黄腐酸对黄土性土壤磷吸附解吸动力学性质的影响

采用连续液流法研究了黄腐酸处理对５种黄土性土壤Ｈ＿２ＰＯ＿４￣（－１）吸附、解吸动力学性质及有效性的影响。结果表明：①黄腐酸处理对Ｈ＿２ＰＯ＿４￣（－１）吸附、解吸动力学模型的拟合性无影响，但能使Ｈ＿２ＰＯ＿４￣（－１）的吸附速度及吸附量分别降低１６．７％～６６．７％及１５．３％～６５．４％，解吸速度及解吸量分别增加１４．３％～９４．４％及１０．８％～８１．４％；②黄腐酸处理能使磷的有效系数降低３８．３％～７２．０％，Ｈ＿２ＰＯ＿４￣（－１）的有效性大幅度提高。黄腐酸对黄土性土壤Ｈ＿２ＰＯ＿４￣（－１）有明显的活化作用。     

小麦叶锈菌生理小种研究

根据全国统一的８个寄主鉴定结果，仍以叶１（２６），叶２（３６０）和洛１０小种群为主要优势小种（群）。在洛１０小种中仍以３６１，２６１，３６３和３７７出现频率较高。近年来，叶１，叶２出现频率在逐年增长，叶３在下降。用新鉴别寄主鉴定的小种，以Ｖ１，９－１２，１５－１６；Ｖ１，９－１２，１５－１６；Ｖ１，９－１６；Ｖ１，９－１２，１４－１６；Ｖ１，９－１３；１５－１６出现频率较高。用毒力频率分析，ＩＲＮ６６—３３１，Ｒｅｄｍａｎ６０６８，百农３２１７和丰抗１３抗性较好，而东方红３号，丰产３号等品种高度感病，能侵染洛１０品种小种在逐年上升，毒力频率均达８３．３３％。这为抗锈育种寻找抗源提出了新的要求。     

氯苯胍与2，4－D配合使用对小麦花药培养的影响

在含２，４－Ｄ２ｍｇ／１的Ｃ１７基本培养基中附加浓度为０．１，０．３，０．５，０．７和０．９ｍｇ／１的氯苯胍，用于培养烟农×８４－Ａ－３５９－９、新冬１５×８４－Ａ－３５９－９、唐山６８９８×８８－Ａ－９１６－１、花冬８６－１６×太原８１、８８－１３８×８４－Ａ－３５９－９和花冬８６－１６×２７－Ａ－４５５－１小麦杂交组合Ｆ２代花药，结果花粉愈伤组织平均诱导率为３．２１％－４．７９％，其中０．７（４．３２％）和０．９（４．７９％）的诱导率高于对照（４．０９％），其他均低于对照；绿苗分化率（１１．９７％－１９．４０％）均低于对照（２０．１９％），但以０．９ｍｇ／ｌ（１９．４％）与对照接近；白苗分化率（１０．１６％－１５．４９％）均高于对照（６．７３％）。     

黄腐酸对黄土性土壤磷吸附解吸动力学性质的影响

采用连续液流法研究了黄腐酸处理对５种黄土性土壤Ｈ２ＰＯ４＾－１吸附、解吸动力学性质及有效性的影响。结果表明：①黄腐酸处理对Ｈ２ＰＯ４＾－１吸附、解吸动力学模型的拟合性无影响，但能使Ｈ２ＰＯ４＾－１的吸附速度及吸附量分别降低１６．７％￣６６．７％及１５．３％￣６５．４％，解吸速度及解吸量分别增加１４．３％￣９４．４％及１０．８％￣８１．４％；②黄腐酸处理能使磷的有效系数降低３８．３％￣７２．０％，Ｈ     

内蒙古地区鸡群沙门氏菌的分离及鉴定

本项实验对内蒙古地区７个盟市１１个养鸡场的鸡群进行了禽沙门氏茵的分离和鉴定。结果表明从不同生长阶段的鸡群中共分离到８４株沙门氏菌，鸡群的平均检出率为２５。５％，最高达６１．２％。血清学鉴定结果表明所分离的沙门氏菌分别属于４个种，它们是都柏林沙门氏茵（１５株）、鸡白痢沙门氏茵（２８株）、汤卜逊沙门氏菌（１０株）和猪霍乱沙门氏菌（１株），其中以都柏林沙门氏茵和鸡白痢沙门氏苗分布最广。４个种的沙门氏菌对雏鸡均表现致病性，致死率为１２．５～８７．５％。     

