进境鸡爪槭中日本短体线虫的鉴定

2013年2月从宁波口岸进境的日本鸡爪槭(Acer palmatum)树木根际介质中检测到1种短体线虫,由于短体属线虫具有很大的危害性,可对多种作物造成危害引起根腐病,因此对该种线虫进行了详细的形态特征描述和分子生物学特征分析,旨在为中国口岸植物检疫提供理论依据。采用形态学特征鉴定的方法将该线虫群体初步鉴定为日本短体线虫(Pratylenchus japonicus Ryss,1988),其主要形态鉴别特征为:唇区有3个浅环,第1个唇环前端凸出;口针长而粗壮;阴门位置靠后,V值为84.0~88.7;受精囊内无精子;后阴子宫囊短,长度为12.4~21.5μm;尾细长,末端光滑。结合核糖体DNA的ITSRFLP图谱特征以及ITS区及28S-D2/D3区序列构建的系统发育树分析,进一步证实了该群体为日本短体线虫。结论:日本短体线虫是中国进境植物检疫性线虫,目前国内尚无分布的报道,这是中国口岸首次截获。     

进境鸡爪槭中日本短体线虫的鉴定

2013年2月从宁波口岸进境的日本鸡爪槭(Acer palmatum)树木根际介质中检测到1种短体线虫,由于短体属线虫具有很大的危害性,可对多种作物造成危害引起根腐病,因此对该种线虫进行了详细的形态特征描述和分子生物学特征分析,旨在为中国口岸植物检疫提供理论依据。采用形态学特征鉴定的方法将该线虫群体初步鉴定为日本短体线虫(Pratylenchus japonicus Ryss,1988),其主要形态鉴别特征为:唇区有3个浅环,第1个唇环前端凸出;口针长而粗壮;阴门位置靠后,V值为84.0~88.7;受精囊内无精子;后阴子宫囊短,长度为12.4~21.5μm;尾细长,末端光滑。结合核糖体DNA的ITSRFLP图谱特征以及ITS区及28S-D2/D3区序列构建的系统发育树分析,进一步证实了该群体为日本短体线虫。结论:日本短体线虫是中国进境植物检疫性线虫,目前国内尚无分布的报道,这是中国口岸首次截获。     

荷兰进境百合种球中线虫的分离及分子鉴定

随着荷兰百合种球的进口量逐年增加，其极易携带多种有害生物入境，线虫传入风险随之增大，危害国门生物安全，因此对其准确的检疫鉴定十分重要。本文采用形态学（改良贝曼漏斗法）结合分子生物学方法（DNA提取及PCR扩增）对百合种球中分离到的植物寄生线虫进行分离鉴定。最终鉴定出3个种类，分别为穿刺短体线虫（Pratylenchus penetrans）、毁芽滑刃线虫（Aphelenchoides blastophthorus）和燕麦真滑刃线虫（Aphelenchus avenae）。研究表明，在进境百合种球中分离到的线虫数量有限、幼虫较多，无法通过形态学准确鉴定，应结合分子生物学方法保证结果的准确性。     

从日本进境鸡爪槭中截获朱顶红短体线虫

浙江出入境检验检疫局技术中心植检实验室从日本邮寄进境的鸡爪槭盆栽中检出一种短体线虫,该群体多为幼虫、雌虫,雄虫未见;通过形态学和分子生物学鉴定,将其鉴定为朱顶红短体线虫Pratylenchus hippeastri。该线虫在国内尚未见分布报道,属于中国禁止进境的检疫性有害生物(短体线虫非中国种),是中国首次截获该线虫。     

云南省柑桔根际短体线虫种类的鉴定

从采自云南省12个县市140个柑桔园的260份柑桔病根样本中分离鉴定出4种短体线虫属线虫:咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae),卢斯短体线虫(Pratylenchus loosi),穿刺短体线虫(Pratylenchus pene-trans)和伤残短体线虫(Pratylenchus vulnus)。其中咖啡短体线和伤残短体虫为优势种。     

