 g·mL~(-1))有一定促进作用,高质量浓度(0.050~0.200 g·mL~(-1))抑制作用显著(P0.05),当叶浸提液质量浓度为0.025 g·mL~(-1)时,对SOD活性达到最大促进作用,RI值为0.048,0.200 g·mL~(-1)对POD活性达到最大抑制作用,RI值为-0.827;可溶性蛋白质量分数随水浸液质量浓度升高而逐渐降低,MDA质量摩尔浓度随水浸液质量浓度升高逐渐增加;当叶浸提液质量浓度为0.200 g·mL~(-1)时,可溶性蛋白质量分数最低,RI值为-0.585,MDA的质量摩尔浓度达到最大,RI值为0.475,均与对照差异显著(P0.05)。从化感综合效应看出,火炬树各部位水浸提液对波斯菊化感作用敏感性由强到弱的顺序为叶、根、果穗。     

高粱红曲菌M-3原生质体制备与再生

通过单因素及正交试验优化,拟建立高粱红曲菌M-3的菌丝高效制备和再生原生质体的优化方法。试验结果表明,在以1.0mol·L~(-1)山梨醇(pH8.0)为高渗透稳定液,以纤维素酶(0.3%)和蜗牛酶(0.3%)为裂解酶的条件下,考查不同酶解时间、酶解温度及酶解pH等单因素对原生质体形成与再生的影响;在单因素试验的基础上,采用正交设计试验确定原生质体制备与再生的最佳工艺参数为:酶解时间2h、pH值为6.0、温度32℃,在此工艺条件下,原生质体形成数为3.000×10~6个·mL~(-1),原生质体原生质体再生率为19.33%(再生菌落数为5.80×10~5个·mL~(-1))。