河北省禽病原性大肠杆菌的血清型鉴定

从河北省的保定,石家庄等８个市（地）所属的７８个发病鸡群中的１８３只病,死鸡的内脏,器官中分离出１２７株大肠杆菌,并对其进行了生化试验,致病性试验及血清学鉴定,１２７个分离株中,除３２株未能定型外,共鉴定出９５个分离株的Ｏ血清型,占分离菌株的７４．８％,这些定型菌株覆盖了２４个血清型,但以Ｏ７８（２６．３２％）,Ｏ２（１３．６８％）,Ｏ１１１（９．４７％）,Ｏ１（８．４２％）和Ｏ１５（６．３２％     

水稻纹枯病拮抗细菌的分离和筛选

从水稻叶鞘、根系,玉米叶鞘和土壤中以及稻纹枯病菌菌核上分离到３６０株细胞,经平板抑菌初测得到５９株拮抗菌。其中,抑菌带宽０．５６～０．８４ｃｍ的７株中,除Ｂ１－２－１外,其它６个ＭＳＥ系列菌株均来自玉米叶鞘。分离材料不同,其拮抗细菌的分离率明显不同。即稻体最低（４．２５％）,土壤纹枯病菌菌核最高（２３．８％）,玉米居中（１６．３％）。在室内人工接种病菌条件下,测定其中４３个拮抗菌株对离体稻秆纹枯病的控制作用,筛选到防效在４８．４７％～９０．９５％的１３株。其中,ＭＳＥ１－７,ＰＢＲ－１,ＭＳ２－１,Ｌ１－３－１,Ｈ１－４,Ｌ１－５－３的防效均达８０％以上。对上述１３个菌株补加ＭＳＥ１－４,共１４个供试菌,接种病菌,对再生稻纹枯病防效为３２．００％～４７．７８％的５株（其中ＭＳＥ１－４为４７．７８％,Ｌ１－５－３为４０．４４％）。其中,ＭＳＥ１－４,ＭＳＥ１－７对稻苗地上部生长有一定的抑制效应,干重分别比对照降低６．８５％和１．３４％,但对根系有促生作用,根系干重分别比对照增加１０．２５％和２．８１％;Ｌ１－５－３,３′－７１和ＭＳ２－１对稻苗地上、下部生长均表现不同程度的促进作用。     

大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率技术设计研究

分３次试验。试验１：Ａ组，供试羊２１４只，对照和精液激素处理的情期产羔率分别为４０％和５７％；Ｂ组，供试羊３０８只，分成（１）对照，（２）精液处理＋混合精液。（３）精液处理＋个体精液，３种处理的情期产羔率分别为６１％、７５％和８０％。试验２；供试母羊１１７只，分成（１）对照，（２）ＨＣＧ（绒毛膜促性腺激素）处理母羊，（３）ＨＣＧ处理＋精液处理，（４）母羊排卵控制＋精液处理，４种处理的情期产羔率分别为６２．２８％，５５．６９％，６９．２４％和７１．１０％。试验３：供试羊５５６只，分成（１）对照，（２）ＬＲＨ－Ａ３（促排卵３号）肌注，（３）精液处理，（４）ＬＲＨ－Ａ３静注，（５）排印控制，５种处理的第一情期受胎率分别为５０．８％，６４．４％，７０．４％，７７．５％和８４．１５％；手术探查结果，排印控制处理后４８—５６ｈ母羊排卵同期率为９０％。试验证实，ＬＲＨ－Ａ３、催产素和ＨＣＧ处理冷冻精液及母羊可以作为大幅度提高绵羊冷冻精液繁殖率的技术设计用于养羊生产实践。     

鸡产蛋下降综合症（EDS_（－76））Z_（16）毒株的分离和鉴定

从５个爆发产蛋下降综合症的鸡场收集８０个样品中，分离到５株具血凝性的病毒，命名为ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）、Ｚ＿２、Ｗ＿４、Ｔ＿１和Ｔ＿３株。病毒大小７０～８０ｎｍ，无囊膜，二十面体对称；对氯仿不敏感，ｐＨ３～５下稳定，５０～６０℃１小时不被完全灭活；在ＤＥＦ细胞上繁殖能被ＩＵＤＲ抑制；经血凝抑制试验、琼扩试验和微量中和试验证实与ＡＶ—１２７株属同一血清型，鉴定为ＥＤＳ＿（－７６）病毒。ＣＡＶ—Ｚ＿（１６）株能在鸭胚上繁殖，致死鸭胚，ＨＡ效价达２￣（１３）～２￣（１７），也能在鸭胚成纤维细胞上繁殖，产生ＣＰＥ，但ＨＡ效价仅有２￣７～２￣（１０）。初次分离ＥＤＳ＿（－７６）病毒选用鸭胚较佳，从生殖道分离成功率较高。     