西藏农作物短体线虫种类的鉴定和描述

在对我国西藏自治区主要耕作区的植物线虫种类进行调查期间,从林芝地区、拉萨市达孜县采集多种作物的根系组织和根际土壤样品,并采用改良贝曼漏斗法从这些样品中分离出了多种植物线虫,根据形态学特征,从中鉴定出卢斯短体线虫(Pratylenchus loosi)、落选短体线虫(P.neglectus)和斯克里布纳短体线虫(P.scribneri)。其中,卢斯短体线虫西藏种群与文献描述的种群相比尾较短,其他形态特征基本一致;落选短体线虫西藏种群和斯克里布纳短体线虫西藏种群分别与文献描述种群的形态特征基本一致。其中,落选短体线虫在林芝地区和拉萨市达孜县均有分布,另外2个种均分布于林芝地区。     

云南石榴根际刻痕短体线虫的鉴定

近年来云南石榴病害日趋严重,特别是根部病害,因为其危害具有隐蔽性,常被人们忽略,线虫病害即其中之一.2003-2007年,笔者对云南省主要石榴产区蒙自县、会泽县和建水县的石榴寄生线虫进行了采样调查,采用形态特征进行鉴定,分离鉴定出了刻痕短体线虫.报道了寄生于云南省石榴根际的一种短体线虫:刻痕短体线虫Pratylenchus crenatus,Loof 1960,石榴是这种线虫的新记录寄主.     

广州香蕉病原线虫咖啡短体线虫的形态学鉴定方法研究

对广州地区香蕉线虫的主要种类--咖啡短体线虫的形态鉴定方法进行研究,主要利用光学显微镜观察和扫描电镜观察2种方法对咖啡短体线虫进行形态特征观察与鉴定,结果表明,观察到了以前未报道过的特征,完善了咖啡短体线虫的形态学鉴定方法.     

南京园林植物短体属和半轮属线虫的鉴定

2009年10月-2010年7月,对南京栖霞区、江宁区和浦口区苗圃地的40种园林植物根际寄生线虫进行了初步调查,根据形态特征和测量值鉴定出短体属和半轮属线虫3个种,分别是咖啡短体线虫(Pratylenchus coffeae)、伤残短体线虫(Pratylenchus vulnus)和紧鞘半轮线虫(Hemicriconemoides strictathecatus).其中,紧鞘半轮线虫为江苏省新记录种.在40种寄主植物中,卫矛(Euonymus alatus (8a) 和七叶树(Aesculus chinensis (8a))为咖啡短体线虫的新寄主,红果栒子(Cotoneaster horizontalis (8a))和南方红豆杉(Taxus chinensis var.mairei (8a) 为伤残短体线虫的新寄主,龙爪槐(Sophora japonica var.pendula (8a))为紧鞘半轮线虫的新寄主.     

河南烟草根际短体线虫鉴定及其致病性分析

【目的】明确从河南省南阳市烟草根际采集到的一种短体线虫的种类及其对烟草的致病性,为烟草根腐线虫病害的识别与有效防治提供理论依据。【方法】采用形态学与分子生物学相结合的方法,对分离自河南省南阳市烟草根际的一种短体线虫进行鉴定,并采用温室盆栽接种的方法测定其对烟草的致病性。【结果】形态学分析发现,待鉴定短体线虫与咖啡短体线虫（Pratylenchus coffeae）的形态特征较为一致。rDNA-ITS和rDNA 28S D2~D3序列分析发现,该线虫种群与NCBI数据库中的咖啡短体线虫序列具有高度相似性。基于rDNA-ITS和rDNA 28S D2~D3序列构建的贝叶斯进化树显示,该短体线虫与其他咖啡短体线虫位于同一高度支持的分支。因此,将从河南省南阳市烟草根际采集到的短体线虫鉴定为咖啡短体线虫。接种咖啡短体线虫75 d后的烟株生长缓慢,植株矮小,叶片黄化萎蔫,根部出现褐色病斑甚至坏死腐烂,咖啡短体线虫在烟草根际的繁殖率达到5.81。【结论】河南省南阳市烟草根腐线虫病病原为咖啡短体线虫,其对烟草具有较强的致病性。     

短体属一新种——薯蓣短体线虫Pratylenchus dioscoreae n.sp.鉴定简报

薯蓣Dioscorea opposita Thunb除供蔬菜食用外,还是重要中药,并加工成光山药大量出口。近年来由于红斑病的危害,使薯蓣的产量和质量大幅度下降,造成很大的经济损失。薯蓣块茎从芦头到40cm以上处均可受害,产生红褐至暗褐色、近圆形或不规则的     