转基因抗虫棉的抗性鉴定

１９９４－１９９５年采用棉铃虫初孵幼虫鉴定Ｒ１，Ｒ２，Ｒ３代Ｂ５转基因棉花２０００多株次，筛选出Ｒ１代抗虫达８０％以上的单株１１个，占参测株６．２１％；；４２代１５个，占参测株系１３．８９％；Ｒ３代３７５株，占参测株７１．２９％；１２份材料进入复鉴，８份材料在罩笼接虫中，百株活虫数及被害蕾铃率平均比对照分别减少８８％－１００％及９０％－１００％。     

雅安周公山土壤苏云金芽孢杆菌菌株资源的筛选和初步鉴定

采集四川雅安市周公山土壤样品320份,利用醋酸钠-抗生素筛选法分离出苏云金芽孢杆菌132株。通过光学显微镜镜检发现,这些菌株均呈典型的苏云金芽孢杆菌形态,其伴孢晶体主要形态有长菱形、短菱形、方形、球形、不定型等。根据GeneBank中公布的cry基因序列,设计了14对杀虫cry基因的通用引物,对这132株分离菌进行的PCR-RFLP分析鉴定表明:在86株菌中分布有除cry18、cry27/29、cry34/35外的11种cry基因型,其中以cry1型最多,其次为cry2型。另46株菌未检测出cry基因。对这132株苏云金芽孢杆菌进行SDS-PAGE蛋白分析,发现杀鳞翅目、鞘翅目和双翅目的约130、80、65、75 kDa的蛋白带最丰富。     

仔猪断奶腹泻大肠杆菌鉴定及其血清型分析

从浙江省规模化猪场采集仔猪断奶腹泻病料,经细菌分离纯化、G染色、生化试验和小鼠致病性试验等,鉴定得到56株病原性大肠杆菌。通过11种主要致病性大肠埃希氏菌O抗原的血清型鉴定,56株致病性大肠杆菌中定型了33株,共覆盖了11种血清型,其中O149、O139、O8为优势血清型,共17株,占定型菌株的51.52%。通过棉籽糖发酵试验、甘露糖血凝抵抗试验(MRHA)和血凝抑制试验(MRHI),确定37株为K88,占66.07%(其中K88ab有8株,占K88菌株的21.62%),其余的未能定型。这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异。     

成都市郊区土壤芽孢杆菌的解磷、解钾潜力

采用稀释平板法对成都市郊区27个土壤样品进行了芽孢杆菌的分离,获得333个菌株。在解磷、解钾培养基上分析其解磷、解钾能力。结果表明,约有15%的土壤芽孢杆菌菌株分解无机磷的效果显著,分属15种芽孢杆菌,其中地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(B.megaterium)和短小芽孢杆菌(B.pumilus)为分解无机磷的优势芽孢杆菌。多数菌株也能在有机磷和钾细菌培养基上生长,但分解能力较差。     

基于16S rDNA序列4株鸡源芽孢杆菌的分子鉴定

对分离自肉鸡肠胃的4株芽孢杆菌R1、R2、S1、H1的16S rDNA序列进行PCR扩增并测定其核酸序列,在NCBI中通过Nucleotide BLAST查找其同源序列,应用DNAstar的MegAlign软件中的Jotun Hein、Clustal V 、Clustal W3种方法进行序列差异和同源性分析,分别使用Mega5.0软件中的最大似然法、邻接法、最小进化法、最大简约法构建系统发育树.序列差异和同源性分析结果显示:由Jotun Hein法可知,H1和R2与Bacillus subtilis DSM10同源性最高,达到100％;R1与B.vallismortis DSM11031同源性最高,达到99.7％;H1与B.subtilis DSM10的同源性为99.9％.由Clustal V法可知,H1与R2同源性最高,达到99.6％;R1与S1同源性最高、为98.7％.由Clustal W法可知,H1与R2同源性最高、为99.7％,R1与S1为99.4％.采用4种方法构建的系统发育树基本一致,可以确立4株鸡源芽孢杆菌的分类地位,R1、S1与B.subtilis BPRIST009、B.subtilis LXB3、B.vallismortis DSM11031之间关系最为亲近;R2、H1与B.subtilis CICC10076、B.subtilis DSM10之间关系最为亲近.     