短体线虫属一新种记述（垫刃目：短体线虫科）

本研究将采自北京市丰台区艾Ａｒｔｅｍｉｓｉａｓｐ．根上的短体线虫描述为短体线虫属一新种，命名为艾短体线虫Ｐｒａｔｙｅｎｃｈｕｓａｒｔｅｍｉｓｉａｅｎ．ｓｐ．，其是短体线虫属内一两性生殖的种，唇区大多有两个环纹。在扫描电镜下观察发现唇盘与中唇融合形成一光滑、连续的结构。口针短，长１１．５０～１４．６３（１３．６２）μｍ，口针基球圆形。Ｖ＝７６．０－８１．２（７８．２２）。受精囊卵圆形至长椭圆形，内充满精子。尾部圆锥形，尖端宽圆、光滑无环纹。雄虫大量存在。     

咖啡短体线虫人工繁殖方法研究

利用愈伤组织法对咖啡短体线虫进行了人工繁殖,并分析讨论了温度、培养时间、接种量对繁殖量的影响.试验结果表明,以25℃为最适温度,20℃与30℃线虫繁殖量不理想;以10条接种量为最适接种量,其次为5条接种量;繁殖量与所设计接种时间成正比.     

进境百合种球上3种线虫的检疫鉴定研究

本文通过改良贝曼漏斗法分离收集进境荷兰百合种球及介质土中携带的线虫,其中3种线虫种类经形态特征观察、显微测计及核糖体DNA 28S-D2/D3区序列分析,分别鉴定为洞穴长尾线虫（Seinura caverna）、毁芽滑刃线虫（Aphelenchoides blastophthorus）和燕麦真滑刃线虫（Aphelenchus avenae）,均为江苏口岸首次截获,目前,洞穴长尾线虫（S.caverna）、毁芽滑刃线虫（A.blastophthorus）国内现有报道较少。本文主要通过对江苏口岸首次截获的3种线虫进行检疫鉴定研究,以期为口岸进境花卉种球检疫监管提供参考。     

斯克里布纳短体线虫的单异活体培养

采用链霉紊含量1000单位/ml、青霉素含量800单位/ml和放线菌酮含量15μg/ml的混合液作线虫的表面消毒剂,用无菌条件下生长在White培养基上的玉米、大豆、小麦和高梁4种植物的离体根均成功地培养了斯克里布纳短体线虫Ptatyleuchus sctibueri。在28℃和33℃下,培养效果均好。在28℃培养9周,P.sctibueri在玉米离体根上繁殖了8.4倍。通过根和培养基块移置都获得继代培养。培养的线虫具有正常的侵染能力。     

我国黄淮麦区10个短体线虫样品种类的分子鉴定

【目的】短体线虫(Pratylenchus spp.)是植物根系内迁移性寄生线虫,可引起许多作物的根腐线虫病,给世界农业生产造成了极大的危害。为明确我国黄淮麦区与禾谷孢囊线虫复合侵染小麦的短体线虫种类,本研究对采自黄淮4省麦区的10个短体线虫样品进行种类的分子鉴定,分析种群系统进化关系及种内遗传变异,以期为我国小麦根部线虫病害的综合防治提供指导。【方法】对采自江苏、安徽、河南和山东4省小麦孢囊线虫发病田中的10个小麦短体线虫样品进行线虫分离,从各样品中随机挑取5条短体线虫,分别提取单条线虫DNA,扩增r DNA 18S片段并进行测序比对,选取序列有代表性的2个DNA样本进一步扩增其r DNA 28S D2-D3区以及mt DNA-COI基因片段,经序列比对分析后,利用MEGA4.0软件采用邻接法分别构建基于r DNA 18S、28S D2-D3和mt DNA-COI序列的系统进化树,通过聚类关系及相似度分析确定线虫种类,同时利用种特异性引物进行验证。【结果】扩增挑取的50条短体线虫的r DNA 18S区片段,测序得到片段长度在857—935 bp,BLAST比对分析揭示部分样品可能为短体线虫的混合种群;进一步测定的20个代表性DNA样本的r DNA 28S D2-D3区和mt DNA-COI基因的片段长度分别在771—784 bp和415—417 bp;系统进化树以及相似度分析揭示我国黄淮流域4省麦区10个短体线虫样品中有咖啡短体线虫(P.coffeae)、落选短体线虫(P.neglectus)和斯克里布纳短体线虫(P.scribneri),其中,江苏沛县样品JS2和山东潍坊样品SD1是落选短体线虫单一侵染样品,河南永城样品HN2和安徽淮北样品AH3是咖啡短体线虫单一侵染样品,安徽萧县样品AH2、AH5和淮北样品AH4以及河南永城样品HN1和HN3均为落选短体线虫和咖啡短体线虫的混合侵染样品,江苏徐州样品JS1是落选短体线虫和斯克里布纳短体线虫的混合侵染样品。用SCAR特异性引物扩增20个短体线虫单条DNA样本,结果显示,用落选短体线虫特异性引物PNEG-F1/D3B5能够从JS1-2、JS2-1、JS2-2、AH2-2、AH4-1、AH5-1、HN1-2、HN3-2、SD1-1和SD1-2等10个样本中扩增出140 bp的单一条带,用咖啡短体线虫引物PC1/PC2能够从AH2-1、AH3-1、AH3-2、AH4-2、AH5-2、HN1-1、HN2-1、HN2-2和HN3-1等9个样本中扩增出630 bp的单一条带,用斯克里布纳短体线虫引物Ps F7/Ps R7从JS1-1中扩增出130bp的单一条带,种类鉴定结果与上述序列分析结果相一致。【结论】我国黄淮流域4省小麦孢囊线虫发病田中的短体线虫种类有咖啡短体线虫、落选短体线虫和斯克里布纳短体线虫,其中落选短体线虫是优势种,证实了短体线虫不同种群复合侵染小麦的现象较为普遍。基于mt DNA-COI基因构建的系统进化树可以有效区分短体线虫的近缘种,相比r DNA 18S和28S基因更适于作为短体线虫种类鉴定的分子靶标。     

德国进境海棠树根际中厚皮拟毛刺线虫的鉴定

从上海口岸进境的德国海棠景观树根际分离到1种拟毛刺属线虫。雌虫双生殖腺对伸,受精囊无,精子分布于子宫内;阴门孔状,阴门骨化结构小,圆三角形到椭圆形,微分离。雄虫腹中颈乳突1个,位于排泄孔前;精子大,胞核香肠形;交合刺末端微腹弯,杆区有横纹;交合伞狭窄;泄殖腔前有3个腹中交配乳突。厚皮拟毛刺线虫特异引物UNIVERSAL-F/PACHYREV2-R检测为PCR阳性,其18S序列与GenBank中厚皮拟毛刺线虫的序列相似性为99.30%—100%,序列差异为0—4 bp。基于18S序列构建的系统发育树显示该种线虫与厚皮拟毛刺线虫位于同一聚类组内。经形态分类鉴定、PCR检测和序列分析,将此线虫鉴定为厚皮拟毛刺线虫Paratrichodorus pachydermus。这是我国口岸首次截获该种线虫。     

短体属线虫中国新纪录种的描述

2012年8月~2013年7月,对新疆伊宁地区大豆根际植物线虫的种类进行调查,鉴定出短体属中国新纪录种2个,即山口短体线虫(Pratylenchus yamagutii)和苏丹短体线虫(P.sudanensis)。山口短体线虫的主要特征是:雌虫头部具有2条唇环,侧区具有4条侧线;口针基球呈圆形,食道腺从腹面覆盖肠的前端;阴门处于虫体后部81%处,受精囊圆形至卵圆形,充满精子;尾部较细,圆锥形,末端呈圆形、无纹。苏丹短体线虫的主要特征是:雌虫具有3条唇环,侧区具有4条侧线;阴门位于虫体后部74%处,受精囊较长,充满精子;尾呈亚圆柱形,尾端平截。     

侵染花生的短尾短体线虫种群动态

通过田间调查与温室接种试验,观察短尾短体线虫(Pratylenchus bruchyurus)侵染花生后的种群动态规律。结果显示:短尾短体线虫主要寄生花生果荚,其次是胚栓、根系和土壤;花生植株各部位的虫量随着种植时间的延长而增加;室温下(22℃)随着存放时间的延长寄生在花生果荚中的线虫量逐步减少,收获18个月后花生果荚中检测出的线虫量最少。