应用抗O抗原单克隆抗体对692个沙门氏菌分离株的分群鉴定

应用抗沙门氏菌菌体抗原O_1、O_2、O_3、O_4、O_7、O_8、O_9,O_(11)、O_(12)、O_(19)一组单克隆抗体(单抗)对692个沙门氏菌分离株进行鉴定,结果A群4株、B群210株、C_1群61株、C_2群109株、D_1群119株、E群182株和F群7株.这一结果与用常规O血清进行的平行试验的鉴定结果一致.同时,这组单抗与172株非沙门氏菌分离菌株不反应.说明这组单抗可以取代常规O单因子血清和A-F群O多价血清用于沙门氏菌的分群鉴定。     

陕西杨凌区市售食品中单增李斯特菌污染状况的调查与分析

【目的】了解陕西杨凌辖区生猪肉、生羊肉、生鸡肉、速冻饺子和即食食品等5类食品中单增李斯特菌的污染情况及其耐药性和血清型,为确保食品安全提供依据。【方法】随机采集杨陵2家超市及1家农贸市场的食品样本共计95个,其中包括生猪肉27份、生羊肉11份、生鸡肉38份、速冻饺子6份和即食食品13份,按照国标GB/T4789.30-2008进行单增李斯特菌的分离培养,用PCR方法进行单增李斯特菌的确证,并用多重PCR法对确证菌株进行血清型测定,采用琼脂稀释法进行药敏性试验。【结果】95个样本中,单增李斯特菌的分离率为13.7%(13/95),其中以即食食品分离率最高,为30.8%(4/13);其次是生鸡肉和生羊肉,分别为21.1%(8/38)和9.1%(1/11);而速冻饺子和生猪肉均未检出单增李斯特菌。超市采集样品中单增李斯特菌污染的检出率较高,为23.6%,农贸市场采集样品中未检出单增李斯特菌。不同温度贮存的样品中,4 ℃贮存样品单增李斯特菌污染的检出率最高,为31.6%,-18 ℃条件贮存样品的检出率为5.9%,而常温贮存样品中未检出单增李斯特菌。单增李斯特菌对头孢西丁、红霉素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、四环素、氯霉素、头孢哌酮的耐药率分别为100%,11.1%,14.8%,26%,4%和3.7%,对庆大霉素、环丙沙星、阿米卡星100%敏感。单增李斯特菌分属5个血清型群体,其中17(63.0%)株为1/2b或3b型,6株(22.2%)为1/2a或3a型,1株(3.7%)为1/2c或3c型,1株(3.7%)为4b、4d或4c型,2(7.4%)株为4a或4c型。【结论】陕西杨凌辖区即食食品和生鸡肉是主要污染单增李斯特菌的食品品种,该单增李斯特菌菌株存在一定程度的多重耐药现象,主要为1/2b或3b及1/2a或3a血清型,对消费者的健康有一定的潜在的危险。     

雏鸡大肠杆菌病及其免疫防制初报

甘肃省兰州市及其近郊６个鸡场时有疑似大肠杆菌病病例发生，Ｌ鸡场的一批雏鸡１月龄时死亡率高达３６％。近年来分离的２７９株肠道杆菌，其中２／３为大肠埃希氏菌。Ｌ鸡场分离的５３株大肠埃希氏菌中，Ｏ＿１型占１５．０９％，Ｏ＿２型占３７．７４％，Ｏ＿（７８）型占２２．６４％；５只雏鸡分离到两种血清型。一些菌株对小鼠和小公鸡有较强的致病力。制备的铝胶灭活苗对控制本病有较好的效果。     

中国部分地区猪源和牛源金黄色葡萄球菌耐药性及凝固酶分型研究

【目的】了解中国动物源金黄色葡萄球菌的耐药现状,以及凝固酶血清型和基因型分布情况,为控制动物源金黄色葡萄球菌的传播和流行提供理论依据。【方法】用微量肉汤稀释法测定细菌耐药性;用凝固酶分型血清确定血清型别;扩增凝固酶基因（coa）并进行序列测定,用mega软件进行序列分析。【结果】共鉴定出124株金黄色葡萄球菌。耐药性检测结果表明,在13种测试抗菌药中,金黄色葡萄球菌对氨苄西林和青霉素的耐药率最高,接近100%,其次是红霉素75%,其它10种药物的耐药率在50%以下,头孢西丁耐药率27%,未发现万古霉素耐药菌株;凝固酶血清分型率达91%,共分出6个型,VII型,VI型和复合型占优势,未分离到Ⅲ型和Ⅴ型;扩增凝固酶基因,共分为6个基因型;构建了凝固酶基因的系统进化树。【结论】中国动物源金黄色葡萄球菌的耐药状况比较严重,猪源菌株的耐药率要高于牛源菌株。凝固酶血清型别多样,分布相对较集中,具有独特的流行特征;凝固酶表型与其基因的进化特征并没有出现直接对应关系,但为进一步开展兽医临床金黄色葡萄球菌分子流行病学调查研究奠定了理论基础。     

鸡传染性支气管炎病毒分离株与疫苗株抗原相关性和S1基因序列分析

本实验挑选8株近年来山东省IBV分离株与疫苗株H120和491,利用SPF鸡分别制备了高免阳性血清,进行鸡胚交叉中和试验,计算其抗原相关系数,鉴定其血清型,并结合S1基因序列分析,研究其血清型和基因型之间的关系.结果显示:SDWF0608、SDLY0612、SDLY0701与疫苗株H120同属Mass血清型的不同亚型,其它5个分离株与H120和491不属于同一个血清型.结合S1基因序列分析发现,S1基因序列分析与血清中和结果二者不具有明显的相关性,8个分离株分属三个基因群,其中SDTA06111与H120等同属一个基因群,但血清中和实验显示它们不属于一个血清型;CK/CH/SD09/005与一个参考株独自构成一个基因群,其S1基因变异程度较大,并且能够与两个疫苗株发生交叉中和实验,但不属于一个血清型,它可能是一个基因重组后病毒.     

解淀粉芽孢杆菌B1619脂肽类抗生素的分离鉴定及其对番茄枯萎病菌的抑制作用

【目的】从解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）生防菌株B1619发酵液上清中分离脂肽类抗生素,分析其抑菌活性相关成分,为应用解淀粉芽孢杆菌B1619菌株防控番茄枯萎病提供依据。【方法】利用特异性引物对B1619中3种脂肽类抗生素合成相关基因sfp、ituA和fenB进行检测;通过盐酸沉淀、甲醇抽提法等方法提取脂肽类抗生素粗提物;用Supelclean^TM LC-18柱及PHASE HF-NH2柱对3种脂肽类抗生素粗提物进行分离;通过MALDI-TOF-MS和HPLC分析、鉴定3种脂肽类抗生素;采用平板对峙培养分别测定3种脂肽类抗生素粗提物对番茄枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici)的抑菌活性。【结果】从解淀粉芽孢杆菌B1619的基因组DNA中扩增sfp、ituA和fenB等脂肽类抗生素合成基因,扩增产物经克隆、测序分析,表明B1619菌株中含有这3个基因。通过HPLC分析,发现60%甲醇洗脱液分离物分别在12、16.5、18 min处出现相应峰值,保留时间与bacillomycin L标准品一致,分泌量为18.5 mg·L^-1;70%甲醇洗脱液分离物分别在22、34、37、51及53 min处出现相应峰值,保留时间与fengycins标准品一致,分泌量为5.1 mg·L^-1;100%甲醇洗脱液分离物分别在27、37、41、51及53 min处出现相应峰值,保留时间与surfactins标准品一致,分泌量为74.3 mg·L^-1。经液质联用进一步验证分析3种脂肽类抗生素的质子化峰值,60%甲醇洗脱液分离物峰值范围在m/z=1 043.4、1 057.5和1 071.4 Da,是C13-C15的bacillomycin L;70%甲醇洗脱液分离物峰值范围在m/z= 1 463.9、1 477.9、1 491.9和1 505.9 Da,是C15-C17的fengycins;100%甲醇洗脱液分离物峰值范围在m/z=1 008.6、1 022.7和1 036.7 Da,是C13-C15的surfactins。平板对峙法试验结果表明1 mg·mL^-1 bacillomycin L和fengycins对番茄枯萎病菌有较强的抑菌效果,而1 mg·mL^-1surfactins对番茄枯萎病菌的抑菌活性较弱,再将surfactins的浓度提高至3和6 mg·mL^-1,发现其抑菌效果没有明显变化。【结论】B1619菌株分泌3种脂肽类抗生素,其中对番茄枯萎病菌生长起重要抑制作用的抗生素是bacillomycin L和fengycins,surfactins对番茄枯萎病菌的抑制活性较弱。